×
10.06.2015
216.013.5519

ШТАММ БАКТЕРИИ Pseudomonas aeruginosa

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Штамм Pseudomonas aeruginosa O11 депонирован в коллекции ФГБУ ВГНКИ под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №10» и регистрационным номером «№10-ДЕП». Штамм имеет высокую длительно сохраняющуюся иммуногенную активность, в связи с чем может быть использован для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней. 3 табл., 4 пр.
Основные результаты: Штамм возбудителя псевдомоноза свиней коллекции ФГБУ ВГНКИ, депонированный под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №10» и регистрационным номером «№10-ДЕП», предназначенный для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии и предназначено для производства вакцинных препаратов против псевдомоноза свиней.

Псевдомоноз - острая инфекционная болезнь животных и птицы, характеризующаяся у молодняка септическим процессом, поражением легких, желудочно-кишечного тракта и суставов, а у взрослых особей репродуктивных органов и молочной железы. Возбудителем псевдомоноза является грамотрицательная аэробная бактерия Pseudomonas aeruginosa, которая по антигенной структуре подразделяется на 20 серологических групп (Псевдомоноз животных / И.А. Болоцкий, А.Г. Шипицын, А.К. Васильев и др. - М.: Колос, 2010. - 223 с.).

Псевдомоноз животных, в т.ч. свиней, регистрируется во всех регионах России независимо от природно-географических условий. В подавляющем большинстве случаев возбудителем псевдомоноза свиней является Pseudomonas aeruginosa серогрупп O1, O3, O4, О6, O11, 019 (Пруцаков С.В. Псевдомоноз продуктивных животных в регионе Северного Кавказа / Автореф. дисс. докт. вет. наук. - Краснодар, 2011. - 37 с.). Учитывая данные обстоятельства, для профилактики болезни была разработана вакцина поливалентная против псевдомоноза сельскохозяйственных животных (Пат. РФ №2308288), которая в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистых культур Pseudomonas aeruginosa, принадлежащих к 10 серогруппам (O1, O2, O3, O4, О6, О10, O11, O13, O18, O19), полученных путем отбора паренхиматозных пораженных органов из местного эпизоотического очага. Существенным недостатком такой вакцины является использование для ее получения неохарактеризованных (случайных) штаммов с неизвестными иммуногенными свойствами.

Известен вакцинный штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa 5142, используемый для изготовления вакцины против псевдомоноза пушных зверей (Пат. РФ 2169193, прототип). Недостатком данного штамма является то обстоятельство, что он ориентирован на создание вакцины против псевдомоноза пушных зверей, при этом у вакцинированных животных формируется иммунитет к экзотоксину А, а не к соматическому О-антигену, который сохраняется непродолжительное время.

Технического решения, в ходе которого использовался штамм Pseudomonas aeruginosa для получения вакцины против псевдомоноза свиней с заданным О-антигенным профилем и иммунногенными свойствами, в доступной научной и патентной литературе нами не выявлено.

Штамм Pseudomonas aeruginosa №10 выделен от павшего поросенка в 2003 г., в 2011 г. предложен в качестве вакцинного штамма, а в 2013 г. депонирован во Всероссийской коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве (Россия, 123022, Москва, Звенигородствое шоссе, 5, ФГБУ «ВГНКИ») под регистрационным номером «№10-ДЕП».

Штамм Pseudomonas aeruginosa №10-ДЕП предназначен в качестве производственного штамма для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней и хранится в ФГУП «Армавирская биофабрика».

Технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается в расширении арсенала штаммов Pseudomonas aeruginosa, обладающих и длительно сохраняющих свои иммунногенные свойства и пригодных для изготовления высокоэффективных вакцинных препаратов.

Технический результат достигается тем, что штамм возбудителя псевдомоноза свиней коллекции ФГБУ ВГНКИ, депонированный под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №10» и регистрационным номером «№10-ДЕП», предназначен для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней.

Штамм Pseudomonas aeruginosa №10-ДЕП характеризуется следующими свойствами.

Культурально-морфологические признаки: грамотрицательная палочка размерами 2-3×0,5-0,8 мкм, подвижная, спор и капсул не образует, располагается поодиночно. Растет на простых питательных средах с образованием сине-зеленого пигмента пиоцианина и слизи. На поверхности мясо-пептонного бульона дает пленку серовато-серебристого цвета, а на поверхности мясо-пептонного агара - шероховатые неправильной формы колонии.

Физиолого-биохимические признаки: мезофил, аэроб, растет при температуре от 18 до 42°C, но оптимальная температура роста 35-37°C. Окисляет глюкозу, восстанавливает нитраты до нитритов, ферментирует аргинин, разжижает желатину, свертывает молоко, разрушает эритроциты барана, образует цитохромоксидазу.

Антигенные свойства: агглютинируется типовой сывороткой О11 до титра 1:1280.

Вирулентные свойства: вызывает гибель белых мышей при внутрибрюшинном введении 3-5×106 микробных клеток.

Иммуногенные свойства: при двукратной иммунизации кроликов инактивированными формалином клетками в дозе 0,5-1,5×1010 и взрослых свиней в дозе 4-6×1010 микробных тел через 14 дней после последней иммунизации в сыворотке крови животных появляются антитела в титре 1:512-1:1024. Защитный титр антител равный для данного штамма 1:64 сохраняется у иммунизированных животных в течение 12 месяцев.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Штамм Pseudomonas aeruginosa №10 выращивают на бульоне Хоттингера в течение 24-46 ч при 36-37°C с pH 7,2-7,4 и постоянном встряхивании на шуттель-аппарате. По истечении срока инкубации культуру проверяют на чистоту путем окрашивания по Граму, доводят физиологическим раствором до концентрации 10 млрд. микробных клеток в 1 мл, после чего инактивируют формалином, содержащим не менее 36% формальдегида до конечной концентрации 0,3-0,4% и выдерживают в течение 14 суток при температуре культивирования. После окончания срока инактивации в культуру вносят 3%-ный раствор гидроокиси алюминия, фасуют во флаконы и укупоривают. Полученная вакцина представляет собой прозрачную жидкость желтовато-зеленоватого цвета с беловато-сероватым рыхлым осадком, при встряхивании образуется однородная суспензия.

Пример 2. Полученную по примеру 1 вакцину проверяют на стерильность и безвредность.

Стерильность вакцины контролируют по отсутствию роста при посеве на среды Сабуро (на грибы), Эндо (колиформные бактерии), МПА (мезо-фильные аэробные бактерии), Китта-Тароци (на анаэробы). Рост на всех средах отсутствовал, что свидетельствует о стерильности вакцины.

Безвредность проверяют на 3 белых мышах массой 18-20 г, которым вакцину вводят подкожно в объеме 0,3 мл и наблюдают в течение 7 дней. Все подопытные животные остались живы, на месте введения вакцины патологических изменений не было, что свидетельствует о безвредности препарата.

Пример 3. Иммуногенность вакцины оценивают по протективности при экспериментальном псевдомонозе на белых мышах и величине накопления титров специфических антител у иммунизированных вакциной кроликов и свиней.

3 группы белых мышей по 10 животных в каждой за 10 дней до заражения эпизоотическим штаммом Pseudomonas aeruginosa О11 иммунизировали: мышей 1 группы вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 в дозе 0,1 мл подкожно; мышей из 2 группы вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 в дозе 0,1 мл подкожно; мышам из 3 группы ввели физраствор в объеме 0,1 мл подкожно. Через 10 дней после иммунизации всех мышей заразили патогенным изолятом Pseudomonas aeruginosa серогруппы О11 в дозе 100 млн. микробных тел внутрибрюшинно. В течение 14 дней за мышами вели наблюдение и производили учет павших.

Результаты отражены в таблице 1, из которой видно, что в первой группе выжило 100% экспериментально зараженных животных, что на 50% больше, чем во второй группе, животные которой иммунизировались вакциной из эпизоотического штамма. В контрольной группе, где животным вводился физраствор, погибли все мыши. Следовательно, вакцина против псевдомоноза из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 защитила наибольшее количество экспериментально зараженных животных, а значит она более иммуногенна, чем вакцина, приготовленная из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142.

Таблица 1
Защитный эффект вакцин при экспериментальном псевдомонозе, обусловленном Pseudomonas aeruginosa серогруппы O11
Группа Кол-во мышей Пало Выжило Защитный эффект вакцины, %
1. Иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 10 - 10 100
2. Иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 10 5 5 50
3. Контроль (вводился физраствор) 10 10 - -

Иммуногенность штамма Pseudomonas aeruginosa №10 оценивали по способности стимулировать выработку специфических антител на 10 кроликах и 10 взрослых свиньях. Для этого животных иммунизируют дважды с интервалом 14 дней: кроликов в дозе 1 мл на голову, свиней - 5 мл на голову. По истечении 14, 30, 90, 180, 270 и 360 дней после последней иммунизации в реакции агглютинации определяют титры антител к Pseudomonas aeruginosa серогруппы О11.

Результаты отражены в таблице 2, из которой видно, что депонированный штамм Pseudomonas aeruginosa №10, предназначенный для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней обладает более выраженными иммуногенными свойствами, чем вакцина из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142, поскольку обеспечивает образование в 3-4 раза большего уровня специфических антител. Кроме того, в организме иммунизированных животных в группах, где использовалась вакцина из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 защитный уровень антител к соматическому антигену О11 (не менее 1:64) сохранялся в течение 12 месяцев, а у животных, иммунизированных вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 - 3-6 месяцев. Отсюда следует, что вакцина, приготовленная из штамма Pseudomonas aeruginosa №10, обеспечивает более продолжительный и напряженный иммунитет, чем вакцина из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142.

Таблица 2
Иммуногенность вакцин против псевдомоноза
Группа Титр антител к соматическому антигену O11 Pseudomonas aeruginosa после иммунизации по дням
14 30 90 180 270 360
Кролики (n=10)
1. Иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 1:1126,4 1:1228,8 1:1024 1:512 1:232,8 1:64
2. Иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 1:282 1:307 1:204,8 1:56,8 1:32 1:16
Свиньи(n=10)
1. Иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 1:1024 1:1433,6 1:716,8 1:307,2 1:256 1:83,2
2. Иммунизировалась вакциной из эпизоотического штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 1:341,3 1:486,7 1:228 1:64 1:38,6 1:12

Пример 4. На свино-товарной ферме, неблагополучной по псевдомонозу, иммунизируют 30 поросят 2-недельного возраста полученной по примеру 1 вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 (опытная группа) и 30 поросят аналогичного возраста вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 (положительный контроль), 30 поросят не иммунизировались (отрицательный контроль). Бактериологическими исследованиями установлено, что заболевание вызывает Pseudomonas aeruginosa серогруппы O11. Поросята опытной группы и группы положительного контроля иммунизировались по одинаковой схеме: дважды с интервалом 14 дней внутримышечно с внутренней стороны бедра в дозе 1,0 и 1,5 мл. Наблюдение за животными вели в течение 120 дней, отмечая все случаи заболевания и гибели поросят, связанные с псевдомонозом.

Результаты опыта отражены в таблице 3, из материалов которой видно, что в опытной группе заболело псевдомонозом 4 поросенка, из них ни один не пал. В группе положительного контроля заболело 11 поросят, из которых пало 4. В группе отрицательного контроля заболело 17 поросят, из которых пало - 8. Следовательно, заболеваемость и смертность в опытной группе составила соответственно 13,3 и 0%, в группе положительного контроля - 36,7 и 13,3%, в группе отрицательного контроля - 56,7 и 26,7%. Сохранность поросят в опытной группе составила 100%, в группе положительного контроля - 86,7% и в группе отрицательного контроля - 73,3%.

Таблица 3
Профилактическая эффективность вакцины против псевдомоноза свиней из штамма Pseudomonas aeruginosa №10
Группа Количество поросят подвергнутых иммунизации Заболело поросят в группе Пало поросят в группе Сохранность поросят, %
1. Опытная, иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa №10 30 4 (13,3%) - 100
2. Контрольная, иммунизировалась вакциной из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142 30 11 (36,7%) 4(13,3%) 86,7
3. Контрольная, не иммунизировалась 30 17(56,7%) 8 (26,7%) 73,3

Таким образом, вакцина, полученная в соответствии с предлагаемым изобретением, а именно из штамма Pseudomonas aeruginosa №10, обеспечивает наибольшую выживаемость животных при экспериментальном и спонтанном псевдомонозе, чем вакцина из штамма Pseudomonas aeruginosa 5142, поскольку способна в большей степени стимулировать выработку и циркуляцию в организме иммунизированных животных специфических антител к соматическому антигену O11. Следовательно, штамм Pseudomonas aeruginosa №10 пригоден для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней.

Штамм возбудителя псевдомоноза свиней коллекции ФГБУ ВГНКИ, депонированный под наименованием «Pseudomonas aeruginosa №10» и регистрационным номером «№10-ДЕП», предназначенный для изготовления вакцины против псевдомоноза свиней.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 545.
20.02.2013
№216.012.251f

Способ профилактики кишечных заболеваний пчел

Изобретение относится к пчеловодству. Для профилактики кишечных заболеваний пчелам в конце зимовки скармливают двукратно с интервалом в 3 недели углеводную подкормку канди с добавлением в нее перпарата крови из расчета 1 кг канди на 1 пчелиную семью. В качестве препарата крови используют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002475023
Дата охранного документа: 20.02.2013
10.09.2013
№216.012.6648

Способ профилактики заболеваний коров в ранний послеотёльный период

Изобретение относится к животноводству и ветеринарии, а именно к способу профилактики заболеваний коров в ранний послеотёльный период. Способ включает скармливание коровам кормовой добавки «Гидрогемол», представляющей собой кислотный гидролизат крови убойных животных, pH которого доводят до...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491831
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.10.2013
№216.012.7888

Способ изготовления вакцины ассоциированной против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается способа изготовления вакцины ассоциированной против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов. При осуществлении способа проводят отбор пораженных органов от павших кроликов из местного эпизоотического...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496518
Дата охранного документа: 27.10.2013
10.11.2013
№216.012.7cb9

Прямоточный грохот

Изобретение относится к технике для классификации сыпучих материалов и может быть использовано в строительной, горнодобывающей, металлургической и других отраслях промышленности. Прямоточный грохот включает просеивающую поверхность, загрузочное и разгрузочное приспособления, привод....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002497602
Дата охранного документа: 10.11.2013
10.11.2013
№216.012.7cba

Грохот строительных материалов

Изобретение относится к технике для классификации сыпучих материалов и может быть использовано в строительной, горнодобывающей, металлургической и других отраслях промышленности. Грохот строительных материалов включает просеивающую поверхность, загрузочное и разгрузочные приспособления, привод....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002497603
Дата охранного документа: 10.11.2013
10.01.2014
№216.012.93cd

Устройство для отделочно-зачистной обработки

Изобретение относится к машиностроению и может быть использовано для отделочно-зачистной и упрочняющей обработки деталей в свободном состоянии. Устройство содержит установленный на станине галтовочный барабан с приводом его вращения и средства для загрузки и выгрузки деталей. Галтовочный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002503531
Дата охранного документа: 10.01.2014
20.01.2014
№216.012.971f

Препарат для профилактики диарей у новорожденных телят

Изобретение относится к ветеринарии. Препарат для профилактики диарей у новорожденных телят, включающий кислотный гидролизат крови животных, молочную, бензойную, янтарную кислоты, содержит дополнительно уксусную кислоту, при следующем соотношении компонентов, мас.%: уксусную кислоту 0,4-0,5,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504386
Дата охранного документа: 20.01.2014
27.03.2014
№216.012.ae9d

Питательная среда для выделения лактобактерий

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при изучении микрофлоры животных, а также бактериологической диагностике дисбактериоза кишечника. Питательная среда содержит молочную сыворотку, дрожжевой аутолизат, глюкозу, уксусную кислоту 70%, агар и капустный отвар в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510416
Дата охранного документа: 27.03.2014
10.04.2014
№216.012.b044

Вакцина ассоциированная против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается вакцины ассоциированной против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов. Представленная вакцина содержит в качестве антигенов суспензию клеток чистой культуры возбудителя сальмонеллеза Sal.typhimurium,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510839
Дата охранного документа: 10.04.2014
10.04.2014
№216.012.b228

Стержневой бетоносмеситель

Для расширения технологических возможностей в стержневом бетоносмесителе, содержащем имеющий привод вращения барабан и рабочий орган, выполненный в виде не связанных между собой стержней-катков, рабочий орган изготовлен в виде многозаходной винтовой поверхности с винтовыми канавками внутри и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002511324
Дата охранного документа: 10.04.2014
Показаны записи 1-10 из 771.
10.04.2013
№216.012.3265

Грохот

Изобретение относится к технике для классификации сыпучих материалов и может быть использовано в строительной, горнодобывающей, металлургической и других отраслях промышленности. Грохот содержит просеивающую поверхность, загрузочное, разгрузочное приспособления и привод. Просеивающая...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478444
Дата охранного документа: 10.04.2013
20.05.2013
№216.012.3fcc

Барабанный грохот

Изобретение относится к устройствам для грохочения пород, строительных материалов при подготовке к транспортировке, для выполнения дробильно-сортировочных операций, а также для классификации строительных материалов. Барабанный грохот включает закрытый со всех сторон короб, с расположенными...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481902
Дата охранного документа: 20.05.2013
27.05.2013
№216.012.42b2

Агрегат для безотвальной обработки почвы

Изобретение относится к области сельхозмашиностроения, в частности к устройствам для сплошной безотвальной обработки почвы. Устройство содержит стойки с закрепленными на них рыхлителями и съемными стрельчатыми лапами. Стойки выполнены из ступенчато изогнутых труб с тремя коленами. Первое колено...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482651
Дата охранного документа: 27.05.2013
10.06.2013
№216.012.465b

Способ производства консервов из мяса птицы для лечебно-профилактического питания

Изобретение относится к пищевой промышленности. Согласно способу подготовленные головы и лапки заливают холодным пищевым пектиновым экстрактом с концентрацией пектиновых веществ не менее 0,7% и готовят бульон. Желатин заливают пищевым пектиновым экстрактом и добавляют в бульон из расчета 1,2% к...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002483591
Дата охранного документа: 10.06.2013
27.06.2013
№216.012.4fc9

Конический проходной грохот

Изобретение относится к устройствам для грохочения пород, строительных материалов при подготовке к транспортировке, для выполнения дробильно-сортировочных операций, а также для классификации строительных материалов. Конический проходной грохот содержит просеивающую поверхность, привод,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486018
Дата охранного документа: 27.06.2013
10.07.2013
№216.012.5287

Устройство для безотвальной обработки почвы

Устройство состоит из рамы с системами навески и регулировки глубины обработки рабочих органов. Рабочие органы выполнены в виде долота и стрельчатых лап. Стойка в нижней фронтальной части имеет направляющую круглого сечения. На направляющей установлено долото. Между стойкой и долотом закреплен...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486730
Дата охранного документа: 10.07.2013
10.07.2013
№216.012.535b

Установка для выделения жидкой фазы из материалов

Изобретение относится к пищевой промышленности, например для обезвоживания сырья при производстве пектина, выделения жидкой фазы из сыпучих материалов, при сушке материалов, а также к сельскому хозяйству, в частности к оборудованию для разделения отходов кормооткормочных комплексов на жидкие и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486942
Дата охранного документа: 10.07.2013
10.07.2013
№216.012.5364

Роторный смеситель-диспергатор

Изобретение относится к устройствам для приготовления продукции во встряхивающих, качающихся и вибрирующих устройствах, и может быть применено в лакокрасочной промышленности. Смеситель содержит наружный барабан, загрузочное и разгрузочное приспособления с патрубками загрузки и выгрузки. В...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486951
Дата охранного документа: 10.07.2013
27.07.2013
№216.012.5b15

Преобразователь напряжения постоянного тока в трехфазное напряжение переменного тока на реверсивном выпрямителе

Изобретение относится к электротехнике и может быть использовано в автономных системах электроснабжения для преобразования напряжения постоянного тока в напряжение переменного тока. Технический результат заключается в разработке преобразователя, формирующего трехфазную систему симметричного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488938
Дата охранного документа: 27.07.2013
10.08.2013
№216.012.5b6c

Способ обработки мясного сырья

Изобретение предназначено для использования в мясной промышленности и относится к физико-химическим технологиям обработки мясного сырья. Способ осуществляют путем воздействия на мясное сырье низкочастотным электромагнитным полем, имеющим энергию выше энергии разрыва водородных связей в мясном...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002489025
Дата охранного документа: 10.08.2013
+ добавить свой РИД