Результат интеллектуальной деятельности: Способ профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.

Известен способ лечения нодулярного дерматита (заразного узелкового дерматита) у крупного рогатого скота с помощью внутривенного введения больным животным 5%-ного раствора гидрокарбоната натрия из расчета 1 мл на 1 кг живого веса животного трехкратно с интервалом в 3 дня. Раствор применялся в качестве симптоматического лечения. Применение раствора гидрокарбоната натрия позволило снизить в сыворотке крови на 106,3 мг% содержание креатина, увеличить содержание каротина на 0,91 мг%, повысить щелочной резерв до 48,91 об. % СО₂.

Достоинством данного способа лечения является его низкая стоимость и отсутствие токсических свойств у используемого раствора, недостатком - большой объем вводимого раствора.

Вацаев, Ш.В., Черных, О.Ю., Лысенко, А.А., Хахов, Л.А., Бурменская, Г.А., Козлов, Ю.В., Кощаев, А.Г. Коррекция гомеостаза организма крупного рогатого скота при нодулярном дерматите // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - №138. - 2018. - С. 149-159.

Известен способ профилактики и лечения нодулярного дерматита с использованием следующих мероприятий: обработка кожного покрова животных, на котором были выявлены нодулы, препаратом АСД (фракция 3); инъекции всем животным внутримышечно «Бициллин-5» в дозе 10000 ЕД/кг массы тела; витаминизация всех животным препаратом «Тривитамин А, Д, Е». Мероприятия также включали в себя обработку животных инсектицидами и репелентами, а также дезинфекцию помещений. После снятия карантина всех животных иммунизировали вакциной против оспы овец.

Достоинством данного способа лечения и профилактики нодулярного дерматита является широкое превентивное воздействие на все звенья распространения вируса, повышение резистентности животных. Недостатком является использование антибиотика «Бициллин-5», который может быть обнаружен в готовой продукции - мясе и молоке.

Кривонос, Р.А., Джаилиди, Г.А., Мищенко, А.В., Мищенко, В.А., Черных, О.Ю., Шевкопляс, В.К, Дресвянникова, С.Г., Коломиец, Д.В., Тихонов, С.В. Проблема профилактики и ликвидации очагов нодулярного дерматита крупного рогатого скота //Ветеринария сегодня. - №1(20). - 2017. - С. 38-44.

Известен способ лечения нодулярного дерматита крупного рогатого скота с использованием препарата Биферон-Б. При обнаружении первых признаков заболеваний его использовали согласно инструкции подкожно или внутримышечно в количестве 10 см³ на животное. У животных в начальной стадии заболевания наблюдалось улучшение общего состояния на вторые сутки и к четвертым суткам исчезали отдельные клинические признаки. В качестве антибиотикотерапии животным назначали Нитокс 200 в дозе 1 мл на 10 кг живой массы в течение 5 дней с интервалом 3 дня. Вскрывшиеся бугорки обрабатывали дезинфицирующими средствами в сочетании с репеллентами.

Достоинством данного способа является быстрая активизация защитных сил организма за счет использования препарата Биферон-Б, содержащего альфа- и гамма-интерфероны. Однако его использование достаточно дорого и требует длительного периода применения. Недостатком также является использование антибиотика окситетрациклина, содержащегося в препарате Нитокс 200. Антибиотик выводится с молоком и накапливается в мясе, что делает продукты животноводства непригодными к применению.

Захаркина, Н.И., Полковниченко, А.П., Воробьев, Д.В., Воробьев, В.И., Бондарь, А.Р. Особенности течения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота и разработка схемы лечебно-профилактических мер в условиях Астраханской области//Известия ОГАУ. - 2017. - №2 (64). - С. 107-109.

Известен способ профилактики нодулярного дерматита при помощи использования вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Вакцина вызывает формирование иммунного ответа против заразного узелкового дерматита крупного рогатого скота не менее чем у 70% привитого поголовья, через 21 сутки после однократного применения в одной прививной дозе (не менее 4 lg ТЦД₅₀/см³ вируса оспы овец штамм «ВНИИЗЖ») продолжительностью не менее 12 месяцев.

При плановой вакцинации для профилактики прививают животных с 3-месячного возраста, телят от не вакцинированных коров возможно прививать с 7 дневного возраста. Ревакцинацию животных проводят каждые 12 месяцев.

В неблагополучном пункте и в угрожаемой зоне вакцинируют животных всех возрастных групп не зависимо от сроков предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Молодняк ревакцинируют через 6 месяцев. Взрослых животных ревакцинируют через 12 месяцев. Вакцину вводят подкожно, с соблюдением правил антисептики, в дозе 1 см³.

Инструкция по ветеринарному применению вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Номер регистрационного удостоверения 12-1-10.17-3883№ПВР-1-1.9/00012.

Достоинством данного способа профилактики нодулярного дерматита (заразного узелкового дерматита) является отсутствие реактогенности у вакцины и осложнений после вакцинации в виде сыпей, снижения продуктивности и рецидивов заболевания.

Данный способ, наиболее близкий по технической сущности и выбранный за прототип, обладает следующим недостатком: вакцина не обладает лечебными свойствами, что делает невозможным применение ее в очаге инфекции во время массового заболевания животных нодулярным дерматитом.

Целью изобретения является способ профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота, позволяющий оказывать иммуностимулирующее действие вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак» как во время профилактики заболевания, так и для лечения заболевших животных. Поставленная цель достигается тем, что для профилактики и лечения крупного рогатого скота при нодулярном дерматите больным и здоровым животным до 12 месяцев одновременно с вакциной применяют трансфер-фактор в дозе 1,4-1,6 мл на голову подкожно или внутримышечно, для животных старше 12 месяцев объем трансфер-фактора составляет 5,9-6,1 мл на голову подкожно или внутримышечно одновременно с вакциной.

Трансфер-фактор получали по методике, предложенной Г. Фримелем.

Кровь отбирают в стерильных условиях и разделяют на порции по 20 мл (на каждые 100 мл крови добавляют 500 ME гепарина). Кровь разливают в стерильные пробирки (25×155 мм), добавляют 2 мл раствора декстрана 250 (60 г/л) в 0,15 М NaCI или раствор инфуколла. Пробирки закрывают, несколько раз встряхивают и инкубируют при 37°С. Эритроциты осаждаются в течение 30-45 мин. Желтоватый или слегка красноватый слой надосадочной жидкости переносят при помощи пастеровской пипетки в конические центрифужные пробирки. Закрытые пробирки центрифугируют в течение 10 мин при 1500g. Плазму осторожно сливают. Осевшие лейкоциты образуют слой над осадкой эритроцитов.

Осадок состоит из 70% из лимфоцитов. Самая нижняя часть конуса пробирки заполнена эритроцитами. На слой лейкоцитов наслаивают 0,1 мл стерильного апирогенного 0,15 М раствора NaCI. Кончик пастеровской пипетки осторожно проводят сквозь слой раствора соли и осторожно отсасывают лейкоциты в виде суспензии в изотоническом растворе NaCI. Можно объединять полученные суспензии лейкоцитов. Для получения диализата необходимо полное разрушение лейкоцитов. Оно достигается 10-кратным замораживанием и оттаиванием суспензии. Пробирки с суспензией клеток замораживают смесью сухого льда с этанолом, а размораживают на водяной бане при 37°С. Процесс повторяют до тех пор, пока жидкость не станет вязкой. При полном разрушении лейкоцитов высвобождается ДНК, делающая раствор чрезвычайно вязким и затрудняющая его дальнейшую обработку. Для деполимеризации ДНК в раствор вносят несколько кристаллов ДНКазы и небольшое количество ионов Mg²⁺ (несколько кристаллов MgSO₄). Гидролиз протекает в течение 30 мин при 37°С.

Если ДНКазу, которая отличается чрезвычайной стабильностью, добавлять прямо к суспензии лейкоцитов, то деполимеризация ДНК происходит в процессе замораживания и оттаивания и не требует дополнительной инкубации. Для удаления высокомолекулярных компонентов проводят диализ. Обработанный ДНКазой экстракт лейкоцитов осторожно переносят в завязанный с одного конца диализный мешок, стараясь не испачкать экстрактом наружный слой мешка, после чего его завязывают, ополаскивают стерильным апирогенным изотоническим раствором NaCI и переносят мешок в стерильный сосуд с дистиллированной водой. На 0,1 мл экстракта используют 5 мл дистиллированной воды. Диализ проходит в течение 24 ч при 4°С.

Полученный диализат растворяли в стерильной физиологическом растворе, консервированном фенолом до 0,5%-ной концентрации.

Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля, Пер. с нем. А.П. Тарасова. - М.: Медицина, 1987. - С. 451-457.

Сопоставительный анализ заявляемого и используемого способов лечения и профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота позволяет выявить признаки, отличающие предлагаемое техническое решение от прототипа: для лечения и профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота дополнительно используется трансфер-фактор.

Из доступной нам литературы не известно способа профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота с использованием вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак» и трансфер-фактора.

Таким образом заявляемый способ лечения соответствует критериям «новизна» и «изобретательский уровень».

Пример выполнения 1:

В неблагополучном пункте стадо, состоящее из 40 голов крупного рогатого скота, разделили на две группы по 20 животных в каждой: контрольную и опытную. В каждой группе было обнаружено по 3 животных с признаками нодулярного дерматита. Всех животных привили вирусвакциной против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Вакцину применяли согласно наставлению. Коровам опытной группы дополнительно внутримышечно произвели инъекцию трансфер-фактора в объеме 6 мл на голову. Животным всех групп оказывали симптоматическое лечение препаратом «Бициллин-5» в дозе 10000 Ед/кг массы тела. В течении трех недель наблюдения за животными в контрольной группе число случаев заболевания животных составило 8, в опытной - 1 голова. В контрольной группе в результате осложнения были вынужденно забиты 4 головы. Забоя животных в опытной группе не осуществлялось. В опытной группе выздоровление ранее заболевших животных и вновь заболевших животных происходило на 5-6 сутки после вакцинации и применения трансфер-фактора. При этом прекращался рост и увеличение числа пузырьков, они исчезали без вскрытия. В контрольной группе выздоровление животных сопровождалось вскрытием пузырьков и нагноением раны.

Пример выполнения 2:

В неблагополучном пункте телят разделили на 2 группы по 30 голов в каждой - опытную и контрольную. Всех животных привили вирусвакциной против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Вакцину применяли согласно наставлению. Телятам опытной группы дополнительно провели инъекцию трансфер-фактора в дозе 1,5 мл на голову. При наблюдении за животными в опытной группе заболевания телят нодулярным дерматитом не наблюдалось. В контрольной группе заболело 4 теленка.

Таким образом, применение вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак» и трансфер-фактора позволяет профилактировать и лечить нодулярный дерматит у крупного рогатого скота.

Экономическая эффективность на 1 рубль затрат составляет 157 рублей.