Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ СТРЕСС-ИНДУЦИРОВАННЫХ НАРУШЕНИЙ КАК ЗАЛОГ ОПТИМИЗАЦИИ СТАНОВЛЕНИЯ МЕХАНИЗМОВ АДАПТАЦИИ У ЭМБРИОНОВ И МОЛОДНЯКА КУР

Данное изобретение относится к сфере сельского хозяйства, в частности, к птицеводству (Предынкубационная обработка яиц водными растворами натриевой соли липоевой кислоты и сукцината).

Птицеводство - одна из самых скороспелых, а вместе с тем перспективных отраслей животноводства. Это наиболее наукоемкий и динамично развивающийся сектор агропромышленного комплекса. Сельскохозяйственная птица в отличие от других животных отличается достаточно быстрыми темпами воспроизводства, интенсивным ростом, высокой продуктивностью и жизнеспособностью, но вместе с тем вследствие несовершенства производственного цикла, не реализованных в полной мере [12].

Известно, что перечисленные выше хозяйственно-полезные показатели в значительной степени зависят от качества суточного молодняка, на которое в первую очередь влияет эффективность инкубации яиц [7].

К сожалению, промышленная инкубация до сих пор не отвечает всем требованиям организма современных кроссов, большинство из которых обладают низкой стрессоустойчивостью, что влечет за собой весомые потери, как поголовья, так и прибыли отрасли. Указанное позволяет утверждать, что профилактика стрессовых явлений, сопровождающих этот ответственный технологический процесс, особенно актуальна, и ее нужно начинать как можно раньше в онтогенезе [6, 12].

Многими авторами доказана тесная взаимосвязь между развитием стресс реакций в организме эмбриона и нарушением формирования, а в дальнейшем и реализации механизмов адаптации молодняка к будущим условиям выращивания и кормления. В этой связи актуализация изучения способов оптимизации становления и реализации механизмов адаптации при стрессе для ветеринарии не вызывает сомнений и значимо возрастает в условиях развития этой комплексной науки, роста населения и производства, а также санкций, наложенных на РФ [1, 5].

Доказано, что основным негативным последствием воздействия любого стрессора является аномальное развитие свободно-радикальных реакций и, как следствие процессов липопероксидации. Указанные явления обуславливают дестабилизацию большинства метаболических процессов, в частности наблюдается снижение интенсивности энергетических синтезов, обуславливающих тяжелые гипоэнергетические состояния, что определяет заведомо низкий потенциал адаптации [1,2,6].

В связи с этим, определенный научный интерес представляет изучение веществ, обладающих одновременно антиоксидантным и энергостимулирующим действием. К таковым, можно отнести липоевую и янтарную кислоты, а также некоторые их производные.

Так, липоевая кислота принимает участие в окислительном декарбоксилировании ПВК до ацетил-КоА; α-кетоглутаровой кислоты в цикле Кребса до сукцинил-КоА; стабилизирует реакции митохондриальной дыхательной цепи. Кроме того, данный метаболит обладает антиоксидантным действием, снижает интенсивность процессов перекисного окисления липидов. Известно, что липоевая кислота не растворима в воде, поэтому для исследований была взята ее натриевая соль, сохраняющая свойства метаболита [8].

Для получения синергического эффекта в сериях экспериментов мы исследовали различные сочетания вышеуказанного БАД с рядом энергетических интермедиатов. Среди прочих позитивный результат в сочетании с тиоктатом натрия был получен при использовании сукцината.

Доказано, что янтарная кислота - это универсальный промежуточный метаболит, субстрат цикла трикарбоновых кислот (ЦТК). Известно, что сукцинат, обладает выраженными антиоксидантными свойствами, а также адаптогенной способностью и оказывает антигипоксическое, антистрессовое и нейротропное действие, нормализует энергетический и пластический обмен и общее физиологическое состояние организма [3, 9].

В данном изобретении в качестве прототипа выбрана работа: Азарнова Т.О., Ярцева И.С., Кочиш И.И. Способ стимуляции эмбриогенеза кур. Патент №2520092, приоритет от 20.06.2014 [11].

В наших исследованиях, доказано, что эффективную профилактику оксидативного стресса и гипоэнергетических состояний можно осуществить путем однократной обработки инкубационных яиц (до закладки в инкубатор) оптимальными растворами натриевой соли липоевой кислоты и сукцината. Следует отметить, что композицию указанных БАВ никогда не применяли ранее для профилактики негативных последствий воздействия стрессоров в птицеводстве. Кроме того, нет данных по влиянию их сочетания на куриный эмбрион.

Цель изобретения - разработать эффективный способ профилактики стресс-индуцированных нарушений и оптимизации становления механизмов адаптации у эмбрионов и молодняка кур.

Технический результат изобретения заключается в том, что под влиянием смеси биологически активных веществ: натриевой соли липоевой кислоты и сукцината, вследствие коррекции реакций оксидативного стресса и активации энергетических процессов повышается интенсивность роста и развития эмбрионов, их качество, снижаются все категории отходов инкубации, значимо увеличивается вывод кондиционных цыплят (на 11,03%).

Способ осуществляется следующим образом:

На поверхность продезинфицированной скорлупы инкубационных яиц за 3-4 часа до инкубации из пульверизатора наносят водный раствор натриевой соли липоевой кислоты в концентрации 0,01% (концентрация выявлена в серии ранее проведенных экспериментов [11]) и сукцината в концентрации от 0,005% до 1%. Порошки препаратов растворяют и смешивают в дистиллированной воде при температуре 18-22°С до полного растворения.

Пример 1. Эксперимент проводили на 6 партиях яиц, одна из которой была контрольной, а остальные пять - опытные, их обрабатывали водным растворами 0,01% натриевой соли липоевой кислоты и от 0,005% - 1% сукцината. Яйца кур кросса «Шейвер 2000» получали от одного родительского стада, сортировали по 272 штук в каждую партию по принципу аналогов, учитывая время снесения, сроки хранения и массу. Яйца хранили 6 суток при температуре 15°С и влажности 75%. На поверхность скорлупы наносили путем орошения растворы БАВ по вышеуказанной схеме. Результаты биоконтроля инкубации представлены ниже. Так, предложенная композиция препаратов оказала позитивное влияние на жизнеспособность зародышей яичных кур на всех этапах эмбриогенеза в широком диапазоне концентраций (табл. 1). В результате исследований установлено, что максимальный эффект на показатели биоконтроля инкубации оказало сочетание, представленное 0,01% раствором натриевой соли липоевой кислоты и 0,25% сукцината (3 опытная партия). В этой партии наблюдали снижение большинства категорий отходов инкубации, в частности, таких как «неоплодотворенные» на 4,41%, «кровяные кольца» на 0,74%, «замершие» на 1,84%, «задохлики» на 2,2% и «слабые» на 1,83%). Вследствие этого, выводимость яиц и вывод цыплят в данной партии были максимальными и составили 94,62%) и 90,44%, соответственно, что достоверно выше, чем в контрольной на 7,52% и 11,03%), соответственно. В остальных опытных партиях выводимость яиц и вывод цыплят были выше, чем в контрольной, однако значимо уступали 3-ой опытной партии.

Пример 2. При инкубации на 11-е сутки определяли категории яиц по степени замыкания аллантоиса (табл. 2). В лучшей опытной партии яиц первой категории было на 10%>больше по сравнению с контролем. Своевременное замыкание аллантоиса свидетельствует об эффективном газообмене, лучшем использовании организмом зародышей опытной партии не только питательных, но и минеральных веществ [1, 4].

Пример 3. Качественное развитие зародышей в период эмбриогенеза определило получение молодняка суточного возраста, превосходящего по комплексу интерьерных показателей контроль (табл. 3). Так, установлено достоверное увеличение массы цыплят опытной группы на 5,0%. Наряду с этим, зафиксирована тенденция к увеличению сердца и печени на 9,1% и на 4,3% при достоверном увеличении мышечного желудка на 3,4% и снижении остаточного желтка на 3,7% по сравнению с контролем.

Пример 4. Интерьерное превосходство цыплят лучшей опытной группы также обусловило их морфофизиологические преимущества, что подтверждено критериями качества шкалы «Пасгар» (табл. 4) и шкалы «Оптистарт» (табл. 5). Так, в лучшей опытной группе средний балл по шкале «Пасгар»составил 1,4 балла, а по шкале«Оптистарт»превосходство былона 0,9 балла, что указывает на более полноценное развитие цыплят в эмбриональный период.

Пример 5. Все выше представленные положительные биологические эффекты были определены изменением интенсивности ПОЛ, очевидно, как за счет стабилизации реакций митохондриальной дыхательной цепи, собственного антиоксидантного потенциала, так и стимуляции АОЗС (табл. 6). Обработка инкубационных яиц оптимальными концентрациями растворов композиции определила снижение таких цитотоксичных продуктов липопероксидации, как: оксодиеновыеконъюгаты (ОДК)на 11,8%, малоновыйдиальдегид (МДА) на 10,5%, основания Шиффа (ОШ) на 35%, что сопровождалось достоверным повышением антиокислительной активности (АОА) сыворотки крови на 31,4%, соответственно, по сравнению с контролем.

Вывод: Предлагаемый способ профилактики стресс-индуцированных нарушений, а также механизмов адаптации в условиях промышленной инкубации является эффективным и сводится к оптимизации свободно-радикальных процессов, а также липопероксидации, следовательно, предупреждению развития гипогликемических, гипоэнергитических, и гипоксических явлений, что определяет повышение адаптационных возможностей организма и его жизнеспособности. Метод осуществляется путем трансовариального введения 0,01% водного раствора натриевой соли липоевой кислоты и 0,25% раствора сукцината перед закладкой яиц в инкубатор.

Список литературы.

1. Азарнова, Т.О. Научно-практические аспекты профилактики оксидативного стресса, как способа оптимизации условий инкубации и акселерации эмбрионов кур: дис. … доктора биол. наук. / Т.О. Азарнова; МГАВМиБ - М., 2013. - 309 с.

2. Азарнова, Т.О. Влияние йодсодержащего препарата при обработке inovo на качество цыплят суточного возраста/ В.И. Максимов, Е.Н. Индюхова, С.Ю. Зайцев // Российский ветеринарный сельскохозяйственных живлтных - 2014. - №4 - С. 24-26.

3. Березов, Т.Т Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б. Ф. Коровкин. - М.: Медицина, 1998. - 704 с.

4. Бессарабов, Б.Ф. Инкубация яиц с основами эмбриологии сельскохозяйственной птицы / Б.Ф. Бессарабов. - М.: КолосС, 2006. - 240 с.

5. Бусловская, Л.К. Адаптация кур к факторам промышленного содержания / Л.К. Бусловская, А.Ю. Ковтуненко, Е.Ю. Беляева // Научные ведомости БелГУ. Сер. Естественные науки. - 2010. - №21(92), вып. 13. - С. 96 - 102. - Библиогр.: с. 102.

6. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А.Владимиров // Вестн. РАМН. - 1993. - Т. 58. - №7. - С. 43-51

7. Дядичкина, Л.Ф. Руководство по биологическому контролю при инкубации яиц с. -х. птицы. / Л.Ф. Дядичкина, Н.С. Позднякова // Сергиев Посад. - ВНИТИП. - 2001.

8. Козачок Н.Н., Селюк М.Н. Применение липоевой кислоты (берлитиона) в клинической практике // Мистецтволiкування.

9. Лукичева, В.А. Влияние комплексной обработки инкубационных яиц естественными метаболитами (сукцинат и глицин) на показатели выводимости и резистентности молодняка птицы / В.А. Лукичева, М.С. Найденский, Н.Ю. Лазарева // Материалы XI Московского международный ветеринарный конгресса - М., 2003. - С. 237.

10. Найденский, М.С. Экологически безопасные методы повышения вывода кондиционных цыплят / М.С. Найденский, В.В. Нестеров, Н.Ю. Лазарева // Био - Ветеринарному специалисту. - 2007. - №10. - С. 23-24.

11. Патент №2520092 РФ, МПК A01K 67/00 Азарнова Т.О., Ярцева И.С., Ярцев Д.С, Индюхова Е.Н., Ярцева А.С. Способ стимуляции эмбриогенеза кур; заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО МГАВМиБ-МВА имени К.И. Скрябина. / №2013104244/10; заявл. 01.02.2013; опублик. 20.06.2014 Бюл. №17. - 5 с.

12. Фисинин В.И., Сурай П. Эффективная защита от стрессов в птицеводстве: от витаминов к витагенам // Птица и птицепродукты. - М., 2011. №5. С. 23-26.

Примечание: здесь и далее *- р<0,05; **- р<0,01; ***- р<0,001