×
27.02.2014
216.012.a750

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЛОСОСЕВЫХ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области молекулярной биологии и ветеринарии и предназначено для диагностики вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых. Осуществляют два раунда полимеразной цепной реакции с праймерами B37-B853r и B123-B320r для выявления фрагмента сегмента В, кодирующего РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса инфекционного некроза поджелудочной железы с последующим электрофоретическим определением размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности. По наличию на электрофореграмме фрагментов длиной 860 и/или 240 пн в исследуемом образце диагностируют вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых. Предлагаемое изобретение применимо в диагностических исследованиях в научно-исследовательских институтах, ветеринарных лабораториях, рыбоводческих хозяйствах. 2 ил., 3 табл., 3 пр.
Основные результаты: Способ диагностики вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых методом полимеразной цепной реакции, при котором используют два прямых и два обратных олигонуклеотидных праймера для выявления фрагмента сегмента B, кодирующего РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса инфекционного некроза поджелудочной железы следующей структуры - B37: ACGTTGGTGGCACCCGACATAC, B123: TGTCGGACATCTTCAACTCACC, B320r: CAGTCGAGGCAGAGCGGCATC, B853r: GTGTCTCCTTTGGTTTTGCCTATG, с электрофоретическим определением размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности, где по наличию на электрофореграмме фрагментов длиной 860 и/или 240 пн в исследуемом образце диагностируют вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых.
Реферат Свернуть Развернуть

Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии, молекулярно-генетической диагностики вирусных болезней животных, научных исследований в ветеринарии и молекулярной биологии.

Инфекционный некроз поджелудочной железы (Infectious pancreatic necrosis virus, IPNV) - высококонтагиозная вирусная болезнь, поражающая молодь культивируемых лососевых и некоторых видов рыб других семейств, обитающих как в пресной, так и в морской воде. Вирус инфекционного некроза поджелудочной железы наносит существенный экономический ущерб рыбоводческим хозяйствам РФ.

В комплексе мероприятий по оздоровлению хозяйств от вируса инфекционного некроза поджелудочной железы ведущее место принадлежит диагностике. Отсутствие коммерчески доступных диагностикумов на отечественном рынке вызвало необходимость создания тест - системы для идентификации IPNV методом полимеразной цепной реакции.

В настоящее время совершенствование методов диагностики IPNV крайне необходимо поскольку традиционные методы выделения вируса в культурах клеток не всегда позволяют идентифицировать вирус и занимают длительное время.

Принцип ПЦР заключается в многократном увеличении (амплификации) определенного участка ДНК выявляемого объекта путем его копирования с помощью фермента ДНК-полимеразы и специфических праймеров. Поскольку геном IPNV представлен двухцепочечной молекулой РНК в виде двух сегментов А и В, предварительно - перед постановкой ПЦР-РНК переводят в кДНК благодаря ферменту обратной транскриптазе. Специфические праймеры (прямой и обратный) ограничивают определенный фрагмент нуклеотидной последовательности таким образом, что элонгация новой цепи кДНК при обратной транскрипции и последующей амплификации в ПЦР происходит только между ними. Основными параметрами эффективного прохождения реакции амплификации, обеспечивающими специфичность и чувствительность, являются правильный выбор области генома идентифицируемого агента, структура и температурный режим отжига олигонуклеотидных праймеров.

Известны способы выявления фрагмента генома вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых методом ПЦР с использованием праймеров к сегменту А [1].

Также описан способ выявления РНК вируса инфекционного некроза поджелудочной железы методом «гнездовой» ПЦР (nested-PCR) с праймерами к сегменту А, которые имеют следующую структуру:

1 5'-CCAAACCAACAGGTCCTATCCTAC-3' (внешний прямой)

2 5'-TGATGCCGTTGTTCTCATCAGCTG-3' (внешний обратный)

3 5'-GAAGGAGATGACATGTGCTACACC-3' (внутренний прямой праймер с биотинилированной меткой на 5'-конце)

4 5'-GAGAGATGTGTTTGCCACCATCTC-3' (внутренний обратный)

Фрагмент, полученный в первом раунде ПЦР, служит матрицей во втором раунде ПЦР. Во втором раунде используется два меченых праймера: один имеет биотинилированную метку на 5'-конце, другой содержит радиоактивную метку 32P. Разделение ампликонов проходит с использованием магнитных частиц с последующей детекцией уровня радиоактивного излучения [2].

Известные способы выявления фрагментов генома вируса инфекционного некроза поджелудочной железы не лишены недостатков: использование радиоактивной метки требует соблюдения специальных мер безопасности и лицензирования лаборатории, в способе, предложенном K. Williams et al., амплифицируется фрагмент гена VP2, характерный для всех бирнавирусов, что не исключает возможность ложноположительных результатов. Описанные в литературе праймеры подобраны к генам сегмента А. В то же время установлено, что изоляты IPNV, выделенные из разных географических мест, отличаются высоким генетическим разнообразием, главным образом, обусловленным вариабельностью генов, кодируемых именно сегментом А. В этой связи высока вероятность того, что праймеры к сегменту А могут не подойти к вновь изолированным вирусам с измененным генотипом. В первую очередь это касается изолятов из водоемов тех регионов, где исследование на присутствие IPNV ранее не проводилось.

Для идентификации возбудителя методом ПЦР целесообразно использовать праймеры к наиболее консервативной области генома. В случае IPNV это может быть сегмент В, кодирующий ключевой фермент репликации вирусного генома РНК-зависимую РНК-полимеразу.

В задачу исследований входило - разработка эффективного способа обнаружения фрагменов генома вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых методом гнездовой ПЦР с использованием 4 специфических олигонуклеотидных праймеров.

Первоочередной задачей было конструирование четырех специфических праймеров к IPNV, которые являются главным компонентом ПЦР и обеспечивают ее специфичность и чувствительность.

Для выбора праймеров был использован сегмент В - в то время как в публикациях преимущественно описаны праймеры к сегменту А. При конструировании праймеров и оценке их специфичности использовали нуклеотидные последовательности и программу BLAST, доступные в Интернете на сайте NCBI Предложенный способ заключается в следующем: с помощью компьютерной программы DNASTAR (Lasergene Co., США) на основании программы, предоставленной в базах данных Интернет ресурсов GenBank(CLUA), по генотипам вируса инфекционного некроза поджелудочной железы выбирают рефернс - последовательность NC_001916 штамма Jasper. Праймеры проверяют на отсутствие гомологии с последовательностями других вирусов и генома человека программой BLAST с помощью веб-ресурса Национального центра биотехнологической информации (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). На основании проведенного компьютерного анализа была подобрано 2 пары праймеров: внешние B37 и B853r и внутренние B123 и B320r.

Название 5'--3' длина
B37 ACG TTG GTG GCA CCC GAC АТА С 22
B123 TGT CGG АСА ТСТ ТСА ACT CAC С 22
B320r CAG TCG AGGCAG AGCGGC АТС 21
B853r GTG ТСТ ССТ TTGGTT TTGCCT ATG 24

Синтез разработанных олигонуклеотидных праймеров заказывается в коммерческом сервисном центре.

Четыре праймера к сегменту В были подобраны таким образом, что позволяют применить технику гнездовой и полугнездовой ПЦР, а также могут быть использованы для секвенирования.

Праймеры имеют следующую характеристику: комлементарность выбранной области гена сегмента В, отсутствие самокомлементарных участков внутри каждого праймера и между прямым и обратным, фланкируют область фрагментов гена В размером 860 пн и ≈240 пн, соответственно. Синтез разработанных олигонуклеотидных праймеров заказывается в коммерческом сервисном центре.

Пример 1

Амплификация специфических фрагментов кДНК вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых с помощью разработанных праймеров для диагностики болезни.

В процессе проведения практических экспериментов подбирают оптимальные условия прохождения полимеразной цепной реакции с разработанными праймерами.

Предварительно проводят реакцию обратной транскрипции с парой внешних праймеров. Реакция обратной транскрипции проходит при 42° в течение 45 минут, затем полученную кДНК прогревают при 95° в течение 3 минут и используют для постановки ПЦР. Состав реакционной смеси указан в таблице 1. В качестве положительного контроля на стадии обратной транскрипции и ПЦР используют эталонные штаммы IPN (предоставлен доктором E. Neuvonen, Ветеринарный институт, Хельсинки, Финляндия. Предварительно штамм был испытан методом ИФА), в качестве отрицательного - воду или среду для культур клеток (например, Игла MEM).

Полимеразную цепную реакцию проводят в объеме реакционной смеси 25 мкл на 1 пробу ДНК.

Состав реакционной смеси представлен в таблице 2. Температурно-временной режим проведения реакции для амплификатора «Терцик» («ДНК-технология», Россия) представлен в таблице 3. Условия амплификации и реакционной смеси для первого и второго раунда одинаковые.

После проведения реакции амплификации продукты ПЦР анализируют методом электрофоретического разделения в 2% агарозном геле с добавлением бромистого этидия.

В процессе ПЦР были получены продукты амплификации кДНК вируса инфекционного некроза поджелудочной железы размером около 860 пн в первом раунде ПЦР и 240 пн во втором раунде ПЦР, что подтверждалось во всех экспериментах. Электрофореграмма результатов ПЦР представлена на рис.1. При учете результатов ПЦР в первую очередь оценивали контрольные образцы. В электрофоретической дорожке с положительным контрольным образцом (K+) присутствовала светящаяся полоса на уровне соответствующем фрагменту длиной 860 или 240 пн (в первом и втором раунде, соответственно; оценивали по маркеру М).

Опытные пробы оценивали по наличию в соответствующей дорожке специфической полосы, которая в положительных образцах располагалась на том же уровне, что и полоса в положительной контрольной пробе. В отрицательных пробах полоса отсутствовала (рис.2).

Пример 2

Определение чувствительности реакции амплификации с использованием разработанных специфических олигонуклеотидных праймеров.

Анализировали десятикратные разведения инфицированной IPNV суспензии клеток с исходным титром 7,5 lg ТЦД50/мл. (107,5 ТЦД50/мл).

При проведении «гнездовой» ПЦР последним разведением, в котором обнаруживалась специфическая полоса, было разведение 10-7, что соответствует 0,5 lg ТЦД50/мл или ~3 ТЦД50/мл. Электрофореграмма результатов ПЦР представлена на Рисунке 2.

Пример 3

Определение специфичности реакции амплификации с использованием разработанных специфических олигонуклеотидных праймеров.

Специфичность праймеров проверяли на образцах вируса инфекционного некроза гемопоэтической ткани, вируса инфекционного некроза поджелудочной железы и вируса геморрагической септицемии лососевых. Специфическая полоса была выявлена только в случае наличия в пробе вируса инфекционного некроза поджелудочной железы.

Предложенный вариант апробирован с положительным результатом и регулярной воспроизводимостью в 2010-2011 годах на 500 пробах, полученных из гомогената внутренних органов рыб, поступивших из хозяйств Московской, Рязанской областей и республики Карелия, а также инфицированных клеточных культур.

Предлагаемое изобретение найдет применение в диагностических исследованиях в научно- исследовательских институтах, ветеринарных лабораториях, рыбоводческих хозяйствах.

Литература

1. Wiliams K., Blake S., Sweeney A., Singer J.T., Nicholson B.L. // Multiplex Reverse transcriptase PCR assay for simultaneous detection of three fish viruses // J of clinical microbiology. - 1999. - V.37 (№12). - Р.4139-4141.

2. Rimstad E., Homes E., Olsvik O., Hyllseth B. // Identification of a double-stranded RNA virus by using polymerase chain reaction and magnetic separation of the synthesized DNA segments // J of clinical microbiology - 1990 -. V.28 (№10). - Р.2275-2278.

Сущность изобретения поясняется таблицами и рисунками, в которых отображается следующая информация:

Таблица 2
Состав реакционной смеси для проведения ПЦР для 1 реакции объемом 25 мкл
Компоненты ПЦР Исходная концентрация Конечная концентрация Объем на 1 реакцию
ПЦР-смесь 2 red 2,5 х 10 мкл
дНТФ 10 µМ 0,2 µМ 0,5 мкл
«Прямой» праймер B37(B123)* 10 µМ 0,2 µМ 0,5 мкл
«Обратный» праймер B853 (B320)* 10 µМ 0,2 µМ 0,5 мкл
Вода 8,5 мкл
кДНК (матрица) 5 мкл
* в скобках указаны праймеры для второго раунда ПЦР

Таблица 3
Температурно-временной режим проведения ПЦР (прибор «Терцик», Россия)
Описание стадии Температура, °С Длительность, сек. Кол-во циклов
1 Предварительное нагревание прибора «пауза» 94 - -
2 Черничная денатурация ДНК 95 120 1
3 Денатурация ДНК 95 20 3
4 Гибридизация праймеров со специфическими участками 50 20
5 Синтез комплементарных цепей 72 50
6 Денатурация ДНК 95 20 30
7 Гибридизация праймеров со специфическими участками 58 20
8 Синтез комплементарных цепей 72 50
9 Конечный синтез комп-х цепей 72 120 1
10 Хранение 10 - -

Способ диагностики вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых методом полимеразной цепной реакции, при котором используют два прямых и два обратных олигонуклеотидных праймера для выявления фрагмента сегмента B, кодирующего РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса инфекционного некроза поджелудочной железы следующей структуры - B37: ACGTTGGTGGCACCCGACATAC, B123: TGTCGGACATCTTCAACTCACC, B320r: CAGTCGAGGCAGAGCGGCATC, B853r: GTGTCTCCTTTGGTTTTGCCTATG, с электрофоретическим определением размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности, где по наличию на электрофореграмме фрагментов длиной 860 и/или 240 пн в исследуемом образце диагностируют вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых.
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЛОСОСЕВЫХ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЛОСОСЕВЫХ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 24.
20.05.2013
№216.012.40e4

Культура мультипотентных мезенхимных стволовых клеток, выделенных из жировой ткани крупного рогатого скота (textus adiposus bos taurus), для ветеринарии, клеточной и тканевой инженерии

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и биотехнологии и касается культуры мультипотентных мезенхимных стволовых клеток (ММСК) крупного рогатого скота. Предложенная культура выделена из жировой ткани крупного рогатого скота, обладает свойствами и признаками мультипотентных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482182
Дата охранного документа: 20.05.2013
20.05.2013
№216.012.40e5

Культура мультипотентных мезенхимных стволовых клеток, выделенных из костного мозга крупного рогатого скота (medulla ossium bos taurus), для ветеринарии, клеточной и тканевой инженерии

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и биотехнологии и касается культуры мультипотентных мезенхимных стволовых клеток (ММСК) крупного рогатого скота. Предложенная культура выделена из костного мозга крупного рогатого скота, способна при индукции in vitro формировать клетки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482183
Дата охранного документа: 20.05.2013
27.07.2013
№216.012.59e3

Постоянная линия клеток из плавников сибирского осетра (acipenser baeri), используемая для вирусологических исследований рыб

Изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии и касается линии клеток из плавников сибирского осетра (Acipenser baeri). Представленная линия клеток получена из первично-трипсинизированной ткани плавников сибирского осетра путем длительного пассирования на среде 199 с солями Хенкса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488632
Дата охранного документа: 27.07.2013
10.10.2013
№216.012.7317

Постоянная линия клеток omg из гонад радужной форели (oncorhynchus mykiss)

Изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии, в частности к получению перевиваемых линий клеток. Постоянная линия клеток получена из ткани гонад радужной форели путем длительного пассирования на среде Игла MEM на солях Эрла с 25 мМ HEPES с 10% эмбриональной сыворотки. Линия может...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002495120
Дата охранного документа: 10.10.2013
10.11.2014
№216.013.03b7

Комплексный препарат для лечения животных, больных бактериозами и дрожжевыми микозами

Заявленная группа изобретений относится к области ветеринарии и предназначена для лечения животных, больных бактериозами и дрожжевыми микозами. Заявленный препарат содержит окситетрациклина гидрохлорид, сульфадимезин, ампициллина натриевую соль, нистатин, растворитель и проводник активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002532349
Дата охранного документа: 10.11.2014
10.01.2015
№216.013.1c5e

Способ изготовления аллергена для дифференциальной диагностики парааллергических реакций у крупного рогатого скота на ппд туберкулин для млекопитающих

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и биологической промышленности, в частности к способам получения аллергенов для дифференциальной диагностики парааллергических реакций у крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих. Способ изготовления аллергена для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538690
Дата охранного документа: 10.01.2015
27.04.2015
№216.013.4721

Штамм ас25 постоянной гибридомной линии клеток мыши mus. musculus-продуцент моноклональных антител к антигену н3 вируса гриппа лошадей

Данное изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии. Предложен штамм постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus.musculus. Продуцируемые штаммом моноклональные антитела специфичны к поверхностному гликопротеиду Н3 вируса гриппа лошадей H3N8 и не обладают кросс-реактивностью по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549713
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.06.2015
№216.013.57fd

Способ иммунизации животных против бруцеллеза

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа иммунизации животных против бруцеллеза. Охарактеризованный способ включает использование инактивированной противобруцеллезной вакцины или бруцеллезного антигена, причем вакцинацию проводят ежедневно, перорально в течение 5-10 дней, через...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002554055
Дата охранного документа: 20.06.2015
20.08.2015
№216.013.7012

Штамм f26 постоянной гибридомной линии клеток мыши mus. musculus - продуцент моноклональных антител к олигополисахаридному (опс) антигену b. abortus

Изобретение относится к области иммунологии и представляет собой штамм F26 постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus. musculus - продуцент моноклональных антител мыши к олигополисахаридному (ОПС) антигену B. abortus, депонированный в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560260
Дата охранного документа: 20.08.2015
20.08.2015
№216.013.7148

Способ диагностики йерсиниоза лососевых рыб, вызываемого yersinia ruckeri, методом полимеразной цепной реакции и диагностический набор для осуществления способа

Предлагаемая группа изобретений относится к области биотехнологии, а именно к способу диагностики йерсиниоза лососевых рыб и набору для его осуществления. Данная группа изобретений может быть использована для выявления возбудителя йерсиниоза лососевых - Yersinia ruckeri - в пробах для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560570
Дата охранного документа: 20.08.2015
Показаны записи 1-10 из 41.
20.05.2013
№216.012.40e4

Культура мультипотентных мезенхимных стволовых клеток, выделенных из жировой ткани крупного рогатого скота (textus adiposus bos taurus), для ветеринарии, клеточной и тканевой инженерии

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и биотехнологии и касается культуры мультипотентных мезенхимных стволовых клеток (ММСК) крупного рогатого скота. Предложенная культура выделена из жировой ткани крупного рогатого скота, обладает свойствами и признаками мультипотентных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482182
Дата охранного документа: 20.05.2013
20.05.2013
№216.012.40e5

Культура мультипотентных мезенхимных стволовых клеток, выделенных из костного мозга крупного рогатого скота (medulla ossium bos taurus), для ветеринарии, клеточной и тканевой инженерии

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и биотехнологии и касается культуры мультипотентных мезенхимных стволовых клеток (ММСК) крупного рогатого скота. Предложенная культура выделена из костного мозга крупного рогатого скота, способна при индукции in vitro формировать клетки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482183
Дата охранного документа: 20.05.2013
27.07.2013
№216.012.59e3

Постоянная линия клеток из плавников сибирского осетра (acipenser baeri), используемая для вирусологических исследований рыб

Изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии и касается линии клеток из плавников сибирского осетра (Acipenser baeri). Представленная линия клеток получена из первично-трипсинизированной ткани плавников сибирского осетра путем длительного пассирования на среде 199 с солями Хенкса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488632
Дата охранного документа: 27.07.2013
10.10.2013
№216.012.7317

Постоянная линия клеток omg из гонад радужной форели (oncorhynchus mykiss)

Изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии, в частности к получению перевиваемых линий клеток. Постоянная линия клеток получена из ткани гонад радужной форели путем длительного пассирования на среде Игла MEM на солях Эрла с 25 мМ HEPES с 10% эмбриональной сыворотки. Линия может...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002495120
Дата охранного документа: 10.10.2013
10.11.2014
№216.013.03b7

Комплексный препарат для лечения животных, больных бактериозами и дрожжевыми микозами

Заявленная группа изобретений относится к области ветеринарии и предназначена для лечения животных, больных бактериозами и дрожжевыми микозами. Заявленный препарат содержит окситетрациклина гидрохлорид, сульфадимезин, ампициллина натриевую соль, нистатин, растворитель и проводник активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002532349
Дата охранного документа: 10.11.2014
10.01.2015
№216.013.1c5e

Способ изготовления аллергена для дифференциальной диагностики парааллергических реакций у крупного рогатого скота на ппд туберкулин для млекопитающих

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и биологической промышленности, в частности к способам получения аллергенов для дифференциальной диагностики парааллергических реакций у крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих. Способ изготовления аллергена для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538690
Дата охранного документа: 10.01.2015
27.04.2015
№216.013.4721

Штамм ас25 постоянной гибридомной линии клеток мыши mus. musculus-продуцент моноклональных антител к антигену н3 вируса гриппа лошадей

Данное изобретение относится к области ветеринарной биотехнологии. Предложен штамм постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus.musculus. Продуцируемые штаммом моноклональные антитела специфичны к поверхностному гликопротеиду Н3 вируса гриппа лошадей H3N8 и не обладают кросс-реактивностью по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549713
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.06.2015
№216.013.57fd

Способ иммунизации животных против бруцеллеза

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа иммунизации животных против бруцеллеза. Охарактеризованный способ включает использование инактивированной противобруцеллезной вакцины или бруцеллезного антигена, причем вакцинацию проводят ежедневно, перорально в течение 5-10 дней, через...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002554055
Дата охранного документа: 20.06.2015
20.08.2015
№216.013.7012

Штамм f26 постоянной гибридомной линии клеток мыши mus. musculus - продуцент моноклональных антител к олигополисахаридному (опс) антигену b. abortus

Изобретение относится к области иммунологии и представляет собой штамм F26 постоянной гибридомной линии клеток мыши Mus. musculus - продуцент моноклональных антител мыши к олигополисахаридному (ОПС) антигену B. abortus, депонированный в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560260
Дата охранного документа: 20.08.2015
20.08.2015
№216.013.7148

Способ диагностики йерсиниоза лососевых рыб, вызываемого yersinia ruckeri, методом полимеразной цепной реакции и диагностический набор для осуществления способа

Предлагаемая группа изобретений относится к области биотехнологии, а именно к способу диагностики йерсиниоза лососевых рыб и набору для его осуществления. Данная группа изобретений может быть использована для выявления возбудителя йерсиниоза лососевых - Yersinia ruckeri - в пробах для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002560570
Дата охранного документа: 20.08.2015
+ добавить свой РИД