×
19.08.2018
218.016.7d1a

АНТИМИКРОБНАЯ КОМБИНАЦИЯ В ОТНОШЕНИИ УСТОЙЧИВЫХ К КАРБАПЕНЕМАМ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ ВИДА KLEBSIELLA PNEUMONIAE, ПРОДУЦИРУЮЩИХ МЕТАЛЛО-β-ЛАКТАМАЗУ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической микробиологии, раскрывает антимикробную комбинацию сочетанного применения карбапенемов и бисфосфонатов в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных бактерий вида Klebsiella pneumoniae АТСС 70603, продуцирующих металло-β-лактамазу (МβЛ). Антимикробные комбинации характеризуются весовым соотношением компонентов, а именно комбинации имипенем/клодроновая кислота, меропенем/клодроновая кислота, имипенем/этидроновая кислота, меропенем/этидроновая кислота используются в соотношениях 1:1875, 1:15000, 1: 50000, 1: 50000 соответственно. Предложенное техническое решение позволяет моделировать получение штаммов грамотрицательных микроорганизмов с различным уровнем резистентности к карбапенемам и оценить эффективность ингибирования МβЛ и может быть использовано для преодоления устойчивости грамотрицательных бактерий вида Klebsiella pneumoniae, продуцирующих МβЛ, к карбапенемам. 5 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической микробиологии, и может быть использовано для преодоления устойчивости к карбапенемам у грамотрицательных бактерий вида Klebsiella pneumoniae, продуцирующих металло-β-лактамазу (MβЛ).

В настоящее время у пациентов, находящихся на стационарном лечении, увеличивается доля грамотрицательных аэробных бактерий как возбудителей инфекций [1]. Это Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp., Klebsiella spp., Stenotrophomonas maltophilia и др. Эти микроорганизмы, как правило, обладают низкой чувствительностью к различным классам антибиотиков, а также способностью приобретать резистентность в процессе лечения, что представляет существенные проблемы при проведении антибактериальной терапии, а именно, резко ограничивает арсенал применяемых для лечения больных антибактериальных препаратов, в том числе карбапенемов. Основным механизмом устойчивости к карбапенемам у грамотрицательных микроорганизмов является продукция металло-β-лактамаз.

Известна композиция и способы лечения, включающие цефтаролин [2], представляющий собой новый парентеральный цефалоспорин с широким спектром активности против клинически важных внебольничных и внутрибольничных грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Однако полученный авторами синергидный эффект применения композиции цефтаролина и антимикробных препаратов не описан в отношении резистентных грамотрицательных микроорганизмов, продуцирующих МβЛ.

Известна композиция [3], содержащая халконы в качестве усилителей антимикробных средств, действие которой направлено на предотвращение образования и разрушение сформированных микробных биопленок в полости рта. Синергидный эффект действия композиции халконов и антимикробных агентов авторы оценивали в средствах гигиены полости рта местного действия. Кроме того, авторы не оценивали данный эффект в отношении резистентных грамотрицательных микроорганизмов, продуцирующих МβЛ.

Известно изобретение [4] ингибиторов металло-β-лактамазы на основе малеиновой кислоты, которое демонстрирует эффект подавления МβЛ грамотрицательных бактерий и усиления действия бета-лактамных антибиотиков. В изобретении описаны способы синтеза различных производных малеиновой кислоты, показан их ингибирующий эффект в отношении МβЛ, а также восстановление действия бета-лактамных антибиотиков в отношении устойчивых к ним микроорганизмов. Однако, такие производные малеиновой кислоты и их сочетания с антимикробными агентами не применяются в практической медицине в настоящее время.

Известна лекарственная композиция в отношении Acinetobacter baumannii, наиболее близкая к заявляемому изобретению по достижению технического результата и выбранная в качестве прототипа [5]. Изобретение представляет лекарственную композицию в отношении A. baumannii и ее применение. Лекарственная комбинация состоит из меропенема и сульбактама с весовым соотношением меропенема к сульбактаму 1:2-4. Дизайн исследования воспроизведен методом «шахматной доски». Синергидный антибактериальный эффект комбинированного применения меропенема и сульбактама в отношении карбапенем-чувствительных и лекарственно-устойчивых штаммов A. baumannii определяли методом микроразведений в бульоне. Как показано в результатах исследования, вне зависимости от того, какие были протестированы штаммы, меропенем-лекарственно-устойчивые или меропенем-чувствительные, большинство из них показали синергидный или частично синергидный эффект к комбинированному применению меропенема и сульбактама, и количество штаммов, продемонстрировавших синергидный эффект, насчитывало 25%.

Недостатком такой композиции является использование авторами сульбактама как ингибитора бета-лактамаз только у A. baumannii, так как по данным литературы известно, что сульбактам является ингибитором сериновых бета-лактамаз, но не ингибирует металло-β-лактамазы. При этом авторы изобретения-прототипа тестировали штаммы A. baumannii, не продуцирующие металло-β-лактамазы.

Заявляемое изобретение свободно от указанного недостатка.

Указанный технический результат достигается тем, что клодроновая или этидроновая кислоты из группы бисфосфонатов ингибируют стандартный реактив - металло-β-лактамазу P. aeruginosa рекомбинантную, экспрессированную в Escherichia coli. Достигнутый результат позволяет выявить антимикробный эффект комбинации клодроновой/этидроновой кислот с карбапенемами(имипенемом/меропенемом) в отношении референс-штамма K. pneumoniae ATCC 70603, резистентного к карбапенемам в присутствии стандартного реактива МβЛ, инактивирующего эти антибиотики. Предложенное техническое решение позволяет моделировать получение штаммов грамотрицательных микроорганизмов с различным уровнем резистентности к карбапенемам и оценить эффективность ингибирования МβЛ.

Далее для достижения технического результата оценивают эффективность антимикробной комбинации карбапенемов (имипенема или меропенема) в сочетании с клодроновой/этидроновой кислотами методом «шахматной доски» [6]. В исследованиях используют микроразведения в бульоне в полистироловых 96-луночных планшетах.

В исследовании используют антибиотики имипенем и меропенем, разведенные стандартным титрованием в бульоне Мюллера-Хинтона [7] от 512 мкг/мл до 2 мкг/мл. Для данного исследования исходный концентрат клодроновой кислоты для приготовления раствора для внутривенного введения с содержанием 60 мг/мл разводят в среде Мюллера-Хинтона методом последовательных двукратных разведений. Этидроновую кислоту из исходного 20% концентрата разводят до 2% раствора в стерильной дистиллированной воде, и далее готовят двукратные разведения в среде Мюллера-Хинтона. В ячейки, содержащие по 95 мкл разведения антибиотика, вносят по 95 мкл разведения клодроновой или этидроновой кислоты, таким образом, объем смеси составляет 190 мкл.

Для получения инокулюма тест-штамма K. pneumoniae ATCC 70603 готовят исходную суспензию суточной культуры микроба по стандарту 0,5 McFarland, далее суспензию разводят в 31 раз в бульоне Мюллер-Хинтон, при этом полученная взвесь содержит 5×106 КОЕ/мл. Далее во все ячейки вносят по 10 мкл микробной взвеси. Таким образом, в каждой ячейке конечная микробная нагрузка соответствующего тест-штамма составляет 5×104 КОЕ в 200 мкл. Всегда присутствует контроль тест-культуры и контроль среды.

Значение минимальной подавляющей концентрации (МПК) тестируемого препарата оценивают в первой ячейке, содержимое которой прозрачное, где отсутствует видимый рост тест-штамма.

В таб. 1 представлены результаты инактивации антибиотика в присутствии стандартного реактива МβЛ. Показано, что фермент в ячейках 1-3 полностью инактивирует антибиотик в количестве от 1 мкг/мл до 32 мкг/мл, при этом в ячейках наблюдается рост тест-культуры K. pneumoniae АТСС 70603. Начиная с 4 ячейки, интенсивность инактивации фермента снижается и в 8-ой ячейке отмечается отсутствие роста тест-культуры до уровня референтного значения чувствительности - 2 мкг/мл (EUCAST 2015 г. [8]).

В табл. 2 представлены результаты ингибирования МβЛ клодроновой кислотой в комбинации с имипенемом. В ячейках без клодроновой кислоты отмечается рост тест-культуры K. pneumoniae АТСС 70603 за счет инактивации антибиотика МβЛ. Эффект ингибитора отмечен со 2-й ячейки, где он содержится в количестве 469 мкг. Отмечен эффект инактивации МβЛ и отсутствие роста тест-культуры в ячейке 5 с количеством антибиотика равным референтному значению чувствительности тест-штамма - 2 мкг/мл. Исходя из данных, представленных в таблице 2 ячейка 5, предложена антимикробная комбинация в отношении K. pneumoniae, которая содержит имипенем и ингибитор МβЛ клодроновую кислоту в соотношении 2:3750 (1:1875).

В табл. 3 представлены результаты ингибирования МβЛ этидроновой кислотой в комбинации с имипенемом. В ячейках без этидроновой кислоты отмечается рост тест-культуры K. pneumoniae АТСС 70603 за счет инактивации антибиотика МβЛ. Эффект ингибитора отмечен со 2-й ячейки, где он содержится в количестве 1563 мкг. Отмечен эффект инактивации МβЛ и отсутствие роста тест-культуры в ячейке 8 с количеством антибиотика, равным референтному значению чувствительности тест-штамма - 2 мкг/мл. Исходя из данных, представленных в таблице 3, ячейка 8, предложена антимикробная комбинация в отношении K. pneumoniae, которая содержит имипенем и ингибитор МβЛ этидроновую кислоту в соотношении 2:100000 (1:50000).

В табл. 4 представлены результаты ингибирования МβЛ этидроновой кислотой в комбинации с меропенемом. В ячейках без этидроновой кислоты отмечается рост тест-культуры K. pneumoniae АТСС 70603 за счет инактивации антибиотика МβЛ. Эффект ингибитора отмечен со 2-й ячейки, где он содержится в количестве 1563 мкг. Отмечен эффект инактивации МβЛ и отсутствие роста тест-культуры в ячейке 8 с количеством антибиотика, равным референтному значению чувствительности тест-штамма - 2 мкг/мл. Исходя из данных, представленных в таблице 4, ячейка 8, предложена антимикробная комбинация в отношении K. pneumoniae, которая содержит меропенем и ингибитор МβЛ этидроновую кислоту в соотношении 2:100000 (1:50000).

В табл. 5 представлены результаты ингибирования МβЛ клодроновой кислотой в комбинации с меропенемом. В ячейках без клодроновой кислоты отмечается рост тест-культуры K. pneumoniae АТСС 70603 за счет инактивации антибиотика МβЛ. Эффект ингибитора отмечен со 2-й ячейки, где он содержится в количестве 469 мкг. Отмечен эффект инактивации МβЛ и отсутствие роста тест-культуры в ячейке 8 с количеством антибиотика, равным референтному значению чувствительности тест-штамма - 2 мкг/мл. Исходя из данных, представленных в таблице 5, ячейка 8, предложена антимикробная комбинация в отношении K. pneumoniae, которая содержит меропенем и ингибитор МβЛ клодроновую кислоту в соотношении 2:30000 (1:15000).

Результаты ингибирования МβЛ клодроновой кислотой в комбинации с меропенемом в отношении тест-культуры K. pneumoniae ATCC 70603

Дозы бисфосфонатов, представленные в соотношениях с карбапенемами, составляют от 3 до 13% суточной дозы клодроновой кислоты и от 8 до 17% суточной дозы этидроновой кислоты.

Технико-экономическая эффективность заявленной антимикробной комбинации состоит в усилении действия антибиотика до уровня референтного значения чувствительности K. pneumoniae, продуцирующих МβЛ, вызывающих инфекционно-воспалительные заболевания у человека, что может улучшить терапевтический эффект проводимой антимикробной химиотерапии карбапенемами.

Использованные источники информации

1. Шевченко О.В., Эйдельштейн М.В., Степанова М.Н. Металло-β-лактамазы: значение и методы выявления у грамотрицательных неферментирующих бактерий. Клин, микробиол. антимикроб. химиотер. 2007; 9(3): 211-19.

2. Композиции и способы лечения, включающие цефтаролин. Патент RU 2524665 C2.

3. Халконы в качестве усилителей антимикробных средств. Патент RU 2521252 C2.

4. Ингибиторы металло-β-лактамазы. Патент RU 2462450 C2.

5. Anti-Acinetobacterbaumannii drug combination and application thereof. Патент CN 102475703 (прототип).

6. Eliopoulos G.M., and R.C. Moellering. 1991. Antimicrobial combinations, p. 432-492. In V. Lorian (ed.), Antibiotics in laboratory medicine. The Williams & Wilkins Co., Baltimore, MD.

7. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Методические указания МУК 4.2.1890-04).

8. EUCAST 2015 г. www.eucast.com

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 59 items.
20.04.2016
№216.015.3310

Универсальная рентгеновская трубка для энергодисперсионных рентгеновских спектрометров

Использование: для исследования элементного состава материалов. Сущность изобретения заключается в том, что универсальная рентгеновская трубка для энергодисперсионных рентгеновских спектрометров включает корпус, катод, фокусирующий электрод, анод с рабочей поверхностью, перпендикулярной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002582310
Дата охранного документа: 20.04.2016
20.05.2016
№216.015.3ef7

Способ рентгенофлуоресцентного определения содержания примесей конструкционных материалов

Использование: для рентгенофлуоресцентного определения примесей. Сущность изобретения заключается в том, что рентгенофлуоресцентное определение содержаний примесей конструкционных материалов включает измерение интенсивностей аналитических линий контролируемых примесей в группе образцов этого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002584064
Дата охранного документа: 20.05.2016
20.05.2016
№216.015.3eff

Способ градуировки партии рентгеновских спектрометров

Использование: для градуировки рентгеновских спектрометров. Сущность изобретения заключается в том, что осуществляют отбор из стандартных образцов состава конструкционных материалов образец с нижними значениями скоростей счета по всем определяемым элементам и второй образец с верхними...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002584065
Дата охранного документа: 20.05.2016
20.05.2016
№216.015.408b

Устройство для энергодисперсионного рентгенофлуоресцентного анализа на основе вторичных излучателей

Использование: для энергодисперсионного рентгенофлуоресцентного анализа. Сущность изобретения заключается в том, что устройство для энергодисперсионного рентгенофлуоресцентного анализа на основе вторичных излучателей включает рентгеновскую трубку, вторичные излучатели, устройство подачи...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002584066
Дата охранного документа: 20.05.2016
10.06.2016
№216.015.46e6

Способ интенсивной пластической деформации кручением под высоким давлением при ступенчатом нагреве заготовок

Изобретение относится к обработке металлов давлением и может быть использовано для интенсивной пластической деформации кручением. Для измельчения микроструктуры металлов и повышения их микротвердости, прочности и пластичности способ включает сжатие и последующее кручение заготовки с получением...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002586188
Дата охранного документа: 10.06.2016
13.01.2017
№217.015.84fb

Устройство для диагностики импульсных пучков ионизирующих частиц

Изобретение относится к области ядерной физики и может быть использовано в ускорительной технике для измерения распределения ионизирующих частиц в поперечном сечении импульсных пучков. Устройство для диагностики профиля пучка ионизирующих частиц содержит систему регистрации распределения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002603231
Дата охранного документа: 27.11.2016
25.08.2017
№217.015.b323

Способ определения аминов в безводных средах

Изобретение относится к области аналитической химии для определения аминов в безводных средах. Для этого анализируемую пробу, содержащую амины, растворяют в ацетонитриле с добавкой от 0,01 до 1 моль/л инертной соли, погружают электрод с предварительно нанесенным на него покрытием толщиной от...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002613880
Дата охранного документа: 21.03.2017
25.08.2017
№217.015.b388

Реагент для количественного спектрофотометрического определения ферроцена в бензине

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к аналитическим реагентам, которые позволяют определять содержание ферроцена в бензине. Реагент для количественного спектрофотометрического определения ферроцена в бензине содержит окислитель, воду, катализатор, в качестве которого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002613899
Дата охранного документа: 21.03.2017
25.08.2017
№217.015.b4ee

Способ получения гибридных плазмонно-люминесцентных маркеров

Изобретение относится к способам синтеза гибридных наноструктурированных материалов, а именно к способу получения гибридных плазмонно-люминесцентных маркеров. Способ заключается в формировании металлических плазмонных наночастиц на поверхности неорганических люминесцентных наночастиц,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002614245
Дата охранного документа: 24.03.2017
26.08.2017
№217.015.d738

Способ химической переработки полихлорированных бифенилов

Изобретение относится к способу химической переработки технических полихлорированных бифенилов (ПХБ), включающему взаимодействие ПХБ с метоксидом натрия (MeONa), неосушенным от метанола (МеОН), в среде диметилсульфоксида (ДМСО) при мольном соотношении ПХБ:MeONa, равном 1:5, при объемном...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002623216
Дата охранного документа: 23.06.2017
Showing 1-10 of 11 items.
25.08.2017
№217.015.b92e

Способ определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки рта с гепатобилиарными расстройствами, исключая гепатиты и обострения заболеваний гепатобилиарной системы и поджелудочной железы

Изобретение относится к области медицины, а именно к разделу терапевтической стоматологии - заболеваниям слизистой оболочки рта, и может быть использовано для определения степени тяжести изменений микробиоты полости рта, тонкой и толстой кишки у больных красным плоским лишаем слизистой оболочки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002615349
Дата охранного документа: 04.04.2017
25.08.2017
№217.015.c4b7

Антимикробная комбинация в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных бактерий вида pseudomonas aeruginosa, продуцирующих металло-β-лактамазу

Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической микробиологии, и описывает антимикробные комбинации сочетанного применения карбапенемов и бисфосфонатов в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных бактерий вида Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, продуцирующих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002618433
Дата охранного документа: 03.05.2017
10.05.2018
№218.016.430f

Антисептическая композиция, содержащая поливинилпирролидон и унитиол, применение такой композиции и способ обработки ран с ее использованием

Группа изобретений относится к области медицины и предназначена для обработки ран и/или для использования при хирургических операциях. Антисептическая композиция содержит один или несколько антисептиков, от около 5 до около 10% мас. поливинилпирролидона (ПВП) с молекулярной массой в диапазоне...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002649785
Дата охранного документа: 04.04.2018
10.05.2018
№218.016.4351

Антисептическая композиция, содержащая унитиол и диметилсульфоксид, применение такой композиции и способ обработки ран с ее использованием

Группа изобретений относится к области медицины и предназначена для обработки ран и/или для использования при хирургических операциях. Антисептическая композиция содержит гидролизат коллагена, одну или несколько фармацевтически приемлемых солей альгиновой кислоты, один или несколько...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002649790
Дата охранного документа: 04.04.2018
12.09.2018
№218.016.8633

Антимикробная комбинация в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных бактерий вида acinetobacter baumannii, продуцирующих металло-β-лактамазу

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической микробиологии, и предназначено для преодоления устойчивости грамотрицательных микроорганизмов вида Acinetobacter baumannii, продуцирующих металло-β-лактамазу (МβЛ), к карбапенемам. Антимикробная комбинация сочетанного применения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002666619
Дата охранного документа: 11.09.2018
20.03.2019
№219.016.e3c9

Клей хирургический антисептический "аргакол"

Изобретение относится к области фармацевтики и касается клея хирургического антисептического, противовоспалительного, ранозаживляющего. Изобретение заключается в том, что клей хирургический антисептический содержит гидролизат коллагена, натриевую соль альгиновой кислоты, катапол, диоксидин,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002284824
Дата охранного документа: 10.10.2006
19.06.2019
№219.017.87f9

Стимулятор жизнедеятельности эукариотов и прокариотов

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при промышленном и лабораторном получении тканевых культур, питательных сред, сывороток, вакцин и других микробных, вирусных и бактерийных препаратов. Применение в качестве стимулятора жизнедеятельности эукариотов и прокариотов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002308482
Дата охранного документа: 20.10.2007
10.07.2019
№219.017.ab24

Способ изготовления сетчатого протеза с антимикробными свойствами для герниопластики

Изобретение относится к медицинской технике, в частности к изготовлению сетчатых протезов для абдоминальной хирургии на основе синтетических полимерных комплексных нитей с покрытием, в состав которого, для придания аллотрансплантату антимикробных свойств, вводятся различные виды...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002292224
Дата охранного документа: 27.01.2007
10.07.2019
№219.017.acc6

Способ камерной стерилизации биологических трансплантатов низкотемпературной плазмой пероксида водорода

Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии. Низкотемпературнаю плазму пероксида водорода используют в качестве стерилизующего средства при заготовке биологических трансплантатов при условии их обязательного предварительного дегидратирования. Для этого предварительно...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002317109
Дата охранного документа: 20.02.2008
01.12.2019
№219.017.e84f

Антимикробная композиция для формирования спейсера

Изобретение относится к области медицины, а именно травматологии и ортопедии, а именно к антимикробной композиции для формирования спейсера. Антимикробная композиция для формирования спейсера на основе костного цемента с гентамицином также содержит пластификатор, антисептики повиаргол,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002707734
Дата охранного документа: 29.11.2019
+ добавить свой РИД