СБОР ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ

Изобретение относится к медицине, в частности к фармации, и представляет собой сбор из лекарственного растительного сырья с гепатопротекторным действием.

Известен сбор, обладающий гепатопротекторной и противоспалительной активностями (Патент РФ №2419447 С2, опуб. 27.05.2011), содержащий соцветия календулы лекарственной; листья мяты перечной; корни шлемника байкальского; корневища бадана толстолистного; листья черные бадана толстолистного; побеги пятилистника кустарникового и применяемый для лечения и профилактики алкогольного гепатита.

Известен способ комплексного лечения хронических вирусных гепатитов В и С (Патент РФ №2341275 С1, опуб. 20.12.2008), включающий настой из сбора №1 лекарственных растений, содержащего кору дуба, траву донника, корни солодки, траву горца птичьего, корни лопуха, листья мать-и-мачехи, траву пустырника, траву сушеницы, траву эхинацеи, а в фазу ремиссии настой из сбора №2, содержащего корневища с корнями девясила, цветки календулы, листья крапивы, листья подорожника, плоды шиповника, траву полыни обыкновенной, створки фасоли, траву эхинацеи.

Известен способ получения средства, обладающего гепатопротекрорным и желчегонным действием (Патент РФ №2292897 С1, опуб. 10.02.2007). Способ заключается в экстракции измельченного сырья и отделении экстракта, в качестве сырья используют сбор лекарственного растительного сырья : трава солянки холмовой, трава чистотела, цветки пижмы и проводят последовательную трехкратную экстракцию 70%-ным этанолом и водой очищенной при соотношении сырье : экстрагент 1:1 методом ступенчатого противоточного экстрагирования.

Известны гепатопротекторы растительного происхождения - легален (силимарин, силибинин), карсил, получаемые из плодов расторопши пятнистой, являющиеся наиболее близкими по фармакологической активности к предлагаемому гепатопротекторному сбору из лекарственного растительного сырья и рекомендуются в качестве препаратов сравнения при изучении гепатопротекторных лекарственных средств [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ., Москва. 2005, С.683-691].

Задача изобретения - расширение арсенала гепатопротекторных средств растительного происхождения.

Поставленная задача решается сбором гепатопротекторного действия, включающим листья смородины черной, листья малины обыкновенной, траву кипрея узколистного и траву лабазника вязолистного при их равном весовом соотношении.

Использование данного сбора в качестве гепатопротекторного средства стало возможным благодаря экспериментальному выявлению его новых свойств, а именно лечебно-профилактического действия при токсическом поражении печени. Водный настой из предлагаемого сбора обладает выраженной гепатопротекторной активностью, не уступающей эталонному препарату - карсилу. Способность данного сбора предотвращать и устранять последствия токсического поражения печени, выявлена при проведении экспериментальных исследований.

Пример конкретного выполнения

Высушенные, измельченные и просеянные через сито с диаметром 0,5 мм листья малины обыкновенной 10,0; листья смородины черной 10,0; траву кипрея узколистного 10,0; траву лабазника вязолистного 10,0 смешивают, помещают в емкость вместимостью 1000 мл, прибавляют 400 мл воды дистиллированной с учетом коэффициента водопоглощения (К_ВП=3,0). Нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин. После охлаждения извлечение фильтруют через марлевый фильтр.

На первом этапе исследований было проведено сравнительное изучение лечебно-профилактического действия разработанного сбора и эталонного препарата - карсила при CCl₄-индуцированном токсическом гепатите. Исследование выполнено на 60 белых беспородных крысах-самцах массой 220-240 г, случайным образом распределенных по 4-м группам:

1-я группа - интактные крысы (n=22);

2-я группа - контрольная группа (n=22);

3-я группа - опытная, заявляемый сбор (n=28);

4-я группа - опытная, эталонный препарат - карсил (n=28).

Животных содержали в стандартных условиях вивария на стандартном рационе кормления. Первая опытная группа в течение трех недель получала водное извлечение из заявляемого сбора. В течение первых двух недель эксперимента опытные животные получали настой в условиях свободного запаивания, в среднем на одно животное приходилось по 30 мл настоя в день. Вторая опытная группа получала карсил (Sopharma, Болгария) в дозе 200 мг/кг внутрижелудочно в виде взвеси, как эталонный препарат с гепатопротекторной активностью. Животные из контрольной и интактной групп получали воду ad librum.

На 15-й день эксперимента у опытных и контрольной групп животных вызывали токсический гепатит внутрибрюшинным введением CCl₄ в виде 25% раствора в оливковом масле, однократно в дозе 0,2 мл/кг (в пересчете на CCl₄). После чего животные продолжали получать гепатопротекторы еще в течение 7 дней. Таким образом, в эксперименте было смоделировано лечебно-профилактическое применение гепатопротекторов.

Гепатопротекторное действие исследуемого сбора оценивали с помощью тиопенталовой пробы. Тиопентал вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг и фиксировали продолжительность тиопенталового наркоза по показателю «бокового положения». Проба позволяет оценить скорость метаболизма тиопентала, осуществляемого цитохром Р-450-зависимой монооксигеназной системой гепатоцитов.

Результаты проведенного эксперимента обработаны с использованием t-критерия Стьюдента и представлены в таблице 1.

CCl₄-гепатит характеризуется развитием колликвационного некроза, белковой и жировой дистрофии гепатоцитов, локализованных преимущественно в центральной зоне печеночной дольки, где максимальна активность зависимых от цитохрома Р-450 монооксигеназ и преобладает продукция повреждающих метаболитов гепатотоксина. Из данных, полученных в эксперименте видно, что продолжительность тиопенталового наркоза у животных, подвергавшихся воздействию гепатотоксина (контроль), продолжительность тиопенталового наркоза была почти в 3 раза выше, чем у интакта. Лечебно-профилактическое применение изучаемого сбора полностью предупреждало эти CCl₄-индуцированные изменения. Следует отметить, что сравнение гепатопротекторного эффекта по данному показателю (продолжительность тиопенталового наркоза) не выявило достоверного различия от этого же показателя препарата сравнения - карсила. Это свидетельствует о меньшем поражении печени в опытной группе (заявляемый сбор) и сохранившейся функции цитохром Р-450-зависимой монооксигеназной системы гепатоцитов.

В качестве информативных критериев оценки сохранности печеночной ткани и гепатопротекторной эффективности предлагаемого сбора были также использованы некоторые биохимические и энзимологические показатели крови.

У экспериментальных животных, не подвергавшихся воздействию тиопентала, на 21 сутки от начала опыта, после декапитации, отбирали кровь для определения холестерина, билирубина (общий, прямой, непрямой), АЛТ, ACT. Кровь центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин на центрифуге «Scanspeed mini» (США). Отбирали плазму и оценивали биохимические показатели крови с использованием наборов фирмы «Intermedica» (США), согласно инструкции производителя на биохимическом анализаторе фирмы «Biochem» (США).

Как видно из результатов, приведенных в таблице 2, в группе контроля CCl₄ гепатита наблюдалось значительное повышение уровня печеночных ферментов, холестерина, общего, прямого и непрямого билирубина, вызванное воздействием гепатотоксина. В группе, получавшей заявляемый сбор на фоне гепатита, указанные сдвиги были существенно менее выражены. Следует отметить, что данные, полученные в группе «CCl₄+ заявляемый сбор» лишь незначительно уступают результатам, полученным в группе животны «CCl₄+ карсил».

Таким образом, данные, полученные в эксперименте, свидетельствуют о наличии гепатопротекторных свойств у сбора, состоящего из листьев малины обыкновенной, листьев смородины черной, травы кипрея узколистного и травы лабазника вязолистного.