Комбинированное лекарственное средство анксиолитического, стресс-протекторного, ноотропного и антиоксидантного действия

Изобретение относится к фармации и медицине, и может быть использовано в фармацевтической промышленности при изготовлении медикаментозных средств с комбинированным составом активных компонентов, которые применяются для лечения и профилактики заболеваний центральной нервной системы, сопровождающихся такими состояниями организма, как тревога, беспокойство, страх, эмоциональное напряжение, в основе которых лежит стресс. Также действие предлагаемого средства будет направлено на устранение психосоматических расстройств при неврозах, неврозоподобных состояниях, абстиненции, алкоголизме, наркомании.

Уменьшение длительности, а также ухудшение качества жизни прямо связано с увеличением количества больных с заболеваниями ЦНС, в этногенезе которых лежит стресс [10]. В этой связи, разработка мер фармакологической коррекции эмоционального стресса является одной из актуальных задач современной медицины. Известно [1, 2, 10, 11], что одним из звеньев патогенеза эмоционального стресса является гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) биоэнергетическими и нейрохимическими системами головного мозга. Избыток АФК в условиях антиоксидантной недостаточности приводит к окислительной модификации липидов, нуклеиновых кислот и белков. Окислительная модификация белковых фрагментов рецепторов, ионных каналов, синаптических структур нейрона приводит к нарушению генерации, образования, проводимости нервного импульса, нарушает синаптическую передачу и, как следствие, приводит к ухудшению когнитивно-мнестических функций головного мозга [1, 2, 13]. Известно также, что под действием АФК в клетке происходит активация экспрессии редокс-чувствительных генов, одни из которых необходимы для защиты клеток от токсических эффектов окислительного стресса, а другие, при избытке АФК, инициируют апоптоз [1, 15]. В связи с вышеизложенным, перспективным направлением фармакокоррекции стресса и его последствий является применение антиоксидантов, ноотропов, анксиолитиков [2, 3]. Широкое применение в клинической практике в качестве стресспротекторов и анксиолитиков нашли структурные аналоги нейротрансмиттеров - ноофен, глицин, ГАМК, триптофан [2].

В последнее время также прослеживается тенденция создания комбинированных лекарственных средств с ноотропным действием, способных восстанавливать нарушенные мнестические и мыслительные функции, снижать неврологические дефициты, а также защищать мозг и повышать резистентность организма к экстремальным воздействиям.

Однако современный арсенал анксиолитических, ноотропных, стресспротекторных, антиоксидантных средств не всегда отвечает всем требованиям клиницистов. Чаще всего такие препараты назначаются в виде отдельных лекарственных форм, что приводит к полипрагмазии, снижает комплайенс пациентов. Иногда препараты бывают недостаточно эффективными. Все это обусловливает необходимость создания новых комбинированных высокоэффективных и малотоксичных препаратов, которые бы совмещали в себе позитивные эффекты активных действующих веществ или же даже усиливали бы их терапевтический эффект.

Известен комбинированный препарат Тиоцетам, который в своем составе содержит тиотриазолин и пирацетам (0,05 г тиотриазолина и 0,2 г пирацетама). Препарат обладает выраженным антиоксидантным, противоишемическим, ноотропным и церебропротективным действием [2, 6, 8, 9]. Однако Тиоцетам не обладает анксиолитическими свойствами и у него недостаточно выражена стресс-протекторная активность.

Известно также средство Ноофен (активное вещество - фенибут, (γ-амино-β-фенилмасляная кислота) для перорального применения (Компендиум - лекарственные препараты online http://compendium.com.ua/info/262/olajnfarm/noofen-sup-sup-500-mg-i-poroshok-i-), которое обладает антигипоксическим, антиамнестическим и анксиолитическим (транквилизирующим) действием. Ноофен стимулирует процессы обучения, улучшает память, повышает физическую и умственную деятельность. Также Ноофен обладает транквилизирующими особенностями: устраняет психоэмоциональное напряжение, тревожность, страх, эмоциональную лабильность, раздражительность, улучшает сон; удлиняет и усиливает действие снотворных, наркотических, нейролептических и противосудорожных средств. Под влиянием Ноофена улучшаются показатели высшей нервной деятельности (внимание, память, скорость и точность сенсорно-моторных реакций). Препарат удлиняет латентный период и сокращает продолжительность и выраженность нистагма, обладает противоэпилептическим эффектом. Не влияет на холино- и адренорецепторы. Ноофен заметно уменьшает проявления астении и вазовегетативные симптомы, в том числе головную боль, ощущение тяжести в голове. У больных с астенией и у эмоционально лабильных пациентов уже с первых дней терапии препаратом улучшается самочувствие, повышается интерес и инициативность, мотивация к активной деятельности без седативного эффекта или возбуждения. Установлено, что при приеме Ноофена при черепно-мозговой травме увеличивается количество митохондрий в клетках перифокальных тканей и улучшаются биоэнергетические процессы в мозгу. При наличии нарушений деятельности сердца и желудка нормализует процессы пероксидации липидов.

Однако спектр ноотропного действия Ноофена весьма узок - препарат проявляет только антиамнестическое действие (влияя на кратковременную память), не влияя на долговременную память, на уровень суждений, кортикальный контроль (http://gomelpsyhosp.by/?p=1080). Ноофен проявляет ряд побочных эффектов, что ограничивает его применение в клинической практике, особенно педиатрической и геронтологической. Препарат может вызывать зависимость, имеет синдром отмены (http://otravleniya.net/ximicheskie-otravleniya/fenibut-privykanie.html). Имеются данные, что Ноофен при длительном применении может оказывать на печень негативное влияние.

Известно средство Триптофан (http://www.likar.info/lekarstva/Triptofan/), которое является предшественником нейротрансмиттера серотонина. Триптофан способствует повышению настроения, снятию тревожности, гиперактивности, навязчивых состояний и синдрома хронической усталости, устраняет чувство страха и напряжения, способствует хорошему засыпанию и нормальному сну.

Однако триптофан не имеет выраженного самостоятельного ноотропного, стресс-протективного и антиоксидантного действия.

Бесспорный интерес представляет поиск возможностей усиления протекторных свойств триптофана за счет комбинирования с веществами, способными улучшать энергообеспечение головного мозга, проявлять антиоксидантное действие и тормозить оксидативный стресс и тем самым восстанавливать чувствительность рецепторов нейрона. К таким веществам относят тиотриазолин. Тиотриазолин способен усилить анксиолитическое действие триптофана, регулируя Red/Oxi - зависимые механизмы повышения аффинности к серотониновым рецепторам. Триптофан, в свою очередь, может усилить антиоксидантное действие тиотриазолина. Так, триптофан, посредством превращения в организме в мелатонин, сможет образовать с тиотриазолином своеобразный тандем по утилизации таких зловещих кислородных радикалов, как гидроксил-радикал и пероксинитрит. Триптофан совместно с тиотриазолином способны оказывать влияние на механизмы памяти как кратковременной - за счет подавления амнезии, вызванной избытком свободных радикалов, так и долговременной - за счет совместного влияния на АТФ-зависимые механизмы синтеза белков памяти.

Подобное совместное действие триптофана и тиотриазолина, направленное на регуляцию Red/Oxi - зависимых механизмов аффинности серотониновых рецепторов, восстановление функции этой системы (снижение тревоги, страха, нарушения сна, беспокойства), а также на усиление антиоксидатного и энерготропного действия (процессы памяти), можно использовать в профилактике и лечении заболеваний, важным звеном патогенеза которых является стресс, а это - заболевания центральной нервной и сердечно-сосудистой системы.

В основу изобретения поставлена задача разработки комбинированного лекарственного средства, которое будет обладать более высокой анксиолитической и антиоксидантной активностью по сравнению с известными средствами, и дополнительно будет оказывать ноотропное и стресс-протективное действие.

Поставленная задача решается тем, что в комбинированном лекарственном средстве анксиолитического, стресс-протективного, ноотропного и антиоксидантного действия, содержащем триптофан, новым является то, что он дополнительно содержит тиотриазолин.

Новым также является то, что комбинированное лекарственное средство анксиолитического, стресс-протективного, ноотропного и антиоксидантного действия содержит триптофан и тиотриазолин в следующем соотношении: триптофан - в пределах от 1 до 7 массовых долей, тиотриазолин - 1 массовая доля.

Новым также является то, что комбинированное лекарственное средство анксиолитического, стресс-протективного, ноотропного и антиоксидантного действия имеет форму таблеток, капсул, инъекционных и инфузионных растворов.

Исходя из изученных механизмов действия обоих компонентов предлагаемого комбинированного средства, содержащего триптофан и тиотриазолин, и предположив возможность того, что предлагаемое комбинированное средство может иметь более эффективное анксиолитическое и антиоксидантное действие, было проведено экспериментальное исследование в этом направлении.

При проведении экспериментальных исследований, которые подтвердили предположение, было обнаружено дополнительное неочевидное свойство комбинации триптофана с тиотриазолином - ее ноотропное и стресс-протективное действие, а также усиление анксиолитического и антиоксидантного эффекта.

Были изучены разные комбинации тиотриазолина с триптофаном - 1:1; 1:2; 1:4; 1:5; 1:7 соответственно, в условиях теста «подвешивания за хвост». Была выявлена оптимальная комбинация тиотриазолина с триптофаном - 1:4. Ниже в таблице 1 приводятсяч данные, которые это подтверждают.

Анксиолитическое действие комбинированного препарата с разным соотношением активных компонентов (тиотриазолина с триптофаном) изучали на 50 белых нелинейных крысах обоего пола массой 170-230 г. Блиц-тестом, применение которого возможно для определения уровня тревожности и выяснения анксиопрофиля препаратов, является подвешивание животного за хвост. Метод основан на наблюдении, что животные, при их подвешивании за хвост, будут демонстрировать соответствующий период иммобильности, по продолжительности которого можно судить об уровне тревожности, страха и отчаяния. Комбинации тиотриазолина с триптофаном вводили в дозе 250 мг/кг внутрижелудочно в виде водного раствора с помощью металлического зонда за 60 мин до тестирования. После введения исследуемых комбинаций животное вытаскивалось из клетки и придерживалось за хвост возле туловища в висячем положении головой вниз. Регистрировалось время, в течение которого животное будет оставаться иммобильным (т.е. до того момента, пока морда животного не достигнет основания хвоста) [10, 14].

В результате проведенных исследований было установлено, что наиболее активной оказалась комбинация тиотриазолина и триптофана в соотношении 1:4 соответственно, но при этом комбинации с соотношением 1:1; 1:2; 1:5 и 1:7 также являются терапевтически эффективными.

Как известно (Кукес В.Г. Клиническая фармакология, 4 издание, Москва, «ГЕОТАР-медиа», 2008, с. 164-169; Гилман А.Г. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману, Москва, «Практика», 2006, с. 57), фармакодинамическое взаимодействие лекарственных средств может быть направлено как в сторону усиления их фармакологических эффектов, так и на их ослабление. Поэтому, хотя тиотриазолин и триптофан оказывают каждый в отдельности широкий спектр положительных фармакологических эффектов, для специалиста не является очевидной возможность использовать тиотриазолин или триптофан в сочетании с любыми другими лекарственными средствами.

Также лекарственные средства могут иметь физическую несовместимость. Она обусловлена физическими свойствами ингредиентов, которые входят в состав лекарств, и может вызываться нерастворимостью, отволаживанием ингредиентов, другими процессами.

Компоненты предлагаемого комбинированного лекарственного средства могут быть также химически несовместимыми, что обусловлено их химическим взаимодействием. Это приводит, как правило, к снижению или полной потере терапевтической активности лекарственного средства.

Лекарственные вещества могут действовать антагонистично или взаимно усиливать побочное или токсическое действие друг друга, и, таким образом, иметь фармакологическую несовместимость. Фармакологическая несовместимость лекарственных веществ во многих случаях исключает возможность их одновременного применения. Несовместимые сочетания компонентов делают фиксированную лекарственную комбинацию неполноценной в терапевтическом отношении, а в некоторых случаях даже опасной для жизни пациента.

Также не является очевидным то, что, если назначать в схеме лечения лекарственные средства с разными действующими веществами в разных лекарственных формах, и назначить средство, которое содержит эти же действующие вещества, скомбинированные в одной лекарственной форме, то эффект будет одинаковым.

Таким образом, возможность создания определенного комбинированного лекарственного средства может подтвердить или опровергнуть лишь экспериментальное исследование. В нашем случае - это сочетание триптофана с тиотриазолином.

Говорить о положительном результате взаимодействия упомянутых компонентов комбинированного лекарственного средства можно только на основании проведенных экспериментальных исследований. Без изучения результатов таких исследований мысль о возможном высоком терапевтическом эффекте комбинированного средства является лишь теоретической предпосылкой.

В данной заявке приведены результаты оригинальных исследований предложенной комбинации, которые подтверждают высокую анксиолитическую, стресс-протекторную, ноотропную и антиоксидантную активность комбинированного препарата, содержащего в своем составе тиотриазолин и триптофан.

Пример 1. Антитревожное (анксиолитическое) действие

Анксиолитическое действие препаратов и их комбинаций изучали на 50 белых нелинейных крысах обоего пола массой 170-230 г. Использовался блиц-тест для определения уровня тревожности и выяснения анксиопрофиля препаратов (подвешивание животного за хвост). Комбинированное средство тиотриазолина с триптофаном (1:4) вводили в дозе 250 мг/кг, таблетки Ноофен - в дозе 250 мг/кг, в этой серии исследований также изучали в качестве референс-препарата триптофан, который вводили в дозе 250 мг/кг. После введения препаратов (за 60 мин до тестирования) животное вытаскивалось из клетки и придерживалось за хвост возле туловища в висячем положении головой вниз. Регистрировалось время, в течение которого животное будет оставаться иммобильным (т.е. до того момента, пока морда животного не достигнет основания хвоста) [10, 14].

В результате проведенных исследований было установлено, что при введении комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) животные дольше находились при проведении эксперимента в иммобильном состоянии на 48,7% (р<0,05), что можно расценивать как снижение тревожности и страха (табл.2).

Менее выраженные изменения продолжительности периода иммобильности отмечались при введении Ноофена и триптофана. Так, введение Ноофена приводило к увеличению времени иммобильности на 35,5% по сравнению с контролем (р<0,05). Введение триптофана приводило к увеличению времени иммобильности на 30,5% по сравнению с контролем 0X0,05).

Таким образом, исследуемый препарат - комбинированное средство тиотриазолина и триптофана (1:4) снижает уровень тревожности, страха и отчаяния более значительно, чем препараты сравнения - анксиолитик и ноотроп Ноофен и анксиолитик триптофан.

Пример 2. Изучение стресс-протективного, ноотропного, анксиолитического и антиоксидантного действия

Эксперименты были проведены на 40 крысах-самцах линии Вистар массой 210-230 г в возрасте 6 мес. Хронический иммобилизационный стресс (ХИС) моделировали жестокой двухчасовой иммобилизацией на спине на протяжении 10 дней [3, 10, 12]. Комбинированное средство тиотриазолина и триптофана (1:4) (НПО «Фарматрон», Украина), эталонный препарат ноотропного, стресс-протективного и анксиолитического действия - Ноофен («Олайнфарм», Латвия), а также комбинированный препарат, содержащий эквивалентное количество тиотриазолина - Тиоцетам, вводили в дозе 250 мг/кг перорально с помощью металлического зонда на 0,5 мл воды в течение 10 дней, раз в сутки за 30 мин до иммобилизации. На первые сутки эксперимента, за 30 мин до стрессирования у животных вырабатывали условную реакцию пассивного избегания (УРПИ) в двухчелночной камере. Через 10 сут, спустя 2 ч после последнего стрессирования, у крыс проводили тест «открытое поле». В течение 3 мин регистрировали количество вертикальных, горизонтальных движений, а также количество заглядываний в «норку», груминг (акты) и количество дефекаций. В эти же сроки оценивали сохранность УРПИ по латентному периоду захода в темный отсек двухчелночной камеры [10, 14]. Затем животные выводились из эксперимента под нембуталовым наркозом (40 мг/кг). Для биохимических иследований мозг промывали в охлажденном изотоническом растворе KCl (+5°С), затем гомогенизировали в гомогенизаторе Поттера (1500 об/мин) в течение 3 мин в 5 объемах буфера, содержащего 50 мМ Трис-HCL, 2 мМ ЭДТА и 2 мМ дитиотрейтол (рН 7,4). Аликвоты этих гомогенатов центифугировали 10 мин при 11000 g [4].

В супернатанте (5 мг/мл) определяли продукты окислительной модификации белка (ОМБ) по уровню альдегидфенилгидразонов (АФГ) и кетонфенилгидразонов (КФГ) по реакции взаимодействия окисленных аминокислотных остатков с 2,4-динитрофенилгидразином [4]. Также определяли стабильные метаболиты NO по уровню нитратов в реакции Грисса [4] и активность NO-синтазы (NOS). Активность NOS определяли по разности между скоростью окисления NADPH, регистрируемой флюорометрически, в двух параллельных образцах как не содержащих, так и содержащих ингибитор NOS - N-нитро-L-аргинин [4]. Концентрацию белка оценивали по методу Бредфорда. Степень окислительной модификации ДНК определяли по суточной экскреции 8-гидроксигуанина (8- OHG) в моче [4].

Результаты проведенных исследований показали, что ХИС характеризуется изменением двигательной активности, что выражается в снижении горизонтальной активности на 82,3%, вертикальной - на 77%, угнетением исследовательской активности (количество заглядываний) на 90%, а также повышением тревожности, о чем свидетельствовало снижение актов груминга на 43% и повышение актов дефекации на 112,5%. Также установлено, что перенесенный ХИС угнетает когнитивно-мнестические функции ЦНС, о чем свидетельствовало уменьшение латентного периода УРПИ на 79% и снижение на 70% количество обученных животных. Введение крысам с ХИС комбинированного средства тиотриазолина с триптофаном (1:4) статистически достоверно по отношению к контрольной группе животных (р<0,05) повышало ориентировочно-исследовательскую активность. Так, в этой группе животных увеличилось количество горизонтальных движений в 2,54 раза, вертикальных - в 2,57 раза, что свидетельствовало о повышении двигательной активности. Под действием комбинированного препарата увеличилось количество заглядываний в «норку» в 5,75 раз. Результаты введения Ноофена уступали изучаемому препарату по степени влияния на исследуемые показатели ориентировочно-исследовательской активности у животных с ХИС. Также введение комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) приводило к увеличению актов груминга на 57% и количества дефекаций на 47%, что свидетельствовало о снижении тревожности после стресса. Воспроизведение УРПИ, проведенное через 10 суток ежедневного стрессирования, показало, что у контрольных животных нарушено воспроизводство памятного следа, о чем свидетельствовало уменьшение времени УРПИ на 79%. Почти все крысы этой группы быстро заходили в темную «опасную» камеру. Введение животным комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) ослабляло амнезию УРПИ, вызванную ХИС, статистически достоверно увеличивая латентное время рефлекса при воспроизведении (табл. 3). Так, введение комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) увеличивало латентный период УРПИ в 2,38 раз, а введение Ноофена - в 1,44 раза. Стоит отметить, что введение комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) достоверно увеличивало количество обученных крыс в группе до 90%, а введение Ноофена до 60%. Приведенные данные подтверждают ноотропную и стресс-протективную активность предлагаемого комбинированного средства.

Моделирование ХИС в течение 10 суток приводило к развитию оксидативного стресса в головном мозге экспериментальных животных, о чем свидетельствовало повышение уровня маркерных продуктов окислительной модификации белка. Так, концентрация АФГ и КФГ в контрольной группе животных на 120% и на 134% соответственно превышала таковые показатели интактной группы. Введение комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) достоверно (р<0,05) снижало концентрацию маркеров ОМБ - АФГ на 46%, КФГ на 36%. По степени снижения маркеров оксидативного стресса - АФГ и КФГ - изучаемое комбинированное средство достоверно превосходило эффективность референс-препарата Ноофена, а по степени снижения АФГ - и Тиоцетама. Окислительная модификация белков приводит к снижению функции белков в цепи переносчиков электронов, активности АТФ-азы, избирательности действия транспортных пор. Изменение Red/Ox - потенциала митохондриальной мембраны может влиять на дисфункцию каскада дыхательной цепи нейрональной клетки. Вышеперечисленные изменения, в конечном итоге, приводят к нарушению секреторной, инкреторной, транспортной функции нейрона, и, как следствие, к развитию когнитивного дефицита [1, 2, 10].

Гиперпродукция NO и ОН^. при некоторых патологических состояниях (ишемия, стресс, нейродегенеративные заболевания и т.д.) играет ключевую роль в молекулярных механизмах окислительного стресса и является пусковым механизмом в окислительной деструкции ДНК клетки [1, 2, 13]. Окислительная модификация ДНК приводит к образованию 8-гидроксигуанина (8-OHG), который оказывает выраженное цито- и геномотоксическое действие, важнейшими последствиями которого является искажение молекулярно-биологических процессов в клетке - репликации и транскрипции. Из таблицы 5 видно, что ХИС сопровождается значительным повышением концентрации 8-OHG (в 2,42 раза) в суточной моче крыс.

Введение экспериментальным животным комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) оказывало протективное действие в отношении нуклеиновых кислот при оксидативном стрессе, о чем свидетельствовало снижение суточной экскреции 8- OHG на 48% (р<0,05). Введение Ноофена приводило к снижению 8-OHG на 13,2% (р<0,05) в суточной моче. Введение комбинированного препарата, содержащего тиотриазолин - Тиоцетама - снижало 8-OHG на 30% (р<0,05) в суточной моче. Стоит отметить, что по данному тесту предлагаемое комбинированное средство достоверно превосходило эффект Ноофена и Тиоцетама, что свидетельствует о более выраженном антиоксидантном и геномопротективном действии комбинированного препарата тиотриазолина и триптофана.

Существенную роль в гиперпродукции NO принадлежит индуцибельной NO-синтазе, которая экспрессируется под действием факторов транскрипции-JunB; c-Fos; AP-1 [1, 2]. Данными исследованиями было установлено, что ХИС приводил к активации NO-синтазы на 132% и гиперпродукции NO, о чем свидетельствовало повышение на 170% в головном мозге крыс его стабильных метаболитов. Назначение экспериментальным животным комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) приводило к снижению активности NO-синтазы на 56% и гиперпродукции NO на 44%. Введение Ноофена не оказывало достоверного влияния на содержание нитритов и достоверно уступало по степени влияния на активность NO-синтазы. Введение Тиоцетама снижало активность NO-синтазы на 40% и гиперпродукции NO на 38%. По степени снижения активности NO-синтазы комбинированный препарат тиотриазолина и триптофана (1:4) достоверно превосходит Тиоцетам (табл. 5).

Подобный эффект комбинированного средства тиотриазолина и триптофана (1:4) является одним из ключевых механизмов его нейропротективного действия, так как от соотношения внутриклеточных концентраций NO и АФК зависит характер действия этих соединений на процессы, связанные с регуляцией апоптоза в нейрональной клетке [1, 2].

Таким образом, исследуемый препарат - комбинированное средство тиотриазолина и триптофана (1:4) обладает выраженными стресс-протективными, ноотропными, анксиолитическими и антиоксидантными свойствами, и по силе этих фармакологических эффектов достоверно превосходит референс-препарат Ноофен, а по силе антиоксидатного действия - Тиоцетам.

Проанализировав результаты проведенных исследований, можно сделать вывод, что предлагаемое комбинированное средство тиотриазолина и триптофана обеспечивает более высокую анксиолитическую и антиоксидантную активность по сравнению с препаратами сравнения. Кроме того, предлагаемое средство проявило новые виды активности - ноотропное и стресс-протективное действия, которыми в отдельности компоненты комбинированного средства -триптофан и тиотриазолин - не обладали.

Таблетки, содержащие триптофан и тиотриазолин, изготавливают покрытыми оболочкой или без оболочки. Ядро таблеток изготавливают различными способами, например, путем получения порошкообразной смеси этих активных ингредиентов с добавлением достаточного количества вспомогательных веществ и последующего прессования. В состав таблеток входят различные вспомогательные вещества, которые влияют на физико-химические свойства, например, полифункциональные вспомогательные вещества, наполнители, разрыхлители, антифрикционные вещества и т.д.

Капсулы изготавливают путем дозирования смеси активных компонентов триптофана и тиотриазолина и вспомогательных веществ в капсулы, которые могут содержать разовую или высшую терапевтическую дозу предлагаемого средства.

Раствор для инъекций, содержащий как активные вещества триптофан и тиотриазолин, готовят как с использованием стабилизатора, так и без него. Возможно использование веществ, которые позволяют достичь изотоничности раствора. Раствор изготавливают различных концентраций, которые содержат терапевтическую дозу предлагаемого комбинированного лекарственного средства.

Для изготовления инфузионных растворов комбинированного препарата триптофана с тиотриазолином могут использоваться физиологические растворы различного состава.

Таким образом, использование предлагаемого средства позволит расширить отечественный арсенал лекарственных средств, которые можно применять в неврологии, и которые являются безопасными и обладают высокой эффективностью.

Литература

1. Беленичев И.Ф., Губский Ю.И, Павлов С.В. Токсические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях // Совр. пробл. токсикол. - 2005. - №3. - С. 20-26.

2. Беленичев И.Ф., Черний В.И., Павлов С.В., Кучеренко Л.И. Нейропротекция и нейропластичность. - К.: Логос, 2015. - 512 с.

3. Гойкова Л.А., Зорян Е.В., Анисимова Е.Н. // Фармакологические методы коррекции стресса // Вопр. биол. мед. и фарм. химии. - 2004. - №3. - С. 3-5.

4. Доклиническое изучение специфической активности потенциальных нейропротективных препаратов / И.С. Чекман, И.Ф. Беленичев, Л.А. Громов и др. - Методические рекомендации Государственного Фармакологического Центра МЗ Украины, Киев. - 2010. - 81 с.

5. Дьюсбери Р. Изучение поведения животных. М.: Наука, 1980. - 376 с.

6. Експериментальне дослiдження активностi таблеток "Тiоцетам" Мазур I.A., I.Ф., Стець В.Р. // Експер.фiзiол.та бioxiм. - 2002. - №1. - С. 7-11.

7. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов // Биохимия. - 2002. - Т. 67, №3. - С. 339-352.

8. Мазур И.А., Беленичев И.Ф. К вопросу создания препаратов нейропротективного действия // Вiсник та . - 2006. - №4. - С. 28-36.

9. Мазур И.А., Зименковский Б.С., Волошин Н.А., Чекман И.С., Стец В.Р. Тиотриазолин. - Львов: Наутилус, 2005. - 230 с.

10. Калуев А.В. Стресс, тревожность и поведение. Актуальные проблемы моделирования тревожного поведения у животных. - Киев, 1998. - 95 с.

11. Коплик Е.В., Мещеряков А.Ф., Перцов С.С. и др. Влияние дипептида вилона на устойчивость крыс к эмоциональному стрессу // Рос. физиол. журн. - 2002. - Т. 88, №11. - С. 1440-1452.

12. Стефанов А.В. Доклинические исследования лекарственных веществ. - Киев: ГФЦ МЗ Украины, 2000. - 540 с.

13. Aruoma О., Halliwell В. Molecular Biology of Free Radicals in Human Diseases - St. Lucia, London: OCIA Int., 1999. - 345 p.

14. Bures J. Cortical spreading depression as a memory disturbing factor / J. Bures, O. Buresude // J. соmр. and phisiol. - 1963. - Vol. 56, №2. - P. 268-272.

15. Mikava S., Kinouchi H., Kami H. et al. Attenuation of acute and chronic damage fllowing traumatic brain injuri in copper, zinc- superoxide dismutsse transgenic mice // J. Neurosurg. - 1996. - V. 85. - P. 885-891.