Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ АБСЦЕССА ПЕЧЕНИ

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гнойной хирургии, и может быть использовано для моделирования абсцесса печени.

Интенсивное развитие хирургии печени началось с середины шестидесятых годов прошлого века, чему способствовало изучение ее анатомии, внутрипеченочной архитектоники трубчатых структур, накопление опыта хирургии печени с внедрением новых технологий, технических средств и методов, позволяющих производить обширные вмешательства на печени. Вследствие резкого увеличения количества оперативных вмешательств на печени выросло и количество различных осложнений, в том числе формирование инфицированных полостных образований печени различной этиологии, что, в свою очередь, потребовало пристального изучения процессов происходящих в печеночной ткани при возникновении в ней инфицированного полостного образования.

Известно моделирование инфицированных полостных образований печени на кроликах путем введения гноеродных микроорганизмов в систему воротной вены животного [В.П. Крышень и др. Воспроизведение абсцессов печени у кроликов в эксперименте. / Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1984. - Выпуск 2. - С. 68-69].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ моделирования. абсцесса печени, заключающийся в том, что предварительно в печень устанавливают подключичный катетер, затем интрапаренхиматозно вводят 2,0 мл 70% раствора этилового спирта, а через сутки в катетер вводят 2 млн KOE в 1,0 мл стафилококкового гноя. Через 7-10 дней наступает формирование абсцесса печени [патент RU 2318248, 2008 г.]. Данная методика при современном развитии медицинской технике является, на наш взгляд, слишком сложной для рутинного моделирования полостного образования в эксперименте: крысе после наркоза необходимо произвести лапаротомию, пункцию печени, фиксацию катетера, при этом неизбежны некоторые потери лабораторных животных из-за технических осложнений и гибели животных вследствие инфицирования брюшной полости, кровотечений, осложнений анестезии.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка технически простого и экономически целесообразного в выполнении метода моделирования абсцесса печени.

Технический результат при использовании изобретения - упрощение и удешевление способа формирования абсцессов печени, предотвращение побочного действия на организм лабораторного животного, ведущего к его гибели.

Предлагаемый способ моделирования абсцесса печени осуществляется следующим образом. Объектом для моделирования являются половозрелые аутбридинговые мужские особи лабораторной крысы Wistar с массой тела 280-300 грамм. Предварительно проводят обривание пупочной области и области мечевидного отростка животного. При помощи маркера в обритых областях проводят разметку: срединная линия (линия №1), соответствующая анатомически срединной плоскости крысы; перпендикулярная первой - вторая линия, соединяющая наиболее нижние точки левой и правой реберной дуг (линия №2). Замеряют и делят на 3 равные части отрезок линии №2, идущий от точки пересечения линий 1 и 2 до левой реберной дуги, выбирают точку на границе внутренней (ближней к точке пересечения линий 1 и 2) и средней третей данного отрезка, которая соответствует проекции центральной части левой доли (фиг.1). В определенной таким образом точке проводят пункцию с введением иглы с мандреном перпендикулярно к поверхности на глубину в 1.2 см, таким образом конец иглы оказывается в толще левой доли печени животного. При помощи чрескожной чреспеченочной пункции тонкой иглой (с диаметром иглы 1.4 мм.) с мандреном в левой доле печени устанавливают гибкий катетер и фиксируют к коже. Правильность места пункции контролируется при помощи ультразвукового аппарата. Затем интрапаренхиматозно через канал катетера вводят 0,3 мл водного раствора трипсина с концентрацией действующего вещества 1 мг/мл, катетер перекрывают. Опытным путем было выявлено, что введение трипсина в данной дозе и концентрации приводит к отграниченному асептическому некрозу ткани печени в зоне введения препарата без значимого системного эффекта на организм лабораторного животного с формированием полости и образованием благоприятной для микроорганизмов питательной среды. Через двое суток через канал катетера вводят 0.5 мл стафилококкового гноя, содержащего 1 млн KOE, и перекрывают просвет на 5 суток. На третьи и пятые сутки осуществляется ультразвуковой контроль за состоянием печени и создаваемой инфицированной полости. Способ обеспечивает воспроизведение модели абсцесса печени при очень простом техническом исполнении, не требующем лапаротомии и длительного наркоза, и коротком сроке формирования абсцесса, при этом первичный аффект в печени с разрушением гепатоцитов и развитием воспалительных изменений благоприятствует развитию вводимых микроорганизмов, а трипсин, инактивируясь, не оказывает негативного влияния на вводимые позднее микроорганизмы. В предлагаемом способе используют экономически выгодное лабораторное животное, типовое медицинское оборудование, а также для создания первичного аффекта в печени раствор трипсина, за счет действия которого в месте его введения происходит разрушение гепатоцитов с формированием полости, а из разрушенных гепатоцитов образуется питательный бульон, благоприятствующий развитию гноеродных микроорганизмов.

Методика была апробирована на 20 животных. Для оценки эффективности предлагаемого способа моделирования инфицированного полостного образования печени, на разных сроках проведения опыта производили выведение животных из опыта введением летальных доз гексенала внутриплеврально и гистологического исследования ткани печени. Трое животных выведены через 48 часов, пять - через 5 суток, пять - через 7 суток и семь - через 10 суток от начала эксперимента. Перед выведением животного из эксперимента проводилось ультразвуковое обследование печени, после эвтаназии проводилось макроскопическое и гистологическое исследования печени. При гистологическом исследовании препараты печени окрашивались гематоксилин-эозином. На фиг.2 проиллюстрировано, что в зоне введения трипсина через 48 часа отмечается некроз и лизис гепатоцитов и межклеточных стромальных элементов. Начинает формироваться демаркационный вал, характеризующийся лейкоцитарной инфильтрацией. За «ободком» лейкоцитарной инфильтрации располагается зона с выраженным полнокровием, отеком, дегенеративными изменениями в печеночных клетках. На пятые сутки вокруг образовавшейся полости формируется явный демаркационный вал, имеются признаки усиления роста соединительнотканных элементов (фиг.3). В тканях за зоной демаркации сохраняется отек стромы, дистрофия гепатоцитов. На седьмые сутки наблюдается дальнейшее формирование демаркационного вала, увеличение количества соединительной ткани (формирование капсулы) (фиг.4). На десятые сутки наблюдается регресс воспалительных изменений за переделами формирующейся капсулы вокруг полости абсцесса (фиг.5).

Метод позволяет с учетом срока вмешательства моделировать вмешательства на различных стадиях развития очагового инфицированного образования в печени. При этом, в отличие от рассматриваемого в качестве прототипа метода, он имеет ряд преимуществ: техническая простота выполнения с использованием доступного типового медицинского оборудования и расходных материалов, для создания первичного аффекта в печени применяется раствор трипсина, обладающий значительным повреждающим действием на печеночную ткань, вызывающий воспалительные изменения в ткани на границе между формирующейся полостью и неповрежденной тканью, но не вызывающий негативного влияния на вводимые позднее в формирующуюся полость гноеродные микроорганизмы.