Способ оценки эффективности стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой

Изобретение относится к области медицины, а именно дерматологии и клинической лабораторной диагностике и может быть использовано для оценки эффективности проводимой стандартной терапии больных нумулярной микробной экземой.

Нумулярная микробная экзема - это хронический аллергодерматоз, представляющий собой специфическую аллергическую реакцию кожи, возникающую вследствие сенсибилизации на продукты распада микроорганизмов и их токсины длительно существующего пиогенного очага при нарушении важнейших регуляторных систем организма [Molin S. Deletion of the late cornified envelope genes LCE3B and LCE3C may promote chronic hand eczema with allergic contact dermatitis / S. Molin, S. Vollmer, E.H. Weiss et al. // J. Investig Allergol Clin Immunol. - 2011. N. 21 (6). - P. 472-9].

Нумулярная микробная экзема характеризуется мультифакториальностью генеза, распространенностью процесса, резистентностью к стандартным видам терапии и тяжелым клиническим течением [Юнусов Е.И. Экзема: дифференцированный подход к выбору наружной терапии / Е.И. Юнусов // Леч врач. - 2013. - №5. - С. 46-48].

Патогенетической основой развития нумулярной микробной экземы являются иммунные нарушения [Масюкова С.А. Диагностическая значимость некоторых показателей врожденного иммунитета у больных аллергодерматозами / С.А. Масюкова, Е.В. Сорокина, Н.К. Ахматова, А.И. Головинов, Е.Л. Чалая // Вестник последипломного медицинского образования. - 2014. - №4. - С. 56-57]. Дезинтеграция функций иммунной системы, развивающаяся у больных нумулярной микробной экземой, приводит к формированию неадекватного по силе и продолжительности иммунного ответа. Инициирующая роль в патогенезе нумулярной микробной экземы принадлежит нарушениям функций Т-лимфоцитов [Shams K. What's new in atopic eczema an analysis of systematic reviews published in 2009-2010 / K. Shams, D.J. Grindlay, H.C. Williams // Clin Exp Dermatol. - 2011, Aug. N. 36 (6). - P. 573-7]. Стафилококковые суперантигены, экзотоксины, энзимы усиливают иммунное воспаление в коже, приводя к накоплению пула Т-клеток памяти, тропных к дермальным антигенам [Tanaka Т. Dental infection associated with nummular eczema as an over looked focal infection / T. Tanaka, T. Saton, H. Yokozeki // J. Dermatol. - 2009, Aug. N. 36 (8). - P. 462-5].

Известен способ прогноза течения и оценки эффективности лечения атопического дерматита, который заключается в проведении клинического и лабораторного обследования пациентов с верифицированным атопическим дерматитом с определением содержания в сыворотке крови белка - лактоферрина (ЛФ) в мкг/мл, альфа-1-антитрипсина (a1-AT) в г/л, альфа-2-макроглобулина (а2-МГ) в г/л, далее вычисляют коэффициент К по определенной формуле и при его значениях от 6 до 15 прогнозируют легкую степень тяжести заболевания, а при 15 и более - среднюю и тяжелую степень тяжести заболевания, через месяц после лечения проводят повторное обследование с вычислением коэффициента К и при его снижении на 30% и более от его исходного значения лечение считают эффективным, прогнозируют длительную ремиссию, а при снижении коэффициента К менее 30% от его исходного значения лечение считают малоэффективным, прогнозируют короткий период ремиссии и высокий риск рецидива [патент RU 2603463, 2016 г.]. Недостатками данного способа являются несвоевременность оценки эффективности лечения и трудоемкость.

Наиболее близким аналогом изобретения является способ оценки эффективности стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой, заключающийся в том, что на 10-й день терапии в капиллярной крови из очага воспаления определяют фагоцитарное число и окислительно-восстановительную активность нейтрофилов в тесте спонтанного восстановления нитросинего тетразолия и при их значениях соответственно 5,0 и 5,0% и ниже эффективность лечения оценивают как низкую, а при 6,0 и 6,0% и выше - как высокую [патент RU 2677881, 22.01.2019 г.]. Недостатками данного способа являются длительность, трудоемкость и высокая себестоимость исследования.

Задачей изобретения стала разработка способа оценки эффективности проводимой стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой.

Техническим результатом при использовании изобретения является упрощение исследования за счет сокращения его продолжительности и трудоемкости.

Предлагаемый способ оценки эффективности проводимой стандартной терапии у больных нумулярной микробной экземой осуществляется следующим образом. На 10-ый день лечения у больного нумулярной микробной экземой для оценки содержания Т-лимфоцитов - хелперов (CD3+CD4+) и цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+) строго натощак из локтевой вены проводят забор 4 мл крови в пробирку VACUETTE-K₃EDTA (Bio-One, Австрия). В каждую пробирку вносят 5 мкл моноклональных антител (Beckman Coulter, США), добавляют по 100 мкл образца цельной крови, инкубируют 20 мин в темноте при комнатной температуре (20-25°С). После инкубации для лизиса эритроцитов в пробирки вносят по 1 мл рабочего лизирующего реагента Cal-lyse (Becton Dickinson, США), инкубируют 10 мин при комнатной температуре в темноте. Пробирки центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин, удаляют надосадочную жидкость, добавляют 2 мл раствора Cell-WASH (Becton Dickinson, США) для отмывания образца от разрушенных клеток. Осадок ресуспендируют и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин, удаляют надосадочную жидкость, полученную клеточную взвесь ресуспендируют в 0,5 мл раствора Cell-WASH. Полученные образцы анализируют на проточном цитофлюориметре FACSCALIBUR с использованием программы исследования CellQuest (Becton Dickinson, США). Результаты содержания клеток в крови выражают в относительных (процент клеток, несущих данный антиген) и абсолютных (×10⁹/л) единицах. При значениях CD3+CD4+ 0,6×10⁹/л и ниже, CD3+CD8+ 0,6×10⁹/л и ниже эффективность лечения оценивают как низкую, а при CD3+CD4+ 0,7×10⁹/л и выше, CD3+CD8+ 0,7×10⁹/л и выше - как высокую.

Предлагаемым способом была проведена оценка эффективности стандартной терапии у 81 больного с нумулярной микробной экземой. Ретроспективный анализ крови параметров CD3+CD4+ и CD3+CD8+ показал достоверную эффективность терапии нумулярной микробной экземы при значениях CD3+CD4+ 0,7×10⁹/л и выше, CD3+CD8+ 0,7×10⁹/л и выше и неэффективность терапии при CD3+CD4+ 0,6×10⁹/л и ниже, CD3+CD8+ 0,6×10⁹/л и ниже.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами:

Пример 1. Больной Ж., поступил на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст - 32 года. Болен в течение 5-ти лет. Обострение наблюдается в течение 2-х недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получал. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 5*5 см с четкими границами, гиперемированные, умеренно инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения индекс оценки тяжести микробной экземы (ИОТМЭ) составлял 19 баллов, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,63×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,42×10⁹/л Больному было назначено стандартное лечение. Системная терапия: кальция глюконат 10% 10 мл внутримышечно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; натрия тиосульфат 30% 10 мл внутривенно-струйно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; таблетки хлоропирамин 25 мг перорально 3 раз в сутки в течение 20 дней; цефазолин 1.0 г внутримышечно 2 раза в сутки в течение 10 дней (в соответствии с результатами культурального посева на флору и чувствительность к антибиотикам).

Наружная терапия: мазь бетаметазона валерат 0,1% 1 раз в сутки в течение 20 дней, мазь гентамициновая 0,1% 2 раза в сутки в течение 20 дней.

В процессе лечения отмечалось обратное развитие воспалительных явлений в очагах. На 10-ый день проводимой терапии ИОТМЭ составлял 9 баллов, что соответствовало легкому течению дерматоза, уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,78×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,81×10⁹/л. К моменту выписки из стационара (20-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация и мокнутие разрешились, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данного больного на 10-ый день лечения значения CD3+CD4+ было выше 0,7×10⁹/л, CD3+CD8+ было выше 0,7×10⁹/л, что соответствовало клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы.

Пример 2. Больной О., поступил на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст - 34 года. Считает себя больным в течение 5-ти лет. Обострение наблюдается в течение 1,5 недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получал. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 5*5 см с четкими границами, гиперемированные, инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения ИОТМЭ составлял 19 баллов, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,62×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,60×10⁹/л. Больному было назначено стандартное лечение. Системная терапия: кальция глюконат 10% 10 мл внутримышечно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; натрия тиосульфат 30% 10 мл внутривенно-струйно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; таблетки хлоропирамин 25 мг перорально 3 раз в сутки в течение 20 дней; цефазолин 1.0 г внутримышечно 2 раза в сутки в течение 10 дней (в соответствии с результатами культурального посева на флору и чувствительность к антибиотикам).

Наружная терапия: мазь бетаметазона валерат 0,1% 1 раз в сутки в течение 20 дней, мазь гентамициновая 0,1% 2 раза в сутки в течение 20 дней.

В процессе лечения воспалительные явления в очагах продолжали прогрессировать: гиперемия и серозные колодцы на поверхности очагов сохранялись, инфильтрация усиливалась. На 10-ый день терапии ИОТМЭ составил 30 баллов, что соответствовало переходу средне-тяжелого течения заболевания в тяжелое течение. На 10-ый день проводимой терапии уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,58×10⁹/л, а CD3+CD8+ 0,52×10⁹/л. К стандартному лечению дополнительно был назначен иммуномодулятор. К моменту выписки из стационара (30-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация значительно уменьшились, мокнутие разрешилось, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данного больного на 10-ый день лечения значения CD3+CD4+ было ниже 0,6×10⁹/л, CD3+CD8+ было ниже 0,6×10⁹/л, что соответствовало низкой клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы и привело к необходимости коррекции схемы лечения, а также пролонгированию курса стационарного лечения.

Пример 3. Больная Н., поступила на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст - 34 года. Больна в течение 4-х лет. Обострение наблюдается в течение 3-х недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получала. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 3*3 см с четкими границами, гиперемированные, умеренно инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения ИОТМЭ составлял 22 балла, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,69×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,47×10⁹/л. Больной было назначено стандартное лечение. Системная терапия: кальция глюконат 10% 10 мл внутримышечно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; натрия тиосульфат 30% 10 мл внутривенно-струйно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; таблетки хлоропирамин 25 мг перорально 3 раз в сутки в течение 20 дней; цефазолин 1.0 г внутримышечно 2 раза в сутки в течение 10 дней (в соответствии с результатами культурального посева на флору и чувствительность к антибиотикам).

Наружная терапия: мазь бетаметазона валерат 0,1% 1 раз в сутки в течение 20 дней, мазь гентамициновая 0,1% 2 раза в сутки в течение 20 дней.

В процессе лечения отмечалось обратное развитие воспалительных явлений в очагах. На 10-ый день проводимой терапии ИОТМЭ составлял 13 баллов, что соответствовало легкому течению дерматоза, уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,7×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,7×10⁹/л. К моменту выписки из стационара (20-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация и мокнутие разрешились, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данного больной на 10-ый день лечения уровень CD3+CD4+ и CD3+CD8+ достигал 0,7×10⁹/л, что соответствовало клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы.

Пример 4. Больная З., поступила на стационарное лечение в ГАУЗ Республиканский кожно-венерологический диспансер №1 с жалобами на высыпания на гладкой коже верхних и нижних конечностей, зуд. Возраст - 37 лет. Считает себя больной в течение 3-х лет. Обострение наблюдается в течение 2-х недель. Лечение по данному обострению дерматоза не получала. На коже верхних и нижних конечностей наблюдались множественные высыпания в виде характерных округлых бляшек от 1*1 см до 3*3 см с четкими границами, гиперемированные, инфильтрированные, с множественными серозными колодцами, пустулами и гнойными корками. До лечения ИОТМЭ составлял 20 баллов, что соответствовало средне-тяжелому течению данного дерматоза. При бактериологическом исследование с очагов высеян Staphylococcus epidermidis. Клинический диагноз - экзема микробная, нумулярная форма, распространенная, хроническая, обострение, средне-тяжелое течение. При поступлении до начала лечения уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,69×10⁹/л, a CD3+CD8+ 0,64×10⁹/л. Больному было назначено стандартное лечение. Системная терапия: кальция глюконат 10% 10 мл внутримышечно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; натрия тиосульфат 30% 10 мл внутривенно-струйно 1 раз в сутки в течение 10 дней через день; таблетки хлоропирамин 25 мг перорально 3 раз в сутки в течение 20 дней; цефазолин 1.0 г внутримышечно 2 раза в сутки в течение 10 дней (в соответствии с результатами культурального посева на флору и чувствительность к антибиотикам).

Наружная терапия: мазь бетаметазона валерат 0,1% 1 раз в сутки в течение 20 дней, мазь гентамициновая 0,1% 2 раза в сутки в течение 20 дней.

В процессе лечения воспалительные явления в очагах продолжали прогрессировать: гиперемия и серозные колодцы на поверхности очагов сохранялись, инфильтрация усиливалась. На 10-ый день терапии ИОТМЭ составил 29 баллов, что соответствовало переходу средне-тяжелого течения заболевания в тяжелое течение. На 10-ый день проводимой терапии уровень в венозной крови CD3+CD4+ составлял 0,6×10⁹/л, а CD3+CD8+ 0,6×10⁹/л. К стандартному лечению дополнительно был назначен иммуномодулятор. К моменту выписки из стационара (30-ый день лечения) гиперемия, инфильтрация значительно уменьшились, мокнутие разрешилось, корки отпали, на месте разрешившихся очагов сохранялась поствоспалительная пигментация.

Таким образом, у данного больного на 10-ый день лечения значения уровень CD3+CD4+ и CD3+CD8+ достигал 0,6×10⁹/л, что соответствовало низкой клинической эффективности проводимой терапии нумулярной микробной экземы и привело к необходимости коррекции схемы лечения, а также пролонгированию курса стационарного лечения.

Как видно из приведенных примеров, результаты определения уровня CD3+CD4+ и CD3+CD8+ в венозной крови на 10-ый день лечения позволяют оценивать эффективность проводимой стандартной терапии.

Авторами в научно-медицинской и патентной литературе не было обнаружено сведений об использовании определения уровня в венозной крови CD3+CD4+ и CD3+CD8+ у больных нумулярной микробной экземой на 10-ый день лечения для ранней оценки эффективности стандартной терапии, проводимой больным нумулярной микробной экземой. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «новизна».

Исследованиями авторов была впервые доказана возможность ранней оценки эффективности стандартной терапии нумулярной микробной экземы предлагаемым способом. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемый способ легко воспроизводим в условиях лаборатории стационара. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «промышленная применимость».