Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ СНИЖЕНИЯ ЭНДОГЕННЫХ ПОТЕРЬ ЭССЕНЦИАЛЬНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ (Co, I, Zn) ИЗ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в лабораториях биологического профиля, решающих вопросы по влиянию пробиотических препаратов со смесью веществ антикворум на снижение эндогенных потерь эссенциальных элементов из тела животных.

Известен способ снижения содержания свинца, олова и стронция в организме цыплят-бройлеров, включающий дачу корма, отличающийся тем, что цыплятам-бройлерам два раза в сутки в корм вводят ферментный препарат «Ронозим NP (СТ)» в количестве 125-175 мг/кг корма в период с 1 по 42 день жизни. Способ позволяет выводить из организма цыплят-бройлеров одновременно свинец, олово и стронций [1].

Известен способ снижения содержания цинка и свинца в организме крыс, взятый в качестве прототипа, включающий дачу им корма и введение один раз в сутки препарата «Споробактерин» на основе спорообразующего штамма Bacillus subtilis 534 в количестве 0,5-1,5 мл на одну голову натощак в течение 7-14 дней, начиная с момента достижения крысами половой зрелости. Использование данного изобретения обеспечивает снижение содержания цинка и свинца в теле крыс за счет введения пробиотика «Споробактерин», что в итоге позволяет повысить устойчивость организма животных к заболеваниям [2].

Недостатком данного способа является то, что он направлен на выведение только цинка и свинца.

Известна статья «Endogenous losses of chemical elements in the digestive tract and their correction» в которой описываются экспериментальные данные исследований проведенные на модели крыс Wistar. Авторами было установлено, что кормление животных бифидобактериями позволило снизить потери кальция на 3,9%, фосфора на 17,6%, меди на 28%, цинка - на 15,2%. Более того, пул свинца в организме увеличился на 16,1%. Отличие этой статьи в том что изучались возможности сокращения эндогенных потерь с использованием препарата содержащего штамм Bifidobacterium longum [3].

Цель предлагаемого изобретения - разработка способа снижения эндогенных потерь эсенциальных элементов из организма крыс линии Wistar.

Экспериментальные исследования были проведены в условиях центра коллективного пользования научным оборудованием ФГБНУ БСТ РАН на пятимесячных крысах линии Wistar. Для эксперимента было отобрано 12 голов крыс, которых методом аналогов разделили на 4 группы (n=3). Во время эксперимента все животные находилась в одинаковых условиях содержания (табл. 1).

Основной рацион состоял из варенного полированного риса (варка риса в дистиллированной воде в течение 15 минут с последующим удалением отвара и промывкой), с добавлением витаминов A, D, С, K, Е, В₁, В₂, В₃, В₄, В₅, В₆, В_с, В₁₂, определяемых рекомендациями Института питания РАМН. Поение осуществлялось дистиллированной водой.

Кормление животных проводилось 2 раза в сутки, учет поедаемости - ежесуточно.

Идентификация химических веществ экстракта Quercus cortex [4] выполнялась на газовом хроматографе с масс-селективным детектором GQCMS 2010 Plus (Shimadzu, Япония), на колонке HP-5MS. При интерпретации результатов исследований использовалось программное обеспечение GCMS Solutions, GCMS PostRun Analysis, для идентификации соединений использовался набор библиотек спектров CAS, NIST08, Mainlib, Wiley9 и DD2012 Lib. Количественное присутствие отдельных идентифицированных компонентов оценивалось относительной величиной (%), соотносящей площадь пика к общей площади экстракта. Была использована смесь веществ выделенных из экстракта Quercus cortex и синтезированных химическим путем (Acros): пропилрезорцин; ванилин; кумарин; антиарол; скополетин; конифериловый спирт. Анти-QS-эффект данной композиции веществ подтвержден с использованием штамма С. violaceum CV026 методами диффузии в агар (качественно) и методом серийных разведений в жидкой питательной среде (количественно). Смесь веществ антикворума экстракта Quercus cortex вводят в количестве 500 мл на одну голову натощак в течение эксперимента, где в расчете на 1 мл воды содержалось активных компонентов: ванилин - 0,053 мг, пропилрезорцин - 0,138 мг, конифериловый спирт - 0,45 мг, кумарин - 0,048 мг, скополетин - 0,03 мг и антиарол - 0,179 мг.

В ходе исследований использовался пробиотический препарат лактобифадол в дозе 0,3 г/кг живой массы. (Международное непатентованное название: LACTOBIFADOLUM). Лекарственная форма: порошок для орального применения. Содержит высушенную сорбционным методом микробную массу молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ЛГ1-ДЕП-ВГНКИ, бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis В-1-ДЕП-ВГНКИ и наполнитель - муку пшеничную.

Элементный состав биосубстратов животных и кормов изучался с использованием методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии с индуктивно-связанной аргоновой плазмой. Дополнительные исследования проводились в лаборатории АНО «Центр биотической медицины», г. Москва (аттестат аккредитации ГСЭН.RU.ЦОА.311, РОСС RU.0001.513118) (приборы ICAP-9000 «Thermo Jarrell Ash, США, Perkin Elmer Optima 2000DV, США) - табл. 2.

В ходе проведенных исследований было установлено, что концентрация изучаемых элементов в теле крыс на конец эксперимента по сравнению с началом была больше. В теле контрольных животных содержалось Са, Со и I больше по сравнению с крысой из опытных групп.

Однако следует отметить, что дополнительное введение в основной рацион смесь веществ антикворум положительно сказался на содержание данных элементов в теле по сравнению с крысами из II и III групп соответственно Са - 13,23 г (35,98%; Р≤0,05) и 18,73 г (50,93%; Р≤0,05), Со - 0,019 мг (26,03%; Р≤0,05) и 0,028 мг (38,35%; Р≤0,05), I - 0,652 мг (39,13%; Р≤0,05) и 0,614 мг (36,85%; Р≤0,05), Zn - 8,376 мг (4,66%) и 27,825 мг (15,50%; Р≤0,05).

Рассчитана величина эндогенных потерь эссенциальных элементов из организма крыс (табл. 3).

Из данных таблицы 3 следует, что дополнительное введение в основной рацион пробиотика и смесь веществ антикворума (III опытная группа) способствует меньшему выведению изучаемых эссенциальных элементов из организма по сравнению с животными из контрольной, I и II опытных групп соответственно: Са - на 32,666 г, 18,727 и 5,497 г; Со - на 0. 033 мг, 0,028 и 0,009 мг; I - 8,36 мг, 0,613 мг; Zn - 20,379 мг, 27,825 и 19,45 мг.

В общем за весь период эксперимента по эндогенным потерям из тела изучаемых эссенциальных элементов крыс из опытных групп имели наилучшие показатели по сравнению с аналогами из контрольной группы.

Список литературы

1. Патент на изобретение РФ №2577057 от 10.03.2016 г. Бюл. №7. Способ снижения содержания свинца, олова и стронция в организме цыплят-бройлеров / С.В. Лебедев и др.

2. Патент на изобретение РФ №2552052 от 10.06.2015 г. Бюл. №16. Способ снижения содержания цинка и свинца в организме крыс / А.Н. Сизенцов и др. (прототип)

3. Miroshnikov S., Kvan О., Duskaev G., Rusakova E., Davydova N. Endogenous losses of chemical elements in the digestive tract and their correction. Modern Applied Science. 2015. T. 9. №9. C. 72-79.

4. Россия, Алтайский край, г. Барнаул пр-т. Космонавтов 32-и. ООО «Фарм-продукт» Дуба кора серии Алтай 50 г х 1 Травы Алтая