×
16.06.2023
223.018.7c9a

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ОЦЕНКИ МИГРАЦИИ КЛЕТОК В СТРУКТУРУ МАТЕРИАЛА ИЛИ СКАФФОЛДА

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области медицины. Предложен способ оценки миграции клеток в структуру материала или скаффолда. На образцы материала или скаффолда высевают интактные мезенхимальные стволовые клетки или фибробласты, затем образцы с клетками окрашивают флуорохромом, проводят флуоресцентную микроскопию в 10 полях зрения с послойной съемкой по оси Z на глубину миграции клеток в структуру образца, с фиксацией глубины залегания ядер клеток относительно поверхности образца и последующим расчетом скорости миграции клеток в структуру материала или скаффолда по формуле A=B/t. Изобретение обеспечивает удешевление, сокращение временных затрат, трудоемкости и повышение доступности способа для оценки миграции клеток в структуру материала/скаффолда. 2 табл., 2 пр., 10 ил.

Предполагаемое изобретение относится к биомедицине, медицине, биотехнологии, регенеративной медицине, в частности к способам оценки миграции клеток в толщу материала или скаффолда.

В настоящее время благодаря развитию новых уникальных технологий во всем мире разрабатываются биосовместимые конструкции и материалы, расширяющие применение биомедицинских продуктов для замещения или восстановления поврежденных или утраченных тканей и органов. Одной из базовых характеристик, которой должны обладать материалы и скаффолды, предназначенные для заселения клетками и создания биомедицинских продуктов - это пористость («Tailoring the pore structure of PCL scaffolds for tissue engineering prepared via gas foaming of multi-phase blends» Salerno, Maio, Iannace, Netti Journal of Porous Materials volume 19, pagesl81-188 2012). Наличие системы взаимосвязанных пор позволяет клеткам заселить материал или скаффолд и нормально функционировать в дальнейшем, что, в конечном счете, обеспечивает целостность создаваемого биомедицинского клеточного продукта и его интеграцию в ткани реципиента при имплантации. Заселение материала / скаффолда происходит при высеве клеток на их поверхность in vitro либо путем рекрутинга клеток из окружающих тканей после его имплантации (Rnjak-Kovacina, J., Wise, S., Li, Z., Maitz, P., Young, C, Wang, Y., and Weiss, A. «Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering». Biomaterials 32, 6729, 2011; Freed LE1, Vunjak-Novakovic G, Biron RJ, Eagles DB, Lesnoy DC, Barlow SK, Langer R. «Biodegradable polymer scaffolds for tissue engineering». Biotechnology 1994 Jul; 12(7):689-93.). Клетки должны мигрировать в структуру материала / скаффолда и заселить создаваемый на их основе конструкт. В тоже время наличие пористости материала / скаффолда как таковой еще не гарантирует успешной миграции клеток в его структуру. Так, малый размер пор, отсутствие межпоровых пространств, особенности свойств поверхности внутренней структуры и т.д. могут препятствовать миграции клеток и не позволить им заселить материал / скаффолд (Takahashi, Y., and Tabata, Y. «Effect of the fiber diameterand porosity of non-woven PET fabrics on the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells». J Biomater Sci Polym Ed 15, 41, 2004). В связи с этим оценка миграции клеток в структуру образцов является одним из важнейших показателей при разработке материалов / скаффолдов. Однако, новые материалы / скаффолды часто являются плотными и непрозрачными, в связи с чем они становятся недоступными для исследования обычными оптическими методами. Поэтому разработка новых способов оценки миграции клеток в структуру материала /скаффолда является актуальной задачей, решение которой позволит на этапе in vitro разработки материалов / скаффолдов спрогнозировать возможность их заселения клетками и провести отбор наиболее перспективных образцов для дальнейшей разработки биомедицинских продуктов. Прогнозирующее тестирование in vitro новых материалов / скаффолдов требует современных ревалентных способов, позволяющих проводить не только качественную, но и количественную оценку. Такой подход является неотъемлемой частью во время доклинических исследований в качестве предварительного этапа перед началом исследований in vivo. В тоже время, существующие методы оценки миграционной способности клеток не являются универсальными и часто позволяют оценить только миграционную активность самих клеток, но не их миграционную способность в структуру материала. Так, например, одними из самых распространенных методов оценки миграционной активности клеток in vitro является оценка миграции клеток с помощью камеры Брейдона или теста "раны монослоя" клеток (Э.В. Бойко, Д.С. Мальцев, В.О. Полякова Влияние рекомбинантного активатора плазминогена урокиназного типа на клеточную культуру пигментного эпителия сетчатки человека // Вестник офтальмологии 2017, 1, С. 42-48). Данный метод оценки миграции клеток имеет ряд преимуществ, как то не требует специального оборудования или реагентов. Через несколько часов после "ранения" монослоя направленная коллективная миграция легко оценивается и определяется количественно. Однако данный способ не может использоваться с целью оценки миграции клеток в структуру материала. Он позволяет проводить оценку миграционной способности непосредственно культуры клеток и клеток под воздействием, например, тестируемых жидкостей.

В качестве прототипа выбран способ, применяемый для оценки миграционной способности фибробластов кожи человека (ФЧ), мезенхимных стромальных клеток жировой ткани человека (МСК-ЖТ) и эпидермальных кератиноцитов (ЭКЦ), в толщу непрозрачного 3D пластического материала в виде губки толщиной 10 мм (Рахматуллин Рамиль Рафаилевич «Биопластический материал на основе гидроколлоида гиалуроновой кислоты и пептидного комплекса для восстановительной и реконструктивной хирургии» Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук, М: 2014), включающий предварительное трансфицирование ФЧ геном зеленого флуоресцирующего белка EGFP под CMV-промотором или предварительное трансфицирование геном красного флуоресцирующего белка TagRFP под CMV-промотором (МСК-ЖТ, ЭКЦ) при помощи лентовирусной конструкции, после чего клетки можно наблюдали на губке с помощью широкопольного флуоресцентного микроскопа Olympus IX51 (Olympus, Япония) по видеозаписи с трехсуточными циклами на протяжении периода культивирования до 26 суток.

Способ, представленный в прототипе, требует дорогостоящих, изготавливаемых только под заказ расходных материалов, в частности конструирование лентивирусного вектора, кодирующего указанную заказчиком последовательность ДНК под контролем универсального промотора цитомегаловируса человека (CMV). Еще одним недостатком является длительность и трудоемкость способа, так как наработка лентивирусных частиц с необходимым титром (с титром 105-106 TU/мл) требует затрат временного ресурса, кроме того работа с конструированием лентивирусов проводится в ограниченном количестве биотехнологических компаний, как в России, так и за рубежом, что резко ограничивает применимость метода. В предложенном способе, в качестве репортерных генов использовали сразу два цветных флуоресцентных белка: зеленый флуоресцирующий белок EGFP для фибробластов кожи человека и красный флуоресцирующий белок TagRFP для мезенхимных стромальных клеток жировой ткани человека (МСК-ЖТ) и эпидермальных кератиноцитов. Следовательно, все перечисленные денежные и временные затраты увеличиваются как минимум вдвое. В итоге, для реализации всего способа необходимы редкие, изготавливаемые только под заказ, лентивирусные конструкции, дорогостоящие технологии и значительные временные затраты.

Задача предполагаемого изобретения - усовершенствование способа.

Технический результат - удешевление, сокращение временных затрат, трудоемкости и повышение доступности способа для оценки миграции клеток в структуру материала /скаффолда.

Технический результат достигается за счет того, что в способе, включающем высев культуры клеток на исследуемый образец и оценку их миграции в толщу материала с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии, на образцы материала или скаффолда высевают интактные мезенхимальные стволовые клетки или фибробласты, затем последовательно через 24, 72 и 144 часа образцы с клетками окрашивают флуорохромом, обладающим высокой специфичностью к двухцепочечной молекуле ДНК, проводят флуоресцентную микроскопию в 10 полях зрения с послойной съемкой по оси Z на глубину миграции клеток в структуру образца, с фиксацией глубины залегания ядер клеток относительно поверхности образца и последующим расчетом скорости миграции клеток в структуру материала или скаффолда по формуле: A=B/t, где А - скорость миграции клеток в структуру образца материала или скаффолда (μm/ч); В - средняя величина глубины миграции клеток в структуру образца по 10 полям зрения (μm); t - время с момента высева клеток на поверхность образца до момента исследования.

Способ оценки миграционной способности клеток в структуру материала или скаффолда осуществляют следующим образом:

Шаг 1. На образцы материала или скаффолда высевают культуру мезенхимальных стволовых клеток или дермальных фибробластов человека с плотностью высева 10 тыс./см2. Образцы помещают в СO2-инкубатор и культивируют при 37°С и 5% СO2.

Шаг 2. В контрольные сроки (например, 24, 72 или 144 часа), образец материала помещают в 24-луночный планшет для флуоресцентной микроскопии с непрозрачными боковыми стенками. Затем проводят прижизненное окрашивание ядер клеток, высеянных на образец флуорохромом, обладающим высокой специфичностью к двухцепочечной молекуле ДНК (например, флуорохром Hoechst 33342). Для этого в лунку, содержащую образец и 2 мл культуральной среды (DMEM или α-МЕМ содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки), добавляют прижизненный краситель, который обладает высокой специфичностью к двухцепочечной молекуле ДНК, согласно инструкции производителя (например, 1 мкл раствора Hoechst 33342 в концентрации 10 мкг/мл). Планшет помещают в термостат и инкубируют в течение 30 мин. при 37°С. После инкубации образец дважды отмывают фосфатным буфером. Затем к образцу добавляют 1 мл фосфатного буфера для предотвращения пересыхания образца.

Шаг 3. Планшет образцом переносят на оборудование, позволяющее проводить широкопольную флуоресцентную микроскопию (например, имиджер Cytation™ 5). В 10 полях зрения с использованием объектива с 4-кратным увеличением проводят послойную съемку по оси Z. Съемку по оси Z проводят, используя функцию Z-stack, от первой клетки (которая лежит на поверхности материала) до последней клетки (которая максимально глубоко мигрировала в толщу материала).

Шаг 4. Снимки в количестве 10 штук полученные по п. 3 обрабатываются с целью наблюдения трехмерного распределения клеток по структуре материала. Проводят анализ послойных снимков материала с клетками от верхних слоев к более глубоким, фиксируя начальный уровень поверхности образца (Н) и глубину миграции клеток в структуру материала (М) - глубину залегания ядер в структуре образца относительно поверхности образца). Для каждого поля зрения рассчитывают абсолютное значение глубины миграции клеток по формуле Г=М-Н. Рассчитывают среднюю величину глубины миграции клеток в структуру материала по 10 полям зрения (В) по формуле В=(Г1+Г2+…Г10)/10, где Г1 - абсолютное значение глубины миграции клеток на снимке 1, Г2 - абсолютное значение глубины миграции клеток на снимке 2. и т.д.

Шаг 5. Проводят расчет скорости миграции клеток в структуру материала по формуле: A=B/t, где А - скорость миграции клеток в структуру образца материала или скаффолда (μm/ч); В - средняя величина глубины миграции клеток в структуру образца по 10 полям зрения (μm); t - время с момента высева клеток на поверхность образца до момента исследования.

Полученные данные позволяют оценить миграцию клеток в структуру материала или скаффолда по изменению значения Z-stack в течение времени и расчитать скорость миграции клеток.

Способ оценки миграции клеток в структуру материала или скаффолда поясняется фигурами, приложенными к данному описанию.

Фиг. 1. Пример микрофотоснимка исследуемого образца, полученного при послойной съемке по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Начальный уровень поверхности образца, глубина по оси Z=106 μm.

Фиг. 2 Пример микрофотоснимка исследуемого образца, полученного при послойной съемке по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок, глубина по оси Z=318 μm.

Фиг. 3 Пример микрофотоснимка исследуемого образца, полученного при послойной съемке по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок, глубина по оси Z=530 μm.

Фиг. 4. Пример микрофотоснимка исследуемого образца, полученного при послойной съемке по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Глубина по оси Z=689 μm, глубже ядра клеток не фиксировались.

Фиг. 5 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Начальный уровень поверхности образца - по оси Z=105 μm.

Фиг.6 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок - по оси Z=119μm.

Фиг. 7 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок - по оси Z=134μm.

Фиг. 8 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок - по оси Z=148μm.

Фиг. 9 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Промежуточный микрофотоснимок - по оси Z=162μm.

Фиг. 10 Пример получаемых фотографий с образца с послойной съемкой по оси Z с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии. Финальный снимок - глубина по оси Z=177 μm.

Достижение заявленного технического результата подтверждается следующими примерами.

Пример 1.

Пример 2.

Пример 1

Для оценки миграции клеток в структуру костнозамещающего материала на основе гидроксиапатита, коллагена и сульфатированных гликозаминогликанов был взят образец материала и согласно представленному способу, на его поверхность были высеяны интактные мезенхимальные стволовые клетки, как описано в шаге 1 данного способа. Далее согласно шагам 2-4 данного способа через 72 часа была проведена окраска и широкопольная флуоресцентная микроскопия с послойной съемкой по оси Z на имиджере Cytation™5. В результате в 10 полях зрения с использованием объектива с 4-кратным увеличением проведена послойная съемка по оси Z на глубину визуализации от поверхности образца (первой клетки на поверхности) до последней клетки в структуре материала (Фиг. 1-4) с фиксацией глубины миграции клеток в структуру материала (глубины залегания ядер в структуре образца относительно поверхности образца) и последующим расчетом скорости миграции клеток в структуру материала согласно шагу 5 данного способа.

Согласно полученным результатам костнозамещающии материал, в состав которого входит гидроксиапатит, коллаген и сульфатированные гликозаминогликаны, позволяет клеткам проявлять высокую миграционную способность в структуру материала. Клетки в среднем мигрировали на глубину 594 μm со 8,25 μm/ч (Табл. 1).

Пример 2

Для оценки миграционной способности клеток были взят образец скаффолда сформированного на основе олигоэфир(мет)акрилатов. На образцы скаффолда были высеяны интактные фибробласты, как описано в шаге 1 представленного способа. Далее, согласно шагам 2-4 способа через 144 часа была проведена окраска и исследование с использованием широкопольной флуоресцентной микроскопии с послойной съемкой по оси Z на имиджер Cytation™ 5. В результате в 10 полях зрения с использованием объектива с 4-кратным увеличением проведена послойная съемка по оси Z на глубину визуализации от первой (на поверхности) до последней (в толще материала) клетки, с фиксацией глубины миграции клеток в структуру материала (глубины залегания ядер в структуре образца относительно поверхности образца) и последующим определением скорости миграции клеток в структуру материала согласно шагу 5 данного способа (Фиг. 5-10).

Таким образом, предложенный способ позволяет оценить миграцию клеток в структуру материала или скаффолда и определить скорость и время миграции клеток.

Согласно полученным результатам образец скаффолда сформированного на основе олигоэфир(мет)акрилатов не позволял клеткам активно мигрировать в структуру материала. Клетки в среднем мигрировали на глубину 67μm со 0,47 μm/ч (Табл. 2).

Таким образом, предложенный способ позволяет получить объективные данные позволяющие оценить миграцию клеток в структуру материала / скаффолда с использованием стандартных методов высева интактных клеток на исследуемый образец и достаточно простых и распространенных методов окрашивания образцов с их исследованием методом широкопольной флуоресцентной микроскопии. Способ не требует дорогостоящих, изготавливаемых только под заказ расходных материалов, а реализуется с использованием стандартных флуорохромов, что значительно удешевляет реализацию и повышает доступность представленного способа. Несомненным преимуществом способа является то, что он не требует длительных, сложных и трудоемких подготовок (например, наработка лентивирусных частиц с необходимым титром), требующих больших временных затрат, а реализуется стандартными методами, доступными многим биотехнологическим лабораториям. Использование для оценки миграции клеток в структуру материала/скаффолда съемки по 10 полям зрения по оси Z с фиксацией залегания глубины ядер позволяет объективно и с высокой степенью точности не только качественно охарактеризовать возможность миграции клеток в структуру (толщу) исследуемых, но и дать количественную оценку процесса рассчитав скорость миграции клеток.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-9 of 9 items.
10.01.2013
№216.012.1a29

Применение фотополимеризующейся композиции для коннектирования световодов, способ коннектирования световодов и устройство для осуществления способа

Изобретение относится к применению фотополимеризующейся композиции, включающей полимеризационно-способный компонент, например мономер или смесь мономеров, орто-хиноны и восстанавливающий агент, например амин, при следующем соотношении компонентов, вес.ч.: полимеризационно-способный компонент -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472189
Дата охранного документа: 10.01.2013
10.01.2015
№216.013.1920

Фотополимеризующаяся композиция для одностадийного получения полимерного нанопористого материала с гидрофобной поверхностью пор, нанопористый полимерный материал с селективными сорбирующими свойствами, способ его получения, способ одностадийного формирования на его основе водоотделяющих фильтрующих элементов и способ очистки органических жидкостей от воды

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, нанотехнологий и фотохимии и касается разработки фотоотверждаемой композиции для получения полимерного материала, обладающего трехмерной нанопористой структурой с гидрофобной поверхностью пор, одностадийного способа его получения и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002537860
Дата охранного документа: 10.01.2015
13.01.2017
№217.015.821b

Способ каталитического пиролиза углеводородной смеси c-c в низшие олефины c-c

Предлагаемое изобретение относится к нефтехимии, касается способа каталитического пиролиза углеводородной смеси C-C в низшие олефины С-С, которые могут быть использованы в процессах полимеризации, алкилирования и этерификации. Способ каталитического пиролиза углеводородной смеси C-C в низшие...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601864
Дата охранного документа: 10.11.2016
13.01.2017
№217.015.85c2

Катализатор для пиролиза углеводородной смеси с1-с4 и способ его получения

Изобретение относится к нефтехимии, касается катализатора для пиролиза углеводородной смеси С-С и способа его получения, который может быть использован для получения этилена и пропилена. Катализатор включает хромсодержащий компонент, нанесенный на поверхность полых микросфер алюмосиликатного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002603134
Дата охранного документа: 20.11.2016
25.08.2017
№217.015.ab18

Способ получения гибридного материала на основе многостенных углеродных нанотрубок с покрытием карбида титана

Изобретение относится к технологии получения функциональных наноматериалов, а именно к химической технологии получения нанокомпозиционных гибридных материалов, состоящих из многостенных углеродных нанотрубок и осажденных на них с использованием метода химического осаждения из паровой фазы...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002612247
Дата охранного документа: 03.03.2017
25.08.2017
№217.015.c4aa

Способ получения гибридного материала на основе многостенных углеродных нанотрубок, декорированных дистанционно разделенными кристаллическими наночастицами алюминия

Изобретение относится к материаловедению и может быть использовано при изготовлении наполнителей для порошковой металлургии, красок, пластмасс, металлокерамики, клеевых и композиционных материалов. Многостенные углеродные нанотрубки (МУНТ) в виде порошка 14 размещают в реакторе 12, создают в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618278
Дата охранного документа: 03.05.2017
19.01.2018
№218.016.0892

Полимерный трехмерный объект сложной формы и способ изготовления полимерного трехмерного объекта сложной формы

Изобретение относится к области изготовления физических носителей формы по геометрической или математической модели, в частности к изготовлению трехмерных объектов сложной формы из отверждающейся под воздействием излучения жидкой среды путем последовательного наращивания слоев. Также может быть...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002631794
Дата охранного документа: 26.09.2017
17.06.2023
№223.018.7da1

Пористый полимерный трехмерный объект сложной формы и способ изготовления пористого полимерного трехмерного объекта сложной формы

Изобретение относится к области изготовления физических носителей формы по геометрической или математической модели, а именно к полимерному трехмерному объекту сложной формы, составленному из параллельных слоев высотой h, последовательно сформированных из жидкой фотополимеризующейся композиции,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002783378
Дата охранного документа: 11.11.2022
17.06.2023
№223.018.8164

Способ получения полимерного материала для замещения дефектов кости

Изобретение относится к медицине, биотехнологии, регенеративной медицине, тканевой инженерии, в частности к способу получения полимерного материала для замещения дефектов кости и формирования костнозамещающих имплантатов. Способ включает фотополимеризацию композиции, содержащей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002758863
Дата охранного документа: 02.11.2021
Showing 1-10 of 15 items.
10.01.2013
№216.012.1a29

Применение фотополимеризующейся композиции для коннектирования световодов, способ коннектирования световодов и устройство для осуществления способа

Изобретение относится к применению фотополимеризующейся композиции, включающей полимеризационно-способный компонент, например мономер или смесь мономеров, орто-хиноны и восстанавливающий агент, например амин, при следующем соотношении компонентов, вес.ч.: полимеризационно-способный компонент -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472189
Дата охранного документа: 10.01.2013
20.08.2014
№216.012.eac4

Фотополимеризующаяся композиция для одностадийного получения полимерного нанопористого материала с гидрофобной поверхностью пор, нанопористый полимерный материал с селективными сорбирующими свойствами, способ его получения, способ одностадийного формирования на его основе водоотделяющих фильтрующих элементов и способ очистки органических жидкостей от воды

Заявляемое изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, нанотехнологий и фотохимии и касается разработки фотополимеризующейся композиции для получения полимерного материала, обладающего трехмерной нанопористой структурой с гидрофобной поверхностью пор, одностадийного способа его...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002525908
Дата охранного документа: 20.08.2014
10.01.2015
№216.013.1920

Фотополимеризующаяся композиция для одностадийного получения полимерного нанопористого материала с гидрофобной поверхностью пор, нанопористый полимерный материал с селективными сорбирующими свойствами, способ его получения, способ одностадийного формирования на его основе водоотделяющих фильтрующих элементов и способ очистки органических жидкостей от воды

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, нанотехнологий и фотохимии и касается разработки фотоотверждаемой композиции для получения полимерного материала, обладающего трехмерной нанопористой структурой с гидрофобной поверхностью пор, одностадийного способа его получения и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002537860
Дата охранного документа: 10.01.2015
26.08.2017
№217.015.dc8b

Способ лечения больных при острой стадии диабетической нейростеоартропатии по типу "стопа шарко"

Изобретение относится к медицине, а именно травматологии и ортопедии, и касается лечения острой стадии диабетической нейроостеоартропатии («стопа Шарко»). Для этого осуществляют разгрузку пораженной конечности и инъекцию обогащенной тромбоцитами аутоплазмы от 2,0 до 4,0 мл в область...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002624230
Дата охранного документа: 03.07.2017
19.01.2018
№218.016.0892

Полимерный трехмерный объект сложной формы и способ изготовления полимерного трехмерного объекта сложной формы

Изобретение относится к области изготовления физических носителей формы по геометрической или математической модели, в частности к изготовлению трехмерных объектов сложной формы из отверждающейся под воздействием излучения жидкой среды путем последовательного наращивания слоев. Также может быть...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002631794
Дата охранного документа: 26.09.2017
19.01.2018
№218.016.09cc

Способ получения коллоидного раствора узкодисперсного по молекулярной массе амфифильного блоксополимера бутилакрилата и акриловой кислоты с узким распределением мицелл по размеру

Изобретение относится к способу получения коллоидных растворов блоксополимера бутилакрилата и акриловой кислоты. Способ получения коллоидных растворов узкодисперсного по молекулярной массе амфифильного блоксополимера бутилакрилата и акриловой кислоты с узким распределением мицелл по размеру...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002632004
Дата охранного документа: 02.10.2017
18.05.2018
№218.016.516e

Способ создания биорезорбируемого клеточного скаффолда на основе фибрина плазмы крови

Изобретение относится к области клеточной биологии и биотехнологии, конкретно к созданию биорезорбируемого клеточного скаффолда на основе фибрина плазмы крови. Способ включает смешивание плазмы крови или криопреципитата плазмы крови с раствором коллагена I типа, имеющим рН 7,4, введение...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002653434
Дата охранного документа: 08.05.2018
18.05.2018
№218.016.51e4

Способ микроскопической оценки цитотоксичности компонентов материалов скаффолдов

Изобретение относится к медицине, биологии, биотехнологии, фармакологии и может быть использовано для оценки цитотоксичности компонентов, входящих в состав скаффолдов, используемых в тканевой инженерии, а именно при пластике или замещении дефектов тканей организма с обеспечением стимуляции их...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002653476
Дата охранного документа: 08.05.2018
29.08.2018
№218.016.812d

Способ доставки биологически активных веществ в скаффолд

Изобретение относится к медицине, в частности к способу доставки биологически активных веществ в скаффолд. В качестве контейнеров используют тени эритроцитов, получаемых путем гипоосмотического шока нативных эритроцитов и инкубации их в растворе биологически активных веществ с последующим...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002665155
Дата охранного документа: 28.08.2018
20.12.2018
№218.016.a92c

Способ количественного анализа клеточной составляющей скаффолда

Изобретение относится к медицине, биотехнологии, регенеративной медицине, в частности к способам количественной оценки клеток в составе клеточно-инженерной конструкции (скаффолда). Раскрыт способ количественного анализа клеточной составляющей скаффолда, который включает окрашивание образцов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002675376
Дата охранного документа: 19.12.2018
+ добавить свой РИД