Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ СИНХРОНИЗАЦИИ ЭСТРУСА У КОРОВ-РЕЦИПИЕНТОВ ПРИ ПОДГОТОВКЕ К ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности скотоводству для разведения крупного рогатого скота методом трансплантации эмбрионов для дальнейшего геномного редактирования и селекции здорового поголовья.

Эффективность метода трансплантации эмбрионов зависит от подхода к его применению, основанного на строго научной основе, с непременным соблюдением технологических требований.

Проявление эструса у коров-реципиентов не дает возможности обеспечить требуемого их количества для пересадки эмбрионов в день вымывания и культивирования у коров-доноров. Темпы работ сдерживаются, а эмбрионы, оставшиеся и не использованные в день трансплантации, необходимо обязательно консервировать и хранить в специальной питательной среде, то есть в последующем, стадия морфологического развития эмбрионов и день эстрального цикла коровы-реципиента не совпадает с днем эстрального цикла коровы-донора. При отставании эстрального цикла коровы-реципиента от коровы-донора на 1 день приживаемость эмбрионов значительно снижается.

Для удачной приживаемости эмбрионов принципиальное значение имеет не только их морфологическая полноценность, но и отсутствие гинекологических заболеваний реципиента, в частности, морфофункциональное состояние эндометрия матки в день пересадки им зародышей и, основное, синхронность проявления эструса коровы-реципиента с коровой-донором.

Целью предложенного метода синхронизации эструса коров-реципиентов с коровами-донорами является улучшение приживаемости пересаженных зародышей методом индуцирования синхронности эстрального цикла у коров-реципиентов с коровами-донорами, наиболее точной координации и планирования взаимодействий в технологии трансплантации эмбрионов.

Синхронность проявления эструса между донором и реципиентом -важнейшее условие высокой приживаемости эмбрионов. Для синхронизации охоты используют простагландина F2α или его синтетические аналоги (эстрофан, магэстрофан, ремофан, клопростенол, клатрапростин, суперфан, эстуфалан и др.).

Известен способ подготовки коров-доноров и коров-реципиентов к эмбриотрансплантации (SU 19990346, кл. A61D 19/04), включающий отбор коров-доноров и коров-реципиентов, вызывание суперовуляции у доноров, синхронизацию эструса у коров-доноров и коров-реципиентов путем введения гормональных препаратов в лютеиновой фазе полового цикла при наличии желтого тела в яичниках и искусственное осеменение коров-доноров семенем быка-производителя, отличающийся тем, что в качестве гормональных препаратов используют фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), эстрофан и сурфагон, причем первым вводят ФСГ - двукратно, с промежутком в 12 ч, донорам - по 150 И.Е., реципиентам - по 100 И.Е., через 24 ч с начала обработки всем животным вводят эстрофан - однократно, по 2 мл/гол., а затем - через 55 ч после введения эстрофана - сурфагон, однократно, по 20 мкг/гол., на четвертый и пятый дни обработки осуществляют контроль за проявлением половой охоты у животных.

Согласно инструкции по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота в скотоводстве при подготовке к трансплантации эмбрионов используют различные схемы применения гормональных и других биологически-активных препаратов. Наиболее простая схема используется для синхронизации эструса у реципиентов: в 1-й день - тривитамин - 15 мл; 10-й день и 21-й день - эстрофан -по 500 мкг, тривитамин по 15 мл, средства неспецифической терапии: кровь с цитратом - по 40-60 мл, молозиво 1-го дня - по 10-20 мл.

Однако из-за большого количества вводимых препаратов, чаще происходят сбои (во времени, последовательности введения и т.д).

Целью настоящего изобретения является синхронизация эструса у коров-реципиентов при подготовке к трансплантации эмбрионов.

Цель достигается введением в схему синхронизации эструса у коров-реципиентов препарата просольвин в дозе 2 мл и тетравита в дозе 5 мл. двухкратно.

Просольвин в качестве действующего вещества в 1 мл содержит 7,5 мг люпростиола (синтетический аналог простагландина F2α с более выраженной, в отличие от природного, лютеолитической активностью при меньшем воздействии на гладкую мускулатуру матки), а также натрия гидроксид 0,65 мг, пропиленгликоль 709,85 мг и воду в качестве вспомогательных веществ. Препарат представляет собой прозрачный бесцветный или слегка желтоватый раствор и выпускается в стеклянных герметично укупоренных флаконах, объемом 10 мл и 20 мл.

Тетравит выпускают в виде прозрачного, маслянистого раствора для инъекций светло-желтого цвета. В 1 мл раствора содержатся следующие витамины: F (5 мг), Е (20 мг), D3 (25000 ME), А (50000 ME).

Высокая активность обработки данным методом коров-реципиентов обусловлена небольшим набором лекарственных компонентов и двухкратным их введением.

Впервые было проведено исследование синхронизации эструса у коров-реципиентов препаратами просольвин в дозе 2 мл и тетравит в дозе 5 мл. двухкратно.

Отличительной особенностью предлагаемого способа является повышение оплодотворяемости коров-реципиентов, при синхронизации эструса путем введения препаратов просольвин в дозе 2 мл и тетравит в дозе 5 мл двукратно.

Для подтверждения эффективности предлагаемого способа были проведены опыты по изучению действия препаратов.

Научно-хозяйственный опыт проводили на коровах черно-пестрой породы. Оценку эффективности программы синхронизации охоты проводили по количеству стельных животных, в процентном соотношении ко всем синхронизированным.

Беременность определяли методом ректальной пальпации через 2,5-3 мес.после осеменения и через 35-50 дней.

Для синхронизации групп животных было обработано 2 аналогичные группы коров-реципиентов и коров-доноров с однотипным кормлением и условиями содержания. Синхронизацию эструса контрольных животных осуществляли по следующей схеме: животным инъецировали однократно по 2 мл/гол в лютеиновую фазу цикла простагландина F2α (эстрофан). Животным опытных групп вводили просольвин в дозе 2 мл и тетравит в дозе 5 мл внутримышечно двухкратно.

Эффективность способа определяли путем подсчета количества реципиентов, пригодных к эмбриотрансплантации, уровнем приживляемости зародышей и выходом полноценных эмбрионов в расчете на одного донора.

Результаты опыта приведены в таблице.

*- достоверность равна 0,05.

Таким образом, применение предложенного способа в технологии трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота позволяет существенно повысить количество пригодных для эмбриотрансплантации животных, выход полноценных эмбрионов в расчете на одного донора и их приживаемость.

Возможностью осуществления данного изобретения является применение препаратов просольвин в дозе 2 мл и тетравита в дозе 5 мл. двухкратно для синхронизация эструса у коров-реципиентов при подготовке к трансплантации эмбрионов.