ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения мочеполовой системы, в частности заболеваний предстательной железы.

Из уровня техники известно лекарственное средство для лечения заболеваний предстательной железы, содержащее активированную форму сверхмалых доз антител к простатоспецифическому антигену (RU 2192889 C1, A61K 39/395, 20.11.2002). Однако данное лекарственное средство не во всех случаях обеспечивает достаточную терапевтическую эффективность.

Кроме того, известно использование препарата «Афала» на основе активированной формы сверхмалых доз антител к простатоспецифическому антигену для лечения пациентов с доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), которым дополнительно для повышения качества эрекции назначался препарат на основе активированной формы сверхмалых доз антител к эндотелиальной NO-синтазе «Импаза» (Цыбденов А.Г. Клиническая эффективность препаратов «Афала» и «Импаза» в лечении гиперплазии предстательной железы в сочетании с эректильной дисфункции. Вестник Бурятского Госуниверитета. 2009/12, с.129-130 (Д1); Цыбденов Г.Д., Цыбденов А.Г. и др. Клиническая эффективность препаратов Афала и Импаза в лечении гиперплазии предстательной железы в сочетании с эректильной дисфункции.

Третий съезд хирургов Сибири и Дальнего Востока. Томск, 15-16 октября 2009, Материалы съезда с.278-279 (Д2); Калинина С.Н., Шелипанов О.Л. и др. Диагностика и лечение больных с доброкачественной гиперплазией предстательной железы. Актуальные вопросы урологии. Сборник научных работ. С-Пб. 2007, с.125-130 (Д3)).

При этом, первый препарат «Афала» использовали как основной препарат для лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы и назначали по 2 таблетки 4 раза в день, а второй препарат «Импаза» использовали для повышения качества эрекции и назначали ежедневно: 1 раз в день по 2 таблетки или по 1 таблетке 2 раз в день, то есть препараты принимались в различном количестве и в разное время. Данное обстоятельство позволяет предполагать, что каждый из препаратов действовал независимо друг от друга и обеспечивал получение своего, обусловленного его фармакологическими свойствами, терапевтического эффекта.

Кроме того, в Д1 - Д2 применяли «Афала» для лечения аденомы (гиперплазии) предстательной железы. Результаты оценивали по стандартным опросникам. Оценивали качество жизни больных по опроснику.

Так как эти больные одновременно страдали сексуальными расстройствами, им параллельно назначали препарат «Импаза».

Из Д1 - Д2 следует, что применение 2-х препаратов каждому конкретному больному с нарушениями эрекции назначалось для больных для того, чтобы повысить их качество жизни по сравнению с больными с ДГПЖ без нарушений эрекции. При этом препарат «Афала», содержащий активное вещество в гомеопатических дозах, является безопасным препаратом, который не вызывает побочных эффектов, и не оказывает, в отличие от ингибиторов 5-а-редуктозы и адреноблокаторов, угнетения сексуальной функции.

В ходе исследования были подтверждены известные ранее свойства, присущие каждому препарату в отдельности:

1) безопасность, хорошая переносимость (свойства обоих препаратов),

2) уменьшение симптомов ДГПЖ (свойства «Афала»),

3) улучшение эректильной функции (свойства «Импаза»).

Каждый из препаратов применялся по рекомендованным производителем схемам лечения: 4 приема «Афала» и 1 прием «Импаза» в день - по 2 таблетки на прием.

В ходе исследования не было установлено факторов взаимодействия препаратов или каких-либо новых, неизвестных эффектов при их одновременном применении.

Таким образом, можно говорить, что в данной публикации Д1 - Д2 отражен факт параллельного приема препаратов с целью воспроизведения у отдельного пациента известных для каждого препарата свойств, но не факт их сочетанного (комбинированного, одновременного и в одной дозе) применения с целью терапии единого заболевания.

Из Д3 следует, что больным для лечения ДГПЖ, предъявляющим жалобы также на снижение эрекции, в первой группе назначали комплексную терапию α-адреноблокаторами и «Афала», а во второй группе - α-адреноблокаторами и простамол-уно. В результате выявлено, что комплексная терапия ДГПЖ с применением «Афала» более эффективна, чем с применением простамол-уно.

Параллельно для повышения качества эрекции (качества жизни) обе группы получали препарат «Импаза», а также курс аппаратного вакуумного лечения, что сопровождалось повышением половой функции.

В рамках комплексной терапии ДГПЖ «Афала» назначалась по рекомендованной производителем схеме: 2 таблетки 4 раза в день в течение недели, а затем по 2 таблетки 2 раза в день. «Импаза» - вероятно, также по рекомендованной разработанной схеме, в течение 12 недель (подробного описания нет).

Таким образом, как и в Д1 - Д2, так и в Д3, «Афала» и «Импаза» применялись у пациентов одновременно для лечения разных заболеваний - ДГПЖ и эректильной дисфункции. Какого-либо воздействия на симптомы ДГПЖ «Импаза» или на симптомы эректильной дисфункции «Афала» выявлено не было. При этом совместное применение «Афала», α-адреноблокаторов и «Импаза» улучшает качество жизни пациентов, нормализует нарушенное при ДГПЖ мочеиспускание, повышает половую функцию, т.е. при совместном использовании препаратов по различным схемам введения сохраняются их известные фармакологические свойства без создания нового терапевтического эффекта, и, следовательно, терапевтическое действие препарата «Афала» для лечения ДГПЖ введение препарата «Импаза» не улучшает.

Изобретение направлено на создание лекарственного средства в виде фармацевтической композиции, обеспечивающего повышение эффективности лечения заболеваний предстательной железы на основе активированной - потенцированной формы антител к простатоспецифическому антигену.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что лекарственное средство для лечения заболеваний предстательной железы, содержащее активированную - потенцированную форму антител к простатоспецифическому антигену (ПСА), согласно изобретению, выполнено в виде фармацевтической композиции и включает в качестве дополнительного - усиливающего компонента активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NО-синтазе.

Активированную - потенцированную форму антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного - потенцированного водного или водно- спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

Фармацевтическая композиция заявленного лекарственного средства может быть выполнена в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной - потенцированной формы антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и активированной - потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки. При этом фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Водные или водно-спиртовые растворы активированных -потенцированных форм антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и к эндотелиальной NO-синтазе получены путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричных растворов аффинно очищенных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и к эндотелиальной NO-синтазе с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

Каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений.

При этом каждый из действующих компонентов представляет собой смесь различных гомеопатических сотенных разведений.

Предпочтительно лекарственное средство содержит активированную - потенцированную форму антител к простатоспецифическому антигену и к эндотелиальной NO-синтазе в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰ в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30 и С200.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в способе лечения заболеваний предстательной железы путем введения в организм активированной - потенцированной формы антител к простатоспецифическому антигену, согласно изобретению, дополнительно одновременно и сочетано вводят активированную - потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.

При этом указанное заболевание предстательной железы выбирают из группы, включающей, в том числе: доброкачественную гиперплазию предстательной железы I и II стадии, дизурические расстройства (частые позывы на мочеиспускание, затруднение при мочеиспускании, боль и дискомфорт в области промежности).

Кроме того, способ лечения и профилактики с использованием заявленного лекарственного средства может применяться в комплексной терапии у мужчин, страдающих заболеваниями простаты, в том числе до и после оперативных вмешательств на предстательной железе, и в комплексной терапии острого и хронического простатита в качестве противовоспалительного и обезболивающего средства.

При этом активированную - потенцированную форму антител к простатоспецифическому антигену и активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного - потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

Предпочтительно используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных гомеопатических разведений антител к простатоспецифическому антигену в сочетании со смесью различных гомеопатических разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе.

Кроме того, лекарственное средство содержит действующие компоненты в соотношении 1:1, при этом каждый компонент используют в виде смеси трех соответствующих матричных растворов, разведенных в 100¹², 100³⁰, и 100²⁰⁰ раз, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям С 12, С 30, С 200.

Заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать, предпочтительно, по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.

При лечения заболеваний предстательной железы возможно раздельное, но сочетанное (одновременное) применение (введение в организм) в виде двух отдельно приготовленных препаратов как в виде растворов, так и в твердых лекарственных формах (таблеток), каждый из которых содержит активированную - потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и, соответственно, активированную - потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.

Предложенное сочетание активированных - потенцированных форм антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и к эндотелиальной NO-синтазе в фармацевтической композиции (т.е. формы антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и к эндотелиальной NO- синтазе, приготовленные по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия - вертикального встряхивания, которые обладают активностью в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения заболеваний предстательной железы) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, подтвержденного на адекватных экспериментальных моделях и клинических исследованиях, который заключается в усилении антиаденомного (антипролиферативного) эффекта и в усилении противовоспалительного эффекта и проявляется нормализацией функционального состояния простаты и нижних отделов мочевыводящих путей, улучшением показателей уродинамики. Заявленное средство может применяться как при консервативной терапии, так и у больных с ДГПЖ, перенесших оперативное вмешательство для уменьшения объема предстательной железы, активирует регенеративно-репарационные процессы у пациентов, перенесших оперативное вмешательство по поводу ДГПЖ, уменьшает вероятность развития осложнений после операции. Кроме того, заявленное техническое решение способствует улучшению качества жизни пациентов с доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), простатитом и другими заболеваниями предстательной железы, уменьшает дизурические расстройства, оказывают вегетостабилизирующее действие. Указанный технический результат обусловлен эндотелиопротективным действием активированной - потенцированной формы антител к эндотелиальной NO - синтазе, которая усиливает антипролиферативную и противовоспалительную активность активированной -потенцированной формы антител к ПСА, в том числе за счет воздействия активированной - потенцированной формы антител к эндотелиальной NO - синтазе на трансдукцию внутриклеточного сигнала, при их одновременном и совместном использовании в виде комплексного препарата.

При этом заявленное техническое решение характеризуется широтой терапевтического воздействия и может быть использовано для широкого спектра показаний, связанных с заболеваниями мочеполовой системы, сопровождающимися заболеваниями предстательной железы, в том числе в составе комплексной терапии.

Кроме того, заявленное лекарственное средство расширяет арсенал препаратов, предназначенных для лечения заболеваний предстательной железы.

Для приготовления активированной - потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.

Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемыми в соответствии с изобретением веществами - антигенами: простатоспецифическим антигеном (ПСА) и эндотелиальной NO-синтазой. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифические антисыворотки с высоким содержанием антител, которые используют для получения активированных - потенцированных форм. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.

Предпочтительным для приготовления заявленной фармацевтической композиции является использование поликлональных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и к эндотелиальной NO-синтазе, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, используют для последующего приготовления активированной - потенцированной формы.

Предпочтительной для приготовления каждого компонента является использование смеси трех водно-спиртовых разведений первичного матричного раствора антител, разведенных соответственно в 100¹², 100³⁰, и 100²⁰⁰ раз, что соответствует сотенным гомеопатическим разведениям С 12, С30 и С 200.

Предпочтительным для приготовления заявленного лекарственного препарата является использование поликлональных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и эндотелиальной NO-синтазе, которые могут быть получены иммунизацией кроликов следующим образом.

Пример 1.

Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.

Поликлональные антитела к простатоспецифическому антигену (ПСА) получают, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу простатоспецифического антигена следующей последовательности:

Возможно для получения поликлональных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) использование в качестве иммуногена (антигена) одного полипептидного фрагмента простатоспецифического антигена, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:

Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN₃ до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С. Для выделения из антисыворотки антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:

1. 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl, добавляют 6,26 г Nа₂SO₄, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;

2. Выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;

3. После удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;

4. Фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.

Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к простатоспецифическому антигену (ПСА), который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.

Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антител к простатоспецифическому антигену (ПСА), очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной - потенцированной формы.

Поликлональные антитела к эндотелиальной NO-синтазе получают аналогичным вышеуказанным способом, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:

Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:

Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) синтетического пептида эндотелиальной NO-синтазы, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:

Активированную - потенцированную форму каждого компонента готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения) или в 99 частях (для сотенного разведения), или в 999 частях (для тысячного разведения) нейтрального растворителя с многократным вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).

Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) (или к NO-синтазе) с концентрацией 3,0 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 70% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-ое сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С 12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С 12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) с концентрацией 3,0 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, полученный разведением матричного раствора в 100¹² раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений С 30 и С 200.

При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных гомеопатических, преимущественно сотенных, разведений, каждый компонент состава (например, С 12, С 30, С 200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С 11, С29, С 199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную - потенцированную форму антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) в сверхмалой дозе, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰ в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, С30 и С2000.

Возможно использование компонентов в виде смеси других различных гомеопатических разведений, например, десятичных и или сотенных (D 20, С 30, С 100 или С12, С30, С50 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.

При потенцировании вместо встряхивания в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Для получения заявленной фармацевтической композиции водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов смешивают, преимущественно, в соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.

Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной - потенцированной формой антител к простатоспецифическому антигену (ПСА) и активированной - потенцированной формой антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Hüttlin Pilotlab» производства компании Hüttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой гранул нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 150÷300 мкм, предварительно полученным водным или водно-спиртовым раствором активированных - потенцированных форм антител к простатоспецифическому антигену и к эндотелиальной синтазе оксида азота (NO-синтазе), преимущественно, в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (1:5-1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°С. Расчетное количество 0,17÷0,34 от массы твердой оральной формы) высушенных гранул, насыщенных активированной - потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с микрокристаллической целлюлозой, вводимой в количестве 3÷8 масс. частей от общей массы загрузки - от массы твердой оральной формы. Затем в эту смесь добавляют 25÷45 масс. частей от общей массы загрузки «ненасыщенной» чистой лактозы (для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия), стеарат магния в количестве 0,1÷0,3 масс. частей от общей массы загрузки и микрокристаллическую целлюлозу в количестве 3÷8 масс. частей от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет - прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток массой 150÷500 мг. После таблетирования получают таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/табл.) активированной -потенцированной формой антител к простатоспецифическому антигену и к NO - синтазе в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰ в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30 и С200.

Предпочтительно заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.