МУТАНТЫ БЕЛКА F RSV

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

По настоящей заявке испрашивается приоритет временной заявки на патент США № 62/387270, поданной 23 декабря 2015 года, и временной заявки на патент США № 62/421184, поданной 11 ноября 2016 года. Полное содержание каждой из вышеуказанных заявок включено в настоящее описание в качестве ссылки.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к вакцинам в общем, и в частности, к вакцинам против респираторно-синцитиальных вирусов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОМУ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Респираторно-синцитиальный вирус, или RSV, представляет собой респираторный вирус, который инфицирует легкие и дыхательные пути. RSV является ведущей причиной серьезного вирусного заболевания нижних дыхательных путей у младенцев по всему миру и является важной причиной респираторных заболеваний в пожилом возрасте. Однако для предупреждения инфекции RSV отсутствуют одобренные вакцины.

RSV является представителем семейства Paramyxoviridae. Его геном состоит из одноцепочечной отрицательной молекулы РНК, которая кодирует 11 белков, включая девять структурных белков (три гликопротеина и шесть внутренних белков) и два неструктурных белка. Структурные белки включают три трансмембранных поверхностных гликопротеина: белок прикрепления G, белок слияния F и малый гидрофобный белок SH. Существует два подтипа RSV: A и B. Они отличаются в основном гликопротеином G, в то время как последовательность гликопротеина F является более консервативной между двумя подтипами.

Зрелый гликопротеин F имеет три общих домена: эктодомен (ED), трансмембранный домен (TM) и цитоплазматическую хвостовую часть (CT). CT содержит один пальмитоилированный остаток цистеина.

Гликопротеин F RSV человека первоначально транслируется с мРНК в качестве единого полипептида-предшественника из 574 аминокислот (обозначаемый как "F0" или "F0-предшественник"), который содержит последовательность сигнального пептида (аминокислоты 1-25) на N-конце. При трансляции сигнальный пептид удаляется сигнальной пептидазой в эндоплазматической сети. Остальная часть F0-предшественника (т.е. остатки 26-574) может далее расщепляться в двух многоосновных участках (а.к. 109/110 и 136/137) клеточными протеазами (в частности, фурином), удаляя промежуточную последовательность из 27 аминокислот, обозначаемую как pep27 (аминокислоты 110-136) и образуя два связанных фрагмента, обозначаемых как F1 (C-концевая часть; аминокислоты 137-574) и F2 (N-концевая часть; аминокислоты 26-109). F1 содержит гидрофобный слитый пептид на его N-конце и две семичленных повторяющихся области (HRA и HRB). HRA расположен близко к пептиду слияния, и HRB расположен близко к TM-домену. Фрагменты F1 и F2 связаны вместе через две дисульфидных связи. Либо нерасщепленный белок F0 без последовательности сигнального пептида, либо гетеродимер F1-F2, может образовывать протомер F RSV. Три таких протомера собираются, образуя конечный комплекс белка F RSV, который является гомотримером трех протомеров.

Аминокислотная последовательность F-белков подтипов A и B идентична приблизительно на 90 процентов. Пример последовательности полипептида F0-предшественника для подтипа A представлен в SEQ ID NO: 1 (штамм A2; GenBank GI: 138251; Swiss Prot P03420), и для подтипа B в SEQ ID NO: 2 (штамм 18537; GenBank GI: 138250; Swiss Prot P13843). Как SEQ ID NO: 1, так и SEQ ID NO: 2, являются последовательностями из 574 аминокислот. Последовательность сигнального пептида для SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2 также была описана как аминокислоты 1-25 (GenBank и UniProt). В обеих последовательностях TM-домен находится приблизительно от 530 до 550 аминокислоты, но альтернативно сообщалось, что он находится в положении 525-548. Цитоплазматическая хвостовая часть начинается либо на аминокислоте 548, либо на аминокислоте 550, и оканчивается аминокислотой 574, причем пальмитоилированный остаток цистеина расположен на аминокислоте 550.

Одним из основных антигенов, исследуемых для субъединичных вакцин против RSV, является белок F. Тример белка F RSV опосредует слияние между мембраной вириона и клеточной мембраной хозяина и также стимулирует образование синцития. В вирионе перед слиянием с мембраной клетки-хозяина наибольшая популяция молекул F образует подобную леденцу на палочке структуру, причем TM-домен заякоривается на вирусной оболочке [Dormitzer, P.R., Grandi, G., Rappuoli, R., Nature Reviews Microbiol, 10, 807, 2012.]. Эта конформация обозначается как префузионная конформация. Префузионный F RSV распознается моноклональными антителами (mAb) D25, AM22 и MPE8, не различая олигомерные состояния. Префузионные тримеры F специфически распознаются mAb AM14 [Gilman MS, Moin SM, Mas V et al. Characterization of a prefusion-specific antibody that recognizes a quaternary, cleavage-dependent epitope on the RSV fusion glycoprotein. PLoS Pathogens,11(7), 2015]. В процессе вхождения RSV в клетки происходит перестройка белка F из префузионного состояния (которое может обозначаться в настоящем описании как "пре-F"), через промежуточную удлиненную структуру в постфузионное состояние ("пост-F"). В ходе этой перестройки C-концевая суперспираль префузионной молекулы диссоциирует на три составных цепи, которые затем оборачивают глобулярную головку и связывают три дополнительных спирали с образованием постфузионного шестиспирального пучка. Если префузионный тример F RSV подвергнуть воздействию жестких химических или физических условий, таких как повышенная температура, произойдут его структурные изменения. Первоначально происходит утрата тримерной структуры (по меньшей мере локально в молекуле), затем перестройка в постфузионную форму, а затем денатурация доменов.

Для предотвращения вхождения вируса F-специфические нейтрализующие антитела предположительно должны связывать префузионную конформацию F на вирионе или потенциально удлиненную промежуточную структуру, перед слиянием вирусной оболочки с клеточной мембраной. Таким образом, префузионная форма белка F считается предпочтительной конформацией в качестве желаемого вакцинного антигена [Ngwuta, J.O., Chen, M., Modjarrad, K., Joyce, M.G., Kanekiyo, M., Kumar, A., Yassine, H.M., Moin, S.M., Killikelly, A.M., Chuang, G.Y., Druz, A., Georgiev, I.S., Rundlet, E.J., Sastry, M., Stewart-Jones, G.B., Yang. Y., Zhang, B., Nason, M.C., Capella, C., Peeples, M., Ledgerwood, J. E., Mclellan, J.S., Kwong, P.D., Graham, B.S., Science Translat. Med., 14, 7, 309 (2015)]. При экстракции из мембраны с использованием поверхностно-активных веществ, таких как Triton X-100, Triton X-114, NP-40, Brij-35, Brij-58, Tween 20, Tween 80, октилглюкозид, октилтиоглюкозид, SDS, CHAPS, CHAPSO, или экспрессии в качестве эктодомена, физическом или химическом стрессовом воздействии, или хранении, гликопротеин F легко конвертируется в постфузионную форму [McLellan JS, Chen M, Leung S et al. Structure of RSV fusion glycoprotein trimer bound to a pre-fusion-specific neutralizing antibody. Science 340, 1113-1117 (2013); Chaiwatpongsakorn, S., Epand, R.F., Collins, P.L., Epand R.M., Peeples, M.E., J Virol. 85(8):3968-77 (2011); Yunus, A.S., Jackson T.P., Crisafi, K., Burimski, I., Kilgore, N.R., Zoumplis, D., Allaway, G.P., Wild, C.T., Salzwedel, K. Virology. 2010 Jan 20;396(2):226-37]. Таким образом, получение префузионного F в качестве вакцинного антигена остается затруднительным. Поскольку нейтрализующие и защитные антитела действуют, препятствуя вхождению вируса, постулируется, что можно ожидать, что антиген F, который индуцирует только специфичные к постфузионной форме антитела, не будет настолько же эффективным, как антиген, который индуцирует специфичные к префузионной форме антитела. Таким образом, считается более желательным использовать вакцину на основе F, которая содержит иммуноген белка F в префузионной форме (или потенциально в удлиненной промежуточной форме). На сегодняшний день усилия не привели к вакцине RSV, для которой в клинике продемонстрировано, что она индуцирует достаточные уровни защиты для обоснования лицензирования вакцины против RSV. Таким образом, существует потребность в иммуногенах, происходящих из б F елка RSV, которые имеют улучшенные свойства, такие как усиленная иммуногенность или увеличенная стабильность префузионной формы, по сравнению с соответствующим нативным F-белком RSV, а также в композициях, содержащих такой иммуноген, таких как вакцина.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В некоторых аспектах настоящее изобретение относится к мутантам белков F дикого типа RSV, где мутанты имеют внесенные мутации в аминокислотной последовательности относительно аминокислотной последовательности соответствующего белка F дикого типа RSV и являются иммуногенными против белка F дикого типа RSV или против вируса, содержащего белок F дикого типа. Мутации аминокислот в мутантах включают аминокислотные замены, делеции или вставки относительно белка F дикого типа RSV.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам белка F дикого типа RSV, где внесенные мутации аминокислот представляют собой мутации пары аминокислотных остатков в белке F дикого типа RSV на пару остатков цистеина ("внесенная способами инженерии мутация на дисульфид"). Внесенная пара остатков цистеина позволяет образование дисульфидной связи между остатками цистеина, которые стабилизируют конформацию белка или олигомерное состояние, такое как префузионная конформация. Примеры конкретных пар таких мутаций включают: 55C и 188C; 155C и 290C; 103C и 148C; и 142C и 371C, такие как S55C и L188C; S155C и S290C; T103C и I148C; и L142C и N371C.

В других вариантах осуществления мутанты белка F RSV включают мутации аминокислот, которые представляют собой одну или несколько заполняющих полость мутаций. Примеры аминокислот, которые могут быть заменены с целью заполнения полости, включают небольшие алифатические (например, Gly, Ala и Val) или небольшие полярные аминокислоты (например, Ser и Thr), и аминокислоты, которые утоплены в префузионной конформации, но открыты для растворителя в постфузионной конформации. Примеры заменяющих аминокислот включают крупные алифатические аминокислоты (Ile, Leu и Met) или крупные ароматические аминокислоты (His, Phe, Tyr и Trp). В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит заполняющую полость мутацию, выбранную из группы, состоящей из:

(1) замена S в положениях 55, 62, 155, 190 или 290 на I, Y, L, H или M;

(2) замена T в положении 54, 58, 189, 219 или 397 на I, Y, L, H или M;

(3) замена G в положении 151 на A или H;

(4) замена A в положении 147 или 298 на I, L, H или M;

(5) замена V в положении 164, 187, 192, 207, 220, 296, 300 или 495 на I, Y, H; и

(6) замена R в положении 106 на W.

В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию, выбранную из группы, состоящей из: T54H, S190I и V296I.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, где мутанты содержат электростатические мутации, которые снижают ионное отталкивание или повышают ионное притяжение между остатками в белке, которые находятся близко друг к другу в свернутой структуре. В некоторых вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит электростатическую замену, которая снижает отталкивающие ионные взаимодействия или повышает притягивающие ионные взаимодействия с кислотными остатками Glu487 и Asp489 из другого протомера тримера F RSV. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит электростатическую мутацию, выбранную из группы, состоящей из:

(1) замена E в положении 82, 92 или 487 на D, F, Q, T, S, L или H;

(2) замена K в положении 315, 394 или 399 на F, M, R, S, L, I, Q или T;

(3) замена D в положении 392, 486 или 489 на H, S, N, T или P; и

(4) замена R в положении 106 или 339 на F, Q, N или W.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, которые содержат комбинацию двух или более различных типов мутаций, выбранных из внесенных способами инженерии мутаций для образования дисульфида, заполняющих полость мутаций и электростатических мутаций. В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту белка F дикого типа RSV, который содержит комбинацию мутаций относительно соответствующего белка F дикого типа RSV, где комбинация мутаций выбрана из группы, состоящей из:

(1) комбинация T103C, I148C, S190I и D486S;

(2) комбинация T54H S55C L188C D486S;

(3) комбинация T54H, T103C, I148C, S190I, V296I и D486S;

(4) комбинация T54H, S55C, L142C, L188C, V296I и N371C;

(5) комбинация S55C, L188C и D486S;

(6) комбинация T54H, S55C, L188C и S190I;

(7) комбинация S55C, L188C, S190I и D486S;

(8) комбинация T54H, S55C, L188C, S190I и D486S;

(9) комбинация S155C, S190I, S29°C и D486S;

(10) комбинация T54H, S55C, L142C, L188C, V296I, N371C, D486S, E487Q и D489S; и

(11) комбинация T54H, S155C, S190I, S29°C и V296I.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к молекулам нуклеиновых кислот, которые кодируют мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании. В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей мутант белка F RSV, где молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

(1) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 8;

(2) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 9;

(3) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 10;

(4) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 11;

(5) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 12;

(6) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 13;

(7) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 14;

(8) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 15;

(9) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 16;

(10) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 17; и

(11) нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 18.

В другом аспекте изобретение относится к композициям, которые содержат (1) мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, или (2) молекулу нуклеиновой кислоты или вектор, кодирующие такой мутант белка F RSV. В некоторых конкретных вариантах осуществления композиции представляют собой фармацевтические композиции, которые содержат мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель. В других конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция представляет собой вакцину.

Также настоящее изобретение относится к применению мутанта белка F RSV, к нуклеиновым кислотам, кодирующим такой мутант белка F RSV, или векторам для экспрессии такого мутанта белка F RSV, или композициям, содержащим мутант белка F RSV или нуклеиновые кислоты. В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу предупреждения инфекции RSV у индивидуума, включающему введение индивидууму эффективного количества фармацевтической композиции, такой как вакцина, содержащей мутант белка F RSV, нуклеиновую кислоту, кодирующую мутант белка F RSV, или вектор, экспрессирующий мутант белка F RSV.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг.1 представлена аминокислотная последовательность матрицы полипептида-предшественника (SEQ ID NO: 3), использованной для конструирования некоторых мутантов белка F RSV, описанных в разделе "Примеры". Полипептид-предшественник включает сигнальную последовательность (остатки 1-25), полипептид F2 (остатки 26-109), последовательность pep27 (остатки 110-136), полипептид F1 (остатки 137-513), происходящий из фибритина T4 домен тримеризации (фолдон; остатки 518-544), распознающую последовательность тромбина (остатки 547-552), гистидиновую метку (остатки 553-558), Streptag II (561-568) и линкерные последовательности (остатки 514-517, 545-546 и 559-560). Также он включает три встречающихся в природе замены (P102A, I379V и M447V) относительно нативной последовательности F RSV, указанной в SEQ ID NO: 1. Участки расщепления фурином представлены как RARR и KKRKRR.

На фиг.2A представлен полиакриламидный гель-электрофорез с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и анализ с использованием вестерн-блоттинга отдельных префузионных мутантов F (pXCS847, pXCS851 и pXCS852) в невосстанавливающих условиях.

На фиг.2B представлены распределения коэффициентов седиментации для отдельных мутантов (pXCS847, pXCS851 и pXCS852), вычисленные в экспериментах по определению скорости седиментации с использованием аналитической ультрацентрифуги.

На фиг.3A и 3B представлены спектры спектроскопии кругового дихроизма (CD) иллюстративных модифицированных белков F RSV с мутациями в конкретных участках. Спектры CD в дальней ультрафиолетовой (УФ) области сконструированных мутантов подтверждают целостность вторичной структуры и спектры CD в ближней УФ-области подтверждают целостность третичной структуры.

На фиг.4 представлено тестирование зависимого от времени стресса для очищенного DS-Cav1 с использованием двух различных моноклональных антител (mAb) D25 и AM14 при двух температурах (50°C и 60°C).

На фиг.5 представлены эксперименты с использованием дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) с очищенным DS-Cav1 (пример 8). Эксперименты проводили, как описано для сконструированных мутантов префузионного F. Сплошная линия - первоначальная сканограмма DSC для образца, пунктирная линия - повторная сканограмма для того же образца, который использовался при первоначальном сканировании. Пик DSC по большей части восстанавливается в ходе повторного сканирования, что указывает на то, что конформационный переход, обнаруженный посредством DSC, является обратимым.

На фиг.6A представлены спектры CD в дальней УФ-области для DS-Cav1 в условиях стрессового воздействия при 60°C (пример 8). Спектры CD регистрировали, как описано выше для сконструированных мутантов префузионного F RSV (пример 6). DS-Cav1 сохраняет определенный спектр CD в дальней УФ-области после инкубации при 60°C вплоть до 2 часов, что указывает на то, что за это время не происходит значительного разворачивания белка.

На фиг.6B представлены спектры CD в ближней УФ-области для DS-Cav1, подвергнутого стрессовому воздействию при 60°C (пример 8). Спектры CD регистрировали, как описано выше для сконструированных мутантов префузионного F RSV (пример 6).

На фиг.7A представлена зависимость от концентрации белка резистентности к термическому стрессу при определении по сохранению эпитопа AM14, специфичного к тримеру префузионного F (пример 8).

На фиг.7B представлена зависимость от концентрации белка резистентности к термическому стрессу при определении по сохранению эпитопа D25, специфичного к префузионному F (пример 8). Образцы белков подвергали серийному разведению и подвергали стрессовому воздействию при 50°C в течение 1 часа. Реактивность D25, оставшуюся после стресса относительно контрольных (не подвергнутых стрессовому воздействию) образцов оценивали в способах анализа ELISA.

На фиг.8 представлены ответы нейтрализующих антител от мышей, иммунизированных DS-Cav1; F дикого типа или мутантами pXCS852, pXCS855, pXCS830, pXCS853, pXCS780, pXCS898, pXCS851, pXCS874, pXCS881, pXCS738 или pXCS847; с фосфатом алюминия в качестве адъюванта или без него. Результаты сообщены в качестве 50% геометрического среднего значения титра (GMT) для 10 мышей на группу. Каждый график рассеяния отражает ответ отдельных мышей всего с 10 животными на группу. Линия в каждой группе указывает на геометрическое среднее значение титра антител, нейтрализующего на 50%. "F дикого типа" относится к рекомбинантной конструкции эктодомена F дикого типа.

На фиг.9A и 9B представлены корреляции между титрами нейтрализующих антител, индуцированных сконструированными мутантами префузионного белка F, и стабильность этих мутантов. Ось y - титры нейтрализующих антител, индуцированных иммунизацией мышей 0,25 мкг антигена и без адъюванта или 0,025 мкг антигена с 0,1 мг/мл адъюванта AlPO4. (Данные представлены в таблице 12.) Ось x - стабильность сконструированных мутантов при определении по остаточной реактивности AM14 после термического стресса (данные представлены в таблице 8B).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, иммуногенным композициям, содержащим мутанты белка F RSV, к способам получения мутантов белка F RSV, композициям, содержащим мутанты белка F RSV, и к нуклеиновым кислотам, которые кодируют мутанты белка F RSV.

A.ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Термин "101F" относится к антителу, описанному в US 2006/0159695 A1, которое имеет вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31.

В рамках изобретения форма единственного числа относится как к единственному числу, так и к множественному числу, если только контекст явно не указывает на иное. Например, термин "антиген" включает единственное или множественное число антигена, и он может считаться эквивалентным выражению "по меньшей мере один антиген".

Термин "адъювант" относится к веществу, способному усиливать. ускорять или продлевать иммунный ответ организма на антиген в вакцине (хотя сам он не нацелен на антиген вакцины). Адъювант может быть включен в вакцинную композицию или может быть введен отдельно от вакцины.

Термин "введение" относится к предоставлению вещества или композиции индивидууму выбранным путем. Введение может быть местным или системным. Например, если выбранный путь является внутримышечным, композицию (такую как композиция, включающая описанный иммуноген) вводят путем введения композиции в мышцу индивидуума.

Термин "AM14" относится к антителу, описанному в WO 2008/147196 A2, которое имеет вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25.

Термин "AM22" относится к антителу, описанному в WO 2011/043643 A1, которое имеет вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, и вариабельный домен легкой цепи. содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27.

Термин "антиген" относится к молекуле, которая может распознаваться антителом. Примеры антигенов включают полипептиды, пептиды, липиды, полисахариды и нуклеиновые кислоты, содержащие антигенные детерминанты, такие как антигенные детерминанты, распознаваемые иммунной клеткой.

Термин "консервативная замена" относится к замене аминокислоты химически сходной аминокислотой. Консервативные аминокислотные замены, обеспечивающие функционально сходные аминокислоты, хорошо известны в данной области. Каждая из следующих шести групп содержит аминокислоты, которые являются консервативными заменами друг для друга:

1) аланин (A), серин (S), треонин (T);

2) аспарагиновая кислота (D), глутаминовая кислота (E);

3) аспарагин (N), глутамин (Q);

4) аргинин (R), лизин (K);

5) изолейцин (I), лейцин (L), метионин (M), валин (V); и

6) фенилаланин (F), тирозин (Y), триптофан (W).

Термин "D25" относится к антителу, описанному в WO 2008/147196 A2, которое имеет вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23.

Термин "вырожденный вариант" эталонного полинуклеотида относится к полинуклеотиду, который отличается нуклеотидной последовательностью от эталонного полинуклеотида, но кодирует ту же полипептидную последовательность, что и эталонный полинуклеотид. Существует 20 природных аминокислот, большинство из которых определяется более чем одним кодоном. Например, все из кодонов CGU, CGC, CGA, CGG, AGA и AGG кодируют аминокислоту аргинин. Таким образом, в каждом положении, где последовательность, кодирующая белок, определяет аргинин, кодон может быть заменен на любой из описанных соответствующих кодонов без изменения кодирующего белка. Вследствие вырожденности генетического кода, любой данный полипептид кодируется большим количеством функционально идентичных нуклеиновых кислот.

Термин "DS-Cav1" относится к версии белка F RSV, имеющей аминокислотную последовательность, описанную в McLellan, et al., Science, 342(6158), 592-598, 2013.

Термин "эффективное количество" относится к количеству вещества, которое является достаточным для достижения желаемого ответа. Например, оно может представлять собой количество, необходимое для ингибирования репликации вируса или для изменения на поддающемся обнаружению уровне видимых симптомов вирусной инфекции.

Термин "эпитоп" (или "антигенная детерминанта" или "антигенный участок") относится к области антигена, с которой связывается антитело, B-клеточный рецептор или T-клеточный рецептор, или на которую они отвечают. Эпитопы могут быть образованы последовательно расположенными аминокислотами или не расположенными последовательно аминокислотами, которые находятся вблизи друг к другу во вторичной, третичной или четвертичной укладке белка. Эпитопы, образованные последовательно расположенными аминокислотами, как правило, сохраняется под действием денатурирующих растворителей, в то время как эпитопы, образованные укладкой более высокого порядка, как правило, утрачиваются при обработке денатурирующими растворителями.

Термин "полипептид F0" (F0) относится к полипептиду-предшественнику белка F RSV, который состоит из сигнальной полипептидной последовательности, последовательности полипептида F1, последовательности полипептида pep27 и последовательности полипептида F2. За редким исключением полипептиды F0 известных штаммов RSV состоят из 574 аминокислот.

Термин "полипептид F1" (F1) относится к полипептидной цепи зрелого белка F RSV. Нативный F1 включает приблизительно остатки 137-574 F0-предшественника RSV и состоит из (от N- к C-концу) внеклеточной области (приблизительно остатки 137-524), трансмембранного домена (приблизительно остатки 525-550) и цитоплазматического домена (приблизительно остатки 551-574). Как используют в рамках изобретения, термин охватывает как нативные полипептиды F1, так и полипептиды F1, включающие модификации (например, аминокислотные замены, инсерции или делецию) относительно нативной последовательности, например, модификации, сконструированные для стабилизации мутанта F или для повышения иммуногенности мутанта F.

Термин "полипептид F2" (F2) относится к полипептидной цепи зрелого белка F RSV. Нативный F2 включает приблизительно остатки 26-109 F0-предшественника RSV. Как используют в рамках изобретения, термин охватывает как нативные полипептиды F2, так и полипептиды F2, включающие модификации (например, аминокислотные замены, инсерции или делецию) относительно нативной последовательности, например, модификации, сконструированные для стабилизации мутанта F или для повышения иммуногенности мутанта F. В нативном белке F RSV полипептид F2 связан с полипептидом F1 двумя дисульфидными связями, образуя гетеродимер a F2-F1. Термин "фолдон" или "домен фолдон" относится к аминокислотной последовательности, которая способна образовывать тримеры. Одним примером таких доменов фолдон является пептидная последовательность, происходящая из фибритина T4 бактериофага, которая имеет последовательность GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL (SEQ ID NO: 40). Термин "млекопитающее" относится к любому виду животных класса Mammalia. Примеры млекопитающих включают: людей; не являющихся человеком приматов, таких как обезьяны низшие обезьяны; лабораторных животных, таких как крысы, мыши, морские свинки; домашних животных, таких как кошки, собаки, кролики, крупный рогатый скот, овцы, козы, лошади и свиньи; и находящихся в неволе диких животных, таких как львы, тигры, слоны и т.п.

Термин "гликопротеин" относится к белку, который содержит олигосахаридные цепи (гликаны), ковалентно связанны с боковыми цепями полипептида. Углевод связывается с белком при котрансляционной или посттрансляционной модификации, известной как гликозилирование. Термин "участок гликозилирования" относится к аминокислотной последовательности на поверхности полипептида, такого как белок, в которой происходит присоединение гликана. Участок N-связанного гликозилирования представляет собой триплетную последовательность NX(S/T), в которой N представляет собой аспарагин, X представляет собой любой остаток за исключением пролина и (S/T) представляет собой остаток серина или треонина. Гликан представляет собой полисахарид или олигосахарид. Гликан также можно использовать для обозначения углеводной части гликоконъюгата, такого как гликопротеин, гликолипид или протеогликан.

Термин "клетки-хозяева" относится к клеткам, в которых вектор может увеличиваться в количестве и его ДНК или РНК может экспрессироваться. Клетка может быть прокариотической или эукариотической.

Термины "идентичный" или процентная "идентичность" в контексте двух или более последовательностей нуклеиновых кислот или полипептидов, относится к двум или более последовательностям или подпоследовательностям, которые являются одинаковыми или имеют определенный процент аминокислотных остатков или нуклеотидов, которые являются одинаковыми при сравнении и выравнивании для максимального соответствия. Способы выравнивания последовательностей для сравнения хорошо известны в данной области. После выравнивания количество соответствий определяют путем подсчета количества положений, где в обеих последовательностях присутствует идентичный нуклеотид или аминокислотный остаток. Процентную идентичность последовательностей определяют делением количества соответствий либо на длину последовательности, составляющей идентифицированную последовательность, либо на частичную длину (такую как 100 последовательно расположенных нуклеотидов или аминокислотных остатков из последовательности, составляющей идентифицированную последовательность), с последующим умножением полученной величины на 100. Например, пептидная последовательность, которая имеет 1166 соответствий при выравнивании с исследуемой последовательностью, имеющей 1554 аминокислот, является на 75,0 процентов идентична исследуемой последовательности (1166÷1554*100=75,0).

Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно проводить, например, с использованием алгоритма локальной гомологии Smith и Waterman, Adv. Appl. Math. 2:482, 1981, алгоритма выравнивания по гомологии Needleman и Wunsch, Mol. Biol. 48:443, 1970, способа поиска сходства Pearson и Lipman, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444, 1988, компьютеризованных воплощений этих алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA в Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI) или выравнивания вручную или визуального изучения (см., например, Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 4th ed, Cold Spring Harbor, New York, 2012) и Ausubel et al. (In Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, New York, through supplement 104, 2013).

Термин "иммуногенный" относится к способности вещества вызывать, достигать, стимулировать или индуцировать иммунный ответ против конкретного антигена у животного, как в присутствии, так и в отсутствие адъюванта.

Термин "иммунный ответ" относится к любому поддающемуся обнаружению ответу клетки или клеток иммунной системы организма млекопитающего на стимул (такой как иммуноген), включая, но не ограничиваясь ими, врожденный иммунный ответ (например, активация каскада передачи сигнала Toll-рецептором), клеточно-опосредуемый иммунный ответ (например, ответы, опосредуемые T-клетками, такими как антигенспецифические T-клетки и неспецифические клетки иммунной системы), и гуморальный иммунный ответ (например, ответы, опосредуемые B-клетками, такие как образование и секреция антител в плазму, лимфу и/или тканевую жидкость). Примеры иммунных ответов включают изменение (например, повышение) активации Toll-подобного рецептора, экспрессию или секрецию лимфокинов (например, цитокинов (например, цитокинов типа Th1, Th2 или Th17) или хемокинов), активацию макрофагов, активацию дендритных клеток, активацию T-клеток (например, CD4+ или CD8+ T-клеток), активацию NK-клеток, активацию B-клеток (например, образование и/или секреция антител), связывание иммуногена (например, антигена (например, иммуногенного полипептида)) с молекулой MHC, индукцию ответа цитотоксических T-лимфоцитов ("CTL"), индукцию B-клеточного ответа (например, продукции антител), и экспансию (например, рост популяции клеток) клеток иммунной системы (например, T-клеток и B-клеток), и усиленный процессинг и презентацию антигена антигенпредставляющими клетками. Термин "иммунный ответ" также охватывает любой поддающийся обнаружению ответ на конкретное вещество (такое как антиген или иммуноген) одним или несколькими компонентами иммунной системы позвоночного животного in vitro. Термин "иммуноген" относится к соединению, композиции или веществу, которые являются иммуногенными, как определено в настоящем описании ниже.

Термин "иммуногенная композиция" относится к композиции, содержащей иммуноген.

Термин "MPE8" относится к антителу, описанному в Corti et al. [Corti, D., Bianchi, S., Vanzetta, F., Minola, A., Perez, L., Agatic, G., Lanzavecchia, A. Cross-neutralization of four paramyxoviruses by a human monoclonal antibody. Nature, 501(7467), 439-443 (2013)], которое имеет вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29. Термин "мутант" белка F дикого типа RSV, "мутант" белка F RSV, "мутант белка F RSV" или "модифицированный белок F RSV" относится к полипептиду, который имеет внесенные мутации относительно белка F дикого типа и является иммуногенным против белка F дикого типа.

Термин "мутация" относится к делеции, вставке или замене аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности белка или полипептида по сравнению с аминокислотной последовательностью эталонного белка или полипептида. На протяжении настоящего описания и формулы изобретения замена аминокислоты в одном конкретном положении белковой последовательности указывается с использованием обозначения "(аминокислотный остаток в белке дикого типа)(положение аминокислоты)(аминокислотный остаток в модифицированном белке)". Например, обозначение Y75A относится к замене остатка тирозина (Y) в 75-м положении аминокислотной последовательности эталонного белка остатком аланина (A) (в мутанте эталонного белка). В случаях, когда существует варьирование аминокислотного остатка в одном положении среди различных последовательностей дикого типа, код аминокислоты, предшествующей номеру положения, может отсутствовать в обозначении, как например, "75A."

Термин "нативный" или "дикого типа" в отношении белка, последовательности или полипептида относится к существующему в природе белку, последовательности или полипептиду, которые не являются искусственным образом модифицированными посредством направленных мутаций.

Термин "полипептид pep27" или "pep27" относится к полипептиду из 27 аминокислот, который вырезается из F0-предшественника в процессе созревания белка F RSV. Последовательность pep27 фланкируется двумя участками расщепления фурином, которые расщепляются клеточной протеазой в ходе созревания белка F с образованием полипептидов F1 и F2.

Термин "фармацевтически приемлемые носители" относится к материалу или композиции, которые, когда их комбинируют с активным ингредиентом, совместимы с активным ингредиентом и не вызывают токсичных или иных нежелательных реакций при введении индивидууму, в частности, млекопитающему. Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают растворители, поверхностно-активные вещества, суспендирующие вещества, буферные средства, смазывающие вещества, эмульгаторы, поглощающие вещества, дисперсионные среды, покрытия и стабилизаторы.

Термин "антитело, специфичное к префузионной форме," относится к антителу, которое специфически связывается с гликопротеином F RSV в префузионной конформации, но не связывается с белком F RSV в постфузионной конформации. Иллюстративные антитела, специфичные к префузионной конформации, включают антитела D25, AM22, 5C4, MPE8 и AM14.

Термин "антитело, специфичное к префузионному тримеру" относится к антителу, которое специфически связывается с гликопротеином F RSV в префузионной тримерной конформации, но не связывается с белком F RSV в постфузионной конформации или в префузионной конформации, которая при этом не является тримерной. Иллюстративным антителом, специфичным к префузионному тримеру, является антитело AM14. "Антитела, специфичные к префузионному тримеру," представляют собой подгруппу "антител, специфичных к префузионной форме".

Термин "вакцинация с примированием-вспомогательной иммунизацией" относится к режиму иммунотерапии, который включает введение первой иммуногенной композиции (примирующая вакцина) с последующим введением второй иммуногенной композиции (вспомогательная вакцина) индивидууму для индукции иммунного ответа. Примирующая вакцина и вспомогательная вакцина, как правило, содержат один и тот же иммуноген, и они предоставляются в одинаковом или сходном формате. Однако они также могут быть предоставлены в различных форматах, например, одна в форме вектора, а другая в форме простой ДНК-плазмиды. Специалисту в данной области будет понятен подходящий временной интервал между введением примирующей вакцины и вспомогательной вакцины. Кроме того, примирующая вакцина, вспомогательная вакцина или как примирующая вакцина, так и вспомогательная вакцина, дополнительно включают адъювант.

Термин "префузионная конформация" относится к структурной конформации, которую принимает белок F RSV или мутант, который может специфически связываться (i) антителом D25, когда белок F RSV или мутант имеет форму мономера или тримера, или (ii) антителом AM14, когда мутант белка F RSV имеет форму тримера. Префузионная конформация тримера представляет собой подгруппу префузионных конформаций.

Термин "постфузионная конформация" относится к структурной конформации, которую принимает белок F RSV, который не связывается специфически посредством D25, AM22 или AM14. Нативный белок F принимает постфузионную конформацию после слияния оболочки вируса с мембраной клетки хозяина. Белок F RSV также может принимать постфузионную конформацию вне контекста события слияния, например, в условиях стрессового воздействия, такого как нагревание и низкая осмолярность, в экстрагированном из мембраны состоянии, при экспрессии в качестве эктодомена или при хранении.

Термин "растворимый белок" относится к белку, способному растворяться в водной жидкости и оставаться растворенным. Растворимость белка может изменяться в зависимости от концентрации белка в жидкости на водной основе, и от буферных условий жидкости, концентрации других растворенных веществ в жидкости, например, концентрации солей и белков, и температуры жидкости.

Термин "специфически связываться" в контексте связывания антитела с данной молекулой-мишенью относится к связыванию антитела с молекулой-мишенью с более высокой аффинностью, чем его связывание с другими исследуемыми веществами. Например, антитело, которое специфически связывается с белком F RSV в префузионной конформации, представляет собой антитело, которое связывает белок F RSV в префузионной конформации с более высокой аффинностью, чем оно связывается с белком F RSV в постфузионной конформации.

Термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству вещества, которое является достаточным для предупреждения, лечения (в том числе профилактики), снижения и/или смягчения симптомов и/или основных причин нарушения.

Термин "вакцина" относится к фармацевтической композиции, содержащей иммуноген, который способен индуцировать профилактический или терапевтический иммунный ответ у индивидуума. Как правило, вакцина индуцирует антигенспецифический иммунный ответ на антиген патогена, например, вирусного патогена.

Термин "вектор" относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной транспортировать или переносить чужеродную молекулу нуклеиновой кислоты. Термин охватывает как экспрессирующие векторы, так и транскрипционные векторы. Термин "экспрессирующий вектор" относится к вектору, способному экспрессировать вставку в клетке-мишени и, как правило, он содержит последовательности контроля, такие как последовательности энхансера, промотора и терминатора, которые контролируют экспрессию вставки. Термин "транскрипционный вектор" относится к вектору, способному транскрибироваться, но не транслироваться. Транскрипционные векторы используют для амплификации их вставки. Чужеродную молекулу нуклеиновой кислоты называют "вставкой" или "трансгеном". Вектор, как правило, состоит из вставки и последовательности большего размера, которая служит в качестве остова для вектора. Исходя из структуры или происхождения векторов, основные типы векторов включают плазмидные векторы, космидные векторы, фаговые векторы, такие как фаг лямбда, вирусные векторы, такие как аденовирусные (Ad) векторы, и искусственные хромосомы.

B. МУТАНТЫ БЕЛКА F RSV

В некоторых аспектах настоящее изобретение относится к мутантам белков F дикого типа RSV, где мутанты имеют мутации в аминокислотной последовательности относительно аминокислотной последовательности соответствующего белка F дикого типа RSV и являются иммуногенными против белка F дикого типа RSV или против вируса, содержащего белок F дикого типа. В определенных вариантах осуществления мутанты F RSV имеют определенные полезные характеристики, такие как увеличенные иммуногенные свойства или улучшенная стабильность в префузионной конформации мутантов или префузионной тримерной конформации мутантов, по сравнению с соответствующим белком F дикого типа. В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам F RSV которые имеют одну или несколько внесенных мутаций, как описано в настоящем описании, и связываются антителом, специфичным к префузионной конформации, выбранным из антитела D25 или антитела AM14.

Внесенные аминокислотные мутации в мутантах белка F RSV включают замены, делеции или вставки аминокислот. В некоторых вариантах осуществления единственными мутациями в аминокислотной последовательности мутантов являются аминокислотные замены относительно белка F дикого типа RSV.

Аминокислотная последовательность большого количества нативных белков F RSV из различных подтипов RSV, а также последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие такие белки, известны в данной области. Например, последовательность нескольких белков F0-предшественников RSV подтипов A, B и бычьего RSV, указана в SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270.

Нативный белок F RSV обладает значительной консервативностью последовательностей среди подтипов RSV. Например, подтипы A и B RSV обладают 90% идентичностью последовательностей, и каждый из подтипов A и B RSV обладает 81% идентичностью последовательностей с белком F бычьего RSV, в молекуле F0-предшественнике. В подтипах RSV идентичность последовательностей F0 еще выше; например, в каждом из A, B и бычьего подтипов RSV, белок F0-предшественника RSV обладает приблизительно 98% идентичностью последовательности. Практически все идентичные последовательности F0-предшественника RSV состоят из 574 аминокислот с небольшими отличиями в длине, в основном за счет длины C-концевой цитоплазатической хвостовой части. Идентичность последовательностей среди различных нативных белков F RSV известна в данной области (см., например, WO2014/160463). Чтобы далее проиллюстрировать уровень консервативности последовательностей белков F, неконсенсусные аминокислотные остатки среди последовательностей полипептидов F0-предшественников репрезентативных штаммов A RSV и штаммов B RSV представлены в таблицах 17 и 18, соответственно (где неконсенсусные аминокислоты были идентифицированы после выравнивания отдельных последовательностей белка F из штаммов A RSV с использованием ClustalX (v. 2)).

Ввиду существенной консервативности последовательностей F RSV специалист в данной области может без труда сравнить положения аминокислот между различными нативными последовательностями F RSV для идентификации соответствующих положений аминокислот F RSV между различными штаммами и подтипами RSV. Например, среди практически всех идентифицированных нативных белков-предшественников F0 RSV, участки расщепления фурином находится в одних и тех же аминокислотных положениях. Таким образом, консервативность нативных последовательностей белка F RSV среди штаммов и подтипов позволяет использовать эталонную последовательность F RSV для сравнения аминокислот в конкретных положениях белка F RSV. Для целей описания настоящего изобретения (если контекст не указывает на иное), положения аминокислот белка F RSV приведены относительно последовательности полипептида F0-предшественника, указанного в SEQ ID NO: 1 (аминокислотная последовательность полноразмерного нативного полипептида-предшественника F штамма A2 RSV; соответствующая идентификационному номеру GenInfo GI 138251 и идентификационному номеру Swiss Prot P03420). Однако следует отметить, и специалисту в данной области будет понятно, что различные последовательности F0 RSV могут иметь различные системы нумерации, например, если существует дополнительные добавленные или удаленные аминокислотные остатки по сравнению с SEQ ID NO: 1. В связи с этим, следует понимать, что, когда конкретные аминокислотные остатки обозначаются номером, описание не ограничивается только аминокислотами, расположенными точно в этом пронумерованном положении при подсчете от начала данной аминокислотной последовательности, но, скорее, что подразумевается эквивалентный/соответствующий аминокислотный остаток в любой и всех последовательностях F RSV, даже если этот остаток находится не в том же конкретном пронумерованном положении, например, если последовательность RSV короче или длиннее SEQ ID NO: 1 или имеет инсерции или делеции по сравнению с SEQ ID NO: 1.

B-1. Структура мутантов белка F RSV

Мутанты белка F RSV, описанные в настоящем описании, содержат полипептид F1 и полипептид F2. В нескольких вариантах осуществления мутанты дополнительно содержат домен тримеризации. В некоторых вариантах осуществления, либо полипептид F1, либо полипептид F2, включает по меньшей мере одну внесенную модификацию (например, аминокислотную замену), как подробно описано в настоящем описании ниже. В некоторых других вариантах осуществления, каждый из полипептида F1 и полипептида F2 включает по меньшей мере одну внесенную модификацию (например, аминокислотную замену), как подробно описано в настоящем описании ниже.

B-1(a). Полипептид F1 и полипептид F2 мутантов F RSV

В некоторых вариантах осуществления мутанты соответствуют зрелой форме белка F RSV, которая содержит две отдельных полипептидных цепи, а именно, полипептид F1 и полипептид F2. В некоторых других вариантах осуществления полипептид F2 связан с полипептидом F1 одной или двумя дисульфидными связями с образованием полипептидного гетеродимера F2-F1. В других вариантах осуществления мутанты F RSV имеют форму одноцепочечного белка, где полипептид F2 связан с полипептидом F1 пептидной связью или пептидным линкером. Можно использовать любые подходящие пептидные линкеры для связывания двух полипептидных цепей. Примеры таких линкеров включают линкерные последовательности G, GG, GGG, GS и SAIG. Линкер также может представлять собой полноразмерную последовательность pep27 или ее фрагмент.

Полипептидная цепь F1 мутанта может иметь такую же длину, что и полноразмерный полипептид F1 соответствующего белка F дикого типа RSV; однако она также может иметь делеции, такие как делеции от 1 вплоть до 60 аминокислотных остатков с C-конца полноразмерного полипептида F1. Полноразмерный полипептид F1 мутантов F RSV соответствует положениям аминокислот 137-574 нативного F0-предшественника RSV и включает (от N-конца к C-концу) внеклеточную область (остатки 137-524), трансмембранный домен (остатки 525-550) и цитоплазматический домен (остатки 551-574). Следует отметить, что аминокислотные остатки с 514 и далее в нативной последовательности полипептида F1 являются необязательными последовательностями в полипептиде F1 мутантов F RSV, описанных в настоящем описании, и, таким образом, могут отсутствовать в полипептиде F1 мутанта.

В некоторых вариантах осуществления полипептид F1 мутантов F RSV лишен всего цитоплазматического домена. В других вариантах осуществления полипептид F1 лишен цитоплазматического домена и части или всего трансмембранного домена. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант содержит полипептид F1, где отсутствуют аминокислотные остатки в положениях от 510, 511, 512, 513, 514, 515, 520, 525 или 530 до 574. Как правило, для мутантов, которые связаны с доменом тримеризации, таким как фолдон, аминокислоты с 514 по 754 могут отсутствовать. Таким образом, в некоторых конкретных вариантах осуществления аминокислотные остатки с 514 по 574 отсутствуют в полипептиде F1 мутанта. В других конкретных вариантах осуществления полипептид F1 мутантов F RSV содержит или состоит из аминокислотных остатков 137-513 нативной последовательности полипептида F0, такой как любая из последовательностей предшественника F0, указанных в SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270.

С другой стороны, полипептид F1 мутанта F RSV может включать C-концевую связь с доменом тримеризации, таким как фолдон. Многие из последовательностей мутантов F RSV, описанных в настоящем описании, включают последовательность участка расщепления протеазой, такого как участок расщепления тромбином (LVPRGS), белковые метки, такие как 6x His-метка (HHHHHH) и Streptag II (WSHPGFEK) или линкерные последовательности (такие как GG и GS) (См. фиг.1), которые не являются необходимыми для функции белка F RSV, например, для индукции иммунного ответа. Специалист в данной области узнает такие последовательности и в соответствующих случаях поймет, что эти последовательности не включены в описанный мутант F RSV.

В мутантах F RSV, описанных в настоящем описании, полипептидная цепь F2 может иметь ту же длину, что и полноразмерный полипептид F2 соответствующего белка F дикого типа RSV; также он может иметь делеции, такие как делеции 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 аминокислотных остатков с N-конца или C-конца полипептида F2.

Мутант в форме F0 (т.е. одноцепочечный полипептид, содержащий полипептид F2, связанный с полипептидом F1, с или без частичного или полноразмерного pep27) или гетеродимерная форма F1-F2 могут образовывать протомер. Также мутант может быть в форме тримера, который содержит три одинаковых протомера. Кроме того, мутанты могут представлять собой гликозилированные белки (т.е. гликопротеины) или негликозилированные белки. Мутант в форме F0 может включать или может быть лишен последовательности сигнального пептида.

Полипептид F1 и полипептид F2 мутантов белка F RSV, в которые внесена одна или несколько мутаций, могут быть из любого белка F дикого типа RSV, которые известны в данной области или которые будут открыты в будущем, включая, но не ограничиваясь ими, аминокислотную последовательность белка F штаммов RSV подтипа A и подтипа B, включая A2 Ontario и Buenos Aires или любой другой подтип. В некоторых вариантах осуществления мутант F RSV содержит полипептид F1 и/или F2 из вируса A RSV, например, полипептид F1 и/или F2 из белка-предшественника F0 RSV, указанного в любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270, в которые внесены одна или несколько мутаций. В некоторых других вариантах осуществления мутант F RSV содержит полипептид F1 и/или F2 из вируса B RSV, например, полипептид F1 и/или F2 из белка F0-предшественника RSV, указанного в любой из SEQ ID NO: 2, и 211-263, в который внесена одна или несколько мутаций. В других вариантах осуществления мутант F RSV содержит полипептид F1 и/или F2 из бычьего вируса RSV, например, полипептид F1 и/или F2 из белка F0-предшественника RSV, указанного в любой из SEQ ID NO: 264-270, в который внесена одна или несколько мутаций.

В некоторых вариантах осуществления мутанты белка F RSV содержат полипептид F1, полипептид F2, и одну или несколько внесенных аминокислотных мутаций, как описано в настоящем описании ниже, где полипептид F1 содержит 350 последовательно расположенных аминокислот и по меньшей мере на 90, 95, 98 или 99 процентов идентичен аминокислотам 137-513 любой из последовательностей SEQ ID NO: 1, 4 и 81-210, где полипептид F2 содержит 70 последовательно расположенных аминокислот и по меньшей мере на 90, 95, 98 или 99 процентов идентичен аминокислотам 26-109 любой из последовательностей SEQ ID NO: 1, 4, и 81-210, и где мутант белка F RSV стабилизирован в префузионной конформации, либо в виде мономера, либо в виде тримера. В некоторых вариантах осуществления полипептид F1 содержит 350 последовательно расположенных аминокислот и по меньшей мере на 90, 95, 98 или 99 процентов идентичен аминокислотам 137-513 любой из последовательностей SEQ ID NO: 2, 6 и 211-263, и полипептид F2 содержит 70 последовательно расположенных аминокислот и по меньшей мере на 90, 95, 98 или 99 процентов идентичен аминокислотам 26-109 любой из последовательностей SEQ ID NO: 2, 6 и 211-263 и в некоторых других вариантах осуществления мутант белка F RSV стабилизирован в префузионной тримерной конформации.

B-1(b) Домены тримеризации

В нескольких вариантах осуществления мутант F RSV, описанный в настоящем описании, связан с доменом тримеризации. В некоторых вариантах осуществления домен тримеризации стимулирует образование тримера трех гетеродимеров F1/F2.

В данной области известно несколько экзогенных доменов мультимеризации, которые стимулируют образование стабильных тримеров растворимых белков. Примеры таких доменов мультимеризации, которые могут быть связаны с мутантом, описанным в настоящем описании, включают: (1) лейциновую молнию GCN4 (Harbury et al. 1993 Science 262: 1401-1407); (2) мотив тримеризации из сурфактанта легкого (Hoppe et al. 1994 FEB S Lett 344: 191-195); (3) коллаген (McAlinden et al. 2003 Biol Chem 278:42200-42207); и (4) фолдон фибритина фага T4 (Miroshnikov et al. 1998 Protein Eng 11:329-414). В некоторых вариантах осуществления домен фолдон связан с мутантом F на C-конце полипептида F1. В конкретных вариантах осуществления домен фолдон представляет собой домен фолдон фибритина T4, такой как аминокислотная последовательность GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL (SEQ ID NO: 40).

Как правило, домен мультимеризации расположен на C-конце полипептида F1. Он может быть связан непосредственно с полипептидной цепью F1. Необязательно, домен мультимеризации связан с полипептидом F1 через линкер, такой как аминокислотный линкер, например, последовательность GG, GS или SAIG. Линкер также может представлять собой более длинный линкер (например, включая последовательность повтора GG). В данной области известны многочисленные конформационно нейтральные линкеры, которые могут быть использованы в мутантах, описанных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления мутант F, содержащий домен фолдон, включает участок расщепления протеазой для удаления домена фолдон из полипептида F1, такой как участок тромбина между полипептидом F1 и доменом фолдон.

B-2. Внесенные мутации в мутанты белка F RSV

Мутанты F RSV, описанные в настоящем описании, включают полипептид F1 и полипептид F2, где (1) либо полипептид F1, либо (2) полипептид F2, либо (3) как полипептид F1, так и полипептид F2, включает одну или несколько внесенных аминокислотных мутаций относительно аминокислотной последовательности соответствующего нативного белка F. Внесение таких аминокислотных мутаций в мутанты F RSV сообщает полезное свойство мутантам, такое как усиленная иммуногенность, улучшенная стабильность или образование, или улучшенная стабильность определенной желаемой физической формы или конформации мутантов. Такие внесенные аминокислотные мутации обозначают как "внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфидной связи", "заполняющие полость мутации" или "электростатические мутации", и они подробно описаны в настоящем описании ниже. Также изобретение охватывает мутанты F RSV, которые включают любые дополнительные мутации, при условии, что дополнительные мутации не ухудшают иммуногенное свойство мутантов.

B-2(a) Внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфидной связи

В некоторых вариантах осуществления мутанты F RSV, описанные в настоящем описании, включают одну или несколько внесенных способами инженерии мутаций для образования дисульфидной связи. Термин "внесенная способами инженерии мутация для образования дисульфидной связи" относится к мутации пары аминокислотных остатков в белке F дикого типа RSV на пару остатков цистеина. Внесенная пара остатков цистеина позволяет образование дисульфидной связи между внесенными остатками цистеина, которая служит для стабилизации конформации белка или олигомерного состояния, такого как префузионная конформация. Для стабилизации префузионной конформации мутанта пара остатков для мутации на цистеин должны быть расположенными близко в префузионной конформации, но должны быть отдалены друг от друга в постфузионной конформации. Такие остатки можно идентифицировать подходящим способом, известным в данной области, например, посредством визуального исследования кристаллической структуры F RSV в префузионной конформации или более количественная селекция с использованием компьютерного программного обеспечения для моделирования белков (такого как BioLuminate™ [BioLuminate, Schrodinger LLC, New York, 2015 ], Discovery Studio™ [Discovery Studio Modeling Environment, Accelrys, San Diego, 2015 ], MOE™ [Molecular Operating Environment, Chemical Computing Group Inc., Montreal, 2015 ], и Rosetta™ [Rosetta, University of Washington, Seattle, 2015]). Предпочтительно расстояние в паре остатков (например, бета-углеродные атомы) составляет менее 8 Å в префузионной конформации, но более 20 Å в постфузионной конформации.

В некоторых вариантах осуществления мутанты белка F RSV содержат только одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфида ("единичная внесенная способами инженерии мутация для образования дисульфида"). В некоторых других вариантах осуществления мутанты белка F RSV содержат по меньшей мере две внесенных способами инженерии мутации для образования дисульфида, где каждая пара остатков цистеина во внесенных способами инженерии мутациях для образования дисульфида расположена надлежащим образом, когда мутант белка F RSV находится в префузионной конформации ("двойная внесенная способами инженерии мутация для образования дисульфида").

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, содержащему по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфидной связи, где мутант содержит те же внесенные мутации, которые присутствуют в любом из иллюстративных мутантов, представленных в таблицах 1 и 4-6. Иллюстративные мутанты F RSV, представленные в таблицах 1 и 4-6, основаны на одной и той же нативной последовательности F0 RSV штамма A2 с тремя встречающимся в природе заменами в положениях 102, 379 и 447 (SEQ ID NO: 3). Те же внесенные мутации, что и в каждом из мутантов, могут быть внесены в нативную последовательность полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV для получения различных мутантов F RSV, такого как нативная последовательность полипептида F0, указанная в любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270. Также в объем изобретения входят мутанты F RSV, которые основаны на нативной последовательности полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV и содержат любые внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфида. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфида, выбранную из группы, состоящей из: 55C и 188C; 155C и 290C; 103C и 148C; и 142C и 371C, как например, S55C и L188C, S155C и S290C, T103C и I148C или L142C и N371C.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, где аминокислотные мутации представляют собой мутацию пары аминокислотных остатков в области HRB (приблизительно аминокислоты 476-524) белка F RSV на пару остатков цистеина. Внесенная пара остатков цистеина позволяет образование дисульфидной связи между остатками цистеина из двух соседних мутантных протомеров F2-F1 тримера. Связывание дисульфидной связью двух протомеров в тримере обеспечивает стабилизацию мутанта в тримерном состоянии. Примеры конкретных пар таких мутаций включают: 508C и 509C; 515C и 516C; 522C и 523C, как например, K508C и S509C, N515C и V516C или T522C и T523C. В некоторых вариантах осуществления, мутанты F RSV содержат (1) по меньшей мере одну пару мутаций на цистеин в области HRB и (2) по меньшей мере одну внесенную мутацию вне области HRB, выбранную из внесенной способами инженерии мутации для образования дисульфидной связи, как описано в настоящем описании выше, заполняющей полость мутации, как описано в настоящем описании ниже, электростатической мутации, как описано в настоящем описании ниже, или комбинации любой из этих мутаций.

B-2(b) Заполняющие полость мутации.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам F RSV, которые содержат одну или несколько заполняющих полость мутаций. Термин "заполняющая полость мутация" относится к замене аминокислотного остатка в белке F дикого типа RSV аминокислотным остатком, который, как ожидается, заполнит внутреннюю полость в зрелом белке F RSV. В одном применении такие заполняющие полость мутации приводят к стабилизации префузионной конформации мутанта белка F RSV. Полости в префузионной конформации белка F RSV можно идентифицировать способами, известными в данной области, например, посредством визуального исследования кристаллической структуры F RSV в префузионной конформации или с использованием компьютерного программного обеспечения для моделирования белков (such as BioLuminate™ [BioLuminate, Schrodinger LLC, New York, 2015], Discovery Studio™ [Discovery Studio Modeling Environment, Accelrys, San Diego, 2015], MOE™ [Molecular Operating Environment, Chemical Computing Group Inc., Montreal, 2015], и Rosetta™ [Rosetta, University of Washington, Seattle, 2015]). Аминокислоты, подлежащие замене для заполняющих полость мутаций, как правило, включают небольшие алифатические (например, Gly, Ala и Val) или небольшие полярные аминокислоты (например, Ser и Thr). Они также могут включать аминокислоты, которые углублены в префузионной конформации, но открыты для растворителя в постфузионной конформации. Замещающие аминокислоты могут представлять собой крупные алифатические аминокислоты (Ile, Leu и Met) или крупные ароматические аминокислоты (His, Phe, Tyr и Trp). Например, в нескольких вариантах осуществления мутант белка F RSV включает мутацию T54H.

В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит одну или несколько заполняющих полость мутаций, выбранных из группы, состоящей из:

1) замена S в положениях 55, 62, 155, 190 или 290 на I, Y, L, H или M;

2) замена T в положении 54, 58, 189, 219 или 397 на I, Y, L, H или M;

3) замена G в положении 151 на A или H;

4) замена A в положении 147 или 298 на I, L, H или M;

5) замена V в положении 164, 187, 192, 207, 220, 296, 300 или 495 на I, Y, H; и

6) замена R в положении 106 на W.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, содержащему одну или несколько заполняющих полость мутаций, где мутант содержит заполняющие полость мутации в любом из мутантов, представленных в таблицах 2, 4 и 6. Мутанты F RSV, описанные в таблицах 2, 4 и 6, основаны на одной и той же нативной последовательности последовательность F0 штамма A2 RSV с тремя встречающимися в природе заменами в положениях 102, 379 и 447 (SEQ ID NO: 3). Те же внесенные мутации в каждом из мутантов могут быть внесены в нативную последовательность полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV для достижения отличающихся мутантов F RSV, таких как нативная последовательность полипептида F0, указанная в любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270. Также в объем изобретения входят мутанты F RSV, которые основаны на нативной последовательности полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV и содержат любую одну или несколько заполняющих полость мутаций. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, содержит по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию, выбранную из группы, состоящей из: T54H, S190I и V296I.

B-2 (c) Электростатические мутации.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, которые включают одну или несколько электростатических мутаций. Термин "электростатическая мутация" относится к аминокислотной мутации, внесенной в белок F дикого типа RSV, которая снижает ионное отталкивание или увеличивает ионное притяжение между остатками в белке, которые расположены близко друг к другу в свернутой структуре. Поскольку образование водородных связей является особым случаем ионного притяжения, электростатические мутации могут усиливать образование водородных связей между такими расположенными близко остатками. В одном примере электростатическую мутацию можно вносить для повышения стабильности тримера. В некоторых вариантах осуществления электростатическую мутацию вносят для снижения отталкивающих ионных взаимодействий или увеличения притягивающих ионных взаимодействий (потенциально включающих водородные связи) между остатками, которые находятся близко друг к другу в гликопротеине F RSV в его префузионной конформации, но не в постфузионной конформации. Например, в префузионной конформации кислотная боковая цепь Asp486 из одного протомера тримера гликопротеина F RSV расположена на поверхности контакта тример и структурно находится между двумя другими кислотными боковыми цепями Glu487 и Asp489 из другого протомера. С другой стороны в постфузионной конформации кислотная боковая цепь Asp486 расположена на поверхности контакта тримера и открыта для растворителя. В некоторых вариантах осуществления мутант белка F RSV включает электростатическую замену D486S, которая снижает отталкивающие ионные взаимодействия или повышает притягивающие ионные взаимодействия с кислотными остатками Glu487 и Asp489 из другого протомера тримера F RSV. Как правило, внесение электростатической мутации приводит к повышению температуры плавления (Tm) префузионной конформации или префузионной тримерной конформации белка F RSV.

Неблагоприятные электростатические взаимодействия в префузионной конформации или префузионной тримерной конформации могут быть идентифицированы способом, известным в данной области, например, посредством визуального исследования кристаллической структуры F RSV в префузионной конформации или префузионной трммерной конформации или с использованием компьютерного программного обеспечения для моделирования белков (такого как BioLuminate™ [BioLuminate, Schrodinger LLC, New York, 2015], Discovery Studio™ [Discovery Studio Modeling Environment, Accelrys, San Diego, 2015], MOE™ [Molecular Operating Environment, Chemical Computing Group Inc., Montreal, 2015.] и Rosetta™ [Rosetta, University of Washington, Seattle, 2015.]).

В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит по меньшей мере одну электростатическую мутацию, выбранную из группы, состоящей из:

1) замена E в положении 82, 92 или 487 на D, F, Q, T, S, L или H;

2) замена K в положении 315, 394 или 399 на F, M, R, S, L, I, Q или T;

3) замена D в положении 392, 486 или 489 на H, S, N, T или P; и

4) замена R в положении 106 или 339 на F, Q, N или W.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, содержащему одну или несколько электростатических мутаций, где мутант содержит электростатические мутации любого из мутантов, описанных в таблицах 3, 5 и 6. Мутанты F RSV, описанные в таблицах 3, 5 и 6, основаны на одной и той же нативной последовательности F0 RSV штамма A2 с тремя встречающимися в природе заменами в положениях 102, 379 и 447 (SEQ ID NO: 3). Те же внесенные мутации в каждом из мутантов могут быть внесены в нативную последовательность полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV для достижения отличающихся мутантов F RSV, таких как нативная последовательность полипептида F0, указанная в любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6, и 81-270. Также в объем изобретения входят мутанты F RSV, которые основаны на нативной последовательности полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV и содержат любую одну или несколько электростатических мутаций. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутант белка F RSV содержит мутацию D486S.

B-2 (d) Комбинация внесенных способами инженерии мутаций для образования дисульфидной связи, заполняющих полость мутаций и электростатических мутаций.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к мутантам белка F RSV, которые содержат комбинацию двух или более различных типов мутаций, выбранных из внесенных способами инженерии мутаций для образования дисульфидной связи, заполняющих полость мутаций и электростатических мутаций, как как описано в настоящем описании выше.

В некоторых вариантах осуществления мутанты содержат по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфидной связи и по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутанты F RSV включают комбинацию мутаций, как указано в таблице 4.

В некоторых дополнительных вариантах осуществления мутанты белка F RSV содержат по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфида и по меньшей мере одну электростатическую мутацию. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутанты F RSV включают комбинацию мутаций, как указано в таблице 5.

В других вариантах осуществления мутанты белка F RSV содержат по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфида, по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию и по меньшей мере одну электростатическую мутацию. В некоторых конкретных вариантах осуществления мутанты F RSV включают комбинацию мутаций, как указано в таблице 6.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится мутанту F RSV, который содержит комбинацию мутаций, выбранную из группы, состоящей из:

(1) комбинация T103C, I148C, S190I и D486S;

(2) комбинация T54H S55C L188C D486S;

(3) комбинация T54H, T103C, I148C, S190I, V296I и D486S;

(4) комбинация T54H, S55C, L142C, L188C, V296I и N371C;

(5) комбинация S55C, L188C и D486S;

(6) комбинация T54H, S55C, L188C и S190I;

(7) комбинация S55C, L188C, S190I и D486S;

(8) комбинация T54H, S55C, L188C, S190I и D486S;

(9) комбинация S155C, S190I, S29C и D486S;

(10) комбинация T54H, S55C, L142C, L188C, V296I, N371C, D486S, E487Q и D489S; и

(11) комбинация T54H, S155C, S190I, S29C и V296I.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, содержащему комбинацию внесенных мутаций, где мутант содержит комбинацию мутаций любого из мутантов, описанных в таблицах 4, 5 и 6. Мутанты F RSV, представленные в таблицах 4, 5 и 6, основаны на одной и той же нативной последовательности F0 RSV штамма A2 с тремя встречающимися в природе заменами в положениях 102, 379 и 447 (SEQ ID NO: 3). Те же внесенные мутации в каждом из мутантов могут быть внесены в нативную последовательность полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV для достижения отличающихся мутантов F RSV, таких как нативная последовательность полипептида F0, указанная в любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270. В объем изобретения входят мутанты F RSV, которые основаны на нативной последовательности полипептида F0 любого другого подтипа или штамма RSV и содержат любую из комбинаций мутаций.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится мутанту F RSV, где мутант содержит цистеин (C) в положении 103 (103C) и в положении 148 (148C), изолейцин (I) в положении 190 (190I) и серин (S) в положении 486 (486S), и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 42;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 44;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 48;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 50.

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 280;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 282;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 284;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 284;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 286;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 288;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 288;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 290; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 290.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 103 и 148, изолейцин (I) в положениях 190 и 296, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 52;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 52;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 54;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 56;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 58;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 60;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 60;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 292;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 292;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 294;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 294;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 296;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 298;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 298;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 300;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 300;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 302; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 302.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 62;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 64;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 68;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 304;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 304;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 308;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 308;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 310;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 310;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 312;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 312.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 314; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 314.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутанту F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, изолейцин (I) в положении 190 (190I) и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 72;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 74;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 74;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 76;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 78;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 80;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 316;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 318;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 318;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 320;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 320;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 322;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 322;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 324;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 324.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 326.

Аминокислотная последовательность полипептида F2 и полипептида F1 иллюстративных мутантов F RSV, описанных в настоящем описании, представлена в таблицах 19-22.

В нескольких вариантах осуществления домен фолдон связан с мутантом F RSV, описанным в настоящем описании выше, где домен фолдон связан с C-концом полипептида F1 и содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40.

Мутанты белка F RSV, описанные в настоящем описании, можно получать стандартными способами, известными в данной области, например, посредством экспрессии в рекомбинантной системе-хозяине с использованием подходящего вектора. Подходящие клетки-хозяева включают, например, клетки насекомых, клетки млекопитающих, клетки птиц, бактерии и клетки дрожжей. Примеры подходящих клеток насекомых включают, например, клетки Sf9, клетки Sf21, клетки Tn5, клетки Schneider S2 и клетки High Five (клональный изолят, происходящий из родительской клеточной линии Trichoplusia ni BTI-TN-5B1-4 (Invitrogen)). Примеры подходящих клеток млекопитающих включают клетки яичника китайского хомячка (CHO), клетки почки эмбриона человека (клетки HEK293 или Expi 293, как правило, трансформированные расщепленной ДНК аденовируса типа 5), клетки NIH-3T3, клетки 293-T, клетки Vero и клетки HeLa. Подходящие клетки птиц включают, например, эмбриональные стволовые клетки курицы (например, клетки EBx.RTM.), эмбриональные фибробласты курицы, эмбриональные зародышевые клетки курицы, фибробласты перепелки (например, ELL-O) и клетки утки. Подходящие экспрессирующие системы на основе клеток насекомых, такие как бакуловирусные векторные системы, известны специалистам в данной области и описаны, например, в Summers and Smith, Texas Agricultural Experiment Station Bulletin No. 1555 (1987). Материалы и способы для бакуловирусных/основанных на клетках насекомых экспрессирующих системах, среди прочих, коммерчески доступны в форме наборов от Invitrogen, San Diego Calif. Экспрессирующие системы клеток птиц также известны специалистам в данной области и описаны, например, в патентах США № 5340740; 5656479; 5830510; 6114168 и 6500668. Аналогично, бактериальные экспрессирующие системы и экспрессирующие системы на основе клеток млекопитающих также известны в данной области и описаны, например, в Yeast Genetic Engineering (Barr et al., eds., 1989) Butterworths, London.

В данной области хорошо известен и является общепринятым ряд подходящих векторов для экспрессии рекомбинантных белков в клетках насекомых или млекопитающих. Подходящие векторы могут содержать ряд компонентов, включая, но не ограничиваясь ими, один или несколько из следующих: ориджин репликации; ген селективного маркера; один или несколько элементов контроля экспрессии, таких как элемент контроля транскрипции (например, промотор, энхансер, терминатор), и/или один или несколько сигналов трансляции; и сигнальная последовательность или лидерная последовательность для нацеливания на секреторный каскад в выбранной клетке-хозяине (например, происходящей из млекопитающего или из гетерологичного вида млекопитающего или не млекопитающего). Например, для экспрессии в клетках насекомых подходящий бакуловирусный экспрессирующий вектор, такой как pFastBac (Invitrogen), используют для получения рекомбинантных бакуловирусных частиц. Бакуловирусные частицы амплифицируют и используют для инфицирования клеток для экспрессии рекомбинантного белка. Для экспрессии в клетках млекопитающих используют вектор, который обеспечивает экспрессию конструкции в желаемой являющейся хозяином клетке млекопитающего (например, клетки яичника китайского хомячка).

Мутантные полипептиды белка F RSV можно очищать с использованием любых подходящих способов. Например, в данной области известны способы очистки мутантных полипептидов белка F RSV с использованием иммуноаффинной хроматографии. Ruiz-Arguello et al., J. Gen. Virol., 85:3677-3687 (2004). В данной области хорошо известны подходящие способы для очистки желаемых белков, включая преципитацию и различные типы хроматографии, такие как хроматография гидрофобного взаимодействия, ионообменная хроматография, аффинная, хелатирующая и эксклюзионная. Подходящие схемы очистки можно создавать с использованием двух или более из этих или других подходящих способов. Если желательно, мутантные полипептиды белка F RSV могут включать "метку", которая облегчает очистку, такую как эпитопная метка или гистидиновая (HIS) метка. Такие меченые полипептиды удобно очищать, например, из кондиционированной среды, с использованием хелатирующей хроматографии или аффинной хроматографии.

C. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ МУТАНТЫ БЕЛКА F RSV

В другом аспекте настоящее изобретение относится к молекулам нуклеиновых кислот, которые кодируют мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании выше. Эти молекулы нуклеиновых кислот включают последовательности ДНК, кДНК и РНК. Также изобретение охватывает молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют только полипептид F2 или только полипептид F1 мутанта RSV F. Молекула нуклеиновой кислоты может быть включена в вектор, такой как экспрессирующий вектор.

В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид F0-предшественника, который при экспрессии в соответствующей клетке процессируется в описанный мутант F RSV. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид F0-предшественника, который при экспрессии в соответствующей клетке процессируется в описанный мутант F RSV, где полипептид F0-предшественника включает, от N-конца к C-концу, сигнальный пептид, полипептид F2, полипептид Pep27 и полипептид F1. В некоторых вариантах осуществления полипептид Pep27 содержит аминокислотную последовательность, указанную в качестве положений 110-136 любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270, где аминокислотные положения соответствуют аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления сигнальный пептид содержит аминокислотную последовательность, указанную в качестве положений 1-25 любой из SEQ ID NO: 1, 2, 4, 6 и 81-270, где аминокислотные положения соответствуют аминокислотной последовательности эталонной SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует мутант, выбранный из группы, состоящей из:

(1) мутанта, содержащего по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфида;

(2) мутанта, содержащего по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию;

(3) мутанта, содержащего по меньшей мере одну электростатическую мутацию;

(4) мутанта, содержащего по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфидной связи и по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию;

(5) мутанта, содержащего по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфидной связи и по меньшей мере одну электростатическую мутацию;

(6) мутанта, содержащего по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию и по меньшей мере одну электростатическую мутацию; и

(7) мутанта, содержащего по меньшей мере одну внесенную способами инженерии мутацию для образования дисульфидной связи и по меньшей мере одну электростатическую мутацию, по меньшей мере одну заполняющую полость мутацию, и по меньшей мере одну электростатическую мутацию.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая кодирует мутант, выбранный из группы, состоящей из:

(1) мутанта, содержащего комбинацию замен 103C, 148C, 190I и 486S;

(2) мутанта, содержащего комбинацию замен 54H, 55C, 188C и 486S;

(3) мутанта, содержащего комбинацию замен 54H, 103C, 148C, 190I, 296I и 486S;

(4) мутанта, содержащего комбинацию замен 54H, 55C, 142C, 188C, 296I и 371C;

(5) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 55C, 188C и 486S;

(6) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 54H, 55C, 188C и 190I;

(7) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 55C, 188C, 190I и 486S;

(8) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 54H, 55C, 188C, 190I и 486S;

(9) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 155C, 190I, 29C и 486S;

(10) мутанта, содержащего комбинацию аминокислотных замен 54H, 55C, 142C, 188C, 296I, 371C, 486S, 487Q и 489S; и

(11) комбинацию аминокислотных замен 54H, 155C, 190I, 29C и 296I.

В некоторых конкретных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует мутант F RSV, где мутант содержит цистеин (C) в положении 103 (103C) и в положении 148 (148C), изолейцин (I) в положении 190 (190I), и серин (S) в положении 486 (486S), и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 42;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 44;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 48;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 50.

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 280;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 282;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 284;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 284;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 286;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 288;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 288;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 290; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 290.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 103 и 148, изолейцин (I) в положениях 190 и 296, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 52;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 52;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 54;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 56;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 58;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 60;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 60;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 292;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 292;

(13) a полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 294;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 294;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 296;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 298;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 298;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 300;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 300;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 302; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 302.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 62;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 64;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 68;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 304;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 304;

(13) a полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 308;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 308;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 310;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 310;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 312;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 312.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 314; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 314.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления the молекула нуклеиновой кислоты кодирует мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, изолейцин (I) в положении 190 (190I), и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 72;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 74;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 74;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 76;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 78;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 80;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 316;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 318;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 318;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 320;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 320;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 322;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 322;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 324;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 324.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 326.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая кодирует мутант, выбранный из группы, состоящей из:

(1) мутанта, содержащего аминокислоты 26-513 SEQ ID NO: 19;

(2) мутанта, содержащего аминокислоты 26-513 SEQ ID NO: 20;и

(3) мутанта, содержащего аминокислоты 26-513 SEQ ID NO: 21.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей мутант белка F RSV или ее вырожденный вариант, где молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

(1) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 8;

(2) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 9;

(3) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 10;

(4) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 11;

(5) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 12;

(6) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 13;

(7) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 14;

(8) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 15;

(9) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 16;

(10) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 17; и

(11) нуклеотидной последовательности, содержащей нуклеотиды 76-1539 SEQ ID NO: 18.

D. КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ МУТАНТ БЕЛКА F RSV; КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ НУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ, КОДИРУЮЩУЮ МУТАНТ БЕЛКА F RSV

В другом аспекте изобретение относится к композициям, которые содержат (1) мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, или (2) молекулу нуклеиновой кислоты или вектор, кодирующие такой мутант белка F RSV.

В некоторых вариантах осуществления композиция представляет собой иммуногенную композицию, способную индуцировать иммунный ответ против белка F RSV у индивидуума. В некоторых конкретных вариантах осуществления иммуногенная композиция представляет собой фармацевтическую композицию, которая содержит мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель.

В других вариантах осуществления фармацевтическая композиция представляет собой вакцину. Иммуногенный компонент в вакцине может представлять собой (1) мутант белка F RSV, описанный в настоящем описании, (2) нуклеиновую кислоту, кодирующую такой мутант белка F RSV, или (3) вектор для экспрессии такого мутанта белка F RSV.

В некоторых конкретных вариантах осуществления вакцина содержит мутант F RSV, где мутант содержит цистеин (C) в положении 103 (103C) и в положении 148 (148C), изолейцин (I) в положении 190 (190I), и серин (S) в положении 486 (486S), и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 41, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 42;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 43, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 44;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 45, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 47, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 48;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 49, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 50.

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 279, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 280;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 281, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 282;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 284;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 283, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 284;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 285, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 286;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 288;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 287, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 288;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 290; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 289, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 290.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления вакцина содержит мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 103 и 148, изолейцин (I) в положениях 190 и 296, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 52;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 51, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 52;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 53, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 54;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 55, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 56;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 58;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 60;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 59, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 60;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 292;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 291, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 292;

(13) a полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 294;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 293, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 294;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 295, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 296;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 298;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 297, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 298;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 300;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 299, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 300;

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 302; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 301, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 302.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления вакцина содержит мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 61, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 62;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 63, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 64;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 65, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 68;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 69, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 304;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 303, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 304;

(13) a полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 305, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 308;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 308;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 310;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 309, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 310;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 312;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 311, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 312.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 314; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 313, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 314.

В некоторых других конкретных вариантах осуществления вакцина содержит мутант F RSV, где мутант содержит гистидин (H) в положении 54, цистеин (C) в положениях 55 и 188, изолейцин (I) в положении 190 (190I), и серин (S) в положении 486, и где мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2, выбранный из группы, состоящей из:

(1) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72;

(2) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 72;

(3) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 74;

(4) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 73, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 74;

(5) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76;

(6) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 75, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 76;

(7) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78;

(8) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 78;

(9) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80;

(10) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 79, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 80;

(11) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316;

(12) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 315, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 316;

(13) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 318;

(14) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 317, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 318;

(15) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 320;

(16) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 319, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 320;

(17) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 322;

(18) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 321, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 322;

(19) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 324;

(20) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 323, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 324.

(21) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326; и

(22) полипептида F2, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 325, и полипептида F1, содержащего аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 326.

В некоторых вариантах осуществления композиция, такая как фармацевтическая композиция или вакцина, содержит два или более различных мутанта F RSV. Два или более различных мутанта F RSV могут содержать одинаковые внесенные аминокислотные мутации, но полипептид F1 и полипептид F2 из различных штаммов или подтипов RSV. Два или более различных мутанта F RSV могут содержать различные внесенные аминокислотные мутации.

В некоторых вариантах осуществления композиция содержит два различных мутанта, содержащих одинаковые внесенные аминокислотные мутации, где один мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2 из RSV подтипа A и где другой мутант содержит полипептид F1 и полипептид F2 из RSV подтипа B. В некоторых конкретных вариантах осуществления два различных мутанта содержит одну и ту же комбинацию аминокислотных замен, выбранную из группы, состоящей из:

(1) комбинации аминокислотных замен 103C, 148C, 190I, и 486S;

(2) комбинации аминокислотных замен 54H, 55C, 188C, и 486S;

(3) комбинации аминокислотных замен 54H, 103C, 148C, 190I, 296I, и 486S;

(4) комбинации аминокислотных замен 54H, 55C, 142C, 188C, 296I, и 371C;

(5) комбинации аминокислотных замен 55C, 188C, и 486S;

(6) комбинации аминокислотных замен 54H, 55C, 188C, и 190I;

(7) комбинации аминокислотных замен 55C, 188C, 190I, и 486S;

(8) комбинации аминокислотных замен 54H, 55C, 188C, 190I, и 486S;

(9) комбинации аминокислотных замен 155C, 190I, 290C, и 486S;

(10) комбинации аминокислотных замен 54H, 55C, 142C, 188C, 296I, 371C, 486S, 487Q, и 489S; и

(11) комбинации аминокислотных замен 54H, 155C, 190I, 290C, и 296I.

В дополнение к иммуногенному компоненту, вакцина, кроме того, может содержать иммуномодулирующее средство, такое как адъювант. Примеры подходящих адъювантов включают соли алюминия, такие как гидроксид алюминия и/или фосфат алюминия; композиции масляной эмульсии (или композиции "масло в воде"), включая эмульсии сквален-вода, такие как MF59 (см., например, WO 90/14837); составы сапонина, например, такие как QS21 и иммуностимулирующие комплексы (ISCOMS) (см., например, патент США № 5057540; WO 90/03184, WO 96/11711, WO 2004/004762, WO 2005/002620); бактериальные или микробные производные, примерами которых являются монофосфориллипид A (MPL), 3-O-деацилированный MPL (3dMPL), содержащие CpG-мотив олигонуклеотиды, ADP-рибозилирующие бактериальные токсины или их мутанты, такие как термолабильный энтеротоксин LT E. coli, холерный токсин CT и т.п. Также можно использовать кодируемый вектором адъювант, например, с использованием гетерологичной нуклеиновой кислоты, которая кодирует слитую конструкцию домена олигомеризации C4-связывающего белка (C4 п.н.) с представляющим интерес антигеном (например, Solabomi et al., 2008, Infect Immun 76: 3817-23). В определенных вариантах осуществления композиции, описанные в настоящем описании, содержат алюминий в качестве адъюванта, например, в форме гидроксида алюминия, фосфата алюминия, алюмофосфата кальция или их комбинаций, в концентрациях 0,05-5 мг, например, 0,075-1,0 мг, алюминия на дозу.

E. ПРИМЕНЕНИЕ МУТАНТОВ БЕЛКА F RSV, МОЛЕКУЛ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И КОМПОЗИЦИЙ

Настоящее изобретение также относится к применению мутанта белка F RSV, нуклеиновых кислот, кодирующих мутант белка F RSV, или векторов для экспрессии мутанта белка F RSV, или композиций, содержащих мутант белка F RSV или нуклеиновые кислоты.

В нескольких вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу индукции иммунного ответа на RSV у индивидуума, включающему введение индивидууму эффективного количества мутанта белка F RSV, молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей мутант белка F RSV, или композиции, содержащей мутант белка F RSV или молекулу нуклеиновой кислоты.

В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу предупреждения инфекции RSV у индивидуума, включающему введение индивидууму эффективного количества фармацевтической композиции, такой как вакцина, содержащей мутант белка F RSV, нуклеиновую кислоту, кодирующую мутант белка F RSV, или вектор, экспрессирующий мутант белка F RSV. В некоторых вариантах осуществления индивидуумом является человек. В некоторых конкретных вариантах осуществления человек представляет собой ребенка, такого как младенец. В некоторых других конкретных вариантах осуществления человек представляет собой женщину, в частности, беременную женщину.

Композицию можно вводить индивидууму с введением адъюванта или без него. Эффективное количество, вводимое индивидууму, представляет собой количество, которое является достаточным для индукции иммунного ответа против антигена RSV, такого как F RSV, у индивидуума. Индивидуумы, которые могут быть выбраны для лечения, включают индивидуумов, которые имеют риск развития инфекции RSV вследствие воздействия или возможности воздействия RSV. Поскольку практически все люди инфицированы RSV к возрасту 2 лет, популяция, подходящая для иммунизации, включает когорту всех возрастов. Иммунизацию можно проводить, например, начиная режим иммунизации в любой момент времени от рождения до 6 месяцев, от 6 месяцев до 5 лет, у беременных женщин (или женщин детородного возраста) для защиты их младенцев посредством пассивного переноса антитела, членов семей новорожденных детей или тех, кто все еще находится in utero, и индивидуумов в возрасте более 50 лет. Индивидуумы с наибольшим риском инфицирования RSV с тяжелыми симптомами (например, требующие госпитализации) включают недоношенных детей, детей с бронхолегочной дисплазией и детей с врожденным заболеванием сердца.

Введение композиций, описанных в настоящем описании, таких как фармацевтические композиции, можно проводить с использованием стандартных путей введения. Неограничивающие варианты осуществления включают парентеральное введение, такое как внутрикожное, внутримышечное, подкожное, чрескожное, мукозальное или пероральное введение.

Общая доза композиции, предоставляемая индивидууму за одно введение, может варьироваться, как известно специалисту в данной области.

Также является возможным проведение одного или нескольких вспомогательных введений одной или нескольких вакцинных композиций. Если проводят вспомогательную вакцинацию, как правило, такую вспомогательную вакцинацию проводят тому же индивидууму в момент от одной недели до 10 лет, предпочтительно от двух недель до шести месяцев после введения композиции индивидууму в первый раз (что в таких случаях называют "примирующей вакцинацией"). В альтернативных вспомогательных режимах также можно вводить отличающиеся векторы, например, один или несколько аденовирусных или других векторов, таких как модифицированный вирус осповакцины Анкара (MVA), или ДНК, или белок, индивидууму после примирующей вакцинации. Например, можно вводить индивидууму рекомбинантный вирусный вектор, описанный в настоящем описании, в качестве примирующей вакцинации, и вспомогательную иммунизацию можно проводить композицией, содержащей белок F RSV.

В определенных вариантах осуществления введение включает примирующее введение и по меньшей мере одно вспомогательное введение. В некоторых других вариантах осуществления введение проводят ежегодно. В других вариантах осуществления введение проводят ежегодно вместе с введением вакцины против гриппа.

Вакцины, описанные в настоящем описании, можно использовать вместе с одной или несколькими другими вакцинами. Например, у взрослых их можно использовать вместе с вакциной против вируса гриппа, Prevnar, вакциной против столбняка, вакциной против дифтерии и вакциной против коклюша. Для педиатрического применения вакцины, описанные в настоящем описании, можно использовать с любой другой вакциной, показанной для педиатрических пациентов.

Таблица 17. Неконсенсусные аминокислотные остатки среди последовательностей белка F из отдельных штаммов A RSV.

Таблица 18. Неконсенсусные аминокислотные остатки среди последовательностей белка F из отдельных штаммов B RSV.

Таблица 19. Варианты мутантного pXCS847, содержащего внесенные мутации T103C, I148C, S190I и D486S

Таблица 20. Вариант мутанта pXCS851, содержащий внесенные мутации T54H, T103C, I148C, S190I, V296I, D486S

Таблица 21. Вариант мутантов pXCS852, содержащий внесенные мутации T54H, S55C, L188C, D486S

Таблица 22. Вариант мутанта pXCS855, содержащий внесенные мутации T54H, S55C, L188C, S190I, D486S

Таблица 23. Номера последовательностей

F. ПРИМЕРЫ

Кроме того, изобретение описано с помощью следующих иллюстративных примеров. Примеры не ограничивают изобретение никоим образом. Они служат только для пояснения изобретения.

Пример 1: Конструирование и получение мутантов белка F RSV

1A: Мутанты F RSV с доменом фолдон

В этом примере проиллюстрировано конструирование и получение различных мутантов белка F RSV, которые включают домен тримеризации фолдон фибритина и внесенные аминокислотные мутации, такие как внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфидной связи, заполняющие полость мутации, электростатические мутации или их комбинация. Иллюстративные мутанты F RSV, каждый из которых обозначен уникальным идентификатором, таким как pXCS501, pXCS601, и т.д., представлены в таблицах 1-6. Каждый из этих мутантов конструировали и получали на основе аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 3, которая также проиллюстрирована на фиг.1. Аминокислотные остатки 1-513 последовательности SEQ ID NO: 3 идентичны аминокислотным остаткам 1-513 полипептида F0-предшественника нативного RSV A2, как указано в SEQ ID NO: 1, за исключением трех встречающихся в природе замен: P102A, I379V и M447V в последовательности SEQ ID NO: 3. Таким образом, аминокислотные последовательности этих иллюстративных мутантов F идентичны, за исключением внесенных аминокислотных мутаций, как указано для каждого мутанта, приведенного в таблицах 1-6. Каждый из этих мутантов белка F RSV содержит две отдельных полипептидных цепи. Одна из полипептидных цепей, полипептид F2, содержит аминокислоты 26-109 SEQ ID NO: 3, за исключением внесенных мутаций, как указано. Другая полипептидная цепь содержит полипептид F1 (остатки 137-513), связанные с доменом тримеризации фолдоном (остатки 518-544) через линкер SAIG (остатки 514-517). Сигнальный пептид (остатки 1-25) и pep27 (остатки 110-136) SEQ ID NO: 3 отщеплялся от F0-предшественника в ходе процесса экспрессии. Процесс экспрессии и очистки этих иллюстративных мутантов F RSV описан в примерах 2 и 3.

1B: Мутанты F RSV без домена фолдон

Мутант F RSV pXCS899, который был лишен домена фолдон, получали тем же способом, который описан в примере 1A выше, за исключением того, что аминокислоты 514-544 последовательности F0-предшественника SEQ ID NO: 3 были удалены. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS899 указана в SEQ ID NO: 271.

Таблица 1. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфида

Таблица 2. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие заполняющие полость мутации

Таблица 3. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие электростатические мутации

Таблица 4. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие внесенные способом инженерии мутации для образования дисульфидной связи и заполняющие полость мутации

Таблица 5. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфидной связи и электростатические мутации

Таблица 6. Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие комбинацию внесенных способами инженерии мутаций для образования дисульфида, заполняющих полость мутаций и электростатических мутаций.

Пример 2. Конструирование экспрессирующего вектора для мутанта F RSV

В молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую нативный F0-полипептид RSV A2, указанный в SEQ ID NO: 1, имеющий встречающиеся в природе замены P102A, I379V и M447V, вносили мутацию с использованием стандартных способов молекулярной биологии для кодирования полипептида-предшественника для мутанта F RSV, имеющего желаемые внесенные аминокислотные мутации. Структура и компоненты полипептида-предшественника указаны на фиг.1 и в SEQ ID NO: 3. Полипептид-предшественник содержит сигнальный пептид (остатки 1-25), полипептид F2 (остатки 26-109), полипептид pep27 (остатки 110-136), полипептид F1 (остатки 137-513), фолдон фибритина T4 (остатки 518-544), последовательность распознавания тромбином (547-552), метки для очистки (HIS-метка (остатки 553-558)), Streptag II (остатки 561-568) и линкерные последовательности (остатки 514-517, 545, 546, 559 и 560).

Белковую последовательность SEQ ID NO: 3 подвергали оптимизации кодонов на кодоны млекопитающих и проводили их синтез с использованием DNA2.0 (Menlo Park, CA). Синтезированный генный продукт вносили в коммерчески доступный экспрессирующий вектор pcDNA3.1/Zeo(+) (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA), который был модифицирован для кодирования резистентности к канамицину вместо резистентности к ампициллину и для кодирования промотора CAG [Niwa, H., Yamamura, K., & Miyazaki, J., Efficient selection for high-expression transfectants with a novel eucaryotic vector. Gene, 108(2), 193-199, 1991] вместо промотора CMV. Мутагенные олигонуклеотиды конструировали с использованием алгоритма QuikChange Primer Design algorithm (Agilent Technologies, Santa Clara, CA), и все олигонуклеотиды приобретали от Integrated DNA Technologies (Coralville, IA). Нуклеотидные замены, инсерции или делеции включали с использованием набора для сайт-направленного мутагенеза QuikChange Lightning Multi Site-Directed Mutagenesis Kit (Agilent Technologies). После расщепления исходной плазмидной матрицы посредством DpnI, подвергнутый мутагенезу аллель F повторно амплифицировали полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с использованием высокоточной ДНК-полимеразы Q5 (New England Biolabs, Ipswich, MA) или ДНК-полимеразы PrimeSTAR HS (Premix) (Takara/Clontech, Mountain View, CA), и полученный продукт встраивали в экспрессирующий вектор для млекопитающих с использованием набора NEBuilder HiFi DNA Assembly Kit (New England Biolabs) или Gibson Assembly Master Mix (New England Biolabs). Присутствие заданной последовательности подтверждали секвенированием ДНК. Плазмидную ДНК для трансфекции в клетки Expi293 очищали с использованием набора QIAprep Spin MiniPrep Kit (Qiagen, Valencia, CA) или с использованием набора EndoFree Plasmid Mega Kit (Qiagen). Для всех коммерческих наборов или реагентов методики выполняли в соответствии с протоколом изготовителя.

Пример 3. Экспрессия и очистка мутантов белка F RSV

Белок для оценки мутанта белка F RSV получали посредством временной трансфекции клеток Expi293F (ThermoFisher, Waltham, MA) с использованием конструкций ДНК, собранных и полученных, как описано в примере 2. Временные трансфекции проводили в соответствии с протоколом изготовителя.

Очищенную клеточную культуру концентрировали в 5-10 раз с использованием проточной фильтрации вдоль потока с последующей заменой буфера на буфер, пригодный для улавливания на колонке Ni-IMAC. Кондиционированную среду для культивирования клеток, содержащую растворимый белок F, загружали в колонку Ni-IMAC. Продукт элюировали с использованием возрастающих концентраций имидазола. Фракции, содержавшие продукт, объединяли, аз затем загружали в колонку Strep-Tactin (IBA Life Sciences, Goettingen, Германия) Продукт элюировали с колонки Strep-Tactin с использованием возрастающих концентраций дестиобиотина. Фракции, содержавшие продукт, объединяли и подвергали диализу в конечный буфер для хранения. Неочищенные культуральные супернатанты и очищенные белки использовали для анализов in vitro и in vivo, описанных в настоящем описании.

Пример 4: Стабильность мутантов белка F RSV

Стабильность сконструированных мутантов белка F RSV оценивали с использованием тестирования со стрессовым воздействием и экспериментов по стабильности при хранении. В ходе тестирования с термической нагрузкой неочищенные культуральные супернатанты сконструированных мутантов инкубировали в течение 1 часа при 50°C или 60°C и исследовали с использованием специфического к префузионной конформации моноклонального антитела D25 и специфического к префузионной тримерной конформации антитела AM14 в анализах ELISA. Соотношение реактивности антитела в повергнутом стрессовому воздействию против не подвергнутого стрессовому воздействию образца определяют как параметр резистентности к стрессовому воздействию. Ожидается, что более стабильные мутанты имеют более высокую резистентность к стрессовому воздействию. В ходе анализов стабильности при хранении реактивность антитела против префузионной конформации в неочищенных культуральных супернатантах после хранения в течение 1 недели при 4°C сравнивали с реактивность свежих культуральных супернатантов. соотношение активности определяют как стабильность мутанта при хранении.

Результаты представлены в таблицах 7A-7C и 8A-8C. Резистентность к стрессовому воздействию вычисляли как долю реактивности специфического к префузионной конформации mAb, оставшейся после стрессового воздействия ("NR" - не было обнаружено реактивности, "ND" - не определено). Большинство стабилизирующих аминокислотных замен, идентифицированных в скрининге индивидуальных сконструированных способами инженерии мутантов с мутациями для образования дисульфидной связи, мутантов с заполняющими полость мутациями и мутантов с электростатическими мутациями (стабильность префузионной конформации, определенная по реактивности D25, оставшейся после термического стрессового воздействия) комбинировали в комбинированные мутанты. Эти комбинированные мутанты также подвергали термическому стрессовому воздействию и исследовали с использованием двух моноклональных антител - D25 (специфичное к префузионной конформации) и AM14 (специфичное к префузионной тримерной конформации). Специфичный к префузионной тримерной конформации четвертичный эпитоп, распознаваемый антителом AM14, является на значимом уровне более чувствительным к термическому стрессовому воздействию, чем эпитоп D25 (таблица 8B). После стрессового воздействия при 60°C не сохранялось значительной реактивности AM14 ни в отношении одного из комбинированных мутантов, тем не менее, большинство мутантов сохраняли реактивность D25 после термического стрессового воздействия при 60°C. Это наблюдение обеспечивает важное доказательство того, что антитело AM14 является значительно более точным индикатором утраты префузионной структуры и, в частности, утраты префузионного тримерного состояния.

Таблица 7A. Термическая стабильность и стабильность при хранении мутантов, содержащих внесенные способами инженерии дисульфиды

Таблица 7B. Термическая стабильность и стабильность при хранении мутантов, содержащих заполняющие полость мутации

Таблица 7C. Термическая стабильность и стабильность при хранении мутантов, содержащих электростатические мутации

Таблица 8A. Термическая стабильность и стабильность при хранении мутантов, содержащих двойные комбинированные мутации

Таблица 8B. Термическая стабильность и стабильность при хранении мутантов, содержащих тройные комбинированные мутации

Резистентность к стрессовому воздействию вычисляли в качестве доли реактивности mAb, специфичного к префузионной конформации (D25), и mAb, специфичного к тримерной префузионной конформации (AM14) после стрессового воздействия. "NR" - не было выявлено реактивности, "ND" - не определено.

Таблица 8C: Термическая стабильность мутанта, лишенного домена тримеризации фолдона (pXCS899)

Пример 5: Конформационная целостность мутантов белка F RSV, оцененная с использованием панели моноклональных антител.

Целью исследования была идентификация мутантов белка F RSV, которые сохраняют структурную целостность префузионной конформации F RSV, включая префузионную тримерную конформацию и сборку. Каждый мутант тестировали против панели эталонных mAb, которая включает два mAb, специфичных к участку ∅ и префузионной конформации (AM22 и D25), одно mAb, которое связывает эпитоп вблизи участка II и также является специфичным к префузионной конформации (MPE8), одно специфичное к участку II mAb, которое связывает как префузионный, так и постфузионный F (паливизумаб, Synagis^®), одно специфичное к префузионному тримеру mAb (AM14) и специфичное к участку IV антитело, которое связывает как префузионный, так и постфузионный F (101F). Ожидалось, что мутанты белка F RSV, остающиеся в префузионной конформации, будут связываться всеми эталонными тестируемыми антителами.

Для оценки реактивности антитела в отношении каждого мутанта использовали устройство OCTET HTX (ForteBio, Pall Corporation, Port Washington, NY), которое измеряет кинетику биомолекулярных взаимодействий в реальном времени. Эксперименты проводили при встряхивании 1000 об/мин, при температуре 30°C в 96-луночных черных планшетах (Greiner Bio-One, Monroe, NC) с конечным объемом 200 мкл на лунку. Биосенсорные чипы, направленные против HIS, уравновешивали в фосфатно-солевом буфере (PBS), 2% бычьем сывороточном альбумине (BSA), 0,05% Tween 20 (PBT) в течение 10 мин, а затем начинали измерение связывания. Меченные посредством HIS мутантные белки улавливали на биосенсоры, направленные против HIS, в течение 5 мин. Исходный уровень определяли в PBT в течение 3 мин перед стадией ассоциации с 20 нМ антителами в PBT в течение 10 мин. Диссоциацию всех антител позволяли в течение 20 мин в тех же лунках, которые использовали для установления исходного уровня. Для кинетического анализа на основе аппроксимации кривых стадий ассоциации и диссоциации и предполагая обратимое связывающее взаимодействие 1:1, использовали программное обеспечение для анализа данных OCTET (версии 8.2, Pall Corp.). Связывающий ответ (сдвиг в нм) для каждого из мутантов для различных эталонных моноклональных антител представлен в таблицах 9A и 9B. Величина ответа <0,10 считалась отрицательной и является пределом обнаружения (LOD) для этого анализа. Величины ≥0,10 считались положительными и указывали на связывание антитела с отдельными мутантами. Различные степени связывания наблюдали среди мутантов и для каждого антитела. Однако большинство комбинированных мутантов связывались 101F и Synagis, в то время как мутанты, например, такие как pXCS735 и pXCS776, продемонстрировали снижение связывания по меньшей мере с одним специфичным к префузионной конформации mAb. Снижение связывания указывало на отсутствие интактной префузионной конформации.

Таблица 9A. Результаты OCTET для специфичных к префузионной конформации антител

Примечание: LoD=предел обнаружения, ND=не определено

Таблица 9B. Результаты OCTET для антител 101F и Synagis

Пример 6. Анализ молекулярной массы и распределения размеров отдельных мутантов F RSV.

Стабилизированные мутанты префузионного F анализировали посредством SDS-PAGE с последующим вестерн-блоттингом с использованием специфичного к F RSV моноклонального антитела L4 [Walsh EE, Cote PT, Fernie BF et al. Analysis of the Respiratory Syncytial Virus Fusion Protein Using Monoclonal and Polyclonal Antibodies. J. Gen. Virol. 76: 505-513, 1986.]. На фиг.2A представлены профили SDS-PAGE подвижности репрезентативных мутантов pXCS847, pXCS851 и pXCS852, и DS-Cav1. Во всех случаях в невосстанавливающих условиях присутствовала основная полоса с кажущейся молекулярной массой от 55 до 60 кДа, как и ожидалось для мономерных мутантов F RSV. Наблюдаемое небольшое изменение подвижности между DS-Cav1 и мутантами pXCS847, pXCS851, pXCS852 могло быть следствием природы отдельных дисульфидных связей, и итогового эффекта на общую компактность белка в развернутом состоянии и доступность для SDS.

На фиг.2B описано распределение молекулярной массы и размера мутантов pXCS847, pXCS851, pXCS852 и DS-Cav1 в растворе в нативных условиях. Распределение молекулярной массы и размера оценивали в анализе скорости седименации с использованием аналитической ультрацентрифуги. Очищенный белок центрифугировали при 35000 об/мин при 20°C, и проводили мониторинг УФ-поглощения ячеек с образцом при 280 нм. Данные приводили в соответствии с непрерывным распределением c(s), предполагая одинаковое фрикционное соотношение для всех оседающих структур в ячейке. Все белки оседали с коэффициентом седиминации ~7,6 S и кажущейся молекулярной массой ~180 кДа, что указывало на то, что очищенные белки являются тримерными в растворе. Ожидаемая молекулярная масса тримера F RSV, вычисленная исходя из его аминокислотного состава, составляет 171 кДа.

Пример 7. Спектроскопия кругового дихроизма для охарактеризации целостности вторичной и третичной структуры сконструированных мутантов белка F RSV.

Спектры CD как в дальней, так и в ближней УФ-области регистрировали на автоматизированном регистрирующем спектрополяриметре Jasco J-810, оборудованном держателем ячейки с контролируемой температурой в 6 положениях по принципу Пельтье. Спектры CD в дальней УФ-области регистрировали при концентрации белка 0,10-0,12 мг/мл в 1×PBS, pH 7,4, в 1-мм прямоугольных кварцевых ячейках в пределах от 200 до 260 нм каждый 0,1 нм при скорости 100 нм/мин с шириной полосы 3 нм. Для каждого образца получали пять спектров и усредняли. Спектры CD в ближней УФ-области регистрировали при концентрации белка 0,4-0,5 мг/мл в 1×PBS, pH 7,4, в 1-см прямоугольных кварцевых ячейках в пределах от 250 до 320 нм каждые 0,1 нм при 100 нм/мин с шириной полосы 3 нм. Для каждого образца также получали пять спектров и усредняли. В данные вносили поправку на базовое искажение вследствие буфера и приводили либо к средней остаточной эллиптичности (CD в дальней УФ-области) или молярной эллиптичности (CD в ближней УФ-области), с использованием установленных взаимосвязей.

Результаты представлены на фиг.3A и 3B. Данные CD как в дальней, так и в ближней УФ-области демонстрируют, что все белки сохраняют точно определяемую вторичную и третичную структуру. Более того, очевидное сходство спектров CD дальней и ближней УФ-области указывает на то, что общая вторичная и третичная структура мутантов является сходной и структурная целостность белков сохраняется.

Пример 8. Структурная стабильность сконструированных мутантов белка F RSV

Структурную стабильность очищенных мутантов белка F RSV охарактеризовывали с использованием дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC). Эксперименты по DSC проводили на микрокалориметре VP-DSC (MicroCal, Northampton, MA). Концентрацию белка определяли спектрофотометрически и вносили поправку на рассеяние света. Образцы белка в 1×PBS, pH 7,4, в концентрации 0,2-0,5 мг/мл (концентрация тримера 1,0-2,4 мкмоль/л) сканировали от 10°C до 80°C при 90°C/ч с временем ответа 8 секунд и временем уравновешивания перед сканированием 5 минут. В зависимости от количества наблюдаемых переходов на термограммах профили теплоемкости аппроксимировали к моделям разворачивания из 2 или 3 состояний с использованием программного обеспечения Origin 7.0 предоставляемого производителем DSC. Температуры плавления первых наблюдаемых переходов приведены в качестве температур плавления каждого мутанта.

Данные DSC демонстрируют, что практически все из сконструированных мутантов являются более стабильными, чем DS-Cav1 (таблица 10). Температуры плавления (определяемые как максимумы DSC первого наблюдаемого пика DSC в каждом эксперименте, таблица 10) всех мутантов (за исключением pXCS738) являются более высокими, чем у DS-Cav1, на вплоть до 18°C. Данные DSC демонстрируют, что компьютерное моделирование белков, описанное в примере 1, обеспечило получение значительно более стабильных мутантов F RSV, которые также сохраняют префузионную конформацию (данные Octet, пример 5).

Таблица 10. Температуры плавления мутантов белка F RSV.

Температуры плавления вычисляли из экспериментов DSC (как описано в примере 8).

Пример 9. Механизм утраты префузионной тримерной конформации.

Для охарактеризации конкретного структурного пути, ведущего к утрате префузионной конформации, авторы настоящего изобретения подвергли очищенный DS-Cav1 тестированию в условиях термического стресса. Очищенный гликопротеин (0,5 мг/мл в 1×PBS, pH 7,4) инкубировали при 50°C и 60°C в течение 30, 60 и 120 минут. Связывание специфичного к префузионной конформации mAb D25 и специфичного к префузионному тримеру mAb AM14 с белком, подвергнутым стрессовому воздействию, оценивали посредством экспериментов ELISA, как описано в примере 4). Структурную целостность белка охарактеризовывали посредством CD и DSC, как описано в примерах 7 и 8, соответственно. Результаты представлены на фиг.4-6.

Относительная реактивность AM14 и D25 в подвергнутых стрессовому воздействию образцах представлена на фиг.4. Реактивность как D25, так и AM14, в отношении DS-Cav1 остается в основном неизменной после вплоть до 2 часов инкубации при 50°C. Напротив, реактивность обоих специфичных к префузионной конформации антител постепенно утрачивается при обработке при 60°C. Более того, реактивность AM14 утрачивается быстрее, чем реактивность D25, что указывает на то, что четвертичный префузионный эпитоп AM14 разрушается раньше, чем эпитоп D25. Этот результат указывает на преимущество антитела AM14 в качестве инструмента для обнаружения утраты префузионной тримерной конформации.

Оценка посредством DSC не подвергнутого стрессовому воздействию DS-Cav1 (фиг.5) показывает, что белок претерпевает обратимый конформационный переход между 50°C и 60°C. Этот переход не соответствует утрате префузионной конформации, которое необратимо. Более того, этот переход не является результатом общего разворачивания белка, поскольку DS-Cav1 сохраняет определенные спектры CD в ближней и дальней УФ-области (фиг.6A и 6B), что указывает на то, что белок остается свернутым в этих условиях. Наиболее вероятным объяснением наблюдаемого перехода DSC является обратимая потеря четвертичной структуры белка, т.е. по меньшей мере локальная диссоциация префузионного тримера. Эта диссоциация требуется для начальных стадий в направлении утраты префузионной конформации, поскольку ни реактивность AM14, ни реактивность D25 не утрачивается заметно до этого перехода (фиг.4, данные ELISA). Эти данные подчеркивают важность целостности тримера для стабильности префузионной конформации. Целостность тримера может быть подтверждена по реактивности специфичного к четвертичному эпитопу антитела AM14, но не специфичного к участку ∅ антитела D25.

Эти данные указывают на то, что утрата префузионной конформации происходит по следующему пути:

N₃↔3N→3U→U_n

Нативный тример (N₃) обратимо диссоциирует на нативные мономеры (3N), которые медленно и необратимо утрачивают префузионную конформацию (3U) и в конечном итоге агрегируют, образуя высокомолекулярные структуры (U_n). Диссоциация тримера в свою очередь означает, что DS-Cav1 проявляет зависимую от концентрации белка резистентность к термическому стрессу: снижение общей концентрации белка обеспечивает диссоциацию тримера, которая в свою очередь ускоряет утрату префузионной конформации. Напротив, стабилизированные мутанты префузионного F (например, 851) должны демонстрировать от малой до никакой зависимости от концентрации их резистентности к стрессовому воздействию при условии, что они являются достаточно стабильными. На фиг.7A и 7B представлены следующие экспериментальные доказательства для подтверждения этой гипотезы. Образцы белка подвергали серийному разведению и подвергали стрессовому воздействию при 50°C в течение одного часа. Реактивность AM14 и D25, оставшуюся после стрессового воздействия относительно контрольных (не подвергнутых стрессовому воздействию) образцов, оценивали в анализах ELISA. Резистентность DS-Cav1 демонстрирует выраженную зависимость от концентрации белка при определении по реактивности либо антитела AM14 (фиг.7A), либо антитела D25 (фиг.7B). Напротив, резистентность к стрессовому воздействию стабилизированных мутантов pXCS851 и pXCS898 остается в основном неизменной в том же диапазоне концентраций белка.

Пример 10: Стабилизированные мутанты белка F RSV в префузионной конформации индуцируют ответы нейтрализующих антител у мышей.

Самок мышей Balb/c иммунизировали либо 0,025 мкг, либо 0,25 мкг одного из DS-Cav1, F дикого типа, мутантов F pXCS852, pXCS855, pXCS830, pXCS853, pXCS780, pXCS898, pXCS851, pXCS874, pXCS881, pXCS738 или pXCS847, с 0,1 мг на дозу фосфата алюминия в качестве адъюванта или без него. Иммунизации проводили внутримышечно на 0 и 3 неделях (таблица 11). Сыворотки до (0 неделя) введения и после 2 доз (PD2, 5 неделя) оценивали в анализе нейтрализации RSV подсемейства A, как описано, с небольшими модификациями [Eyles JE, Johnson JE, Megati S, et al. Nonreplicating vaccines can protect african green monkeys from the Memphis 37 strain of respiratory syncytial virus. J Inf Dis. 208(2):319-29, 2013.]. В кратком изложении, титры нейтрализующих антител определяли как коэффициент разведения сыворотки, приводящий к 50% снижению количества инфекционных единиц. Результаты сообщены в качестве геометрического среднего значения титра для 10 мышей на группу. Сывороткам без поддающейся обнаружению нейтрализации вируса присваивали титр 20. Кратность повышения геометрических средних значений 50% титров указана в качестве соотношение величины титра после 2 дозы (PD2) к титру до иммунизации в каждой группе.

Таблица 11. Схема иммунизации в исследовании иммуногенности у мышей, сравнивающем мутанты префузионного F.

Все исследованные мутанты индуцировали ответ нейтрализующих антител после двух иммунизаций у мышей (таблица 12). В целом, титры антител были более стабильно высокими при обеих дозах антигена для мутантов 852, 830, 851 и 847, демонстрируя, что эти мутанты были более иммуногенными формами стабилизированного префузионного гликопротеина F RSV (таблица 12 и 13, фиг.8).

Таблица 12. Геометрическое среднее значение нейтрализующих на 50% титров антител у мышей Balb/c после иммунизации мутантами префузионного F.

Таблица 13. Кратность повышения нейтрализующих на 50% титров антител у мышей Balb/c после иммунизации мутантами префузионного F.

Сравнение нейтрализующих на 50% титров антитела в момент PD2 с данными охарактеризации их соответствующих мутантов in vitro демонстрирует корреляцию между титром нейтрализующих антител в момент PD2 и резистентностью AM14 к термическому стрессовому воздействию (фиг.9). Этот результат указывает на то, что связывание AM14, которое является специфичным к префузионному тримерному состоянию, коррелирует с иммуногенностью мутантов.

Пример 11. Мутанты F RSV, содержащие внесенные мутации на цистеин в области HRB

11A. Получение мутантов F RSV, содержащих внесенные мутации в области HRB

Репрезентативные мутанты F RSV, которые содержат внесенные мутации на цистеин в области HRB (приблизительно аминокислоты 476-524 полипептида F0), представлены в таблице 14, где указаны конкретные мутации в этой области в каждом мутанте. В дополнение к мутациям в области HRB, каждый из этих мутантов также включает внесенные мутации S55C, L188C, T54H и D486S. Эти мутанты получали способами, сходными со способами, описанными в примерах 1-3. В кратком изложении, для каждого мутанта получали полипептид-предшественник, состоящий из 545 аминокислот, который содержит: (1) аминокислоты 1-529 последовательности SEQ ID NO: 1 за исключением делеции 41 аминокислоты между остатками 104 и 144; (2) внесенные мутации (S55C, L188C, T54H и D486S) вне области HRB, (3) последовательность распознавания протеазой тромбина; (4) домен фолдон; (5) HIS-метку; (6) Streptag II; (7) линкерные последовательности; и (8) внесенные мутации на цистеин, как указано. Сигнальный пептид, который содержит аминокислоты 1-25, отщеплялся от предшественника в процессе экспрессии. Домен фолдон также отщепляли от мутантов, что достигалось расщеплением посредством 500 мкг/мл бычьего альфа-тромбина (HTI) в течение ночи при комнатной температуре после экспрессии.

Таблица 14: Иллюстративные мутанты белка F RSV, содержащие мутанты с внесенными способами инженерии мутациями для образования дисульфида в области HRB

11B. Стабильность мутантов F RSV, содержащих внесенные мутации на цистеин в области HRB

Стабильность мутантов F RSV, представленных в таблице 14, оценивали способом, описанным в примере 8 и примере 4. Результаты представлены в таблицах 15 и 16, соответственно.

Таблица 15: Температуры плавления мутантов белка F RSV

Таблица 16: Термическая стабильность мутантов, содержащих внесенные способами инженерии мутации для образования дисульфида

Резистентность к стрессовому воздействию вычисляли как долю реактивности специфичного к префузионной конформации mAb, оставшейся после стрессового воздействия. Очищенный белок pXCS1106, от которого был отщеплен фолдон, разбавляли в кондиционированной среде в концентрации 12 мкг/мл.

Список необработанных последовательностей

SEQ ID NO: 1. Аминокислотная последовательность полноразмерного F0 нативного RSV A2 (GenBank GI: 138251; Swiss Prot P03420)

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIE LSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPPTNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEINLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGMDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLHNVNAGKSTTNIMITTIIIVIIVILLS LIAVGLLLYCKARSTPVTLSKDQLSGINNIAFSN

SEQ ID NO: 2. Аминокислотная последовательность полноразмерного F0 нативного RSV B (штамм 18537; GenBank GI: 138250; Swiss Prot P13843)

MELLIHRSSAIFLTLAVNALYLTSSQNITEEFYQSTCSAVSRGYFSALRTGWYTSVITIE LSNIKETKCNGTDTKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQNTPAANNRARREAPQYMNYTINTTKNLNVSISKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGIAVSKVLHLEGEVNKIKNALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYINNRLLPIVNQQSCRISNIETVIEFQQMNSRLLEITREFSVN AGVTTPLSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSSNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYV VQLPIYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNIKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQADTCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVSLCNTDIFNSKYDCKIMTSKTDISSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKLEGKNLYVKGEPIINYYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRRSDELLHNVNTGKSTTNIMITTIIIVIIVVLLS LIAIGLLLYCKAKNTPVTLSKDQLSGINNIAFSK

SEQ ID NO: 3. Эктодомен с фолдоном F RSV A2

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 4: Нативная аминокислотная последовательность F RSV RSVA/Homo sapiens/USA/LA2_21/2013 (Ontario) (GenBank GI: AHX57185):

MELPILKTNAITTILAAVTLCFASSQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPAANSRARRELPRFMNYTLNNTKNTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGIAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSSNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNIDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLHNVNAGKSTTNIMITTIIIVIIVILLALIAVGLLLYCKARSTPVTLSKDQLSGINNIAFSN

SEQ ID NO: 5: Эктодомен c фолдоном F RSV RSVA/Homo sapiens/USA/LA2_21/2013:

MELPILKTNAITTILAAVTLCFASSQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPAANSRARRELPRFMNYTLNNTKNTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGIAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSSNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNIDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 6: Нативная аминокислотная последовательность RSV RSVB/Homo sapiens/PER/FPP00592/2011 F (Buenos Aires) (GenBank GI: AHV80758):

MELLIHRSSAIFLTLAINALYLTSSQNITEEFYQSTCSAVSRGYFSALRTGWYTSVITIELSNIKETKCNGTDTKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQNTPAANNRARREAPQYMNYTINTTKNLNVSISKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGIAVSKVLHLEGEVNKIKNALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYINNQLLPIVNQQSCRISNIETVIEFQQKNSRLLEITREFSVNAGVTTPLSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSSNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPIYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNIKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQADTCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVSLCNTDIFNSKYDCKIMTSKTDISSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKLEGKNLYVKGEPIINYYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRRSDELLHNVNTGKSTTNIMITAIIIVIIVVLLSLIAIGLLLYCKAKNTPVTLSKDQLSGINNIAFSK

SEQ ID NO: 7: Эктодомен с фолдоном F RSV RSVB/Homo sapiens/PER/FPP00592/2011:

MELLIHRSSAIFLTLAINALYLTSSQNITEEFYQSTCSAVSRGYFSALRTGWYTSVITIELSNIKETKCNGTDTKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQNTPAANNRARREAPQYMNYTINTTKNLNVSISKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGIAVSKVLHLEGEVNKIKNALLSTNKAVVSLSNGVSVLTSKVLDLKNYINNQLLPIVNQQSCRISNIETVIEFQQKNSRLLEITREFSVNAGVTTPLSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSSNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPIYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNIKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQADTCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVSLCNTDIFNSKYDCKIMTSKTDISSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKLEGKNLYVKGEPIINYYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRRSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 8: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS738:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccactgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgtgtggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacatccaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaaatcctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgtgtagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttccgacgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S55C: 163-165; L142C: 424-426; L188C: 562-564; V296I: 886-888; N371C: 1111-1113]

SEQ ID NO: 9: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS780:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtacacctgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacatccaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; S55C: 163-165; L188C: 562-564; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 10: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS830:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccactgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttccgacgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S55C: 163-165; L188C: 562-564; S190I: 568-570]

SEQ ID NO: 11: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS847:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtacaccagcgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgcctgtaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcatgtgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgctgacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T103C: 307-309; I148C: 442-444; S190I: 568-570; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 12: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид pXCS851:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccacagcgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgcctgtaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcatgtgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgctgacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaaatcctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; T103C: 307-309; I148C: 442-444; S190I: 568-570; V296I: 886-888; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 13: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS852:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccactgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacatccaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539 (only including native RSV F последовательность); F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S55C: 163-165; L188C: 562-564; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 14: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS853:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtacacctgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие компоненты (координаты в п.н.): Сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; S55C: 163-165; L188C: 562-564; S190I: 568-570; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 15: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS855:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccactgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие основные компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S55C: 163-165; L188C: 562-564; S190I: 568-570; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 16: Нуклеотидная последовательность, кодирующие полипептид pXCS874:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtacaccagcgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtgtaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgctgacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtgcattatcaaggaggaagtgctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttcctccgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие основные компоненты (координаты в п.н.): cигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; S155C: 463-465; S190I: 568-570; S290C: 868-870; D486S: 1456-1458]

SEQ ID NO: 17: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS881:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccactgtgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgtgtggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtccaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgtgtacatccaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtcaattatcaaggaggaaatcctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgtgtagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttccagccagttcagtgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие основные компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S55C: 163-165; L142C: 424-426; L188C: 562-564; V296I: 886-888; N371C: 1111-1113; D486S: 1456-1458; E487Q: 1459-1461; D489S: 1465-1467]

SEQ ID NO: 18: Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид-предшественник pXCS898:

atggaacttctgatcctgaaagccaacgcgattaccactatcctgactgccgtcaccttctgcttcgcatcgggacagaacattaccgaggagttctaccagtccacctgttcggcggtgtccaagggttacctctcggccctgagaactggctggtaccacagcgtgattactatcgagctgagcaacatcaaggagaacaagtgcaatggaacggacgcgaaggtcaagctgattaagcaggaactcgataagtacaagaacgccgtgaccgagctccagctgctgatgcaatcgacccctgccactaacaacagagctcgccgggaactgccgcgcttcatgaattacaccctcaacaacgcgaagaaaaccaacgtgaccctgtccaagaagcgcaagcggaggttcctgggattcctgttgggcgtgggctccgcaatcgcatccggagtggccgtgtgtaaagtgctgcatctggagggggaagtgaacaagatcaagtccgccctcctgtcaactaataaggcggtggtgtccctgagcaacggagtcagcgtgctgacaatcaaggtcctggacctcaagaactacatcgacaagcagctgttgcccatcgtcaacaagcagtcatgctcgattagcaatatcgaaaccgtgattgagttccagcagaagaacaacagactgctcgaaattacccgggagttttccgtgaacgccggagtgaccactcctgtgtccacctacatgcttacgaactccgaactgctcagcctcatcaacgatatgccgatcactaacgaccagaagaagttgatgagcaacaatgtgcagatcgtgcgccaacagtcctactcaatcatgtgcattatcaaggaggaaatcctcgcctatgtggtgcaattgcctctgtacggagtcatcgacacaccctgctggaagctgcacactagcccactctgtacgaccaacaccaaggaaggttccaacatctgcctgactaggaccgatcggggctggtattgcgataatgctgggtccgtgagcttcttcccgcaagccgagacttgcaaagtgcagtcaaaccgcgtgttctgtgacaccatgaacagcctgaccctgccatccgaagtcaacctctgcaacgtggacatctttaacccgaaatacgactgcaagattatgacctccaagaccgacgtcagcagctctgtcatcactagcctgggagctattgtgtcctgctacggaaagaccaaatgcactgcctcgaacaagaacagaggcatcatcaagaccttcagcaacggctgtgactacgtgtccaacaagggagtggacaccgtgtccgtcgggaacaccctgtactacgtgaacaagcaggaggggaagtcgctctacgtcaagggggaaccgattatcaatttctacgaccccctggtgttcccttccgacgagttcgatgcctccatatcccaagtcaacgagaagatcaaccagtctcttgccttcatccggaagtcggacgaactgctgtccgccatcggtggctatattccggaagcccccagggatggacaggcctacgtgcggaaggatggagaatgggtgcttttgtccaccttcctgggcggtctggtgccccgcggctcacaccatcatcaccaccacggttcgtggtcccaccctcaatttgagaagtga

[Соответствующие основные компоненты (координаты в п.н.): сигнальная последовательность: 1-75; pep27: 328-408; F1: 409-1539; F2: 76-327; фолдон: 1552-1632; последовательность распознавания тромбином: 1639-1656; His-метка: 1657-1674; Streptag II: 1681-1704; линкерные последовательности: 1540-1551, 1633-1638, 1675-1680; P102A (встречающаяся в природе замена): 304-306; I379V (встречающаяся в природе замена): 1135-1137; M447V (встречающаяся в природе замена): 1339-1341; T54H: 160-162; S155C: 463-465; S190I: 568-570; S290C: 868-870; V296I: 886-888]

SEQ ID NO: 19: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS847:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPACNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSACASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T103C; I148C; S190I; D486S]

SEQ ID NO: 20: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS851:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPACNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSACASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEILAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H; T103C; I148C; S190I; V296I; D486S]

SEQ ID NO: 21: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS852:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513 (only including native RSV F последовательность); F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S55C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 22: Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи антитела D25: QVQLVQSGAEVKKPGSSVMVSCQASGGPLRNYIINWLRQAPGQGPEWMGGIIPVLGTVHYAPKFQGRVTITADESTDTAYIHLISLRSEDTAMYYCATETALVVSTTYLPHYFDNWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 23: Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела D25:

DIQMTQSPSSLSAAVGDRVTITCQASQDIVNYLNWYQQKPGKAPKLLIYVASNLETGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDVATYYCQQYDNLPLTFGGGTKVEIKR

SEQ ID NO: 24: Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи антитела AM14:

EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSFSHYAMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGENTYYADSVKGRFSISRDNSKNTVSLQMNSLRPEDTALYYCARDRIVDDYYYYGMDVWGQGATVTVSS

SEQ ID NO: 25: Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела AM14:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDIKKYLNWYHQKPGKVPELLMHDASNLETGVPSRFSGRGSGTDFTLTISSLQPEDIGTYYCQQYDNLPPLTFGGGTKVEIKRTV

SEQ ID NO: 26: Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи антитела AM22

QVQLVQSGAEVKKPGATVKVSCKISGHTLIKLSIHWVRQAPGKGLEWMGGYEGEVDEIFYAQKFQHRLTVIADTATDTVYMELGRLTSDDTAVYFCGTLGVTVTEAGLGIDDYWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 27: Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела AM22

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQIVSRNHLAWYQQKPGQAPRLLIFGASSRATGIPVRFSGSGSGTDFTLTINGLAPEDFAVYYCLSSDSSIFTFGPGTKVDFK

SEQ ID NO: 28: Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи антитела MPE8:

EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSSISASSSYSDYADSAKGRFTISRDNAKTSLFLQMNSLRAEDTAIYFCARARATGYSSITPYFDIWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 29: Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела MPE8:

QSVVTQTPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYDNNNRPSGVPDRFSASKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDRNLSGVFGTGTKVTVL

SEQ ID NO: 30: Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи антитела 101F:

QVTLKESGPGILQPSQTLSLTCSFSGFSLSTSGMGVSWIRQPSGKGLEWLAHIYWDDDKRYNPSLKSRLTISKDTSRNQVFLKITSVDTADTATYYCARLYGFTYGFAYWGQGTLVTVSA

SEQ ID NO: 31: Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела 101F:

DIVLTQSPASLAVSLGQRATIFCRASQSVDYNGISYMHWFQQKPGQPPKLLIYAASNPESGIPARFTGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQQIIEDPWTFGGGTKLEIK

SEQ ID NO: 32: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS738:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLCGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEILAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMCSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S55C (внесенная мутация); L142C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); V296I (внесенная мутация); N371C (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 33: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS780:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); S55C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 34: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS830:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S55C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); S190I (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 35: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS853:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); S55C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); S190I (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 36: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS855:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S55C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); S190I (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 37: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS874:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYTSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVCKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMCIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); S155C (внесенная мутация); S190I (внесенная мутация); S29C (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 38: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS881:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLCGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEILAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMCSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSQFSASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S55C (внесенная мутация); L142C (внесенная мутация); L188C (внесенная мутация); V296I (внесенная мутация); N371C (внесенная мутация); D486S (внесенная мутация); E487Q (внесенная мутация); D489S (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 39: Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS898:

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHSVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVCKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVLTIKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMCIIKEEILAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSDEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

[Соответствующие основные компоненты (координаты аминокислотных остатков): Сигнальная последовательность (не присутствует в конечном продукте): 1-25; pep27 (не присутствует в конечном продукте): 110-136; F1: 137-513; F2: 26-109; фолдон: 518-544; последовательность распознавания тромбином: 547-552; His-метка: 553-558; Streptag II: 561-568; линкерные последовательности: 514-517, 545-546, 559-560; P102A (встречающаяся в природе замена); I379V (встречающаяся в природе замена); M447V (встречающаяся в природе замена); T54H (внесенная мутация); S155C (внесенная мутация); S190I (внесенная мутация); S29C (внесенная мутация); V296I (внесенная мутация)]

SEQ ID NO: 40: Аминокислотная последовательность фолдона фибритина T4:

GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL

SEQ ID NO: 271. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS899

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATNNRARRELPRFMNYTLNNAKKTNVTLSKKRKRRFLGFLLGVGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLGGLVPRGSHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 272. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1106

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRCCDELLHNVNAGKSTTNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 273. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1107

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLHCCNAGKSTTNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 274. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1108

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLHNVNAGKSCCNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 275. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1109

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRCCDELLHCCNAGKSTTNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 276. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1110

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRCCDELLHNVNAGKSCCNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 277. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1111

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRKSDELLHCCNAGKSCCNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

SEQ ID NO: 278. Аминокислотная последовательность полипептида-предшественника pXCS1112

MELLILKANAITTILTAVTFCFASGQNITEEFYQSTCSAVSKGYLSALRTGWYHCVITIELSNIKENKCNGTDAKVKLIKQELDKYKNAVTELQLLMQSTPATGSAIASGVAVSKVLHLEGEVNKIKSALLSTNKAVVSLSNGVSVCTSKVLDLKNYIDKQLLPIVNKQSCSISNIETVIEFQQKNNRLLEITREFSVNAGVTTPVSTYMLTNSELLSLINDMPITNDQKKLMSNNVQIVRQQSYSIMSIIKEEVLAYVVQLPLYGVIDTPCWKLHTSPLCTTNTKEGSNICLTRTDRGWYКDNAGSVSFFPQAETCKVQSNRVFCDTMNSLTLPSEVNLCNVDIFNPKYDCKIMTSKTDVSSSVITSLGAIVSCYGKTKCTASNKNRGIIKTFSNGCDYVSNKGVDTVSVGNTLYYVNKQEGKSLYVKGEPIINFYDPLVFPSSEFDASISQVNEKINQSLAFIRCCDELLHCCNAGKSCCNIMITTLVPRGSGGSAIGGYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLGGHHHHHHGSWSHPQFEK

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Pfizer Inc.

<120> Мутанты белка F RSV

<130> PC72226A

<150> US 62/387,270

<151> 2015-12-23

<150> US 62/421,184

<151> 2016-11-11

<160> 326

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 574

<212> БЕЛОК

<213> Респираторно-синцитиальный вирус человека

<400> 1

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Pro Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Ile Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Met Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu His Asn Val Asn Ala Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr

515 520 525

Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ser Leu Ile Ala Val

530 535 540

Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser

545 550 555 560

Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn

565 570

<210> 2

<211> 574

<212> БЕЛОК

<213> Респираторно-синцитиальный вирус человека

<400> 2

Met Glu Leu Leu Ile His Arg Ser Ser Ala Ile Phe Leu Thr Leu Ala

1 5 10 15

Val Asn Ala Leu Tyr Leu Thr Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Asn Thr Pro Ala Ala Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Ala Pro

100 105 110

Gln Tyr Met Asn Tyr Thr Ile Asn Thr Thr Lys Asn Leu Asn Val Ser

115 120 125

Ile Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn Asn Arg Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Met Asn Ser Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly

450 455 460

Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu His Asn Val Asn Thr Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr

515 520 525

Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Val Leu Leu Ser Leu Ile Ala Ile

530 535 540

Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Lys Asn Thr Pro Val Thr Leu Ser

545 550 555 560

Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Lys

565 570

<210> 3

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 3

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 4

<211> 574

<212> БЕЛОК

<213> Респираторно-синцитиальный вирус человека

<400> 4

Met Glu Leu Pro Ile Leu Lys Thr Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Ala

1 5 10 15

Ala Val Thr Leu Cys Phe Ala Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Ala Asn Ser Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Thr Lys Asn Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Ile

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu His Asn Val Asn Ala Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr

515 520 525

Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ala Leu Ile Ala Val

530 535 540

Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser

545 550 555 560

Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn

565 570

<210> 5

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 5

Met Glu Leu Pro Ile Leu Lys Thr Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Ala

1 5 10 15

Ala Val Thr Leu Cys Phe Ala Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Ala Asn Ser Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Thr Lys Asn Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Ile

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 6

<211> 574

<212> БЕЛОК

<213> Респираторно-синцитиальный вирус человека

<400> 6

Met Glu Leu Leu Ile His Arg Ser Ser Ala Ile Phe Leu Thr Leu Ala

1 5 10 15

Ile Asn Ala Leu Tyr Leu Thr Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Asn Thr Pro Ala Ala Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Ala Pro

100 105 110

Gln Tyr Met Asn Tyr Thr Ile Asn Thr Thr Lys Asn Leu Asn Val Ser

115 120 125

Ile Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn Asn Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Ser Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly

450 455 460

Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu His Asn Val Asn Thr Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr

515 520 525

Ala Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Val Leu Leu Ser Leu Ile Ala Ile

530 535 540

Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Lys Asn Thr Pro Val Thr Leu Ser

545 550 555 560

Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Lys

565 570

<210> 7

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический пептид

<400> 7

Met Glu Leu Leu Ile His Arg Ser Ser Ala Ile Phe Leu Thr Leu Ala

1 5 10 15

Ile Asn Ala Leu Tyr Leu Thr Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Asn Thr Pro Ala Ala Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Ala Pro

100 105 110

Gln Tyr Met Asn Tyr Thr Ile Asn Thr Thr Lys Asn Leu Asn Val Ser

115 120 125

Ile Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn Asn Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Ser Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly

450 455 460

Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 8

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 8

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc actgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgtgtggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacatcc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaaatcct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg tgtagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttccgacga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 9

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 9

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtaca cctgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacatcc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 10

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 10

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc actgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttccgacga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 11

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 11

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtaca ccagcgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgcctgta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc atgtgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gctgacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 12

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 12

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc acagcgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgcctgta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc atgtgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gctgacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaaatcct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 13

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 13

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc actgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacatcc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 14

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 14

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtaca cctgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 15

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 15

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc actgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 16

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 16

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtaca ccagcgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgttgggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtgtaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gctgacaatc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtgc attatcaagg aggaagtgct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg aacagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttcctccga gttcgatgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 17

<211> 1707

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 17

atggaacttc tgatcctgaa agccaacgcg attaccacta tcctgactgc cgtcaccttc 60

tgcttcgcat cgggacagaa cattaccgag gagttctacc agtccacctg ttcggcggtg 120

tccaagggtt acctctcggc cctgagaact ggctggtacc actgtgtgat tactatcgag 180

ctgagcaaca tcaaggagaa caagtgcaat ggaacggacg cgaaggtcaa gctgattaag 240

caggaactcg ataagtacaa gaacgccgtg accgagctcc agctgctgat gcaatcgacc 300

cctgccacta acaacagagc tcgccgggaa ctgccgcgct tcatgaatta caccctcaac 360

aacgcgaaga aaaccaacgt gaccctgtcc aagaagcgca agcggaggtt cctgggattc 420

ctgtgtggcg tgggctccgc aatcgcatcc ggagtggccg tgtccaaagt gctgcatctg 480

gagggggaag tgaacaagat caagtccgcc ctcctgtcaa ctaataaggc ggtggtgtcc 540

ctgagcaacg gagtcagcgt gtgtacatcc aaggtcctgg acctcaagaa ctacatcgac 600

aagcagctgt tgcccatcgt caacaagcag tcatgctcga ttagcaatat cgaaaccgtg 660

attgagttcc agcagaagaa caacagactg ctcgaaatta cccgggagtt ttccgtgaac 720

gccggagtga ccactcctgt gtccacctac atgcttacga actccgaact gctcagcctc 780

atcaacgata tgccgatcac taacgaccag aagaagttga tgagcaacaa tgtgcagatc 840

gtgcgccaac agtcctactc aatcatgtca attatcaagg aggaaatcct cgcctatgtg 900

gtgcaattgc ctctgtacgg agtcatcgac acaccctgct ggaagctgca cactagccca 960

ctctgtacga ccaacaccaa ggaaggttcc aacatctgcc tgactaggac cgatcggggc 1020

tggtattgcg ataatgctgg gtccgtgagc ttcttcccgc aagccgagac ttgcaaagtg 1080

cagtcaaacc gcgtgttctg tgacaccatg tgtagcctga ccctgccatc cgaagtcaac 1140

ctctgcaacg tggacatctt taacccgaaa tacgactgca agattatgac ctccaagacc 1200

gacgtcagca gctctgtcat cactagcctg ggagctattg tgtcctgcta cggaaagacc 1260

aaatgcactg cctcgaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgtgac 1320

tacgtgtcca acaagggagt ggacaccgtg tccgtcggga acaccctgta ctacgtgaac 1380

aagcaggagg ggaagtcgct ctacgtcaag ggggaaccga ttatcaattt ctacgacccc 1440

ctggtgttcc cttccagcca gttcagtgcc tccatatccc aagtcaacga gaagatcaac 1500

cagtctcttg ccttcatccg gaagtcggac gaactgctgt ccgccatcgg tggctatatt 1560

ccggaagccc ccagggatgg acaggcctac gtgcggaagg atggagaatg ggtgcttttg 1620

tccaccttcc tgggcggtct ggtgccccgc ggctcacacc atcatcacca ccacggttcg 1680

tggtcccacc ctcaatttga gaagtga 1707

<210> 18

<211> 1707

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 18

Ala Thr Gly Gly Ala Ala Cys Thr Thr Cys Thr Gly Ala Thr Cys Cys

1 5 10 15

Thr Gly Ala Ala Ala Gly Cys Cys Ala Ala Cys Gly Cys Gly Ala Thr

20 25 30

Thr Ala Cys Cys Ala Cys Thr Ala Thr Cys Cys Thr Gly Ala Cys Thr

35 40 45

Gly Cys Cys Gly Thr Cys Ala Cys Cys Thr Thr Cys Thr Gly Cys Thr

50 55 60

Thr Cys Gly Cys Ala Thr Cys Gly Gly Gly Ala Cys Ala Gly Ala Ala

65 70 75 80

Cys Ala Thr Thr Ala Cys Cys Gly Ala Gly Gly Ala Gly Thr Thr Cys

85 90 95

Thr Ala Cys Cys Ala Gly Thr Cys Cys Ala Cys Cys Thr Gly Thr Thr

100 105 110

Cys Gly Gly Cys Gly Gly Thr Gly Thr Cys Cys Ala Ala Gly Gly Gly

115 120 125

Thr Thr Ala Cys Cys Thr Cys Thr Cys Gly Gly Cys Cys Cys Thr Gly

130 135 140

Ala Gly Ala Ala Cys Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Thr Ala Cys Cys

145 150 155 160

Ala Cys Ala Gly Cys Gly Thr Gly Ala Thr Thr Ala Cys Thr Ala Thr

165 170 175

Cys Gly Ala Gly Cys Thr Gly Ala Gly Cys Ala Ala Cys Ala Thr Cys

180 185 190

Ala Ala Gly Gly Ala Gly Ala Ala Cys Ala Ala Gly Thr Gly Cys Ala

195 200 205

Ala Thr Gly Gly Ala Ala Cys Gly Gly Ala Cys Gly Cys Gly Ala Ala

210 215 220

Gly Gly Thr Cys Ala Ala Gly Cys Thr Gly Ala Thr Thr Ala Ala Gly

225 230 235 240

Cys Ala Gly Gly Ala Ala Cys Thr Cys Gly Ala Thr Ala Ala Gly Thr

245 250 255

Ala Cys Ala Ala Gly Ala Ala Cys Gly Cys Cys Gly Thr Gly Ala Cys

260 265 270

Cys Gly Ala Gly Cys Thr Cys Cys Ala Gly Cys Thr Gly Cys Thr Gly

275 280 285

Ala Thr Gly Cys Ala Ala Thr Cys Gly Ala Cys Cys Cys Cys Thr Gly

290 295 300

Cys Cys Ala Cys Thr Ala Ala Cys Ala Ala Cys Ala Gly Ala Gly Cys

305 310 315 320

Thr Cys Gly Cys Cys Gly Gly Gly Ala Ala Cys Thr Gly Cys Cys Gly

325 330 335

Cys Gly Cys Thr Thr Cys Ala Thr Gly Ala Ala Thr Thr Ala Cys Ala

340 345 350

Cys Cys Cys Thr Cys Ala Ala Cys Ala Ala Cys Gly Cys Gly Ala Ala

355 360 365

Gly Ala Ala Ala Ala Cys Cys Ala Ala Cys Gly Thr Gly Ala Cys Cys

370 375 380

Cys Thr Gly Thr Cys Cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Cys Gly Cys Ala

385 390 395 400

Ala Gly Cys Gly Gly Ala Gly Gly Thr Thr Cys Cys Thr Gly Gly Gly

405 410 415

Ala Thr Thr Cys Cys Thr Gly Thr Thr Gly Gly Gly Cys Gly Thr Gly

420 425 430

Gly Gly Cys Thr Cys Cys Gly Cys Ala Ala Thr Cys Gly Cys Ala Thr

435 440 445

Cys Cys Gly Gly Ala Gly Thr Gly Gly Cys Cys Gly Thr Gly Thr Gly

450 455 460

Thr Ala Ala Ala Gly Thr Gly Cys Thr Gly Cys Ala Thr Cys Thr Gly

465 470 475 480

Gly Ala Gly Gly Gly Gly Gly Ala Ala Gly Thr Gly Ala Ala Cys Ala

485 490 495

Ala Gly Ala Thr Cys Ala Ala Gly Thr Cys Cys Gly Cys Cys Cys Thr

500 505 510

Cys Cys Thr Gly Thr Cys Ala Ala Cys Thr Ala Ala Thr Ala Ala Gly

515 520 525

Gly Cys Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Thr Cys Cys Cys Thr Gly Ala

530 535 540

Gly Cys Ala Ala Cys Gly Gly Ala Gly Thr Cys Ala Gly Cys Gly Thr

545 550 555 560

Gly Cys Thr Gly Ala Cys Ala Ala Thr Cys Ala Ala Gly Gly Thr Cys

565 570 575

Cys Thr Gly Gly Ala Cys Cys Thr Cys Ala Ala Gly Ala Ala Cys Thr

580 585 590

Ala Cys Ala Thr Cys Gly Ala Cys Ala Ala Gly Cys Ala Gly Cys Thr

595 600 605

Gly Thr Thr Gly Cys Cys Cys Ala Thr Cys Gly Thr Cys Ala Ala Cys

610 615 620

Ala Ala Gly Cys Ala Gly Thr Cys Ala Thr Gly Cys Thr Cys Gly Ala

625 630 635 640

Thr Thr Ala Gly Cys Ala Ala Thr Ala Thr Cys Gly Ala Ala Ala Cys

645 650 655

Cys Gly Thr Gly Ala Thr Thr Gly Ala Gly Thr Thr Cys Cys Ala Gly

660 665 670

Cys Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Ala Cys Ala Gly Ala Cys

675 680 685

Thr Gly Cys Thr Cys Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Cys Cys Cys Gly

690 695 700

Gly Gly Ala Gly Thr Thr Thr Thr Cys Cys Gly Thr Gly Ala Ala Cys

705 710 715 720

Gly Cys Cys Gly Gly Ala Gly Thr Gly Ala Cys Cys Ala Cys Thr Cys

725 730 735

Cys Thr Gly Thr Gly Thr Cys Cys Ala Cys Cys Thr Ala Cys Ala Thr

740 745 750

Gly Cys Thr Thr Ala Cys Gly Ala Ala Cys Thr Cys Cys Gly Ala Ala

755 760 765

Cys Thr Gly Cys Thr Cys Ala Gly Cys Cys Thr Cys Ala Thr Cys Ala

770 775 780

Ala Cys Gly Ala Thr Ala Thr Gly Cys Cys Gly Ala Thr Cys Ala Cys

785 790 795 800

Thr Ala Ala Cys Gly Ala Cys Cys Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Gly

805 810 815

Thr Thr Gly Ala Thr Gly Ala Gly Cys Ala Ala Cys Ala Ala Thr Gly

820 825 830

Thr Gly Cys Ala Gly Ala Thr Cys Gly Thr Gly Cys Gly Cys Cys Ala

835 840 845

Ala Cys Ala Gly Thr Cys Cys Thr Ala Cys Thr Cys Ala Ala Thr Cys

850 855 860

Ala Thr Gly Thr Gly Cys Ala Thr Thr Ala Thr Cys Ala Ala Gly Gly

865 870 875 880

Ala Gly Gly Ala Ala Ala Thr Cys Cys Thr Cys Gly Cys Cys Thr Ala

885 890 895

Thr Gly Thr Gly Gly Thr Gly Cys Ala Ala Thr Thr Gly Cys Cys Thr

900 905 910

Cys Thr Gly Thr Ala Cys Gly Gly Ala Gly Thr Cys Ala Thr Cys Gly

915 920 925

Ala Cys Ala Cys Ala Cys Cys Cys Thr Gly Cys Thr Gly Gly Ala Ala

930 935 940

Gly Cys Thr Gly Cys Ala Cys Ala Cys Thr Ala Gly Cys Cys Cys Ala

945 950 955 960

Cys Thr Cys Thr Gly Thr Ala Cys Gly Ala Cys Cys Ala Ala Cys Ala

965 970 975

Cys Cys Ala Ala Gly Gly Ala Ala Gly Gly Thr Thr Cys Cys Ala Ala

980 985 990

Cys Ala Thr Cys Thr Gly Cys Cys Thr Gly Ala Cys Thr Ala Gly Gly

995 1000 1005

Ala Cys Cys Gly Ala Thr Cys Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly

1010 1015 1020

Thr Ala Thr Thr Gly Cys Gly Ala Thr Ala Ala Thr Gly Cys Thr

1025 1030 1035

Gly Gly Gly Thr Cys Cys Gly Thr Gly Ala Gly Cys Thr Thr Cys

1040 1045 1050

Thr Thr Cys Cys Cys Gly Cys Ala Ala Gly Cys Cys Gly Ala Gly

1055 1060 1065

Ala Cys Thr Thr Gly Cys Ala Ala Ala Gly Thr Gly Cys Ala Gly

1070 1075 1080

Thr Cys Ala Ala Ala Cys Cys Gly Cys Gly Thr Gly Thr Thr Cys

1085 1090 1095

Thr Gly Thr Gly Ala Cys Ala Cys Cys Ala Thr Gly Ala Ala Cys

1100 1105 1110

Ala Gly Cys Cys Thr Gly Ala Cys Cys Cys Thr Gly Cys Cys Ala

1115 1120 1125

Thr Cys Cys Gly Ala Ala Gly Thr Cys Ala Ala Cys Cys Thr Cys

1130 1135 1140

Thr Gly Cys Ala Ala Cys Gly Thr Gly Gly Ala Cys Ala Thr Cys

1145 1150 1155

Thr Thr Thr Ala Ala Cys Cys Cys Gly Ala Ala Ala Thr Ala Cys

1160 1165 1170

Gly Ala Cys Thr Gly Cys Ala Ala Gly Ala Thr Thr Ala Thr Gly

1175 1180 1185

Ala Cys Cys Thr Cys Cys Ala Ala Gly Ala Cys Cys Gly Ala Cys

1190 1195 1200

Gly Thr Cys Ala Gly Cys Ala Gly Cys Thr Cys Thr Gly Thr Cys

1205 1210 1215

Ala Thr Cys Ala Cys Thr Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Gly Ala

1220 1225 1230

Gly Cys Thr Ala Thr Thr Gly Thr Gly Thr Cys Cys Thr Gly Cys

1235 1240 1245

Thr Ala Cys Gly Gly Ala Ala Ala Gly Ala Cys Cys Ala Ala Ala

1250 1255 1260

Thr Gly Cys Ala Cys Thr Gly Cys Cys Thr Cys Gly Ala Ala Cys

1265 1270 1275

Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala Gly Gly Cys Ala Thr Cys

1280 1285 1290

Ala Thr Cys Ala Ala Gly Ala Cys Cys Thr Thr Cys Ala Gly Cys

1295 1300 1305

Ala Ala Cys Gly Gly Cys Thr Gly Thr Gly Ala Cys Thr Ala Cys

1310 1315 1320

Gly Thr Gly Thr Cys Cys Ala Ala Cys Ala Ala Gly Gly Gly Ala

1325 1330 1335

Gly Thr Gly Gly Ala Cys Ala Cys Cys Gly Thr Gly Thr Cys Cys

1340 1345 1350

Gly Thr Cys Gly Gly Gly Ala Ala Cys Ala Cys Cys Cys Thr Gly

1355 1360 1365

Thr Ala Cys Thr Ala Cys Gly Thr Gly Ala Ala Cys Ala Ala Gly

1370 1375 1380

Cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Ala Gly Thr Cys Gly

1385 1390 1395

Cys Thr Cys Thr Ala Cys Gly Thr Cys Ala Ala Gly Gly Gly Gly

1400 1405 1410

Gly Ala Ala Cys Cys Gly Ala Thr Thr Ala Thr Cys Ala Ala Thr

1415 1420 1425

Thr Thr Cys Thr Ala Cys Gly Ala Cys Cys Cys Cys Cys Thr Gly

1430 1435 1440

Gly Thr Gly Thr Thr Cys Cys Cys Thr Thr Cys Cys Gly Ala Cys

1445 1450 1455

Gly Ala Gly Thr Thr Cys Gly Ala Thr Gly Cys Cys Thr Cys Cys

1460 1465 1470

Ala Thr Ala Thr Cys Cys Cys Ala Ala Gly Thr Cys Ala Ala Cys

1475 1480 1485

Gly Ala Gly Ala Ala Gly Ala Thr Cys Ala Ala Cys Cys Ala Gly

1490 1495 1500

Thr Cys Thr Cys Thr Thr Gly Cys Cys Thr Thr Cys Ala Thr Cys

1505 1510 1515

Cys Gly Gly Ala Ala Gly Thr Cys Gly Gly Ala Cys Gly Ala Ala

1520 1525 1530

Cys Thr Gly Cys Thr Gly Thr Cys Cys Gly Cys Cys Ala Thr Cys

1535 1540 1545

Gly Gly Thr Gly Gly Cys Thr Ala Thr Ala Thr Thr Cys Cys Gly

1550 1555 1560

Gly Ala Ala Gly Cys Cys Cys Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Thr

1565 1570 1575

Gly Gly Ala Cys Ala Gly Gly Cys Cys Thr Ala Cys Gly Thr Gly

1580 1585 1590

Cys Gly Gly Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Gly Ala Gly Ala Ala

1595 1600 1605

Thr Gly Gly Gly Thr Gly Cys Thr Thr Thr Thr Gly Thr Cys Cys

1610 1615 1620

Ala Cys Cys Thr Thr Cys Cys Thr Gly Gly Gly Cys Gly Gly Thr

1625 1630 1635

Cys Thr Gly Gly Thr Gly Cys Cys Cys Cys Gly Cys Gly Gly Cys

1640 1645 1650

Thr Cys Ala Cys Ala Cys Cys Ala Thr Cys Ala Thr Cys Ala Cys

1655 1660 1665

Cys Ala Cys Cys Ala Cys Gly Gly Thr Thr Cys Gly Thr Gly Gly

1670 1675 1680

Thr Cys Cys Cys Ala Cys Cys Cys Thr Cys Ala Ala Thr Thr Thr

1685 1690 1695

Gly Ala Gly Ala Ala Gly Thr Gly Ala

1700 1705

<210> 19

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 19

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 20

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 20

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 21

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 21

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 22

<211> 126

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 22

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Met Val Ser Cys Gln Ala Ser Gly Gly Pro Leu Arg Asn Tyr

20 25 30

Ile Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Val Leu Gly Thr Val His Tyr Ala Pro Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Asp Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Ile His Leu Ile Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Glu Thr Ala Leu Val Val Ser Thr Thr Tyr Leu Pro His Tyr

100 105 110

Phe Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 23

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 23

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Val Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Val Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 24

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 24

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser His Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Glu Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Ser

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ile Val Asp Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Ala Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 25

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 25

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Lys Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr His Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Glu Leu Leu Met

35 40 45

His Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Arg Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Pro

85 90 95

Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val

100 105 110

<210> 26

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 26

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Thr Val Lys Val Ser Cys Lys Ile Ser Gly His Thr Leu Ile Lys Leu

20 25 30

Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Tyr Glu Gly Glu Val Asp Glu Ile Phe Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln His Arg Leu Thr Val Ile Ala Asp Thr Ala Thr Asp Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Gly Arg Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Gly Thr Leu Gly Val Thr Val Thr Glu Ala Gly Leu Gly Ile Asp Asp

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 27

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 27

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ile Val Ser Arg Asn

20 25 30

His Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Val Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Gly Leu Ala

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Ser Ser Asp Ser Ser Ile

85 90 95

Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys

100 105

<210> 28

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 28

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ser Ile Ser Ala Ser Ser Ser Tyr Ser Asp Tyr Ala Asp Ser Ala

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Ser Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Arg Ala Thr Gly Tyr Ser Ser Ile Thr Pro Tyr Phe Asp

100 105 110

Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 29

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 29

Gln Ser Val Val Thr Gln Thr Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Asn

85 90 95

Leu Ser Gly Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 30

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 30

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser

50 55 60

Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Arg Leu Tyr Gly Phe Thr Tyr Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala

115 120

<210> 31

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 31

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Ile Phe Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asn

20 25 30

Gly Ile Ser Tyr Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Pro Glu Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His

65 70 75 80

Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Ile

85 90 95

Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 32

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 32

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Cys Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Cys Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 33

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 33

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 34

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 34

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 35

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 35

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 36

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 36

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 37

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 37

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Cys Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Cys Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 38

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 38

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Cys Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Cys Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Ser Gln Phe Ser Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 39

<211> 568

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетическая

<400> 39

Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr

1 5 10 15

Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe

20 25 30

Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu

35 40 45

Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile

50 55 60

Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu

85 90 95

Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro

100 105 110

Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr

115 120 125

Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val

130 135 140

Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Cys Lys Val Leu His Leu

145 150 155 160

Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys

165 170 175

Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val

180 185 190

Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn

195 200 205

Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln

210 215 220

Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu

245 250 255

Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys

260 265 270

Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile

275 280 285

Met Cys Ile Ile Lys Glu Glu Ile Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro

290 295 300

Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro

305 310 315 320

Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg

325 330 335

Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe

340 345 350

Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp

355 360 365

Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val

370 375 380

Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr

385 390 395 400

Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys

405 410 415

Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile

420 425 430

Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp

435 440 445

Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly

450 455 460

Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro

465 470 475 480

Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn

485 490 495

Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu

500 505 510

Leu Ser Ala Ile Gly Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln

515 520 525

Ala Tyr Val Arg Lys Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

530 535 540

Gly Gly Leu Val Pro Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser

545 550 555 560

Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys

565

<210> 40

<211> 26

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетическая

<400> 40

Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln Ala Tyr Val Arg Lys Asp

1 5 10 15

Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu

20 25

<210> 41

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 41

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 42

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 42

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 43

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 43

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Pro Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 44

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 44

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Ile Asn Leu Cys Asn Val Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Met Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 45

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 45

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Ser

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 46

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 46

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Ile Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 47

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 47

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Asn Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 48

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 48

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn

50 55 60

Asn Arg Leu Leu Pro Ile Val Asn Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Met Asn Ser Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 49

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 49

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Asn Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 50

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 50

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn

50 55 60

Asn Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Ser Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 51

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 51

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 52

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 52

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 53

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 53

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Pro Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 54

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 54

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Ile Asn Leu Cys Asn Val Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Met Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 55

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 55

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Ala Cys Asn Ser

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 56

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 56

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Ile Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 57

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 57

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Asn Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 58

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 58

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn

50 55 60

Asn Arg Leu Leu Pro Ile Val Asn Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Met Asn Ser Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 59

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 59

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Ser Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Asn Thr Pro Ala Cys Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 60

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 60

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Cys Ala Ser Gly Ile

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Leu Thr Ile Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn

50 55 60

Asn Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Ser Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Ile

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 61

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 61

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 62

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 62

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175

Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu

180 185 190

Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp

195 200 205

Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val

210 215 220

Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro

225 230 235 240

Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp

245 250 255

Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr

260 265 270

Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala

275 280 285

Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp

290 295 300

Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu

305 310 315 320

Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu

325 330 335

Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro Leu Val Phe Pro Ser Ser Glu Phe

340 345 350

Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala

355 360 365

Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu Leu

370 375

<210> 63

<211> 84

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 63

Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser

1 5 10 15

Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu Arg Thr Gly Trp Tyr His Cys Val Ile

20 25 30

Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile Lys Glu Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp

35 40 45

Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala

50 55 60

Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu Met Gln Ser Thr Pro Pro Thr Asn Asn

65 70 75 80

Arg Ala Arg Arg

<210> 64

<211> 377

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> синтетический полипептид

<400> 64

Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val

1 5 10 15

Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys

20 25 30

Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly

35 40 45

Val Ser Val Cys Thr Ser Lys Val Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp

50 55 60

Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn

65 70 75 80

Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu

85 90 95

Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser

100 105 110

Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met

115 120 125

Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile

130 135 140

Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val

145 150 155 160

Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro

165 170 175