Результат интеллектуальной деятельности: Способ диагностики энтеритов сельскохозяйственных животных и птиц

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно для диагностики энтеритов различной этиологии в фекалиях свиней и кур.

Заболевания, связанные с воспалительными заболеваниями кишечника свиней и кур, широко распространены во многих странах мира с развитым животноводством, особенно в хозяйствах промышленного типа, что наносит значительный экономический ущерб, связанный с отходом свиней и кур, снижением производственных показателей за счет уменьшения суточного прироста массы из-за потери аппетита и увеличения неоднородности стада.

Известны способы диагностики воспалительных заболеваний кишечника, применяемые в общей клинической практике.

Общий и биохимический анализ крови позволяют определить наличие дегидратационных процессов, сдвиги в содержании гемоглобина, свидетельствующие о развитии анемии, повышение уровня лейкоцитов и сдвиги лейкограммы, указывающие на развитие воспалительного процесса, а также изменение электролитного баланса и снижение уровня общего белка, глюкозы и тд. (Иванов А.А. Клиническая лабораторная диагностика: Учебное пособие. - СПб.: Издательство «Лань», 2017 - С. 313-415). Анализ крови проводится как косвенный метод диагностики, отклонения от нормы в анализе могут быть связаны с другими причинами (например, патология мочеполовой системы).

Общий и биохимический анализ кала, позволяющий определить состав каловых масс, содержание в них жидкости и др. (Д. Мейер, Дж. Харви Ветеринарная лабораторная медицина. Интерпретация и диагностика. Пер. с англ. - М. Софион, 2007 - С. 244-296). Данный анализ требует множества разнообразных тестов, которые являются косвенными, а определение влажности кала требует специализированного оборудования и занимает много времени.

Известен способ диагностики паразитозов желудочно-кишечного тракта в молочный период (патент РФ №2526193 С1 от 12.03.2013 МПК G01N 33/48 (2006.01). Суть способа состоит в анализе кала методом флотации с добавлением технического спирта.

Недостатком данного способа является то, что он предусматривает оценку взаимодействия яиц гельминтов и ооцист паразитов с флотационной жидкостью, и не позволяет диагностировать воспалительные заболевания кишечника иной этиологии.

Прототипом является способ неинвазивной экспресс-диагностики воспалительного процесса в кишечнике у телят (патент РФ №2552333 С1 от 17.06.2014 МПК G01N 33/50 (2006.01), при котором диагностика воспалительных заболеваний осуществляют за счет взятия и разведения пробы кала с дальнейшим использованием тест-полосок и оценки изменения цвета. Способ включает определение в кале лейкоцитов, белка, гемоглобина и рН-реакции кала.

Недостатком данного способа является отсутствие возможности использование его для диагностики энтеритов у свиней и кур, необходимость разведения проб фекалий и использование специальных индикаторных тест-полосок, что является экономически невыгодным в условиях масштабных предприятий.

Техническая задача - расширение ареала средств диагностики воспалительных заболеваний кишечника свиней и кур. Данный способ значительно снижает экономические затраты, связанные с диагностикой энтеритов, легко применим в условиях хозяйства. Универсальный формат позволяет отсканировать изображение и с помощью программы ImageJ измерить площадь пятна, что значительно упрощает визуальную оценку результата и повышает точность исследования. При отсутствии программного обеспечения и при наличии малого поголовья свиней и кур возможна не менее точная оценка результатов с помощью измерительных приборов - линейка, мерная лента, циркуль и др.

Поставленная задача решается тем, что оценку содержания влаги в фекалиях свиней и помете кур проводят с использованием листа бумаги, на одну сторону которого наносят тонкодисперсный порошок водорастворимого красителя, он изолируется от поступления влаги с этой стороны листом прозрачного полимера на клеящей основе. На внешнюю сторону наносится шкала с шагом в 10 мм. На внешнюю сторону помещают пробу фекалий и высушивают в течение 30 минут. Образуется пятно определенной площади, по которому выявляют прямую зависимость содержания влаги в фекалиях свиней и помете кур. Измеряют площадь пятна и вычисляют объемный индекс влажности по формуле

где X - объемный индекс влажности,

S - площадь пятна, мм²,

m - масса пробы фекалий, г,

и при отклонении значений объемного индекса влажности от значений, характерных для здоровых животных, определяют наличие воспалительных изменений в кишечнике, при этом объемный индекс влажности для здоровых свиней составляет 4,5±2,3, а для здоровых кур 4,9±1,4.

Для иллюстрации способа приведены примеры.

Пример 1. Фиг. 1, где для оценки содержания влаги в фекалиях свиней и помете кур наносят на фильтровальную бумагу (2) тонкодисперсный порошок водорастворимого красителя Light Green SF Yellowish (3), который покрывают листом прозрачного полимера на клеящей основе (4), после чего на слой фильтровальной бумаги наносят фекалии (1) и измеряют образующееся под фекалиями пятно (6). На внешнюю сторону наносят шкалу с шагом в 10 мм (5).

Пример 2. Для иллюстрации способа оценки содержания влаги в фекалиях свиней и помете кур, на готовое устройство, изображенное на фиг. 2, наносят дистиллированную воду в объеме 10 (1), 50 (2) и 100 (3) мкл. При измерении площади пятна получают данные, приведенные в табл. 1.

Исходя из полученных данных, выводят коэффициент корреляции равный 0,99. График полученных значений, представленный на фиг. 3, свидетельствует о прямой зависимости площади пятна от количества влаги, т.е. чем больше жидкости попадает на фильтровальную бумагу, тем больше площадь образующегося пятна.

Пример 3. Пример индивидуальной оценки свиней и кур.

Для иллюстрации практического значения и наглядной демонстрации эффективности данного способа берут фекалии свиней в количестве 9 проб, из которых 5 - с клиническими признаками энтерита, а 4 - клинически здоровы. Также для примера берут 8 проб помета цыплят - 5 проб от больных и 3 пробы от здоровых кур.

Фильтровальную бумагу делят на квадраты со стороной 70 мм и взвешивают. Затем на каждый квадрат помещают фекалии в количестве от 5 до 50 г. После просушивания естественным путем пробы повторно взвешивают и замеряют площадь образовавшегося пятна. С помощью разности весов до и после нанесения фекалий вычисляют массу фекалий. Полученные результаты представлены в табл. 2 и табл. 3.

Таким образом, клинический анализ состояния фекалий менее точен, чем с использованием данного способа (3-ая проба). Остальных делят на больных и здоровых в соответствии с их клиническим статусом.

Высчитывают стандартное отклонение для здоровых свиней. При этом объемный индекс влажности должен быть равен 4,5±2,3.

Высчитывают стандартное отклонение для здоровых кур. При этом объемный индекс влажности должен быть равен 4,9±1,4.

Высчитывая объемный индекс влажности по соотношению площади пятна к массе фекалий и помета, можно говорить о наибольшем содержании влаги в фекалиях и помете больных свиней и кур. Среднее значение объемного индекса влажности по больным животным в 6,5 раз превышает индекс по здоровым животным.

Объемный индекс влажности высчитывают по формуле:

где X - объемный индекс влажности,

S - площадь пятна,

m - масса пробы фекалий.

Предложенный способ диагностики энтеритов свиней и кур практически применим и эффективен в отношении диагностики воспалительных заболеваний кишечника в современном свиноводстве и птицеводстве.