×
10.11.2014
216.013.03a6

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЦИДИВИРОВАНИЯ САРКОМ МЯГКИХ ТКАНЕЙ

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива. Сущностью изобретения является то, что определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход. Разработанный способ обеспечивает повышение точности и информативности прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей. 2 пр., 1 табл.
Основные результаты: Способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей, включающий иммуногистохимическое исследование ткани удаленной опухоли, отличающийся тем, что определяют наличие клеток, экспрессирующих белки EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, при выявлении клеток с гиперэкспрессией белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, при выявлении клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют благоприятный исход.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива.

Из литературных источников известен способ прогнозирования метастазов у больных раком желудка, в котором в качестве одного из маркеров метастазирования используется фактор ингибитора апоптоза bcl-2 (RU 2445632 C1, опубл. 20.03.2012 г., Бюл. №8, G01N /33). Способ включает в себя определение маркера пролиферативной активности Ki-67 и маркера апоптоза p53, отличающийся тем, что у больных раком желудка различного морфологического строения проводят иммуногистохимическое исследование (ИГХ), дополнительно определяют маркер апоптоза bcl-2 и устанавливают, что при абсолютных значениях при перстневидно-клеточном раке: p53 - 10%, bcl-2 - 10%, Ki-67 - 12%; при недифференцированном раке: p53 - 13%, bcl-2 - 11%, Ki-67 - 9%; при аденокарциноме: p53 - 10%, bcl-2 - 9%, Ki-67 - 12% прогнозируют возникновение метастазов в лимфоузлах, а при p53 - 6%, bcl-2 - 5%, Ki-67 - 10% прогнозируют отсутствие метастатического поражения лимфоузлов.

Известен способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров апоптоза Bax и Bcl-2 (см. RU 2242766 C1, G01N 33/68, опубл. 20.12.2004). Способ включает иммуногистохимическое определение в удаленной опухоли наличия клеток, экспрессирующих Bax, и отличается тем, что дополнительно определяют наличие клеток, экспрессирующих Bcl-2, и если первые выявляют, а вторые не выявляют, то прогнозируют высокую вероятность метастазирования. Однако приведенные известные исследования в совокупности факторов, выявляемых при иммуногистохимическом исследовании не обеспечивают прогнозирование неблагоприятного течения сарком мягких тканей.

Известен способ прогнозирования рецидива заболевания, в котором до и после операции по удалению саркомы мягких тканей у мужчин и женщин проводят биохимическое определение уровня креатинкиназы в крови больного и при показателях фермента до и после операции в пределах нормы прогнозируют длительный безрецидивный период, а при уровне фермента, значительно превышающем норму после операции, прогнозируют появление рецидива в ближайшие месяцы после операции (RU 2471191 C2, опубл. 27.12.2012, Бюл. №36).

Однако на наш взгляд предлагаемый авторами способ прогнозирования рецидива опухолевого образования по уровню креатинкиназы не совсем специфичен для сарком мягких тканей.

Техническим результатом предлагаемого нами изобретения является повышение точности и информативности способа прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей.

Технический результат достигают тем, что дополнительно определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход.

Выбор в качестве маркеров метастазирования сарком мягких тканей таких белков, как EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, обусловлен их ролью в развитии рецидивирующего процесса. Так, белок CD34 локализуется в клетках эндотелия новообразованных тонкостенных сосудов и регулирует неоангиогенез. Белок bcl-2 экспрессируется на мембранах клеток опухолей, регулирует процессы апоптоза. Белок EGFR - трансмембранный гликопротеин, запускает внутриклеточный сигнальные каскады, приводящие к повышению пролиферации и росту клеток, ангиогенезу, метастазированию. Белок bcl-6 регулирует степень пролиферации и роста клеток опухоли.

Выбранный нами набор белков позволил оценить биологические потенции мягкотканных сарком, позволяющие дать оценку их прогрессии, рецидивирования, неоангиогенеза.

В таблице 1 представлены результаты ретроспективного исследования иммуногистохимических маркеров EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 в срезах тканей опухолей у 20 пациентов с рецидивирующей саркомой мягких тканей в анамнезе (1 группа) и у 20 пациентов с благоприятным исходом (без рецидивов) (2 группа). При сравнении результатов исследования между двумя группами пациентов обнаружено, что у пациентов с рецидивирующей саркомой мягких тканей наблюдалась гиперэкспрессия EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 белков, а у пациентов с саркомой мягких тканей без рецидивов наблюдалась слабая экспрессия белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2.

Маркер ИГХ 1 группа пациентов, количество (%) экспрессирующих клеток, n=20 p<0,05 2 группа пациентов, количество (%) экспрессирующих клеток, n=20 p<0,05
EGFR 70% 10%
CD 34 100% 7%
Bcl 6 73% 20%
Bcl 2 65% 10%

Подобных иммуногистохимических исследований при изучении прогнозирования сарком мягких тканей в доступной нам научно-медицинской и патентной литературе не встречалось.

Сравнительный анализ известных способов прогнозирования течения заболевания и предлагаемого нами способа позволяет выявить его новизну и отличия от известных.

Новизна способа прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей заключается в использовании дополнительных маркеров, отвечающих за пролиферацию и рост клеток (EGFR, bcl 6), апоптоз (bcl 2) и за ангиогенез (CD 34) с целью повышения точности прогноза рецидивирования заболевания после оперативного удаления опухоли.

Предлагаемый нами способ прогнозирования осуществляют следующим образом.

1. После удаления опухоли мягких тканей готовили из стандартного блока с опухолью 2 парафиновых среза толщиной 3-5 микрон по стандартной методике, депарафинировали в ксилоле и регидратировали в батарее спиртов. Четыре среза использовали для проведения иммуногистохимической реакции с маркерами EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2. Последовательность этапов проведения реакции с каждым из маркеров совпадала.

2. Иммуногистохимическое исследование по оценке экспрессии EGFR, CD 34, Вс12, Вс16 проводили по стандартной методике. Для открытия антигенных детерминант проводили обработку срезов в цитратном буфере [pH 6,0] в течение 30 минут при 95°C на водяной бане.

3. Инкубацию с первичными антителами проводили в течение ночи при 4°C. В качестве первичных антител при оценке экспрессии EGFR, CD 34, Вс12, Вс16 использовали мышиные моноклональные антитела к данным маркерам (разведение EGFR - 1:70, CD 34-1:150, bcl 6 - RTU, bcl-2 - 1:100, фирма производитель DAKO Corp).

4. Для визуализации реакции антиген-антитело использовали стрептавидин-биотиновую тест-систему [DAKO Corp] согласно инструкции. В качестве хромогена использовали ДАБ+[DAKO Corp].

5. Затем срезы докрашивали гематоксилином и заключали в бальзам.

6. Реакцию оценивали с применением светового микроскопа (увеличение ×40) по следующим критериям. Количество положительных клеток оценивали в зонах, содержащих их максимальное количество. В качестве негативного контроля использовали иммуногистохимическую реакцию без добавления первичных антител.

При наличии клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 оценивали прогноз для пациента как неблагоприятный (развитие рецидивов в короткие сроки), а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогноз расценивался как благоприятный (без рецидивов).

Приводим клинический пример использования способа

Пример 1

Больной А, 49 лет. История болезни №23425/ц.

Образование мягких тканей правого бедра заметил в августе 2007 года. Самостоятельно обратился в РНИОИ.

Отлечен комплексным методом лечения.

21.11.2007 года выполнена операция - удаление опухоли мягких тканей правого бедра.

Гистологическое заключение №982276-282/07 - злокачественная фиброзная гистиоцитома, гигантоклеточный вариант, обширные очаги некроза, степень дифференцировки G2 (умереннодифференцированная).

Данные иммуногистохимического исследования парафинового среза опухоли: выявлено EGFR - позитивных клеток 70%, CD 34 - позитивных клеток 100%, bcl 6 - позитивных клеток 73%, bcl 2 - позитивных клеток 65%. Больного отнесли в группу высокого риска развития метастазов и сократили интервалы между визитами к врачу.

С 20.12.2007 г. по 30.12.2007 г. прошел лучевое лечение в СОД 50 Гр на послеоперационный рубец и пути лимфооттока.

С 17.01.2008 г. по 22.01.2008 г. прошел 2 курса адъювантной химиотерапии:

Доксорубицин 100 мг, Циклофосфан 1600 мг, Цисплатин 100 мг.

В марте 2009 года обнаружено образование в послеоперационном рубце. Диагностирован рецидив опухоли.

30.03.2009 г. выполнена операция: широкое иссечение рецидива опухоли мягких тканей правого бедра.

Пример 2

Больная Б, 74 года. История болезни №2251/ф.

В сентябре 2004 г. заметила опухоль в левой пахово-подвздошной области, обратилась к врачу по месту жительства, направлена в РНИОИ.

Отлечена комплексным методом лечения.

02.03.2005 года выполнена операция: удаление саркомы мягких тканей левой паховой области.

Гистологическое заключение №95234-235/05 - злокачественная фиброзная гистиоцитома, гигантоклеточный вариант, обширные очаги некроза, степень дифференцировки G3.

По данным иммуногистохимического исследования парафинового среза опухоли выявлено EGFR - позитивных клеток 10%, CD 34 - позитивных клеток 7%, bcl 6 - позитивных клеток 24%, bcl 2 - позитивных клеток 10%, что расценено нами как благоприятный прогноз.

Прошла курс в СОД 40 Гр после операции на послеоперационный рубец и пути лимфооттока.

С 7.05.2005 г. по 15.05.2005 г. - прошла 3 курса адъювантной химиотерапии по схеме:

Винкристин 2 мг, доксорубицин 100 мг, циклофосфан 1200 мг

Больная планово проходила диспансерное наблюдение в РНИОИ, данных за рецидив в послеоперационном рубце, метастазирование нет.

Последняя явка 14.12.2012 г. - состояние больной удовлетворительное, жалоб не предъявляет. Послеоперационный рубец без признаков рецидивирования.

Таким способом был рассчитан прогноз 20 больным.

Разработанный способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей является промышленно применимым. С помощью этих прогностических факторов можно прогнозировать исход заболевания и планировать лечебные мероприятия.

Способ прогнозирования рецидивирования сарком мягких тканей, включающий иммуногистохимическое исследование ткани удаленной опухоли, отличающийся тем, что определяют наличие клеток, экспрессирующих белки EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, при выявлении клеток с гиперэкспрессией белков EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, при выявлении клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют благоприятный исход.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 101-110 of 110 items.
20.01.2018
№218.016.187a

Способ прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки рта

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта. Сущностью изобретения является то, что в ткани опухоли, взятой во время оперативного вмешательства, определяют уровень...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002635535
Дата охранного документа: 13.11.2017
20.01.2018
№218.016.1e33

Способ прогнозирования прогрессирования рака пищевода

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении рака пищевода для прогнозирования развития его прогрессирования. Способ прогнозирования прогрессирования рака пищевода отличается тем, что в гомогенатах образцов ткани опухоли и визуально неизмененной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002640954
Дата охранного документа: 12.01.2018
17.02.2018
№218.016.2dcf

Способ расчета прогноза раннего прогрессирования меланомы кожи

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогноза раннего прогрессирования меланомы кожи. Способ по изобретению включает определение в гомогенатах образцов ткани опухоли и прилежащей к ней визуально неизмененной ткани (перитуморальной зоне), взятых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002643761
Дата охранного документа: 05.02.2018
04.04.2018
№218.016.3543

Способ лечения лучевых повреждений мочевого пузыря

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения лучевых повреждений мочевого пузыря. Способ заключается в том, что во все вершины ромба Михаэлиса вводят по 0,3 мл аутологичной дендритно-клеточной вакцины, полученной с использованием антигенов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002645957
Дата охранного документа: 28.02.2018
11.03.2019
№219.016.d609

Способ премедикации у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией, контролируемой ингибиторами ангиотензинпревращающего фермента

Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии и онкоурологии, и может быть использовано при проведении премедикации и последующего анестезиологического пособия при оперативных вмешательствах у больных локализованным раком почки с артериальной гипертензией I-II степени, принимающих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002681496
Дата охранного документа: 06.03.2019
27.04.2019
№219.017.3caf

Способ выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей

Изобретение относится к медицине, а именно к детской онкологии, хирургии и лучевой диагностике, и может быть использовано для выбора доступа при удалении ганглионевром средостения у детей. В предоперационном периоде пациентам выполняют компьютерную томографию грудной клетки. Измеряют объем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686043
Дата охранного документа: 23.04.2019
31.05.2019
№219.017.7013

Способ прогнозирования рецидивов менингиом в послеоперационный период

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии и онкологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидивов менингиом в послеоперационном периоде. Для этого во время операции по удалению менингиомы получают фрагмент опухолевой ткани. После чего фрагмент замораживают и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689795
Дата охранного документа: 29.05.2019
01.06.2019
№219.017.71d3

Способ коррекции дерматологических реакций у онкологических больных при применении терапии ингибиторами egfr

Изобретение относится к медицине, в частности онкологии, и может быть использовано для лечения больных с кожной токсичностью. Способ включает выполнение лечебного плазмафереза при развитии кожной токсичности 2-3-й степени в сроки за 24 часа до и через 24 часа после введения ингибитора EGFR, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689993
Дата охранного документа: 30.05.2019
02.08.2019
№219.017.bb85

Способ комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в качестве комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости. Для этого перед проведением хирургического лечения проводят два курса деносумаба по 120 мг 1 раз в месяц в качестве неоадъювантной таргетной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696097
Дата охранного документа: 31.07.2019
07.07.2020
№220.018.3032

Способ патологоанатомического вскрытия коронарных артерий после стентирования

Изобретение относится к медицине, в частности к патологической анатомии, судебно-медицинской экспертизе, сердечно-сосудистой хирургии и может быть использовано для патологоанатомического вскрытия коронарных артерий после их стентирования. Способ позволяет сопоставить данные аутопсии с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002725858
Дата охранного документа: 06.07.2020
Showing 131-140 of 166 items.
19.07.2019
№219.017.b640

Способ прогнозирования течения патологического процесса при первично-операбельном люминальном без гиперэкспрессии her2neu раке молочной железы у женщин в постменопаузе

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при прогнозировании течения патологического процесса при люминальном без гиперэкспрессии Her2neu первично-операбельном раке молочной железы у женщин в постменопаузе. Для этого при иммуногистохимическом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694843
Дата охранного документа: 17.07.2019
01.08.2019
№219.017.bb0d

Способ прогнозирования исхода заболевания у больных раком желудка после хирургического лечения

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и представляет собой способ прогнозирования исхода заболевания у больных раком желудка после хирургического лечения, включающий определение в образцах опухолевой ткани, взятых во время операции, содержания малонового диальдегида и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696054
Дата охранного документа: 30.07.2019
02.08.2019
№219.017.bb85

Способ комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в качестве комбинированного лечения гигантоклеточной опухоли кости. Для этого перед проведением хирургического лечения проводят два курса деносумаба по 120 мг 1 раз в месяц в качестве неоадъювантной таргетной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696097
Дата охранного документа: 31.07.2019
03.09.2019
№219.017.c6bf

Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком тела матки на основе анализа экспрессии генов magea1, mageb2 и prame1

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной биологии, онкологии, и предназначено для прогнозирования развития метастазов у больных раком тела матки. Осуществляют выделение тотальной РНК из тканевых проб матки с помощью метода гуанидин-тиоционат-фенол-хлороформной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002698895
Дата охранного документа: 02.09.2019
06.09.2019
№219.017.c7f7

Способ диагностики аденокарциномы поджелудочной железы (пж) и метастазов в её паренхиму

Изобретение относится к медицине, а именно к магнитно-резонансной томографии, абдоминальной хирургии и гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики аденокарциномы поджелудочной железы (ПЖ) и метастазов в ее паренхиму. Проводят магнитно-резонансное исследование органов брюшной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002699277
Дата охранного документа: 04.09.2019
02.10.2019
№219.017.cd60

Способ формирования аппаратного пищеводного анастомоза

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть применимо для формирования аппаратного пищеводного анастомоза. После мобилизации опухоли в нижней трети пищевода в заднем средостении без вскрытия плевральной полости накладывают угловой пищеводный зажим выше верхнего края...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002701132
Дата охранного документа: 24.09.2019
06.10.2019
№219.017.d339

Способ диагностики острого повреждения почек после органосохраняющего хирургического лечения локализованного рака почки

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для диагностики острого повреждения почек после органосохраняющего хирургического лечения локализованного рака почки. На предоперационном этапе в венозной крови определяют следующие показатели: концентрацию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002702023
Дата охранного документа: 04.10.2019
01.11.2019
№219.017.dc63

Способ повышения эффективности хирургического лечения распространенного рака органов полости рта и ротоглотки с использованием оростомы

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и может быть применимо для повышения эффективности хирургического лечения распространенного рака органов полости рта и ротоглотки с использованием оростомы. Удаляют опухоль. Формируют четырехугольный кожный лоскут шириной 22,0 мм, высотой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002704599
Дата охранного документа: 29.10.2019
19.11.2019
№219.017.e38e

Способ лечения гнойного холангита при остром билиарном панкреатите

Изобретение относится к медицине, а именно к абдоминальной хирургии, и может быть использовано для лечения больных с острым билиарным панкреатитом, осложненным гнойным холангитом. Выполняют эндоскопическую папилосфинктеротомию (ЭПСТ) и ретроградную холангиопанкреатографию (РХПГ). Устанавливают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002706369
Дата охранного документа: 18.11.2019
22.12.2019
№219.017.f10e

Способ дифференциальной диагностики глиом на основании анализа экспрессии генов и микро-рнк

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ дифференциальной диагностики глиом на основании анализа экспрессии генов и микро-РНК, включающий выделение тотальной РНК из тканевых проб глиом и перифокальной зоны, обратную транскрипцию, с последующей амплификацией в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002709651
Дата охранного документа: 19.12.2019
+ добавить свой РИД