СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЦИС-ДИХЛОРОДИАММИНПЛАТИНЫ(II) С АРАБИНОГАЛАКТАНОМ

Изобретение относится к способам получения препарата, обладающего биологической активностью и возможностью использования его в качестве лекарственного средства при лечении злокачественных заболеваний.

Соль цис-дихлородиамминплатины(II) до настоящего времени остается самым известным противоопухолевым препаратом и широко применяется в онкологии (Ronald С. DeConte, Bartlet R. Tofthness, Robert С. Lange, and William A. Creasey Clinical and Pharmacological Studies with c/s-Diamminedichloroplatinum(II). // Cancer Reseach V. 33, 1973, P. 1310-1315).

Тем не менее соль цис-дихлородиамминплатины(II) обладает умеренной токсичностью, не высокой растворимостью и при лечении данным препаратом происходит привыкание организма, что существенно понижает его эффективность. Поэтому с целью исключения данных эффектов предлагается использовать в качестве матрицы полисахарид арабиногалактан, продукт растительного происхождения, который обладает биологической активностью, является имуномодулятором, активирующим ретикулоэндотелиальную систему, увеличивая фрагоцитарный индекс. (Медведев С.А., Александрова Г.П., Дубровина В.И., Четверикова Т.Д., Грищенко Л.А., Красникова И.М., Феоктистова Л.П., Тюкавкина Н.А. Арабиногалактан лиственницы - перспективная полимерная матрица для биогенных металлов. // Butlerov Commun. 2002. №7. Р. 45-49; Александрова Г.П., Медведева С.А., Грищенко Л.А., Дубровина В.И. Металлопроизводные арабиногалактана, способ получения металлопроизводных арабиногалактана. Патент РФ №2194715 (13) С2 от 20.12.2002).

Описано несколько способов получения препаратов на основе взаимодействия солей металлов с полисахаридом (Старков А.К., Когай Б.Е. Способ получения Pt-производного арабиногалактана. Патент РФ №2406508 С1 от 20.12.2010; Josephson L., Groman E.V., Jung C., Lewis J.M. Targeting of therapeutic agents using polisa-charides. US Patent 5336506 A, 09.08.1994; Медведева C.A., Александрова Г.П., Грищенко Л.А., Тюкавкина Н.А. Синтез железо (II, III) содержащих производных арабиногалактана. // ЖОХ, 2002. - Т. 72. - №9. - С. 1569-1573; Медведев С.Α., Александрова Г.П., Дубровина В.И., Четверикова Т.Д., Грищенко Л.Α., Красникова И.М., Феоктистова Л.П., Тюкавкина Н.А. Арабиногалактан лиственницы - перспективная полимерная матрица для биогенных металлов. // Butlerov Commun. 2002. №7. Р. 45-49). Они основаны на взаимодействии этих солей металлов с полисахаридом арабиногалактаном.

Наиболее близким к заявляемому является способ получения препарата (Старков А.К., Когай Б.Е. Способ получения Pt-производного арабиногалактана. Патент РФ №2406508 C1 от 20.12.2010), включающий в себя следующее: К 30 мл водного раствора соли цис-дихлородиамминплатины(II) с концентрацией 0,39 ммоль добавляли 2,34 мл 50% раствора арабиногалактана при интенсивном перемешивании и оставляли при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученную смесь в нейтральной среде нагревали на водяной бане в течение 15 минут и фильтровали через бумажный фильтр (синяя лента). Выделение препарата и очистку от низкомолекулярных примесей проводили высаживанием в спирт. Выход полученного препарата составлял 93% с содержанием платины 4,97.

Недостатками этого способа являются:

- процесс ведут в водном растворе без добавления хлорид иона

- синтез ведут не в эквимолекулярном соотношении комплекса платины(II) и арабиногалактана.

Задача изобретения состоит в разработке способа получения препарата на основе взаимодействия цис-дихлородиамминплатины(II) и арабиногалактана. Этот препарат обладает противоопухолевой активностью, повышенной растворимостью в воде, пониженной токсичностью, по сравнению с исходным комплексом цис-дихлородиамминплатины(II).

Для решения поставленной задачи пользовались высокочистым комплексным соединением цис-дихлородиамминплатины(II), получаемым по способам (Старков A.К., Казбанов В.И., Карпова Н.В., Борисов В.В., Малиновская Л.М. Способ очистки цис-диамминдихлороплатины(II). АС СССР №1640920 от 24.02.1989; Казбанов B.И., Старков А.К., Кожуховская Г.Α., Неклюдова В.В. Способ получения стерилизованной микрокристаллической цис-дихлородиамминплатины(II). Патент РФ №2292210 от 03.05.2005).

Кроме того синтез ведут в 0,1 Μ растворе хлористого лития для подавления гидролиза комплексного соединения цис-дихлородиамминплатины(II) и повышения выхода препарата. Процесс проводят в эквимолекулярном соотношении цис-дихлородиамминплатины(II) и арабиногалактана.

Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, состоит в следующем.

В водный раствор соли цис-дихлородиамминплатины(II) в 0,1 Μ растворе хлористого лития добавляют 50% раствор арабиногалактана в мольном соотношении 1:1 при интенсивном перемешивании и оставляют при комнатной температуре в течение 30-90 минут. Полученную смесь кипятят на водяной бане в течение 15-30 минут. Из фильтрата препарат выделяют высаливанием спиртом.

Поставленная задача решается использованием следующих новых данных по сравнению с прототипом:

- синтез ведут при максимальном содержании цис-дихлородиамминплатины(II) в препарате при условии эквимолекулярного соотношения его с арабиногалактаном.

- синтез ведут в среде 0,1 Μ раствора хлористого лития.

- разработанный способ позволяет получить препарат без примеси исходных веществ цис-дихлородиамминплатины(II) и арабиногалактана.

Способ подтверждается конкретными примерами.

Пример 1. К 50 мл водного раствора цис-дихлородиамминплатины(II) с концентрацией 0,33 ммоля добавляли 10,5 мл 50% водного раствора арабиногалактана. Синтез вели в 0,1 Μ растворе хлористого лития при интенсивном перемешивании, оставляли при комнатной темперетуре в течение 30 минут. Полученную смесь нагревали на водяной бане в течение 15 минут. Фильтровали через бумажный фильтр (синяя лента). Выделение препарата и очистку от низкомолекулярных примесей проводили высаживанием в спирт. Выход полученного препарата составляет 95% с содержанием платины 1,3%. Препарат охарактеризован РФА, ИК-спектроскопией, ЯМР-спектроскопией, УФ-спектрофотоментрией, термогравиметрией.

Пример 2. К 30 мл водного раствора цис-дихлородиамминплатины(II) с концентрацией 0,066 ммоля добавляли 10,5 мл 50% водного раствора арабиногалактана. Синтез вели в 0,1 Μ растворе хлористого лития при интенсивном перемешивании, оставляли при комнатной темперетуре в течение 30 минут. Полученную смесь нагревали на водяной бане в течение 15 минут. Фильтровали через бумажный фильтр (синяя лента). Выделение препарата и очистку от низкомолекулярных примесей проводили высаживанием в спирт. Выход полученного препарата составляет 78% с содержанием платины 0,26%. Препарат охарактеризован методами, аналогичными методам в примере 1.

Пример 3. К 20 мл водного раствора цис-дихлородиамминплатины(II) с концентрацией 0,85 ммоля добавляли 10,5 мл 50% водного раствора арабиногалактана. Синтез вели в 0,1 Μ растворе хлористого лития при интенсивном перемешивании, оставляли при комнатной темперетуре в течение 30 минут. Полученную смесь нагревали на водяной бане в течение 15 минут. Фильтровали через бумажный фильтр (синяя лента). Выделение препарата и очистку от низкомолекулярных примесей проводили высаживанием в спирт. Выход полученного препарата составляет 85% с содержанием платины 3,35%. Препарат охарактеризован методами, аналогичными методам в примере 1.

Пример 4. К 50 мл водного раствора цис-дихлородиамминплатины(II) с концентрацией 0,33 ммоля добавляли 10,5 мл 50% водного раствора арабиногалактана. Синтез вели при интенсивном перемешивании, оставляли при комнатной темперетуре в течение 30 минут. Полученную смесь нагревали на водяной бане в течение 15 минут. Фильтровали через бумажный фильтр (синяя лента). Выделение препарата и очистку от низкомолекулярных примесей проводили высаживанием в спирт. Выход полученного препарата составляет 82% с содержанием платины 0,95%. Препарат охарактеризован методами, аналогичными методам в примере 1.

На основании физико-химических исследований методами РФА, ИК-спектроскопии, ЯМР-спектроскопии, УФ-спектрофотоментрии, термогравиметрии полученный препарат (пример 1) взаимодействия соли цис-дихлородиамминплатины(II) с арабиногалактаном представляет из себя вещество, в котором цис-дихлородиамминплатины(II) связан с арабиногалактаном по связи -C-O-C- водородом ΝΗ₃ - группы исходного комплекса в соотношении 1:1.

В примере 2 это соотношение составляет 0,2:1 и согласно данным физико-химических исследований содержит смесь препарата и исходного арабиногалактана. В примере 3 соотношение составляет 2,6:1 и согласно данным физико-химических исследований содержит смесь препарата и исходной соли цис-дихлородиамминплатины(II). В примере 4 синтез вели без добавления 0,1 М раствора хлористого лития, поэтому соотношение составляет 0,8:1 и согласно данным физико-химических исследований содержит смесь препарата и исходного арабиногалакта.

Результаты исследования противоопухолевого действия синтезированного препарата на рост асцидных клеток карциномы Эрлиха показали, что он обладает способностью подавлять рост опухоли, не оказывая на организм токсического эффекта. Эффективность препарата в 3,5 раза выше, чем эффективность цис-дихлородиамминплатины(II), а растворимость выше в 3 раза. Причем концентрация платины в препарате в несколько десятков раз ниже, чем в исходной соли цис-дихлородиамминплатины(II).

Таким образом, разработанный способ синтеза препарата на основе цис-дихлородиамминплатины(II) с арабиногалактаном позволяет получить более дешевый продукт, который может использоваться при лечении злокачественных заболеваний