ПРЕПАРАТ И СПОСОБ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕФИЦИТА АНДРОГЕНОВ У ЖЕНЩИН, СОДЕРЖАЩИЙ ЭНТОМОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОТЕИНЫ

Изобретение относится к биохимии, а конкретнее, к энтомологическим протеинам, полученным путем гомогенизации трутневого расплода и используемым для нормализации гормонального фона и общего состояния женщин. Конкретно, изобретение касается донаторов андрогенов для женщин.

Донаторы андрогенов для женщин получают путем гомогенизации трутневого расплода. Трутневый расплод - это совокупность развивающихся личинок, предкуколок и куколок мужских особей пчелиной семьи. Гомогенизацию проводят с помощью гомогенизаторов. Таким образом, получают однородную смесь белков, в том числе гормонов и ферментов, жиров, углеводов, олигонуклеотидов, нуклеиновых и аминокислот, витаминов, макро- и микроэлементов.

Для нормальной жизни любой женщине в репродуктивном периоде нужны три половых гормона (эстрогены, гестагены, андрогены). Для нормального протекания физиологических процессов старения в постменопаузальном периоде необходимы два из них (эстрогены, андрогены). Одной из главных причин развития климакса считали дефицит эстрогенов, который, независимо от причин недостаточности функции яичников, инициирует процессы климакса. Поэтому для уменьшения климактерических расстройств широко применяется заместительная терапия эстрогенами. Но ряд авторов полагает, что в нарушениях в период постменопаузы большее значение имеют андрогены. В пользу того, что андрогены необходимы женщине, говорит то, что рецепторы к андрогенам присутствуют практически во всех органах и тканях женского организма: костной ткани, центральной нервной системе, коже, сосудах, жировой ткани, в гладкой и поперечно-полосатой мускулатуре.

Женская андрогенная недостаточность приводит к ухудшению полового влечения, подавленному настроению, снижению мышечной массы, снижению плотности костной ткани и снижению чувства благополучия. Соответствующий уровень андрогенов может играть важную роль в метаболических, психологических и сексуальных функциях у женщин.

До настоящего времени роль андрогенов в организме женщины изучена недостаточно. Установлено, что андрогены необходимы не только для становления репродуктивной функции, но и поддержания нормального гормонального статуса в различные возрастные периоды. В том числе потому, что они являются предшественниками биосинтеза эстрогенов у женщин. Изучаются геномные и негеномные эффекты андрогенов. Большинство периферических органов и тканей: костная ткань, молочные железы, сальные железы и волосяные фолликулы, скелетные мышцы, жировая ткань, наружные половые органы содержат специфические андрогенные рецепторы. В связи с этим, андрогены оказывают различные эффекты на плотность кости, массу и силу мышц, распределение жировой ткани, настроение, сексуальное влечение, познавательную функцию и ощущение общего благополучия. Помимо геномного механизма, они могут оказывать внегеномные эффекты, например в органах и тканях, где имеется фермент ароматаза, путем преобразования их в эстрогены. В норме, у взрослых мужчин уровень тестостерона в крови составляет от 300 до 1000 нг/дл, а у женщин по данным разных авторов - от 20-50 до 80-120 нг/дл, т.е. примерно в 10 раз ниже [1-8]. В связи с тем, что физиологические уровни андрогенов у женщин значительно ниже, чем у мужчин, даже небольшое нарушение образования или обмена андрогенов может приводить к развитию у них андрогендефицитного состояния.

В Принстоне в 2001 г. (США) была проведена первая Международная конференция по дефициту андрогенов у женщин, где было дано определение понятия «дефицит андрогенов» (ДА) как новый диагностический термин для характеристики этого нарушения. Термин «андрогены» применяется к классу С19 стероидов, которые у лиц обоего пола образуются в гонадах и надпочечниках. Они включают тестостерон (Т), дегидроэпиандростерон (ДГЭА), дегидроэпиандростерона сульфат (ДГЭА-С), андростендион (А) и 5 а-дигидротестостерон (ДГТ). Что касается «Δ-андрогенов» (дельта-андрогенов) - ДГЕА и ДГЕА-С, то 70-80% их общего количества продуцируется в надпочечниках, основная их часть превращается в А, Т, ДГТ и эстрогены. Из андрогенных стероидов Т и ДГТ имеют наибольшую биологическую активность. У молодых здоровых женщин ежедневная продукция тестостерона (Т) в организме составляет примерно 300 µг, т.е. около 5% от таковой у мужчин. 98% этого гормона связано с белком-глобулином, связывающим половые стероиды.

В зависимости от уровня поражения возможны следующие причины ДА у женщин:

1. Яичниковая (овариэктомия, химио- или лучевая терапия). При овариэктомии происходит резкое снижение как эстрогенов, так и андрогенов уже в первые сутки после операции.

2. Надпочечниковая недостаточность или адреналэктомия.

3. Гипоталамо-гипофизарная - гипопитуитаризм.

4. Медикаментозная, связанная с приемом кортикостероидов, антиандрогенных препаратов, оральных препаратов для заместительной гормональной терапии.

5. Идиопатическая.

С наступлением менопаузы продукция тестостерона (Т) постепенно снижается. Снижение выработки в организме андрогенов начинается уже после 30 лет, и к 70 годам составляет примерно 20% от их значений в молодом возрасте.

Диагностика ДА включает сбор психосоциального и медицинского анамнеза, объективный осмотр и лабораторные исследования. Диагноз ДА может быть поставлен только в случае нормы эстрогенов. Это касается как женщин репродуктивного возраста с нормальным менструальным циклом, так и женщин в постменопаузе, получающих ЗГТ. Выявление низких значений андрогенов служит дополнительным критерием для постановки диагноза ДА. Однако этот признак не является основанием для постановки диагноза при отсутствии его клинических признаков. Согласно консенсусу Международной конференции по вопросам дефицита андрогенов (2001 г. ) лучше всего ДА отражает концентрация общего Т в сыворотке крови, определенного в утренние часы. Этот признак является «золотым стандартом» диагностики дефицита андрогенов (ДА) у женщин. Таким образом, диагностика ДА достаточно сложна. Врачу в первую очередь, следует убедиться, что симптомы, характерные для ДА, не обусловлены дефицитом эстрогенов. При нормальном уровне эстрогенов в организме появление характерных симптомов ДА может быть связано с другими, одним или несколькими, соматическими, эндокринными заболеваниями: гипо- или гипертиреоз, метаболический синдром, дефицит витамина D, синдром хронический усталости; хронический психосоциальный стресс на работе и в семье и др. Помимо низких значений эстрогенов, низкий уровень Т может стать причиной депрессии и снижения ощущения общего благополучия у женщин [1-8].

При выявлении ДА, также следует исключить ятрогенные причины - прием антидепрессантов, ингибиторов обратного захвата серотонина, седативных препаратов (барбитураты, бензодиазепины), антигипертензивных препаратов из группы бета-адреноблокаторов (пропранолол, атенолол и др.), блокаторов кальциевых каналов (фелодипин, исрапидин); диуретиков (спиронолактон); гормональных средств (эстрогены, прогестагены, антиандрогены, кортикостероиды).

Возникновению ДА способствует также длительный прием кортикостероидных препаратов при терапии ревматоидного артрита, системной красной волчанки и др. Алкоголь и наркотические средства также угнетают продукцию Т.

Механизмы антиандрогенного эффекта вышеуказанных причин могут быть обусловлены снижением продукции в яичниках андростендиона (А) и Т; конкурентным подавлением 5а-редуктазы, фермента, превращающего Т в ДГТ в коже; снижением образования ДГЭА-С. Наиболее сильным антиандрогеном является ципротерона ацетат, диеногест, хлормадинона ацетат.

Терапия ДА не разработана. В России, как и в большинстве стран мира, нет официально одобренных препаратов для заместительной терапии андрогенами у женщин с ДА, ведение таких пациенток представляет определенные трудности. Наличие «остаточных» производных 19-норстероидов, обладающих слабым андрогенным воздействием, используются в составе препаратов для ЗГТ у женщин с ДА в перименопаузе (Климонорм, Трисеквенс), в постменопаузе (Клиогест и Тиболон). При наличии выраженных сексуальных нарушений, тяжелого астено-депрессивного синдрома у пациенток с синдромом постовариэктомии даже при удаленной матке предпочтительнее использовать комбинированные препараты. Правильно подобранная ЗГТ оказывает комплексное, благоприятное воздействие на психовегетативные расстройства, метаболические процессы, препятствует изменению пропорций тела, улучшает социальную адаптацию и общее качество жизни. Однако, широкое применение ЗГТ, особенно в пожилом возрасте, ограничено рядом противопоказаний: нарушение функции печени, склонность к тромбообразованию и тромбофлебитам, наличие гиперпластических процессов в матке и молочных железах. Риск рака молочных желез возрастает на 30-50%.

В настоящее время также используют препараты тестостерона в виде инъекций, имплантов, пластырей или гелей. Однако все эти препараты далеко не безопасны в терапии ДА у женщин. Нередки побочные эффекты: ожирение, акне, рост волос на лице и теле, увеличение веса, понижение тембра голоса, могут быть приступы гнева, агрессивность.

В уровне техники не выявлено рекомендаций по лечению ДА, которые базировались бы на результатах больших, рандомизированных, плацебо-контролируемых клинических исследованиях.

Главными андрогенами в сыворотке у женщин с нормальным менструальным циклом являются тестостерон и дигидротестостерон. Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-С), дегидроэпиандростерон (ДГЭА) и андростендион считаются прогормонами, поскольку лишь конверсия в тестостерон проявляет их андрогенные свойства. У здоровых женщин репродуктивного периода ежедневно образуется 300 мкг тестостерона (5% от их ежедневной продукции у мужчин). С возрастом у женщин происходит значительное снижение всех андрогенов. Так, уровень общего и свободного тестостерона, андростендиона и ДГЭА в 45-летнем возрасте составляет в среднем 50%, в 60-летнем - около 30%, в 70-летнем - 10% от уровня этих гормонов у 20-летних женщин [4]. На основании изложенного Kalinchenko S. и др. [5] считают, что изучение роли андрогенов у женщин имеет важное значение.

В мировой практике имеется огромный опыт применения эстрогенной заместительной терапии, однако появляется все больше данных о том, что часто без коррекции возрастного андрогенного дефицита не удается повысить качество жизни. Кроме того, широкое применение ЗГТ, особенно в пожилом возрасте, ограничено рядом противопоказаний: нарушение функции печени, склонность к тромбообразованию и тромбофлебитам, наличие гиперпластических процессов в матке и молочных железах. Риск рака молочных желез возрастает на 30-50%.

В связи с изложенным, поиск новых методов лечения возрастного ДА чрезвычайно актуален. Так как введение естественных гормонов эстрогенов и андрогенов имеет ряд недостатков, было предложено использование растительных гормонов. В США в состав Citracal plus Vitamin D включен генистеин - гормоны сои (аналог женских половых гормонов) как субстрат для синтеза собственных гормонов. Авторами заявляемого изобретения разработаны новые технологии в лечении ДА - с использованием трутневого расплода в качестве донатора половых гормонов, а именно тестостерона у женщин.

Из уровня техники известен препарат, состоящий из трутневого расплода и лапчатки белой (RU 2425593, 10.08.2011). Исходя из этого патента, влияние трутневого расплода на мужской организм было достаточно хорошо изучено. Действие трутневого расплода на мужской организм объяснялось стимулированием функции семенников по выработке ими тестостерона.

Поэтому, применение трутневого расплода для стимулирования выработки тестостерона в женском организме не представлялось очевидным, особенно в постменопаузальном периоде, так как было не ясно, стимулирование какого органа привело бы к выработке тестостерона в женском организме.

Из уровня техники известно, что андрогены у женщин вырабатываются либо корой надпочечников, либо яичниками. В случае женщин климатического периода, второй путь синтеза тестостерона отпадает в связи с общим упадком функций данного органа. Что касается первого пути синтеза андрогенов, то надпочечники синтезируют андростендион, дегидроэпиандростерон и 11-β-гидроксиандростендион. Как известно, данные гормоны являются предшественниками тестостерона (Филиппович Ю.Б., Биохимические основы жизнедеятельности человека, Владос, Москва, 2005, стр. 336).

Авторами сделано предположение, что выработке тестостерона в женском организме способствует печень, расщепляя энтомологический тестостерон до человеческого тестостерона.

Но каким бы ни был путь синтеза тестостерона в организме женщины, не представляется возможным делать параллели с путями синтеза данного гормона в мужском организме. Так, известно, что все стероиды представляют собой соединения липидной природы. Они плохо растворимы в воде, поэтому в крови находятся в основном в связанном состоянии с белками плазмы крови, лишь незначительная их часть находится в свободном виде. Именно свободные стероиды обладают высокой биологической активностью: они проникают через мембрану клеток-мишеней. Предшественником стероидов является холестерин, который в клетках коры надпочечников превращается в прогестерон. Из прогестерона могут образовываться кортикостероиды, андрогены и эстрогены (Любимова З.В., Возрастная физиология, часть 1, Владос, Москва, 2004, стр. 105). Одной из диетических рекомендаций для повышения уровня тестостерона у мужчин обычно служит повышение количества потребляемого холестерина, например, яиц. Однако для женщин такая рекомендация не может иметь место, так как она может повлечь за собой увеличение эстрогенов или кортикостероидов. Из уровня техники известно, что предъявление одних и тех же стимулов железам внутренней секреции мужчин и женщин имеет разное влияние на синтез гормонов. Так, выделение гипофизом фоллинтропина у женщин ведет к выработке эстрогенов, а у мужчин - к выработке тестостерона (Гуровец Г.В., Возрастная анатомия и физиология, Владос, Москва, 2013, стр. 215). Таким образом, несмотря на известность из уровня техники действия трутневого расплода как активатора производства собственного тестостерона у мужчин, учитывая отличия функционирования эндокринной системы у мужчин и женщин, нельзя было предположить, что вещества, оказывающие влияние на центральные звенья, контролирующие синтез тестостерона у мужчин (Теория и средства апитерапии, Москва, 2007), будут оказывать такой же эффект на женщин. Тем более нельзя предположить, что те вещества, которые регулируют выработку тестостерона яичками, будут действовать на выработку тестостерона у женщин.

Изобретение базируется на неожиданном открытии того факта, что трутневый расплод обладает андрогенотропным действием на женский организм.

Техническим результатом заявленной группы изобретений является повышение в крови уровня собственных андрогенов у женщин, в частности тестостерона.

Ранее авторы заявляемого изобретения сообщали, что трутневый расплод является донатором различных половых гормонов (эстрадиола, прогестерона, тестостерона) как у мужчин, так и у женщин (RU 2498811, 20.11.2013; RU 2412616, 27.02.2011; RU 2497533, 10.11.2013). Однако на тот момент не было известно, донатором каких именно половых гормонов является трутневый расплод у женщин, т.е. в указанных публикациях отсутствуют сведения, раскрывающие, что у женщин будет повышаться уровень тестостерона в крови при употреблении трутневого расплода. Исходя из существующего уровня техники, логично было предполагать, что у женщин будет повышаться уровень эстрадиола или прогестерона. Несмотря на то, что в разных источниках сообщается о выраженном гонадотропном действии, стимулирующем активность половых желез, известно, что гомогенат трутневого расплода выступает стимулятором центральных механизмов регуляции образования мужских половых гормонов (андрогенов), восстанавливает биохимические характеристики семенников (концентрацию тестостерона в крови и фруктозы в жидкости семенных пузырьков), предстательной железы и продуцирование спермы. Применение трутневого расплода эффективно при нарушенной половой функции у мужчин и при мужском бесплодии, повышает половое влечение. Прием трутневого молочка стимулирует функционирование яичников у женщин, способствует восстановлению гормонального фона и детородной функции. То есть, из уровня техники было известно, что гомогенат трутневого расплода стимулирует выработку андрогенов у мужчин и стимулирует выработку эстрогенов у женщин.

Указанные публикации касаются решений, относящихся к лечению остеопороза. Из уровня техники известно, что остеопороз у женщин может иметь эстрадиол-зависимую природу. Суммируя вышесказанное, авторы заключают, что анализ уровня техники не выявил ни одного решения, приводящего к достижению заявленного технического результата - повышение в крови уровня собственных андрогенов у женщин, в частности тестостерона, при использовании биологически активных веществ, в частности трутневого расплода.

При этом было установлено, что действие энтомологического тестостерона значительно отличается от действия экзогенного тестостерона, например от действия тестостерона пропионата, применение которого наносит существенный урон здоровью женщины: маскулинизация, акне, огрубление голоса, чрезмерная волосатость, облысение и клиторомегалия, тромбофлебия.

Учитывая, что тестостерона пропионат печень разлагает до эстрогенов, предположить, что энтомологический тестостерон трутневого расплода будет разлагаться печенью до человеческого тестостерона, было не логично.

Наиболее близким аналогом к заявленной группе изобретений является решение, раскрытое в ЕА 14932, 29.04.2011. Указанное решение раскрывает способ лечения состояний, связанных со снижением уровня андрогенов у женщин, включающий введение селективного модулятора андрогеновых рецепторов.

Авторами разработан препарат на основе гомогената трутневого расплода, выполненный в виде порошка, таблетки или капсулы.

Авторами было проведено исследование с целью изучения влияния созданного препарата на гормональный статус женщин с андрогенным дефицитом.

Материал и методы. С 2009 по март 2013 года обследовано 72 женщины в возрасте 49-85 лет. Критериями включения в исследование были: только женщины с гормонально и клинически подтвержденным андрогенным дефицитом.

Обследование включало объективный осмотр, общеклиническое лабораторное обследование, а также гормональное исследование - определение общего тестостерона, глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ). Гормональное исследование производилось иммунохемилюминесцентным методом на аппарате Immulite 2000.

Все женщины разделены на 2 сравнимые группы по возрасту и тяжести заболевания: 1 группа - 38 женщин - получали заявляемое средство перорально (в 1 таблетке трутневый расплод 100 мг) по 1 таблетке утром и на ночь, трехмесячными курсами три раза в год. 2-группа (сравнения) - 34 женщины - получали плацебо два раза в день такими же курсами, как и в 1 группе.

Статистический анализ полученных данных выполнялся с помощью пакета программ StatSoft, Windows ХР. Количественные признаки описывались средними и среднеквадратическими отклонениями. Данные представлены в формате: M±m, где M - средняя арифметическая; m - ошибка средней арифметической. Различия считались статистически значимыми при уровне значимости p<0,05.

Результаты:

После завершения лечения в группе женщин, получавших заявляемое средство, отмечалось: улучшение настроения, повышение активности, увеличение мышечной силы, уменьшение дизурических расстройств, снижение активности остеопороза.

В альтернативной группе женщин, получавших плацебо, ничего из описанного в первой группе не наблюдалось.

При анализе гормональных показателей выявлено, что концентрация общего тестостерона у женщин исследуемых групп до лечения составляла:

в 1 группе 1,1±0,4 нмоль/л;

во 2 группе 1,2±0,5 нмоль/л (p>0,05),

при референсных значениях для данного метода 1,7-3,4 нмоль/л. Концентрации ГСПГ в 1 и 2 группах до лечения составляла 64,3±2,6 нмоль/л, 62,8±2,9 нмоль/л (p>0,05). При терапии заявляемым средством через 9 месяцев у 29 из 37 пациенток отметили улучшение состояния. При оценке лабораторных показателей отмечалось повышение концентрации общего тестостерона в сыворотке крови с 1,1±0,4 нмоль/л до 2,5±0,6 нмоль/л (p<0,05), концентрации ГСПГ с 64,3±2,6 нмоль/л, до 115,0±5,9 нмоль/л. (p<0,05). Во второй группе получавших плацебо положительных сдвигов в содержании тестостерона и повышения ГСПГ не отмечалось ни у одной пациентки.

Результаты проведенного исследования наглядно демонстрируют, что прием заявляемого средства содействует нормализации андрогенов у женщин. Это ведет к улучшению общего состояния, исчезновению или уменьшению клинических проявлений ДА. Такой эффект может быть получен в случае приема препарата в количестве от 10 мг до 600 мг в сутки.

Полученные данные указывают на то, что старение сопровождается снижением гормонального андрогенного статуса, что ведет к появлению клинических симптомов ДА.

Литература:

1. Л.А. Марченко, Л.М. Ильина. Информационный материал по андрогенному дефициту для рассылки членам АГЭ. 2005 г.

2. Калинченко С.Ю., Апетов С.С. Роль андрогенов у женщин: что мы знаем? Леч. врач 2010; 8: 78-83.

3. Калинченко С.Ю., Апетов С.С. Применение андрогенов у женщин в климактерическом периоде. Леч. врач 2009; 3: 28-30.

4. Riggs B.L., Hodgson I.F., O′Fallon W.M. et al. Auoride treatment on the fracture rate in postmenopausal women with osteoporosis. // N Engl J Med. 1990; 322:802-809.

5. Kalinchenko S., Vishnevskiy E.L., Koval A.N., Mskhalaya G.J., Saad F. Beneficial effects of testosterone administration on symptoms of the lower urinary tract in men with late-onset hypogonadism: A pilot study // The Aging Male. 2008, vol. 11, Iss. 2: 57-61.

6. Mudali S., Dobs A.S., Ding J., Cauley J.A., Szklo M., Golden S.H. Endogenous postmenopausal hormones and serum lipids: the Atherosclerosis Risk in Communities Study // J Clin Endocrinol Metab, 2005, vol. 90, p. 1202-1209.

7. Nathorst-Boos J., Floter A., Jarcander-Rollf M. Treatment with percutaneous testosterone gel in postmenopausal women with decreased libido-effects on sexuality and psychological well-being // Maturitas, 2006, vol. 53, p. 11-18.

8. Riverra-Woll L.M., Papalia M., Davis S.R., Burger H.G. Androgen insufficiency in women: diagnostic and therapeutic implications // Human Reproduction Update, 2004, vol. 10, № 5, p. 421-432.