Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ОПТИМИЗАЦИИ ГИСТОГЕНЕЗА ОРГАНОВ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА У ЭМБРИОНОВ КУР МЯСНОГО НАПРАВЛЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕРЕД ИНКУБАЦИЕЙ

Данное изобретение относится к области сельского хозяйства и, а именно, к птицеводству (предынкубационное применение раствора, в состав которого входят коламин, серии, янтарная кислота и пиридоксина гидрохлорид).

Известны обработки инкубационных яиц растворами коламина, янтарной кислоты и серина с целью стимуляции эмбрионального развития кур яичных кроссов (1). Янтарная кислота и ее соли обладают адаптогенной способностью и оказывают антигипоксическое, антистрессовое, антиоксидантное и нейротропное действие, нормализуют энергетический и пластический обмен и общее физиологическое состояние организма (2). Коламин ингибирует окисление жиров, витамина А и других соединений, имеющих ненасыщенные углеродные связи, принимает активное участие в окислительно-восстановительных процессах в организме животных, улучшает фосфорный и белковый обмен и, следовательно, является стимулятором роста (3). В свою очередь, серии - гликогенная аминокислота, входящая в состав фосфолипидов мембран клеток и активные центры многих ферментов (4). Витамин В6 (пиридоксина гидрохлорид) - водорастворимый витамин, активной формой которого являются фосфорилированные производные - пиридоксальфосфат и пиридоксаминофосфат. Пиридоксальфосфат входит в состав многих ферментов, которые принимают различное участие в процессах метаболизма. Так, например, он является коферментом декарбоксилаз, трансаминаз, кенурениназы, триптофансинтазы, цистеиноназы. При участии витамина В6 протекает реакция образования δ-аминолевулиновой кислоты (синтеза гема) и синтез арахидоновой кислоты, также он способствует наиболее эффективному использованию глюкозы. В медицине и ветеринарии используют витамин В6 в виде пиридоксина гидрохлорида. В процессе метаболизма он всасывается в тонком отделе кишечника и превращается в активные формы. Продукты его метаболизма выделяются почками и не являются токсичными (5). Необходимо отметить, что пиридоксин оказывает большое влияние на обмен аминокислот, содержащих серу, принимает участие в пересульфировании, т.е. переноса сульфгидрильных групп с одного соединения на другое. Так, ферменты, в состав которых входит фосфопиридоксаль, способствуют переносу серы с метионина на серии и образованию цистеина. Вместе с серином он участвует в синтезе сфинголипидов. Также принимает участие в образовании биогенных аминов, таких, например, как коламин. Пиридоксин способен взаимодействовать с янтарной кислотой, с образованием оксипиридинов, спектр антиоксидантного и антигипоксантного действия которых достаточно широк (5). Таким образом, дополнение ранее изученной композиции, состоящей из коламина, янтарной кислоты и серина витамином В6 расширяет спектр антиоксидантного, гематопротекторного, обменостимулирующего действия ранее предложенных БАВ, обуславливая предпосылки для более качественного становления тканей, органов, тканей, целого организма. Важность дополнения пиридоксина в композицию несомненна, поскольку ранее учеными доказано, что он обладает выраженным гастропротекторным действием, а также снижает воспалительные процессы в ЖКТ (5). Совместное применение данных веществ не зарегистрировано. Использование витамина В6 для стимуляции эмбрионального развития также не изучено. Стоит отметить, что данную композицию естественных метаболитов никогда не применяли для стимуляции эмбриогенеза птиц, а также не использовали на биологически полноценном яйце высокопродуктивных кроссов. Вместе с тем, необходимо отметить положительное влияние на микроморфологическую структуру органов желудочно-кишечного тракта при использовании коламина, янтарной кислоты и серина (6).

Данный метод, взятый нами в качестве прототипа, заключаются в том, что коламин, янтарную кислоту и серии использовали для обработки яиц кур яичного кросса. Вывод цыплят был выше на 9,38% и составил 84,38% (против 75% в контроле). Кроме того, заявленные данные прототипа свидетельствуют, что высокая разница между опытом и контролем была обусловлена не только стимулирующим действием композиции БАВ (коламина, янтарной кислоты и серина), но и низким качеством инкубационного яйца, поскольку вывод в контроле был ниже норматива для данного кросса на 7% (1) Указанное явилось еще одним весомым аргументом для разработки композиции БАВ, положительно влияющей на эмбриогенез кур в условиях использования при инкубации биологически полноценного яйца.

Цель изобретения - оптимизация гистогенеза мышечного и железистого желудков, стимуляция эмбриогенеза мясных кур, увеличение вывода кондиционных цыплят выше нормативов для данного кросса путем предынкубационной обработки яиц перед закладкой на инкубацию водным раствором пиридоксина гидрохлорида, серина, янтарной кислоты и коламина.

Способ осуществляется следующим образом.

На поверхность скорлупы за 3-4 часа до инкубации из пульверизатора наносят водный раствор препаратов - коламина, янтарной кислоты, серина и пиридоксина гидрохлорида в концентрациях: 0,1% 0,1%, 0,2%, 2,5%, соответственно, Предварительно препараты растворяют и смешивают в дистиллированной воде при 18-22°С.

Пример 1. Яйца кур кросса «Росс 308» получали от одного родительского стада, сортировали по 324 штуки в каждую партию при соблюдении аналогичности массы, времени снесения и сроков хранения. На поверхность скорлупы из пульверизатора наносили раствор препаратов по вышеуказанной схеме. В качестве контроля отбирали яйца этой же партии по принципу аналогов, которые обрабатывали по технологии, принятой в хозяйстве. Полученные данные представлены в таблице 1.

Из таблицы следует, что вывод в опытной партии превышает контроль на 2,47%, а выводимость на 2,23%. Указанное обусловлено снижением большинства отходов инкубации, в частности таких как: «ложный неоплод» в 2 раза, «уроды» на 0,31%, а «слабые» в 1,5 раза. По данным Тагирова М.Т. (2012) наиболее высокий риск гипоксии у эмбрионов кур наблюдается в 1-7 и в 19-21 сутки инкубации, в связи с отсутствием сформированного хориоаллантоиса вначале и его атрофии в конце инкубации. Именно благодаря компонентам композиции БАВ, являющимися антигопоксантами и антиоксидантами удалось снизить количество ложного неоплода, уродов и слабых, попадающих под вышеуказанные периоды. Витамин В6 по данным Логиновой Н.Ю. (2017) также препятствует развитию гипоксии мышечных клеток (5, 6) В свою очередь, коламин и серии являются структурными компонентами фосфолипидов, непременно повреждающихся в условиях гипоксии. Необходимо отметить, что по данным Тагирова М.Т. (2009) иФархутдинова P.P. (2006) гипоксия во многом обусловлена аномальной интенсивностью свободно-радикальных реакций в клетках вследствии истощения запасов антиоксидантов, а также нарушении обменных процессов и увеличении потребности тканей в кислороде под влиянием внутренних и внешних факторов. Тем временем, представленные вещества, обладая антиоксидантыми свойствами, препятствуют чрезмерной интенсификации заявленных процессов, а вместе с тем липопероксидации, снижая вероятность деструкции и создавая предпосылки для более полноценного становления мембранных структур клеток (7, 13).

Следует отметить, что данная птицефабрика оснащена современным оборудованием для инкубации, поддерживающим максимально приближенные к физиологичным условиям процессы инкубации, что является важным фактором снижения воздействий технологических стрессов на организм эмбрионов кур, обуславливая условия для получения более высокого вывода цыплят (8). Необходимо отметить, что нормативный вывод для данного кросса согласно паспорту стада составляет 83,1%, однако даже в контроле он 89,2%, что свидетельствует также об изначально высококачественном биологически полноценном яйце, используемом для инкубации, соответствии технологий производства стандартам, хорошей селекционной работе. Несмотря на этот факт, применение указанной композиции позволило превзойти высокий технологический результат, получаемый на птицефабрике при минимальных затратах труда и средств.

Пример 2. У полученных цыплят был определен температурный статус с целью прогнозирования их дальнейшей жизнеспособности (таблица 2).

Как видно из таблицы, у цыплят опытной группы температура была достоверно выше на 0,7-1,3°С (р<0,05, р<0,01) по сравнению с контролем, что по данным Агеечкина А.П. (2010) свидетельствует о высокой биологической полноценности молодняка суточного возраста. Оптимизация становления и реализации процессов терморегуляции, очевидно, связана с сохранением и, вероятно, интенсификацией процессов энергосинтеза, что обусловлено синергическим многоплановым, в том числе антиоксидантным действием композиции изучаемых БАВ (8). Последнее нашло свое подтверждение при исследовании показателей, представленных в таблице 3.

Анализ данных выше приведенной таблицы указывает на высокую эффективность антиоксидантного действия изучаемой композиции БАВ. Установлено, что интенсивность перекисного окисления в опытной группе значительно ниже, чем в контроле. Так, уровень ОШ достоверно снизился в 2,5 раза (р<0,05), а количество вторичного продукта перекисного окисления липидов в виде малонового диальдигида (МДА) снизилось в 1,3 раза (р<0,05), соответственно. Учитывая тот факт, что выемка молодняка из инкубатора и распределение по лоткам является для них стрессовым фактором, становится, понятной необходимость увеличения в опытной группе активности пероксидазы на 17,65%, СОД в 1,6 раза (р<0,01). Указанное также позволяет предположить, что заявленные БАВ обладают не только собственным антиоксидантым действием, но и стимулирующим другие составляющие защитной системы.

Работы Тагирова М.Т. (2009) и Фархутдинова P.P. (2006) свидетельствуют, что интенсивность свободно-радикальных реакций и, как следствие липопероксидации оказывают весомое влияние на полноценность становления и реализацию функций различных тканей и органов. Исследования ученых свидетельствуют о высокой значимости для повышения качества развития особи и ее продуктивности в дальнейшем -качества становления органов желудочно-кишечного тракта. По данным Цивенко А.И. (2006) любое негативное воздействие на желудок сопровождается активизацией свободно-радикальных процессов с последующей деструкцией, прежде всего, мембран органелл, в свою очередь А.В. Ануфриева (2012) с соавторами считает, что дисбаланс про и антиоксидантов является универсальным базовым механизмом патогенеза заболеваний пищеварительного тракта (14,15).

Пример 3. У цыплят, выведенных из обработанных яиц, в суточном возрасте были взяты внутренние органы для проведения гистологического исследования.

Снижение аномальной интенсивности свободно-радикальных реакций и, как следствие липопероксидации в большей степени позитивно повлияло на гистоархитектонику мышечного и железистого желудков (таблица 4).

Так установлено, что они лучше развиты у представителей опытной группы, на что указывает преимущество ряда морфометрических параметров заявленных органов, в частности зафиксирована тенденция к увеличению толщины слизистой оболочки мышечного желудка на 16,6%, а также его кутикулы достоверно в 1,4 раза, железистого - в 1,2 раза относительно контроля. Исследования Омельченко О.Е. (2014), указывают на тот факт, что толщина слизистого слоя мышечного желудка и железистого слоя долек железистого желудка имеет обратную корреляцию с интенсивностью свободно-радикальных и липопероксиданых процессов (9), что нашло свое подтверждение и в наших исследованиях.

Изучение гистологических характеристик желудков у цыплят в суточном возрасте является важным маркером их будущих возможностей адаптации в постэмбриогенезе (10). Необходимо отметить, что более интенсивное формирование слизистой желудков птицы по данным Кривовой Н.А. может свидетельствовать о преимуществе барьерной функции (против инфекционных агентов), что обусловит более высокую жизнеспособность особи и качество ее развития в дальнейшем (16). В свою очередь увеличение толщины слизистой железистого желудка, очевидно, будет способствовать лучшему перевариванию кормов, состоятельности интрамуральных регуляторных процессов и других функций пищеварительной системы в целом, а значит, более высокой мясной продуктивности (10-12).

Литература:

1. Патент 2486752 РФ, МПК А01K 45/00 Способ стимуляции эмбриогенеза кур яичного направления продуктивности и профилактики физиологического стрессового воздействия Т.О. Азарнова, И.С. Ярцева, М.С. Найденский, С.Ю. Зайцев, Л.Ю. Азарнова, И.А. Ярцева; заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина. - №2011144760/13; заявл. 07.11.2011; опубл. 10.07.2013, Бюл. №11. - 7 с.

2. Евглевский, А.А. Биологическая роль и метаболическая активность янтарной кислоты / А.А. Евглевский, Г.Ф. Рыжкова, Е.П. Евглевская, Н.В. Ванина, И.И. Михайлова, А.В. Денисова, Н.Ф Ерыженская // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. - 2013. - №9. - С. 67-69.

3. Шипунова, Н.Н. Влияние моноэтаноламина на основные субстраты гликолиза животных / Н.Н. Шипунова, Н.А. Лушников // Главный зоотехник. - 2014. - №5. - С. 56-59.

4. Гараева, С.Н. Аминокислоты в живом организме / С.Н. Гараева, Г.В. Редкозубова, Г.В. Постолати. - Издательство Академии Наук Молдовы, 2009. - 552 с.

5. Логинова, Н.Ю. Витамин В6: Общие аспекты метаболизма / Н.Ю. Логинова // В сборнике: Фундаментальные и прикладные научные исследования: актуальные вопросы, достижения и инновации сборник статей победителей V Международной научно-практической конференции: в 4 частях. - 2017. - С. 226-229.

6. Азарнова, Т.О. Некоторые аспекты трансовариального питания эмбриона и стимуляции развития их пищеварительного тракта / Т.О. Азарнова, И.С.Ярцева, С.Ю. Зайцев, М.С. Найденский, А.А. Антипов //Международный вестник ветеринарии. - №4. - СПб. - 2012. - С. 54-57.

7. Тагиров, М.Т. Питание и основные метаболические пути в развивающемся зародыше птицы / М.Т. Тагиров, О.В. Терещенко // Вестник Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина. Серия: биология. Выпуск 10. - №878. - 2009. - С. 48-59.

8. Агеечкин, А.П. Промышленное птицеводство / А.П. Агеечкин, Ф.Ф. Алексеев, А.В. Аралов и др. Под ред. В.И. Фисинина. - Сергиев Посад: ГНУ ВНИТИП Россельхозакадемии, 2010. - 599 с.

9. Омельченко, О.Е. Патогенетичні механізми розвитку стресорних виразок шлунка залежно від типу реагування організму / О.Е. Омельченко // Вестник проблем биологии и медицины. - 2014. - Т. 2. - №4 (114). - С. 161-169.

10. Ваххаб, С.А. Сравнительная оценка гистогенеза желудка цыплят кроссов ROSS-308 и Хайсекс Браун / С.А. Ваххаб, О.С.Бушукина // Аграрный научный журнал. - №4. - 2017. - С. 11-15.

11. Налетова Л. А. Анатомо-гистологическая характеристика железистого желудка кур и гусей /Л.А. Налетова // Вестник Бурятского государственного университета. Биология. География. - №4. - 2013. - С. 186-188.

12. Налетова Л.А. Макро и микроморфологические особенности мускульного желудка кур и гусей /Л.А. Налетова // Вестник Бурятского государственного университета. Биология. География. - №4. - 2010. - С. 186-191.

13. Фархутдинов, P.P. Свободнорадикальное окисление: мифы и реальность (избранные лекции) / P.P. Фархутдинов // Медицинский вестник Башкортостана. - 2006. - С. 146-152.

14. Цивенко А.И. Экспериментальное изучение влияния выбора метода физической диссекции стенки желудка на характер перекисных процессов /А.И. Цивенко // Вестник Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина. Серия «Медицина». - 2006.- С. 1-5.

15. Ануфриева А.В. Коррекция свободнорадикальных нарушений при эрозивном гастродуодените /А.В. Ануфриева, О.А. Лебедько, Г.П. Березина, В.К. Козлов // Здоровье. Медицинская экология. Наука. - 2014. - С. 13-15.

16. Кривова Н.А. Состояние слизистой оболочки желудка, про- и антиоксидантной активности и биохимических показателей крови у крыс после скармливания нано- или микрочастиц диоксида титана / Н.А. Кривова, О.Б. Заева, М.Ю. Ходанович, О.А. Карелина, Е.В. Гуль, А.Е. Зеленская // Вестник Томского государственного университета. Биология. - 2011. - №2 (14). - С. 81-95.