Способ оценки эффективности лечения нумулярной микробной экземы

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки эффективности проводимой стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой.

Для клинической картины нумулярной микробной экземы характерно появление на коже туловища, верхних и нижних конечностей округлых гиперемированных и инфильтрированных бляшек с четкими границами, с чешуйками или чешуйко-корками на поверхности [Микробная экзема / Е.В. Файзуллин, В.Х. Фазылов, Г.М. Зинатуллина // Казанский медицинский журнал.- 2009.-№90(3).- С. 454-457].

Для нумулярной микробной экземы характерно тяжелое течение, распространенность патологического процесса на коже и частое рецидивирование [Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни / Ю.К. Скрипкин, А.А. Кубанова, В.Г. Акимова.- М: ГЭОТАР-медиа. 2012.-544 с].

В патогенезе нумулярной микробной экземы инициирующая роль отводится Т-лимфоцитам. Стафилококковые суперантигены, экзотоксины, энзимы резко усиливают иммунное воспаление в коже, приводя к накоплению пула Т-клеток памяти, тропных к дермальным антигенам (CD45Ro+) и тяжелым обострениям данного дерматоза. Этим клеткам принадлежит ведущая роль в аллергическом воспалении в виде гиперчувствительности замедленного типа. При поступлении в кожу происходит активация CD45Ro+ и продукция цитокинов, хемокинов и других медиаторов воспаления, которые воздействуют на иммунокомпетентные клетки, запуская каскад воспалительных реакций. Активация клеток Лангерганса, являющихся основными клетками, регулирующими иммунный ответ в коже, приводит к секреции интерлейкинов (ИЛ) -1α, -1β, -8, -6 и ФНО-альфа, которые, действуя аутокринным и/или паракринным путем, вызывают нарушения самоограничения воспалительных процессов в эпидермисе [Eczema and food allergy in an Italian pediatric cohort: no association with TLR-2 and TLR-4 polymorphisms / E. Galli, A.Ciucci, S. Cersosimo et al. // Int J Immunopathol Pharmacol.- 2010.- №23(2).- P. 671-675].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ прогноза течения и оценки эффективности лечения атопического дерматита, который заключается в проведении клинического и лабораторного обследования пациентов с верифицированным атопическим дерматитом с определением содержания в сыворотке крови белка -лактоферрина (ЛФ) в мкг/мл, альфа-1-антитрипсина (a1-AT) в г/л, альфа-2-макроглобулина (а2-МГ) в г/л, далее вычисляют коэффициент К по определенной формуле и при его значениях от 6 до 15 прогнозируют легкую степень тяжести заболевания, а при 15 и более -среднюю и тяжелую степень тяжести заболевания, через месяц после лечения проводят повторное обследование с вычислением коэффициента К и при его снижении на 30% и более от его исходного значения лечение считают эффективным, прогнозируют длительную ремиссию, а при снижении коэффициента К менее 30% от его исходного значения лечение считают малоэффективным, прогнозируют короткий период ремиссии и высокий риск рецидива [патент RU 2603463, 2016 г.]. Недостатками данного способа являются несвоевременность оценки эффективности лечения и трудоемкость.

Задачей изобретения стала разработка способа оценки эффективности проводимой терапии у больных нумулярной микробной экземой.

Техническим результатом при использовании изобретения является повышение точности и своевременности оценки, упрощение исследования.

Предлагаемый способ оценки эффективности проводимой стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой осуществляется следующим образом. На 15-ый день лечения выполняют забор 5 мл крови из периферической вены с дальнейшим получением из нее сыворотки. В сыворотке крови определяют концентрацию провоспалительного цитокина фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-альфа). При значении ФНО-альфа 80 пг/мл и выше эффективность лечения оценивают как низкую, а при 45 пг/мл и ниже - как высокую.

Метод определения основан на «сэндвич» - варианте твердофазного иммуноферментного анализа с применением моно - и поликлональных антител к ФНО - альфа. На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы инкубируют в лунках с иммобилизованными антителами. Имеющийся в образцах ФНО-альфа связывается с иммобилизованными антителами. Связавшийся ФНО-альфа взаимодействует при инкубации с коньюгатом №1 (антитела к ФНО -альфа человека с биотином). На третьей стадии связавшийся коньюгат №1 взаимодействует при инкубации с коньюгатом №2 (стрептавидин с пероксидазой хрена). Количество связавшегося коньюгата №2 определяют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы хрена -перекиси водорода и хромогена - тетраметилбензидина. Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна концентрации содержащегося в образце ФНО - альфа.

Авторами в научно-медицинской и патентной литературе не было обнаружено сведений об использовании определения концентрации ФНО-альфа в сыворотке крови на 15-ый день лечения для ранней оценки эффективности стандартной терапии, проводимой больным нумулярной микробной экземой. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «новизна».

Предлагаемым способом была проведена оценка эффективности терапии у 104 больных с нумулярной микробной экземой. Ретроспективный анализ количественной концентрации ФНО-альфа в сыворотке крови больных нумулярной микробной экземой показал достоверную неэффективность терапии при значениях ФНО-альфа 80 пг/мл и выше и эффективность терапии при значениях ФНО-альфа 45пг/мл и ниже на 15-ый день лечения (таблица).

Исследованиями авторов была впервые доказана возможность ранней оценки эффективности терапии нумулярной микробной экземы предлагаемым способом. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной К., поступил на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст -39 лет. Болен в течение 6-ти лет. Обострение наблюдается в течение 2-х недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получал. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 4*4 см с четкими границами, гиперемированные, умеренно инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения индекс оценки тяжести микробной экземы (ИОТМЭ) составлял 21 балл, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения количественная концентрация ФНО-альфа составляла 69,1 пг/мл. Больному было назначено стандартное лечение:

1. раствор кальция глюконат 10%- 10.0 в/м №10 ч/д;

2. раствор натрия тиосульфат 30%-10.0 в/в кап. на натрия хлориде 0.9%-200.0№10 ч/д;

3. таблетки лоратадин 0.01 на ночь №20 дней;

4. капсулы доксициклин 100 мг I день 2 капс. одномоментно, II-Х день по 1 капс. *2 раза в день (в соответствии с результатами посева на чувствительность к антибиотикам);

5. капсулы ретинола ацетат 33000 ME по 2 капс, на ночь №20 дней;

6. наружно: мазь гидрокортизона 17-бутират* 2 раза в день №20 дней, мазь гентамициновая 0,1%*2 раза в день №10 дней (в соответствии с результатами посева на чувствительность к антибиотикам).

В процессе лечения отмечалось обратное развитие воспалительных явлений в очагах. На 15-ый день терапии ИОТМЭ составил 15 баллов, что соответствовало переходу средне-тяжелого течения дерматоза в легкое. На 15-ый день проводимой терапии количественное содержание ФНО-альфа составляло 34,5 пг/мл. К моменту выписки из стационара (20-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация и мокнутие разрешились, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данного больного на 15-ый день лечения значение концентрации ФНО-альфа было ниже 45пг/мл, что соответствовало клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы.

Пример 2. Больная Ж., поступила на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст - 40 лет. Считает себя больной в течение 4-х лет. Обострение наблюдается в течение 2-х недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получала. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 4*4 см с четкими границами, гиперемированные, инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения ИОТМЭ составлял 22 балла, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения количественное содержание ФНО-альфа в сыворотке крови составляло 70,2 пг/мл Больной было назначено стандартное лечение:

1. раствор кальция глюконат 10%- 10.0 в/м №10 ч/д;

2. раствор натрия тиосульфат 30%-10.0 в/в кап. на натрия хлориде 0.9%-200.0№10 ч/д;

3. таблетки лоратадин 0.01 на ночь №20 дней;

4. капсулы доксициклин 100 мг I день 2капс. одномоментно, II-Х день по 1 капс. *2 раза в день (в соответствии с результатами посева на чувствительность к антибиотикам);

5. капсулы ретинола ацетат 33000 ME по 2 капе, на ночь №20 дней;

6. наружно: мазь гидрокортизона 17-бутират* 2 раза в день №20 дней, мазь гентамициновая 0,1%*2 раза в день №10 дней (в соответствии с результатами посева на чувствительность к антибиотикам).

В процессе лечения воспалительные явления в очагах продолжали прогрессировать: гиперемия и серозные колодцы на поверхности очагов сохранялись, инфильтрация усиливалась. На 15-ый день терапии ИОТМЭ составил 30 баллов, что соответствовало переходу средне-тяжелого течения заболевания в тяжелое течение. На 15-ый день проводимой терапии количественное содержание ФНО-альфа составляло 90,2пг/мл. К стандартному лечению дополнительно был назначен иммуномодулятор. К моменту выписки из стационара (30-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация значительно уменьшились, мокнутие разрешилось, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данной больной на 15-ый день лечения значение концентрации ФНО-альфа было выше 80 пг/мл, что соответствовало низкой клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы и привело к необходимости коррекции схемы лечения, а также пролонгированию курса стационарного лечения.

Как видно из приведенных примеров, результаты определения количественного содержания ФНО-альфа в сыворотке крови больных нумулярной микробной экземой на 15-ый день лечения позволяют оценивать эффективность проводимой стандартной терапии.

Предлагаемый способ легко воспроизводим в условиях лаборатории стационара. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «промышленная применимость».

*Различия с показателями на этапе «до лечения» достоверно (р<0,01)