ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В ВИДЕ ТАБЛЕТОК

Изобретение относится к медицине, фармацевтической промышленности и касается создания лекарственного препарата в виде таблеток суспензии, содержащего человеческий рекомбинантный интерферон и другие дополнительные активные ингредиенты для лечения тяжелых форм вирусных инфекций.

В настоящее время в медицинской практике используется большое количество препаратов, обладающих противовирусной активностью (Тамифлю, Реленза, Зовиракс, Ацикловир, Ганцикловир, Видарабин, Зидовудин, Рибамидил. Производные адамантана: Ремантадин, Мидантан, Арбидол, Роидоксол, Бонафтон, Метисазон, Фоскарнет и другие).

Однако чаще всего эти препараты имеют узкий спектр действия, а также различные ограничения при использовании и ряд побочных эффектов.

Универсальным препаратом, обладающим противовирусной активностью практически при любых вирусных заболеваниях, является интерферон. Наиболее широко используются в настоящее время рекомбинантные интерфероны, как самые очищенные и высокоактивные. В нашей стране используются эти препараты для парентерального введения при лечении вирусных гепатитов, тяжелых вирусных заболеваниях различной этиологии, в том числе при лихорадках вирусной этиологии и т.д.

В настоящее время разработаны комбинированные препараты, основными компонентами которых является рекомбинантный интерферон и другие дополнительные ингредиенты.

Так, известен суппозиторий «Генферон», содержащий природный интерферон, или рекомбинантный интерферон-альфа, или рекомбинантный интерферон-бета, или рекомбинантный интерферон-гамма, таурин (тауфон) и вспомогательные вещества при заданном соотношении ингредиентов на 1 г суппозитория массой 1-6 г (RU 2201212, А61К 9/00, 2003).

Известен лекарственный препарат противовирусного действия Кипферон, используемый в медицине для лечения и профилактики вирусных заболеваний, содержащий человеческий интерферон и синергист, в качестве которого используется известный иммуноглобулиновый препарат, в частности комплексный иммуноглобулиновый препарат, содержащий смесь человеческих иммуноглобулинов классов М, А и G. Известный лекарственный препарат содержит также фармацевтически приемлемые добавки, при этом в качестве человеческого интерферона он содержит рекомбинантный альфа-, или бета-, или гамма-интерферон человека. Сочетание человеческого интерферона с иммуноглобулинами человека обуславливает проявление известным препаратом синергического, т.е. сверхсуммарного антивирусного, действия (RU 2073522, А61К 38/21, 39/395,1997).

Известно лекарственное средство, содержащее альфа-, или бета-, или гамма-рекомбинантный интерферон, ацикловир, стабилизатор биологических, физико-химических свойств и/или устойчивости к микробной контаминации и фармацевтически приемлемые добавки. Средство может дополнительно содержать иммуномодулятор, витамины, противовоспалительный препарат, антимикробное, и/или антипротозойное, и/или антифунгальное средство, антиоксидант, местно-анестезирующее средство, рабавирин (RU 2187332, А61К 38/21, 2002).

Известен лекарственный препарат Виферон, содержащий генно-инженерный рекомбинантный интерферон альфа-2, антиоксиданты - аскорбиновую кислоту (витамин С), альфа-токоферол и наполнитель при заданных определенных соотношениях компонентов. Показано, что специфическая противовирусная активность интерферона существенно возрастает в присутствии антиоксидантов. Кроме того, в присутствии антиоксидантов побочные эффекты, типичные для препаратов, содержащих высокие дозы интерферона, значительно ослабляются или не проявляются вовсе (RU 2024253, А61К 9/02, 1994).

Известно противовирусное средство, содержащее рекомбинантный интерферон, стабилизатор биологических, физико-химических свойств и/или устойчивости к микробной контаминации, в качестве которого содержит поливинилпирролидон, или поливиниловый спирт, или производное метилцеллюлозы (Na КМЦ) и нипагин, или четвертичные аммонийные соединения, или хлоргексидин. Кроме того, средство дополнительно содержит трилон Б и/или бутилокситолуол, диметилсульфоксид, твин-80, бета-каротин и консистентно-образующую основу при определенном соотношении компонентов в 1 г смеси (RU 2150291, А61К 38/21, 2000).

Несмотря на разнообразие препаратов интерферона, существуют такие виды вирусных заболеваний, в частности гепатиты В, С и Д, где эффективность интерферонотерапии невысока независимо от способа введения интерферона, особенно при тяжелом течении заболевания.

Таким образом, основным недостатком всех интерферонсодержащих препаратов, в том числе и комбинированных, можно назвать их низкую эффективность при терапии тяжелых форм вирусных заболеваний.

Технической задачей, на решение которой направлено данное изобретение, является создание терапевтически эффективного лекарственного препарата, обладающего комплексным воздействием, стимулирующим защитные силы организма при тяжелом течении вирусной инфекций, в т.ч. проявляющим антиоксидантное, противовоспалительное, регенерирующее, противовирусное, иммуномодулирующее и др. действие.

Техническим результатом, для достижения которого предназначено настоящее изобретение, является создание препарата с высокой биодоступностью, обеспечивающего высокую терапевтическую эффективность лечения тяжелых форм вирусных инфекций за счет комплексного синергетического воздействия его компонентов, проявляющегося в мобилизации защитных сил организма, что способствует предупреждению летальности и сокращению сроков лечения этих заболеваний.

Для достижения указанного технического результата фармацевтическая композиция в виде таблеток в качестве лекарственных средств содержит рекомбинантный интерферон, выбранный из группы: рекомбинантный интерферон-альфа, рекомбинантный интерферон-бета, рекомбинантный интерферон-гамма; антиоксиданты, выбранные из группы: мексидол, эмоксипин, дибунол, альфа-липоевая кислота, карнитина хлорид; аминокислоты, выбранные из группы: ацетилцистеин, цистеин, лизин, аргинин; регенераты анаболического действия (нестероидные препараты), выбранные из группы: калия оротат, рибоксин, метилурацил; а также формообразующую основу при следующем соотношении компонентов в г на 1 г смеси:

Кроме того, фармацевтическая композиция может дополнительно содержать лизоцим в количестве 0,00001-0,5 г, а также лецитин в количестве 0,00001-0,5 г и глицирризиновую кислоту и/или ее соли в количестве 0,00001-0,5 г.Фармацевтическая композиция содержит в качестве формообразующей основы компоненты, выбранные из группы: тальк, стеарат магния, стеарат кальция, аэросил, ацетилфталилцеллюлоза, гипромелоза, альгинат натрия, макрогол, поливинилпирролидон.

Проведенный заявителями анализ уровня техники, включающий поиск по патентным и научно-техническим источникам информации и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявленной фармацевтической композиции, позволил установить, что заявители не обнаружили аналог, характеризующийся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам заявленной фармацевтической композиции.

Настоящее изобретение поясняется конкретными примерами исполнения, которые, однако, не являются единственно возможными, но наглядно демонстрируют возможность достижения требуемого технического результата.

Пример 1. Получение таблетированной формы. Берут выбранные рекомбинантный интерферон, антиоксиданты, аминокислоты и регенеранты анаболического действия. Смешивают указанные компоненты с приемлемой формообразующей основой и таблетируют смесь известным способом.

При этом указанные компоненты берут в следующем соотношении компонентов в г на 1 г смеси:

Пример 2. Осуществляют аналогично примеру 1. Дополнительно в состав заявленной композиции включают лизоцим в количестве 0,00001-0,5 г.

Пример 3. Осуществляют аналогично примеру 1. Дополнительно в состав заявленной композиции включают лецитин в количестве 0,00001-0,5 г.

Пример 4. Осуществляют аналогично примеру 1. Дополнительно в состав заявленной композиции включают глицирризиновую кислоту и/или ее соли в количестве 0,00001-0,5 г.

В качестве формообразующей основы используют соответствующие лекарственной форме компоненты, выбранные из группы: тальк, стеарат магния, стеарат кальция, аэросил, ацетилфталилцеллюлоза, гипромелоза, альгинат натрия, макрогол, поливинилпирролидон.

Заявленная фармацевтическая композиция предназначена для перорального употребления. Комцозиция может быть получена смешением на обычном фармацевтическом оборудовании и таблетирована или капсулирована с последующей расфасовкой. Компоненты композиции не вступают в химическое взаимодействие друг с другом.

Доклиническое изучение заявленной фармацевтической композиции проводилось в экспериментах на лабораторных животных в соответствии с правилами экспериментального изучения новых фармакологических веществ, принятыми в Российской Федерации.

Установлено, что заявленный препарат не токсичен для организма животных в дозах до 3 г/кг (4-й класс опасности). Препарат не обладает отрицательными нейротропными и органотропными эффектами, не оказывает местно-раздражающего действия на слизистую желудка в терапевтической дозе. Не проявляет иммунотоксичности и аллергенности в дозах, которые могут быть рекомендованы для человека.

Для исследований использовались беспородные мыши-самцы массой 16-18 г. Лабораторные животные, соответствующие кондиционным требованиям, поставлялись из питомника «Рапполово» (Ленинградская область). Животные содержались в соответствии с нормативами группового или индивидуального размещения при естественном световом дне, получали стандартный корм и воду для питья в достаточном количестве. Подопытные (4) и контрольные (2) группы формировали по 10 особей в каждой.

Эффективность заявленной композиции была изучена на модели выживаемости лабораторных животных, зараженных смертельной дозой вируса гриппа A/H3N2/ на фоне перорального введения заявленной композиции в течение 5 дней.

Для моделирования экспериментальной гриппозной инфекции использовали адаптированный для мышей штамм вируса типа А/Н3М2/Пуэрто-Рико-8/34, пассировавшийся на развивающихся куриных эмбрионах. Исходный титр вируса составлял 10³-10⁴ЛД₅₀/мл. Животных заражали интраназально. Доза вируса составляла для одних групп 5 ЛД₅₀, для других 10 ЛД₅₀. В группах сравнения при заражении указанными дозами выживаемость мышей на 10 сутки после заражения равна нулю, то есть исследуемые дозы являются смертельными.

Лечение зараженных мышей заявляемой композицией начинали через сутки после заражения. Композиции по примерам 1-4 вводили внутрижелудочно с помощью специального атравматического металлического зонда. Доза лекарственного препарата рассчитывалась на 1 кг веса животного. Лечение продолжали ежедневно в течение пяти суток. Эффективность действия композиции оценивали по выживаемости животных на шестые сутки после заражения. Лечение гриппа в группах использования заявленной композиции обеспечивало выживаемость животных.

Предлагаемая фармацевтическая композиция не является специфичной в отношении какого-либо определенного вируса. Являясь комплексным средством, она оказывает, помимо противовирусного эффекта, главное в этой ситуации воздействие, а именно мобилизующее защитные силы организма на борьбу с вирусным инфекционным процессом за счет стимуляции различных механизмов защиты (уменьшение оксидативного стресса, стимуляция гормонального и клеточного иммунитета, непосредственное противовирусное действие, повышение неспецифической резистентности организма, повышение антистрессовой активности гормонов и т.д.). Так, аминокислоты выполняют в организме не только пластическую и энергетическую роль, но и регуляторную функцию, что в условиях тяжелой инфекции способствует адаптации различных систем организма к течению инфекционного процесса. Аминокислоты как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, малой выраженностью побочных эффектов при значительном усилении неспецифической резистентности организма. Анаболики, в т.ч. используемые в данном изобретении нестероидные препараты, способны усиливать процессы синтеза белка и других биологических веществ, способствуя образованию противовирусных антител. Так, метилурацил активирует синтез нуклеиновых кислот, по конкурентному типу ингибируя ферменты катаболизма пиримидинов, в частности уридинфосфорилазу, вследствие чего происходит накопление в клетках уридина, который и вызывает усиление синтеза пиримидиновых нуклеотидов и нуклеиновых кислот. Во взаимодействии с антиоксидантами и интерфероном анаболики и аминокислоты обеспечивают такой синергетический эффект, который позволяет организму справиться даже со смертельной дозой вирусной инфекции.

Указанные известные по отдельности свойства отдельных компонентов предложенного нами препарата обеспечивают патогенетически значимый эффект в лечении тяжелого инфекционного процесса, который очевидным образом реализуется не только при одной определенной вирусной инфекции. Полученные нами результаты выживания животных при введении им смертельной дозы вируса не дают оснований усомниться в возможности лечения других тяжелых вирусных инфекций. Дополнительно следует отметить, что в настоящее время нами получены и первые клинические данные по успешному лечению тяжелого течения вирусного энцефалита, вирусного гепатита А, В и С в клинических условиях на 9 больных, которые наряду со стандартной терапией получали также разработанные нами таблетки по 1 т 3 раза в день на протяжении всего периода лечения. Динамика клинических, биохимических, иммунологических показателей была у них значительно лучше в сравнении с таковыми и других пациентов.

Заявленная композиция прошла экспериментальную проверку также по определению ее биодоступности. Для изучения биодоступности заявленного препарата его вводили животным по примеру 1 в количестве 20 мг/кг. У каждого животного через определенные промежутки времени после введения препарата из хвостовой вены брали по 0,5 мл крови. Кровь собирали в пробирки типа Eppendorf. Пробирки помещали в холодильную камеру и инкубировали 4-6 часов при 4°C. Автоматической пипеткой отсасывали сыворотку и для удаления клеток крови центрифугировали при 5000 об/мин в течение 5 минут. Для стерилизации образцов сыворотки крови супернатанты переносили в системы фильтрации Ultrafree-MC (Amicon) и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 10 мин. Образцы для тестирования хранили при 4°C. Измерения проводили методом жидкостной хроматографии, пики индентифицировали с помощью масс спектрального анализа. Результаты измерения уровня композиции в крови в течение 3-х дней показали, что около 90% введенной дозы всасывалось в кровь. Это говорит о том, что заявленный препарат обладает хорошей биологической доступностью, что способствует эффективному проявлению свойств ее отдельных компонентов при обеспечении синергизма воздействия.

Таким образом, качественный и количественный подбор компонентов в предлагаемой фармацевтической композиции позволил получить лекарственный препарат с повышенной терапевтической эффективностью комплексного воздействия, обеспечивающего мобилизацию защитных сил организма для лечения тяжелых форм вирусных инфекций.