Результат интеллектуальной деятельности: ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФАКТОРА ВИЛЛЕБРАНДА КАК СПОСОБ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ SARS-COV-2

Изобретение относится к медицине, а именно клинической лабораторной диагностике. Может применяться в интенсивной терапии и пульмонологии для диагностики тяжести течения инфекции SARS-CoV-2.

На данный момент известен ряд способов диагностики вируса SARS-CoV-2 на основании которых определяют тяжесть течения болезни Covid-19. Наиболее известный из них - обнаружение уникальных последовательностей вирусной РНК с помощью метода амплификации нуклеиновых кислот (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени) с дальнейшим подтверждением с помощью секвенирования нуклеиновых кислот при необходимости [1]. Данный метод позволяет определить наличие РНК вируса в исследуемом материале. Недостатками данного метода является его качественное выполнение, отсутствие определенности, какие именно биологические образцы нужно собирать и в какой период заболевания, а также данный тест не отражает тяжесть течения заболевания [2].

Известен способ диагностики вируса SARS-CoV-2 и определения тяжести течения инфекции с помощью выявления антител IgM и IgG к вирусу. Данные лабораторные тесты на антитела являются косвенными тестами, так как они не обнаруживают вирус, а скорее выявляют установленную сероконверсию к предыдущей инфекции или раннюю сероконверсию к текущей инфекции [2]. Недостатками данного способа также является их качественное выполнение, большая частота получения ложных результатов и отсутствие связи с тяжестью течения заболевания [2].

Известны способы диагностики вируса SARS-CoV-2 и определения тяжести заболевания с помощью различных общеклинических лабораторных показателей, отражающих полиорганную дисфункцию (снижение уровня альбумина, повышение уровня лактатдегидрогеназы, уменьшение количества лимфоцитов, увеличение скорости оседания эритроцитов, повышение уровня D-димеров) [3]. Общим недостатком данных способов является то, что изменения данных показателей характерно для множества заболеваний и состояний. Кроме того, имеются крайне противоречивые данные по связи изменения данных показателей с тяжестью течения инфекции SARS-CoV-2 [3].

Наиболее близким к нашему способу является способ определения тяжести течения инфекции SARS-CoV-2 путем определения уровня в сыворотке пациента ангиотензинпревращающего фермента 2 (АСЕ2), который был ранее идентифицирован как функциональный рецептор для вируса SARS-CoV-2 [4]. Дисфункция АСЕ2 приводит к аномальной активации ренин-ангиотензиновой системы и системному эндотелииту, который может быть связан с аномальной коагуляцией и сепсисом. Существенным недостатком данного метода служит существенная дороговизна определения АСЕ2 и невозможность его определять рутинно в клинических лабораториях учреждений здравоохранения.

Технической задачей, для решения которой направлено настоящее изобретение, является создание способа быстрой и точной диагностики тяжести течения инфекции SARS-CoV-2.

Задача достигается следующим образом: в способе лабораторной диагностики тяжести течения инфекции SARS-CoV-2, заключающийся в том, что у пациента с подтвержденным лабораторно диагнозом SARS-CoV-2 дополнительно определяют уровень фактора Виллебранда (ФВ) в сыворотке крови и при увеличении уровня ФВ в 1,3-1,5 раз от верхней границы нормы - диагностируют легкое течение инфекции, в 1,51-2,5 раз от верхней границы нормы - средней тяжести течение инфекции, в более 2,51 раз от верхней границы нормы - тяжелое течение инфекции.

Для решения поставленной задачи нами проведено пилотное кагортное исследование у 16 пациентов отделения анестезиологии и реанимации, из которых 6 мужчин и 10 женщин, возраст наблюдаемых 59,1 (35,0-85,0) лет, вес 94,9 (70,0-130,0) кг, рост 169,4 (163,0-181,0) см. Все пациенты были с подтвержденной инфекцией COVID-19. Диагноз COVID-19 инфекции был подтвержден методом ОТ-ПЦР и КТ органов грудной клетки, на котором были соответствующие изменения по типу матового стекла и консолидации. Забор крови проводился в первые сутки пребывания пациентов в отделении интенсивной терапии. Во время забора материала для исследования у пациентов имелся умеренный или тяжелый респираторный дистресс синдром, согласно Берлинскому определению и классификации. Получены следующие результаты: у всех пациентов значительно повышена активность фактора фон Виллебранда -456,7±164,4%.

Использование данного способа подтверждается конкретными клиническими примерами:

Пример 1.

Пациент Б. 35 лет поступил в отделение анестезиологии и реанимации с клиническим диагнозом: внегоспитальная двусторонняя полисегментарная пневмония COVID-19 легкое течение ДН0-I. На КТ органов грудной клетки пациента объем поражения легочной ткани составил 23%. Коэффициент оксигенации (отношение парциального напряжения кислорода в артериальной крови к фракции кислорода на вдохе) был равен 270. Уровень фактора Виллебранда в сыворотке крови при поступлении составил 246,8% (при верхней границе нормы 169%).

Пример 2.

Пациентка Н., 71 год, поступила в отделение анестезиологии и реанимации с клиническим диагнозом: двусторонняя полисегментарная пневмония COVID-19 средней тяжести течение ДНI-II. Соп. ИБС:

атеросклеротический кардиосклероз. АГ 1, риск 4. HI. СД 2 тип. На КТ органов грудной клетки пациента объем поражения легочной ткани составил 42%. Коэффициент оксигенации (отношение парциального напряжения кислорода в артериальной крови к фракции кислорода на вдохе) был равен 165. Активность фактора Виллебранда при поступлении составила 328% при верхней границе нормы 169%.

Пример 3.

Пациент Б., 85 лет, поступил в отделение анестезиологии и реанимации с клиническим диагнозом: внегоспитальная двусторонняя полисегментарная пневмония COVID-19 тяжелое течение ДНII-III. Соп. ИБС: атеросклеротический кардиосклероз. АГ 2, риск 4. H1. На КТ органов грудной клетки пациента объем поражения легочной ткани составил 68%. Коэффициент оксигенации (отношение парциального напряжения кислорода в артериальной крови к фракции кислорода на вдохе) был равен 134. Активность фактора Виллебранда при поступлении составила 549% при верхней границе нормы 169%.

Источники информации:

1. Лабораторное тестирование случаев, подозреваемых на коронавирусную инфекцию (COVID-19) временное руководство. ВОЗ.

2. Antonio La Marca, Martina Capuzzo, Tiziana Paglia, Laura Roli, Tommaso Trenti3, Scott M. Nelson. Testing for SARS-CoV-2 (COVID-19): a systematic review and clinical guide to molecular and serological in-vitro diagnostic assays // RBMO, 2020 doi: 10.1016/j.rbmo. 2020.06.001

3. Gangqiang Guo, Lele Ye, Kan Pan, Yu Chen, Dong Xing, Kejing Yan, Zhiyuan Chen, Ning Ding, Wenshu Li, Hong Huang, Lifang Zhang, Xiaokun Li, Xiangyang Xue. New Insights of Emerging SARS-CoV-2: Epidemiology, Etiology, Clinical Features, Clinical Treatment, and Prevention// Front. Cell Dev. Biol., 22 May 2020 doi: 10.3389/fcell. 2020.00410

4. Jie Wang.Ardan M. Saguner.Jiaqi An.Yuye Ning.Yang Yan.Guoliang Li. Dysfunctional Coagulation in COVID-19: From Cellto Bedside // Adv Ther (2020) 37:3033-3039 doi: 10.1007/s12325-020-01399-7