×
25.08.2017
217.015.bd0d

Результат интеллектуальной деятельности: Композиция для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией

Вид РИД

Изобретение

№ охранного документа
0002616245
Дата охранного документа
13.04.2017
Аннотация: Изобретение относится к области медицины, а именно к средствам для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией. Композиция для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией, содержащая инактивированную суспензию Human herpesvirus 5 АТСС® VR-1788™, полиоксидоний, гиалуроновую кислоту, глицирризиновую кислоту в эффективном количестве. Применение изобретения приводит к повышению эффективности лечения заболеваний, вызванных цитомегаловирусной инфекцией. 2 з.п. ф-лы, 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к средствам для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией.

Известен состав и способ лечения цитомегаловирусной инфекции, включающий применение живой, ослабленной цитомегаловирусной (ЦМВ) вакцины, полученной при пересадке органов от доноров (US 4689225, А61K 39/12, 1987). Недостатком этой вакцины является использование живого вируса в ее составе, что создает возможность реактивации или обострения клинического течения инфекции при рекомбинации ослабленного штамма с «диким» вариантом ЦМВ, персистирующим в организме больного ЦМВ инфекцией, кроме того, не доказано отсутствие онкогенных свойств этого штамма.

Субъединичные цитомегаловирусные вакцины, разработанные ранее исследователями в Европе (ЕРА 0180288, МПК А61К 39/245, 1986; ЕРА 0236145, МПК С12N 15/100, 1987), и рекомбинантные цитомегаловирусные вакцины ЕРА 0389286, МПК А61К 39/245, С12N 15/38, 1990), содержащие гликопротеиды ЦМВ, оказались малоиммуногенными и чрезвычайно дорогими и поэтому в практику здравоохранения внедрены не были.

Наиболее близким аналогом заявляемого изобретения является способ лечения цитомегаловирусной инфекции с применением вирионной цитомегаловирусной композиции (патент РФ №2181295) на основе инактивированной суспензии цитомегаловируса штамма АД-169, которая дополнительно содержит полиоксидоний, гиалуроновую кислоту и суппозиторную основу. В этом изобретении также представлен способ получения композиции, включающий культивирование чувствительных к вирусу клеток человека или животных, внесение инфицирующего материала ЦМВ - штамма АД-169, его адсорбцию на этих клетках, инкубацию инфицированных клеток в среде поддержки, отделение структур разрушенных клеток низкоскоростным центрифугированием и инактивацию вируса в культуральной жидкости, отличающийся тем, что в качестве чувствительных клеток используют диплоидные клетки человека культуры М-22 или клетки ночек зеленых мартышек Vero-B, которые предварительно культивируют при температуре 36-38°С в течение 48 час, инкубацию инфицированных клеток осуществляют в течение 6-7 суток, а инактивацию вируса в культуральной жидкости проводят формалином в концентрации 1:2000 при температуре 35-37°С в течение 72 час, а затем при 3-5°С в течение 10 дней или кобальтом-60 в количестве 15-20 кГр температуре 19-21°С в течение 2 час; в полученную суспензию последовательно вводят полиоксидоний, гиалуроновую кислоту и суппозиторную основу. Способ позволяет увеличить иммуногенность и тем самым снизить дозу вакцины.

Недостатками прототипа является то обстоятельство, что применяемый штамм АД-169 цитомегаловируса, характеризуется высокой продуктивностью, но не обеспечивает стабильного получения необходимого качества антигена, обладающего адекватной для использования в вакцине иммуногенностью; в процессе культивирования этого штамма могут возникать мутации, изменяющие свойства антигена и повышающие его токсичность; контроль за возникновением мутаций в случае высокой продуктивности штамма практически невозможен. Более того, при превышении определенного уровня содержания вируса может нарушаться процесс инфицирования в культуре клеток, что приводит к снижению его количества на выходе, ослаблению биологической активности и усложняет процесс очистки продукта.

Для устранения указанных недостатков предлагается композиция вакцины для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией.

В частном случае осуществления изобретения, разработанную композицию возможно применять в двух лекарственных формах: жидкая форма - для внутримышечных и подкожных инъекций или в форме ректальных суппозиториев.

Предлагаемая композиция для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией, включает:

- инактивированную суспензию Human herpesvirus 5 АТСС® VR-1788™,

- полиоксидоний,

- гиалуроновую кислоту,

- глицирризиновую кислоту.

В частном случае осуществления изобретения - в виде суппозитория композиция для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией включает:

- инактивированную суспензию Human herpesvirus 5 АТСС® VR-1788™

- 2,0 мл (106 тканевых цитопатогенных доз ЦМВ);

- полиоксидоний - 0,02 г;

- гиалуроновую кислоту - 1,0 г;

- глицирризиновую кислоту - 0,1 г;

- суппозиторную основу - до 100 г (для лекарственной формы суппозиторий).

В частном случае осуществления изобретения - в виде состава для инъекций композиция для профилактики заболеваний, вызываемых цитомегаловирусной инфекцией включает:

- инактивированную суспензию Human herpesvirus 5 АТСС® VR-1788™

- 2,0 мл (106 тканевых цитопатогенных доз ЦМВ);

- полиоксидоний - 0,02 г;

- гиалуроновую кислоту - 1,0 г;

- глицирризиновую кислоту - 0,1 г;

- воду - до 100 г.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является повышение эффективности лечения заболеваний, вызванных цитомегаловирусной инфекцией за счет создания высокоиммуногенной, нетоксичной, не обладающей побочными эффектами вакцины для профилактики цитомегаловирусной инфекции, содержащей в качестве антигена вирусоспецифические белки.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Приготовление композиции

Вирус выращивается на монослое клеток HEL 299 (5АТСС® VR-1788™). Предварительно подготовленный клеточный монослой промывают для удаления слабо прикрепленных клеток и затем вносят инфицирующую дозу вируса. Предпочтительным является использование взвеси посевного вируса второго пассажа при множественности инфекции 0,001-0,01 ВОЕ/кл, так как это предотвращает накопление дефектных вирионов. Для выращивания клеток используется среда ИГЛА MEM с 10% фетальной бычьей сыворотки. Инфицирующую дозу вируса, содержащуюся в небольшом объеме питательной среды, достаточном для покрытия монослоя клеток, адсорбируют на монослое клеток в течение 1 часа. Зараженные клетки инкубируют при 37°С 3-4 дня, после максимального проявления признаков цитопатогенного действия вируса на клетки собирают культуральную жидкость, содержащую вирус и проводят ее очистку от компонентов культуры клеток.

Клеточный лизат освобождают от ядер центрифугированием при 1700 g и температуре 4°С в течение 10 минут. Надосадочную жидкость осветляют центрифугированием при 13000 g и температуре 4°С в течение 15 минут и подвергают очистке от балластных высокомолекулярных клеточных компонентов в режиме ультрацентрифугирования (ротор SW-28 на ультрацентрифуге «Beckman»), пропуская ее через трехслойную сахарозную подушку, состоящую из 10, 20 и 30% пятимиллилитровых слоев сахарозы при скорости вращения ротора 80000 g в течение 12 часов. К полученному указанным способом первичному концентрату вируссодержащей жидкости при постоянном перемешивании приливают 25% раствор стрептомицина сульфата до его конечной концентрации 0,5% и выдерживают при температуре 4°С 15 минут; осветляют концентрат центрифугированием при 13000 g и температуре 4°С в течение 15 мин на роторе SA-20. Осадок удаляют, концентрат фильтруют через стерилизующий набор фильтров с завершающим диаметром пор 0,2 мкм.

В результате очистки из лизата культивируемых клеток удаляется основная масса балластных белков, а при концентрировании получают оптимальное содержание вируса в суспензии. Полученный вируссодержащий материал подвергается инактивации в присутствии 0,1% раствора формальдегида при температуре 37°С в течение 14 суток. Полученный препарат вирусной суспензии проверяют на полноту инактивации (специфическую безвредность).

На каждые 2,0 мл инактивированной суспензии цитомегаловируса (что соответствует 106 тканевых цитопатических доз ЦМВ) добавляют полиоксидоний - 0,02 г, гиалуроновую кислоту - 1,0 г глицирризиновую кислоту (0,1%) и воду бидистиллированную апирогенную до общего объема 100,0 мл - получают жидкую форму вакцины для инъекций. Для получения лекарственной формы в виде ректальных суппозиториев в вышеуказанную композицию вместо бидистиллированной воды дополнительно вводят суппозиторную основу, в которую входят кондитерский жир, парафин, эмульгатор до общей массы 100,0 г; из полученной массы известным способом изготавливают свечи с указанным соотношением ингредиентов.

Каждая свеча имеет массу от 1,5 г до 2,0 г и содержит до 500 мкг/г белка, имеет температуру плавления не более 37°С, рН от 6,8 до 7,2, специфически безопасна и способна индуцировать синтез специфических антител у лабораторных животных, которые нейтрализуют не менее 2 lg ТЦД 50/мл в исходной суспензии цитомегаловируса.

Пример 2.

Испытания эффективности предлагаемого препарата были проведены на 40 мышах породы BALB/c, которых разделили на 2 группы. Первую группу (n=20) иммунизировали с помощью заявляемой нами композиции в жидкой форме подкожно в области спины в дозе 20 мкг, что соответствует терапевтической дозе для человека. Во второй группе (n=20) использовалась композиция, содержащая инактивированную суспензию Human herpesvirus, изготовленную в соответствии с описанием по Патенту РФ №2181295 (прототип; введение препарата осуществляли так же, как и в первой группе. Через 10 и 15 дней в обеих группах анализировался специфический ответ IgG против ЦМВ, для этого у мышей получали образцы периферической крови из надреза кожи в концевой части хвоста. Содержание специфических антител определяли в ИФА с видоспецифическим конъюгатом против IgG мыши.

Установлено статистически достоверное повышение содержания анти-ЦМВ антител класса IgG (р>0,05) в группе лабораторных животных на 15 и 20% в ответ на введение композиции по заявляемому изобретению, по сравнению с использованием препарата, соответствующего прототипу.

Кроме того, заявляемая композиция обладала более низким порогом токсичности, что было подтверждено при исследовании приготовленных опытных серий композиции с набором реагентов на основе люминесцирующих бактерий «Эколюм» (ЗАО "НВО Иммунотех", ТУ 6-09-20-236-01, свидетельство о метрологической аттестации (4/7-93)) на портативном измерительном приборе - люминометре «Биотоке-10».

Полученные результаты свидетельствуют о более высокой иммуногенности вакцины, получаемой согласно заявляемому изобретению.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 10 items.
10.01.2013
№216.012.1a0a

Состав расширенной квалификационной панели контрольных материалов для осуществления внешнего и внутрилабораторного контроля качества серологической диагностики сифилитической инфекции

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматовенерологии и клинической лабораторной диагностике, и представляет собой состав расширенной квалификационной панели контрольных материалов, приготовленных на основе сыворотки крови человека в жидкой нативной форме, готовых к использованию без...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472158
Дата охранного документа: 10.01.2013
20.09.2014
№216.012.f657

Способ получения иммуносорбента для диагностики вируса простого герпеса 1 типа

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, иммунохимии, и касается диагностики вируса простого герпеса первого типа методом твердофазного иммуноферментного анализа. Изобретение представляет собой способ получения иммуносорбента для диагностики вируса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528896
Дата охранного документа: 20.09.2014
10.04.2015
№216.013.37e0

Способ одновременного детектирования антител класса g к антигенам возбудителей torch-инфекций с использованием иммуночипа

Изобретение относится к иммунологическим методам анализа и может быть использовано для массового скрининга инфекций TORCH-группы у новорожденных, беременных женщин и женщин, планирующих беременность. Целью настоящего изобретения является создание способа одновременного детектирования...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002545792
Дата охранного документа: 10.04.2015
10.06.2015
№216.013.5396

Настойка эхинацеи пурпурной и способ ее получения

Изобретение относится химико-фармацевтической промышленности, а именно к настойке из травы, корневищ и корней Echinacea purpurea (L.) Moench, обладающей иммуномодулирующей, иммуностимулирующей, антимикробной, противовоспалительной, противовирусной активностью и к способу ее получения. Способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002552919
Дата охранного документа: 10.06.2015
27.10.2015
№216.013.8a68

Настойка эхинацеи и способ получения настойки эхинацеи

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к настойке из травы Echinacea, обладающей иммуномодулирующей, иммуностимулирующей, антимикробной, противовоспалительной, противовирусной, активностью и к способу ее получения. Способ получения настойки из травы Echinacea...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002567035
Дата охранного документа: 27.10.2015
19.01.2018
№218.016.0dcc

Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения

Группа изобретений относится к медицине и касается диагностических реагентов для клинической лабораторной диагностики сифилитической инфекции. Заявлены стабилизированный кардиолипиновый антиген и способ его получения. Кардиолипиновый антиген получен способом, включающим приготовление буферного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633087
Дата охранного документа: 11.10.2017
06.06.2019
№219.017.7429

Настойка трутневого расплода и способ ее получения

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к стабильной настойке из личинок трутней, а также способу ее получения. Способ получения настойки из трутневого расплода заключается в том, что проводят экстрагирование измельченных (гомогенизированных) трутневых личинок 40%...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690516
Дата охранного документа: 04.06.2019
29.01.2020
№220.017.fb00

Мяты перечной настойка и способ ее получения

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из листьев и масла мяты перечной (Mentha piperita) с добавлением масла мяты перечной. Способ получения настойки из листьев и масла мяты перечной (Mentha piperita) с добавлением масла мяты перечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002712236
Дата охранного документа: 27.01.2020
29.05.2020
№220.018.2179

Настойка из лекарственного растительного сырья и способ ее получения

Изобретение относится химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из цветков ноготков. Способ получения настойки методом модифицированной дробной мацерации из цветков ноготков, заключающийся в том, что измельченное растительное сырье экстрагируют поочередно...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002722067
Дата охранного документа: 26.05.2020
29.06.2020
№220.018.2ce2

Тест-система для одновременной детекции гуморальных маркеров инфицирования герпесвирусами человека

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике. Раскрыта тест-система для одновременной детекции гуморальных маркеров инфицирования герпесвирусами человека, включающая иммуносорбент в виде тест-полосок (стрипов), на каждой из которых в виде отдельных линий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002724897
Дата охранного документа: 26.06.2020
Showing 1-10 of 10 items.
20.09.2014
№216.012.f657

Способ получения иммуносорбента для диагностики вируса простого герпеса 1 типа

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, иммунохимии, и касается диагностики вируса простого герпеса первого типа методом твердофазного иммуноферментного анализа. Изобретение представляет собой способ получения иммуносорбента для диагностики вируса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528896
Дата охранного документа: 20.09.2014
10.04.2015
№216.013.37e0

Способ одновременного детектирования антител класса g к антигенам возбудителей torch-инфекций с использованием иммуночипа

Изобретение относится к иммунологическим методам анализа и может быть использовано для массового скрининга инфекций TORCH-группы у новорожденных, беременных женщин и женщин, планирующих беременность. Целью настоящего изобретения является создание способа одновременного детектирования...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002545792
Дата охранного документа: 10.04.2015
10.06.2015
№216.013.5396

Настойка эхинацеи пурпурной и способ ее получения

Изобретение относится химико-фармацевтической промышленности, а именно к настойке из травы, корневищ и корней Echinacea purpurea (L.) Moench, обладающей иммуномодулирующей, иммуностимулирующей, антимикробной, противовоспалительной, противовирусной активностью и к способу ее получения. Способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002552919
Дата охранного документа: 10.06.2015
27.10.2015
№216.013.8a68

Настойка эхинацеи и способ получения настойки эхинацеи

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к настойке из травы Echinacea, обладающей иммуномодулирующей, иммуностимулирующей, антимикробной, противовоспалительной, противовирусной, активностью и к способу ее получения. Способ получения настойки из травы Echinacea...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002567035
Дата охранного документа: 27.10.2015
19.01.2018
№218.016.0dcc

Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения

Группа изобретений относится к медицине и касается диагностических реагентов для клинической лабораторной диагностики сифилитической инфекции. Заявлены стабилизированный кардиолипиновый антиген и способ его получения. Кардиолипиновый антиген получен способом, включающим приготовление буферного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633087
Дата охранного документа: 11.10.2017
06.06.2019
№219.017.7429

Настойка трутневого расплода и способ ее получения

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к стабильной настойке из личинок трутней, а также способу ее получения. Способ получения настойки из трутневого расплода заключается в том, что проводят экстрагирование измельченных (гомогенизированных) трутневых личинок 40%...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690516
Дата охранного документа: 04.06.2019
29.01.2020
№220.017.fb00

Мяты перечной настойка и способ ее получения

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из листьев и масла мяты перечной (Mentha piperita) с добавлением масла мяты перечной. Способ получения настойки из листьев и масла мяты перечной (Mentha piperita) с добавлением масла мяты перечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002712236
Дата охранного документа: 27.01.2020
29.05.2020
№220.018.2179

Настойка из лекарственного растительного сырья и способ ее получения

Изобретение относится химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из цветков ноготков. Способ получения настойки методом модифицированной дробной мацерации из цветков ноготков, заключающийся в том, что измельченное растительное сырье экстрагируют поочередно...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002722067
Дата охранного документа: 26.05.2020
29.06.2020
№220.018.2ce2

Тест-система для одновременной детекции гуморальных маркеров инфицирования герпесвирусами человека

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике. Раскрыта тест-система для одновременной детекции гуморальных маркеров инфицирования герпесвирусами человека, включающая иммуносорбент в виде тест-полосок (стрипов), на каждой из которых в виде отдельных линий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002724897
Дата охранного документа: 26.06.2020
23.05.2023
№223.018.6e78

Набор реагентов для выявления рнк вируса sars-cov-2 методом прямой полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Изобретение относится к области молекулярной биологии, вирусологии и биотехнологии, молекулярно-генетической диагностике. Описан набор олигонуклеотидных праймеров и зондов, меченных флуоресцентным красителем для выявления РНК вируса SARS-Cov-2 со следующими последовательностями: SARS-CoV-2 ген...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002795939
Дата охранного документа: 15.05.2023
+ добавить свой РИД