СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ БИОМЕМБРАН В УСЛОВИЯХ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ОБЛУЧЕНИЯ

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, может быть использовано для коррекции процессов перекисного окисления липидов биомембран и повышения антиоксидантного статуса теплокровного организма в условиях воздействия ультрафиолетовых лучей, найти применение в экспериментальной медицине и клинической практике.

Известны способы коррекции процессов перекисного окисления липидов и повышения антиоксидантного статуса теплокровного организма в условиях воздействия прооксидантных факторов введением синтетических препаратов антиоксидантного действия - дибунола, токоферола ацетата, мексидола [1, Машковский М.Д., Лекарственные средства, 2010], эмоксипина [2, Доровских В.А., Антиоксиданты в профилактике и коррекции холодового стресса, 2000]. Недостатками этих способов являются необходимость применения фармакологических препаратов синтетического происхождения, имеющих ряд побочных и токсических эффектов и относительно высокую себестоимость.

Известен способ коррекции процессов липопероксидации в эксперименте, включающий облучение области мечевидного отростка грудины белых крыс электромагнитными волнами терагерцового диапазона на частотах 150,176-150,664 ГГц при плотности мощности 0,2 мВт/см² в течение 30 минут [3, Патент РФ №2393891]. Недостатком способа является обязательное наличие специальной аппаратуры для облучения электромагнитными волнами.

Известен способ повышения неспецифической резистентности организма в условиях ультрафиолетового облучения, обеспечивающий стабилизацию процессов перекисного окисления липидов биомембран в организме облучаемых животных, введением настоя на основе сбора из листьев крапивы, березы, подорожника, дуба и цветков пижмы, взятых в соотношении 1:1:1:1:1 [4, Патент РФ №2485598]. Недостатком этого способа является многокомпонентность сбора для приготовления настоя, обеспечивающего антиоксидантный эффект.

Известен также способ повышения антиоксидантного статуса теплокровного организма в условиях ультрафиолетового облучения введением настоя на основе сбора из листьев крапивы, березы, подорожника, взятых в соотношении 1:1:1 [5, Патент РФ №2424580]. Данное техническое решение взято нами за прототип.

Задачей настоящего изобретения явилось расширение арсенала средств, позволяющих корректировать процессы перекисного окисления липидов на фоне повышения активности антиоксидантной системы теплокровного организма в условиях ультрафиолетового облучения, на основе доступного отечественного сырья и повышения стойкого фармакологического эффекта в условиях сокращения курса фитокоррекции.

Поставленная задача решена путем разработки нового способа коррекции процессов перекисного окисления липидов в условиях ультрафиолетового облучения введением настоя травы звездчатки (мокрицы). Трава звездчатки широко распространена на территории России, содержит большой спектр биологически активных веществ. Сырье, используемое для изготовления, доступно, технология получения рентабельна, спектр применения широк.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе коррекции процессов перекисного окисления липидов в условиях ультрафиолетового облучения, включающем ежедневное пероральное введение лабораторным животным настоя из расчета 5 мл/кг массы за 20 минут до воздействия ультрафиолетовых лучей, животным вводят настой травы звездчатки, полученный настаиванием 6 г сырья на 200 мл кипящей воды, в течение 14 дней.

Осуществление способа. Экспериментальным животным (крысам или мышам), находящимся в стандартных условиях вивария, за 20 минут до облучения в ультрафиолетовой камере [6, Патент РФ №2348079] вводят ежедневно перорально настой травы звездчатки из расчета 5 мл/кг массы в течение 14 дней. На 15-й день эксперимента животные забивались путем декапитации.

Приготовление настоя травы звездчатки. Траву звездчатки измельчали, заливали кипящей водой из расчета 6 г на 200 мл воды, настаивали 60 минут, процеживали, осадок удаляли, настой охлаждали.

Результаты учитывались по соотношению содержания продуктов ПОЛ (гидроперекисей липидов, диеновых конъюгатов, малонового диальдегида), основных компонентов АОС (церулоплазмина, витамина Е) и активности ферментов АОС (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, каталазы) в плазме крови крыс экспериментальной группы в сравнении с животными интактной, контрольной групп и группы-прототипа на 14 и 28 дни эксперимента, обработаны стандартными параметрическими методами с использованием t-критерия Стьюдента.

Способ позволил обеспечить коррекцию процессов перекисного окисления липидов в условиях ультрафиолетового облучения, базируемую на снижении содержания продуктов радикального характера и липидных перекисей в организме облучаемых крыс и увеличении антиоксидантной активности, в условиях сокращения длительности курса фитокоррекции до 14 дней в сравнении с прототипом.

Исследовано содержание продуктов ПОЛ в плазме крови крыс интактной, контрольной групп, группы-прототипа и экспериментальных животных на 14 и 28 дни эксперимента (таблица 1).

В результате проведенных исследований содержание гидроперекисей липидов в крови контрольных (облучаемых) животных достоверно выше на 46,6% относительно интактных крыс (р<0,01), диеновых конъюгатов - на 53,0% (р<0,05), малонового диальдегида - на 62,5% (р<0,001), что свидетельствует о повышении интенсивности процессов пероксидации в условиях ежедневного УФО на 14 день эксперимента. Уровень гидроперекисей липидов в плазме крови крыс, получавших на фоне облучения настой травы звездчатки, достоверно ниже на 20,5%, чем в контрольной (облучаемой) группе животных (р<0,01), диеновых конъюгатов - на 26,6% (р<0,01), малонового диальдегида - на 18,5% (р<0,05). Сравнивая результаты исследований содержания продуктов ПОЛ в крови животных экспериментальной группы с прототипом, можно констатировать, что предлагаемый способ оказывает более выраженное влияние на стабилизацию процессов пероксидации на 14 день эксперимента: уровень гидроперекисей липидов в плазме крови экспериментальных животных относительно крыс группы-прототипа на 10,0% ниже, диеновых конъюгатов - на 16,4%, малонового диальдегида - на 14,6%.

На 28 день эксперимента содержание продуктов пероксидации в крови контрольных (облучаемых) животных достоверно выше в сравнении с интактной группой крыс: уровень гидроперекисей липидов - на 26,2% (р<0,05), диеновых конъюгатов - на 28,5% (р<0,01), малонового диальдегида - на 40,5% (р<0,05). В крови животных экспериментальной группы содержание гидроперекисей липидов ниже на 12,7% относительно контроля (р<0,05), диеновых конъюгатов - на 23,9% (р<0,001), малонового диальдегида - на 23,8%. Сравнительная оценка стабилизирующей активности в отношении накопления продуктов радикального характера настоя травы звездчатки (экспериментальная группа) и настоя листьев крапивы, березы, подорожника (прототип) показала практическую идентичность полученных результатов на 28 день эксперимента.

Повышение интенсивности процессов перекисного окисления липидов биомембран в условиях ультрафиолетового облучения сопровождается снижением активности компонентов АОС в крови облучаемых животных в сравнении с интактными крысами на 14 день эксперимента (таблица 2): уровень церулоплазмина в крови контрольных (облучаемых) животных ниже на 28,2% (р<0,01), витамина Е - на 31,0% (р<0,01).

В крови экспериментальных животных содержание церулоплазмина достоверно выше на 19,9% по сравнению с контрольной группой крыс (р<0,05), уровень витамина Е - на 19,1%) (р<0,05). Сравнительная оценка результатов исследования активности компонентов АОС в крови животных экспериментальной группы и группы-прототипа в конце второй недели эксперимента показывает более выраженное антиоксидантное действие у настоя травы звездчатки (содержание церулоплазмина выше на 14,1%, витамина Е - на 7,5%).

На 28 день эксперимента в условиях ультрафиолетового облучения (контроль) наблюдается снижение уровня церулоплазмина на 34,2% относительно интактной группы (р<0,001), витамина Е - на 31,2% (р<0,01). В крови крыс экспериментальной группы содержание церулоплазмина выше относительно контроля на 9,7%, витамина Е - на 24,9% (р<0,05). Анализируя исследуемые показатели в динамике, важно отметить, что наиболее стойкий фармакологический эффект (антиоксидантный) регистрируется к концу второй недели эксперимента.

Активность ферментов антиоксидантной системы при ультрафиолетовом облучении изменяется соответственно характеру вариабельности основных компонентов к концу второй и четвертой недель опыта (таблица 3): активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в крови контрольных крыс ниже относительно интактной группы на 21,5% (14 день, р<0,05) и 17,0% (28 день, р<0,05), каталазы - на 34,4% и 31,6% соответственно (р<0,01). Активность фермента АОС глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в крови экспериментальной группы животных на 14 день эксперимента достоверно выше на 20% по сравнению с контролем (р<0,05), каталазы - на 34,8% (р<0,01) и несколько снижается к концу опыта. Сравнительная эффективность настоя травы звездчатки и настоя листьев крапивы, березы, подорожника (прототип) свидетельствует о преобладающем активирующем влиянии на состояние антиоксидантной системы у заявленного способа, причем в отношении ферментной активности - как на 14, так и на 28 день исследований.

Таким образом, экспериментально установлено стабилизирующее действие настоя травы звездчатки на процессы перекисного окисления липидов биомембран в условиях ультрафиолетового облучения, основанное на снижении содержания продуктов пероксидации и увеличении активности основных компонентов антиоксидантной системы в крови облучаемых животных, что дает основание рекомендовать настой травы звездчатки к применению для коррекции процессов перекисного окисления липидов на фоне ультрафиолетового облучения.

В целом, базируясь на полученных экспериментальных результатах, предложенный способ (введение настоя травы звездчатки) обеспечивает сокращение курса фитокоррекции процессов пероксидации в условиях ультрафиолетового облучения до 14 дней в сравнении с прототипом, проявляя более выраженный фармакологический (антиоксидантный) эффект.

Технический результат использования изобретения заключается в сокращении длительности курса фитокоррекции процессов пероксидации до 14 дней в сравнении с прототипом при ультрафиолетовом облучении в условиях перорального введения настоя травы звездчатки, обладающего антиоксидантной активностью.