×
10.08.2015
216.013.6d3d

СПОСОБ ПРЕДПОСЕВНОЙ ОБРАБОТКИ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ НОКАРДИОФОРМНЫХ АКТИНОМИЦЕТОВ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к санитарной микробиологии и может быть использовано при лабораторных исследованиях. Способ предпосевной обработки патологического материала для выделения нокардиоформных актиномицетов предусматривает измельчение патологического материала с последующим смешиванием с дезинфекционным средством "Септустин" в концентрации 0,1% в объемном соотношении 1:2 в течение 180 минут при комнатной температуре с последующей двукратной в течение 15 минут отмывкой стерильным физиологическим раствором. 4 табл., 5 пр.
Основные результаты: Способ предпосевной обработки патологического материала для выделения нокардиоформных актиномицетов, включающий воздействие дезинфекционным средством, отличающийся тем, что в качестве дезинфекционного средства используют дезинфекционное средство «Септустин», причем обработку проводят смешиванием водного раствора дезинфекционного средства «Септустин» концентрацией 0,1% и патологического материала в объемном соотношении 1:2 в течение 180 минут при комнатной температуре с последующей двукратной в течение 15 минут отмывкой стерильным физиологическим раствором.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к бактериологическим исследованиям, касается способа обработки патологического материала и может быть использовано для выделения нокардиоформных актиномицетов. Способ основан на предпосевной обработке патологического материала и посеве на питательные среды.

По современной классификации микроорганизмов в группе 22 (нокардиоформные актиномицеты) определены роды Nocardia и Rhodococcus [1].

Роды Nocardia и Rhodococcus (нокардиоформные актиномицеты), также как роды Corynebacteriwn и Mycobacterium, имеют клеточные стенки IV типа, содержащие в составе клеточной стенки миколовые кислоты, общие антигены, обладают кислотоустойчивостью в различной степени и другими общими признаками. Близкий состав и структура химических компонентов обусловливает не менее близкие биологические свойства. Исследованиями по гибридизации ДНК-РНК установлено близкое генетическое родство быстрорастущих микобактерий, нокардий и родококков, а коэффициент SAB M.phlei и R. spp. настолько высок (0,72), что их характеризуют как отдаленно родственные виды.

Результативность бактериологического исследования во многом зависит от предварительной обработки патологического материала.

В практике микробиологических лабораторий в настоящее время для предпосевной обработки патологического материала для выявления микобактерий используют растворы серной (А.Ф. Коржинская, 1926; К.К. Креслинг, 1929; А.Н. Маккавейская, 1956, метод А.П. Аликаевой, 1971), соляной (Ю.А. Юденич, 1928), щавелевой кислот (метод Гона, Левенштейна-Сумиоши), едкого натра (метод флотации О.В. Мартова, 1971), гипохлорита кальция и других растворов [2, 3]. К недостаткам перечисленных способов следует отнести губительное действие кислот и щелочей на нокардиоформные актиномицеты, коринебактерии и слабокислотоустойчивые микобактерии.

Цель изобретения - способ обработки патологического материала для выделения нокардиоформных актиномицетов (нокардий и родококков).

Поставленная цель достигается предпосевной обработкой патологического материала дезинфекционным средством «Септустин».

Дезинфекционное средство «Септустин» (изготовитель ООО «Уралстинол БИО», Россия) рекомендовано для дезинфекции объектов ветеринарного надзора. Данный препарат из группы катионных ПАВ содержит в качестве дезинфицирующего вещества катамин АБ, а также спирт изопропиловый, неионогенное ПАВ, гидрокарбонат натрия и бромфеноловый синий [4], обладает широким спектром действия в отношении возбудителей инфекционных болезней бактериальной (включая туберкулез), вирусной и грибковой этиологии.

Сущность способа заключается в предпосевной обработке патологического материала водным раствором дезинфекционного средства "Септустин" в концентрации 0,1% смешиванием в объемном соотношении 1:2 в течение 180 минут при комнатной температуре с последующей двукратной в течение 15 минут отмывкой стерильным физиологическим раствором.

Пример 1. Воздействие дезинфекционного средства «Септустин» в зависимости от концентрации и экспозиции определяли на культурах микроорганизмов, полученных из ГИСК им. Л.А. Тарасевича и выделенных из патологического материала (Rhodococcus equi №12). Результаты представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, 0,1% водный раствор дезинфекционного средства «Септустин» при экспозиции 15 минут оказывал бактерицидное действие на все микроорганизмы, при увеличении экспозиции до 30 минут - на E.coli и Staph. aureus, а при увеличении концентрации до 0,25% и при экспозиции 30 минут - на Rhodococcus equi. Бактерицидное действие дезинфекционного средства «Септустин» на все нокардиоформные актиномицеты отмечено при концентрации 0,25% и экспозиции 60 минут.

Пример 2. Биоматериал (печень, селезенка, легкие, почки, сердце) от белых мышей, зараженных культурой R. equi, измельчали в стерильной ступке стерильными ножницами, кусочки заливали раствором дезинфекционного средства «Септустин» 0,1, и 0,25% концентрации в объемном соотношении 1:2 и оставляли на 15, 30, 60, 120 и 180 минут при комнатной температуре. Затем сливали надосадочную жидкость и промывали стерильным физиологическим раствором дважды в течение 15 минут, хорошо перемешивали и сливали, а кусочки растирали песком стерильным пестиком. Полученную суспензию засевали на питательную среду Левенштейна-Иенсена, посевы инкубировали 15 дней при +37°С. Учет результатов проводили ежедневно. Результаты представлены в таблице 2.

Пример 3. Провели культуральное исследование патологического материала (кусочки органов с характерными для туберкулеза изменениями) от коров с положительной реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих из хозяйства, благополучного по туберкулезу. Патологический материал измельчали в стерильной ступке стерильными ножницами, кусочки заливали раствором дезинфекционного средства «Септустин» 0,1% концентрации в объемном соотношении 1:2 и оставляли на 180 минут при комнатной температуре. Затем сливали надосадочную жидкость и промывали стерильным физиологическим раствором дважды в течение 15 минут, хорошо перемешивали и сливали, а кусочки растирали песком стерильным пестиком. Из полученной суспензии производили посевы на питательную среду Левенштейна-Йенсена и помещали в термостат. На вторые сутки выращивания при температуре +37°С отмечали рост в виде крупных слизистых без поверхностного мицелия беловато-желтых колоний. В мазках при окраске по Цилю-Нильсену выявили некислотоустойчивые микроорганизмы, клетки полиморфные - палочки и кокки, которые идентифицировали методом газожидкостной хроматографии (выраженный пик туберкулостеариновой кислоты, низкомолекулярные эфиры жирных кислот с числом углеродных атомов от 12 до 20 и отсутствие высокомолекулярных миколовых кислот) как родококки.

Пример 4. Провели культуральное исследование патологического материала (лимфатические узлы, печени, легкие) от морских свинок, зараженных Nocardia asteroides. Патологический материал измельчали в стерильной ступке стерильными ножницами, кусочки заливали раствором дезинфекционного средства «Септустин» 0,1, 0,25 и 0,5% концентрации в объемном соотношении 1:2 и оставляли на 30, 60, 120 и 180 минут при комнатной температуре. Затем сливали надосадочную жидкость и промывали стерильным физиологическим раствором дважды в течение 15 минут, хорошо перемешивали и сливали, а кусочки растирали песком стерильным пестиком. Полученную суспензию засевали на питательную среду Левенштейна-Йенсена и инкубировали при +37°С. Учет результатов проводили ежедневно. Первичный рост отмечали через 3-4 дня. Результаты представлены в таблице 3.

Пример 5. Провели культуральное исследование биоматериала (брыжеечные, заглоточные, подчелюстные, лимфатические узлы, печени, легкие) от пяти коров с положительной реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих способом в соответствии с изобретением. При просматривании посевов учитывали выделение культур и чистоту посевов. В качестве контроля выбран метод А.П. Аликаевой. Результаты представлены в таблице 4.

Как видно из таблицы 4, оптимальные показатели (выявляемость нокардиоформных актиномицетов, % пророста) отмечались при предпосевной обработке патологического материала водным раствором дезинфекционного средства «Септустин» 0,1% концентрации с экспозицией 180 минут. При увеличении концентрации и экспозиции нокардиоформные актимециты не выявлялись. При предпосевной обработке по А.П. Аликаевой (1971) нокардиоформные актиномицеты не выявлялись.

Проведенные исследования подтвердили, что обработка патологического материала водным раствором дезинфекционного средства «Септустин» 0,1% концентрации с экспозицией 180 минут сдерживает развитие посторонней микрофлоры (споровых палочковидных форм, плесневых грибков), повышает эффективность очистки, снижает вероятность проростов посторонней микрофлоры, не влияет на интенсивность и характер роста нокардиоформных актиномицетов, что свидетельствует об отсутствии подавляющего действия дезинфекционного средства при заявленных параметрах.

Источники информации

1. Хоулт Д. и др. Определитель бактерий Берджи. 2 тома. - М.: Мир, 1967.

2. Должанский В.М. и др. Современные методы лабораторной диагностики туберкулеза: Метод. рекомендации. - М., 1992.

3. Кассич Ю.Я. Туберкулез животных и меры борьбы с ним. - Киев, 1990.

4. Наставление по применению препарата «Септустин» для дезинфекции объектов ветнадзора. Уралстинол. - БИО. - 2002.

Способ предпосевной обработки патологического материала для выделения нокардиоформных актиномицетов, включающий воздействие дезинфекционным средством, отличающийся тем, что в качестве дезинфекционного средства используют дезинфекционное средство «Септустин», причем обработку проводят смешиванием водного раствора дезинфекционного средства «Септустин» концентрацией 0,1% и патологического материала в объемном соотношении 1:2 в течение 180 минут при комнатной температуре с последующей двукратной в течение 15 минут отмывкой стерильным физиологическим раствором.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-8 из 8.
20.02.2015
№216.013.2afb

Способ предпосевной обработки патологического материала для выделения микобактерий

Изобретение относится к медицине и описывает способ предпосевной обработки патологического материала для выделения микобактерий, включающий воздействие дезинфекционным средством, где в качестве дезинфекционного средства используют «Септустин», причем обработку проводят смешиванием водного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542460
Дата охранного документа: 20.02.2015
20.07.2015
№216.013.657c

Способ коррекции иммунобиохимического статуса у коров в предродовом и послеродовом периодах

Изобретение относится к области ветеринарии. Изобретение представляет собой способ коррекции иммунобиохимического статуса у коров в предродовом и послеродовом периодах. Изобретение включает следующие стадии: сухостойным коровам в течение 10-12 дней до и 10-12 дней после родов перорально...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002557527
Дата охранного документа: 20.07.2015
10.03.2016
№216.014.beb1

Способ получения антгельминтных средств растительного происхождения с фасциолоцидной активностью в отношении экцистированных личинок fasciola hepatica

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения антгельминтного средства. Способ получения антгельминтного средства растительного происхождения с фасциолоцидной активностью в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica, заключающийся в том, что...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002576831
Дата охранного документа: 10.03.2016
25.08.2017
№217.015.9c89

Способ первичной идентификации микобактерий комплекса m.tuberculosis от нетуберкулёзных микобактерий

Предложен способ первичной идентификации микобактерий комплекса М. tuberculosis от нетуберкулезных микобактерий. Способ включает предпосевную обработку парных образцов патологического материала с последующей отмывкой стерильным изотоническим раствором хлорида натрия, посевом на плотную яичную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002610412
Дата охранного документа: 10.02.2017
25.08.2017
№217.015.c878

Способ выявления микобактерий с поверхностей

Изобретение относится к биотехнологии. Способ выявления микобактерий с поверхностей предусматривает сбор исследуемого материала с поверхности смоченным физиологическим раствором тампоном и обработку его дезинфицирующим средством «Септустин» в виде 1%-ного водного раствора. При этом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002619220
Дата охранного документа: 12.05.2017
25.08.2017
№217.015.cc22

Способ профилактики респираторных болезней телят

Изобретение относится к области ветеринарии. Клинически здоровым телятам 20-30-дневного возраста применяют внутрь ксимедон гидрохлорид в смеси с 3,5% спиртовой настойкой почек сосны обыкновенной (Gemmue Pini), травы и соцветий эхинацеи пурпурной (Ehinacea purpurea L.), корневищ и корней...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002620548
Дата охранного документа: 26.05.2017
25.08.2017
№217.015.cc47

Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает серологическое исследование крови серонегативных животных на лейкоз с применение РИД в течение 5 дней после учета и оценки реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих. При этом ППД-туберкулин для млекопитающих разводят 10%...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002620558
Дата охранного документа: 26.05.2017
25.08.2017
№217.015.cf0b

Способ профилактики постнатального заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота молодняка крупного рогатого скота

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для профилактики постнатального заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота молодняка крупного рогатого скота. Способ включает одновременное применение ронколейкона и фоспренила, риботана и анандина по следующей схеме:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002621146
Дата охранного документа: 31.05.2017
Показаны записи 1-8 из 8.
20.02.2015
№216.013.2afb

Способ предпосевной обработки патологического материала для выделения микобактерий

Изобретение относится к медицине и описывает способ предпосевной обработки патологического материала для выделения микобактерий, включающий воздействие дезинфекционным средством, где в качестве дезинфекционного средства используют «Септустин», причем обработку проводят смешиванием водного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542460
Дата охранного документа: 20.02.2015
20.07.2015
№216.013.657c

Способ коррекции иммунобиохимического статуса у коров в предродовом и послеродовом периодах

Изобретение относится к области ветеринарии. Изобретение представляет собой способ коррекции иммунобиохимического статуса у коров в предродовом и послеродовом периодах. Изобретение включает следующие стадии: сухостойным коровам в течение 10-12 дней до и 10-12 дней после родов перорально...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002557527
Дата охранного документа: 20.07.2015
10.03.2016
№216.014.beb1

Способ получения антгельминтных средств растительного происхождения с фасциолоцидной активностью в отношении экцистированных личинок fasciola hepatica

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения антгельминтного средства. Способ получения антгельминтного средства растительного происхождения с фасциолоцидной активностью в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica, заключающийся в том, что...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002576831
Дата охранного документа: 10.03.2016
25.08.2017
№217.015.9c89

Способ первичной идентификации микобактерий комплекса m.tuberculosis от нетуберкулёзных микобактерий

Предложен способ первичной идентификации микобактерий комплекса М. tuberculosis от нетуберкулезных микобактерий. Способ включает предпосевную обработку парных образцов патологического материала с последующей отмывкой стерильным изотоническим раствором хлорида натрия, посевом на плотную яичную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002610412
Дата охранного документа: 10.02.2017
25.08.2017
№217.015.c878

Способ выявления микобактерий с поверхностей

Изобретение относится к биотехнологии. Способ выявления микобактерий с поверхностей предусматривает сбор исследуемого материала с поверхности смоченным физиологическим раствором тампоном и обработку его дезинфицирующим средством «Септустин» в виде 1%-ного водного раствора. При этом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002619220
Дата охранного документа: 12.05.2017
25.08.2017
№217.015.cc22

Способ профилактики респираторных болезней телят

Изобретение относится к области ветеринарии. Клинически здоровым телятам 20-30-дневного возраста применяют внутрь ксимедон гидрохлорид в смеси с 3,5% спиртовой настойкой почек сосны обыкновенной (Gemmue Pini), травы и соцветий эхинацеи пурпурной (Ehinacea purpurea L.), корневищ и корней...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002620548
Дата охранного документа: 26.05.2017
25.08.2017
№217.015.cc47

Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает серологическое исследование крови серонегативных животных на лейкоз с применение РИД в течение 5 дней после учета и оценки реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих. При этом ППД-туберкулин для млекопитающих разводят 10%...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002620558
Дата охранного документа: 26.05.2017
25.08.2017
№217.015.cf0b

Способ профилактики постнатального заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота молодняка крупного рогатого скота

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для профилактики постнатального заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота молодняка крупного рогатого скота. Способ включает одновременное применение ронколейкона и фоспренила, риботана и анандина по следующей схеме:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002621146
Дата охранного документа: 31.05.2017
+ добавить свой РИД