×
24.08.2019
219.017.c39b

Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицины, кардиологии и генной терапии. Предложено средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека. Композиция состоит из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам. Изобретение обеспечивает создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицины, кардиологии и генной терапии и может быть использовано для лечения атеросклероза путем регуляции генной экспрессии. Изобретение представляет собой композицию для подавления экспрессии генов посредством механизма интерференции РНК,- состоящую из наночастиц Curdlan для адресной доставки siRNA в макрофаги человека и собственно siRNA. Изобретение обеспечивает создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека.

Атеросклероз представляет собой патологическое ремоделирование артерий, которое является основной причиной заболеваемости и смертности в развитых странах; эта патология лежит в основе инфаркта миокарда, инсульта и заболевания периферических артерий. На сегодняшний день терапия атеросклероза включает применение лекарственных и хирургических воздействий, имеющих многочисленные недостатки и требующих дальнейшего совершенствования (Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации, IV пересмотр. / Москва, 2009 г. - 80 с.; Blumenthal R.S., Kapur N.K. Can a potent statin actually regress coronary atherosclerosis? // JAMA. - 2006. - Vol. 295. - P. 1583-1584; Blumenthal R.S., Michos E.D. The HALTS Trial - Halting Atherosclerosis or Halted Too Early? // N. Engl J. Med. 2009. - Vol. 361. - P. 2178-2180; Ibanez В., Badimon J.J., Garcia M.J. Diagnosis of Atherosclerosis by Imaging. // Am. J. Med. - 2009. - Vol. 22, Issue 1. - Supplement: S15-S25.; Klein L.W. Atherosclerosis Regression, Vascular Remodeling, and Plaque Stabilization. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2007. - Vol. 49. - P. 271-273; Gustafsen C. et al. The Hypercholesterolemia-Risk Gene SORT1 Facilitates PCSK9 Secretion. // Cell Metabolism. - 2014 - Vol. 19, Issue 2, p. 310-318.).

Многие антиатеросклеротические препараты (например, статины) снижают проявления симптомов атеросклероза и являются достаточными для лечения некоторой части пациентов, но они не воздействуют на первопричины патогенетических звеньев заболевания. Таким образом, разработка новых подходов к лечению и профилактике атеросклероза остается актуальной задачей.

Недавнее открытие явления интерференции РНК (РНК-и) как одного из основных механизмов посттранскрипционной регуляции генов дало возможность использовать этот феномен для создания новых лекарственных средств, способных эффективно и безопасно подавлять экспрессию генов-мишеней. РНК-и позволяет специфически «выключать» экспрессию генов-мишеней с помощью молекул siRNA (small interfering RNA). Для эффективной доставки siRNA в клетки-мишени применяют специальные молекулы-носители, формирующие комплексы с siRNA. Комплексование приводит к компактизации молекул РНК, их защите от деградации клеточными РНКазами, что позволяет им эффективно проникать внутрь клетки и достигать нужной мишени.

Главными преимуществами использования препаратов на основе РНК-и являются высокая специфичность подавления экспрессии генов, вовлеченных в патогенез, а также высокая эффективность их подавления (до 90%), т.к. вводимые siRNA способны действовать в крайне низких концентрациях. Кроме того, привлекательной является сравнительная дешевизна методики. Синтез олигонуклеотидов в настоящее время вполне доступен и прост в масштабировании. Этот факт дает препаратам, созданным на базе siRNA, важное конкурентное преимущество, например, по сравнению с моноклональными антителами. Открытие РНК-интерференции дало новые возможности для регуляции экспрессии патогенетически значимых генов, в том числе и генов, вовлеченных в инициацию и развитие атеросклероза. РНК-и активируется молекулами siRNA, которые имеют нуклеотидную последовательность, комплементарную гену-мишени. Несмотря на сравнительно недавнее открытие РНК-и, уже имеются изобретения по применению данного подхода к терапии болезни Хантингтона, онкологических заболеваний, начались клинические исследования метода лечения дистрофии желтого пятна сетчатки с помощью siRNA.

Авторами настоящего изобретения обнаружено (неопубликованные данные), что атерогенез приводит к изменению параметров (активности, экспрессии) генов, которые могут быть определены в образцах крови человека. При проведении транскриптомного анализа макрофагов (одного из важнейших клеточных типов, участвующих в атерогенезе) были выявлены гены, активность которых существенно изменяется при взаимодействии клеток с модифицированными липопротеидами низкой плотности. С помощью методов биоинформатики эти гены, тесно связанные с накоплением холестерина макрофагами человека, идентифицированы как IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1,DUSP1 и IL15.

Таким образом, идентифицированные гены (маркеры, мастер-регуляторы), ответственные за накопление холестерина макрофагами человека, представляют значительный интерес для генотерапии атеросклероза с помощью РНК-интерференции.

Аналогом заявляемого изобретения является патент на изобретение №: 2563989 «Композиция для подавления экспрессии гена цитокина интерлейкина-4» (сентябрь 27, 2015), представляющая собой композицию, состоящую из катионного дендримерного пептида - LTP и двух молекул siRNA против гена IL-4 для подавления аллергического воспаления путем блокировки экспрессии гена провоспалительного цитокина IL-4.

Задачей предлагаемого изобретения является создание средства для лечения атеросклероза..

Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15.

Указанная задача решается, а технический результат достигается за счет того, что композиция для подавления экспрессии указанных генов посредством механизма интерференции РНК состоит из носителя (наночастиц Curdlan) и siRNA, поставляемых компанией Ambion (ThermoFisher). Выбор оптимальных молекул siRNA для композиции соответствует методу, описанному в статье (Lu Z.J. and Mathews D.H., 2008).

В свою очередь, получение наночастиц Curdlan осуществляли следующим образом (Ganbold Т, Baigude Н. Design of Mannose-Functionalized Curdlan Nanoparticles for Macrophage-Targeted siRNA Delivery. ACS Appl Mater Interfaces. 2018 May 2;10(17):14463-14474; Han J, Caia J, Borjihan W, Ganbolda T, Rana TM, Baigude H. Preparation of Novel Curdlan Nanoparticles for Intracellular siRNA Delivery. Carbohydrate polymers. 2015; 117:324-330). 6-Амино-6-дехсоид-кундлан (80 мг, 6AC-100) растворяли в 3 мл натрий-фосфатного буфера (PBS) (рН=9;0) и добавляли 1 мл раствора диэтилсульфоксида 4-изотиоцианатофенил. Добавляли альфа-Д-маннопиранозид (18,7 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли смесь гидрохлорид имидазол-4-уксусной кислоты (31,5 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-карбодиимида (22,1 мг) в 0,1 М буфере MES (рН=6,0). Перемешивание продолжалось при комнатной температуре в течение 6 часов. После продукт чистили путем диализа (размер пор 3500) против деионизированной воды в течение 2 дней, обессоливающая колонка PD-10 (GE Healthcare) использовалась для дальнейшей очистки конечного продукта, который был получен при помощи сублимационной сушки.

Полученный конечный продукт (1 мкг) смешивается с siRNA (25 мкМ), готовая композиция вводится в кровь пациентов из расчета 25 мг/кг. В предварительных экспериментах на лабораторных животных и пациентах-добровольцах показано, что заявляемое изобретение - малотоксичная композиция, подавляющая экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, может применяться как отдельно, так и в составе лекарственных препаратов для лечения атеросклероза. Средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека, за счет интерференции РНК, состоящую из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам.

Средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека, за счет интерференции РНК, состоящую из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-5 из 5.
10.01.2015
№216.013.1e19

Иммунокорректирующее средство для терапии атеросклеротических заболеваний

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к иммунокорректирующему средству для терапии атеросклеротических заболеваний. Иммунокорректирующее средство для терапии атеросклеротических заболеваний, содержащее цветки боярышника, траву зверобоя продырявленного, а также...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002539133
Дата охранного документа: 10.01.2015
20.01.2015
№216.013.1f00

Способ лечения атеросклероза, основанный на антицитокиновом действии

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и касается профилактики и лечения атеросклероза. Для этого пациентам назначают таблетки или капсулы, в состав активных компонентов каждой из которых входят цветки бузины черной, цветки календулы и трава фиалки в определенных количественных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002539377
Дата охранного документа: 20.01.2015
26.08.2017
№217.015.da4f

Способ оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности

Изобретение относится к медицине и к клинической биохимии и может быть использовано для оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП). Сущность способа: используют твердофазный лектин-иммуноферментный метод, основанный на связывании цмЛПНП с 100 мкл...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002623879
Дата охранного документа: 29.06.2017
29.06.2018
№218.016.68bb

Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека

Изобретение относится к медицине и клинической биохимии и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП) с диагностическими и терапевтическими целями. Способ количественного определения содержания...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002659211
Дата охранного документа: 28.06.2018
23.08.2019
№219.017.c34a

Способ выявления предрасположенности к заболеванию атеросклерозом на основе определения экспрессии генов, вовлеченных в накопление холестерина

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и кардиологии, и предназначено для выявления предрасположенности пациента к атеросклерозу или наличия доклинических признаков этой патологии. С помощью ПЦР-РВ измеряют уровень экспрессии генов, тесно связанных с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002698092
Дата охранного документа: 22.08.2019
Показаны записи 1-10 из 11.
20.06.2013
№216.012.4b3b

Способ профилактики атеросклероза, основанный на подавлении атерогенной модификации липопротеидов

Изобретение относится к профилактической медицине и может быть использовано для профилактики и лечения атеросклероза. Для этого пациентам назначают натуральный комплекс, активным компонентом которого является корень солодки голой, вспомогательными - лактоза, поливинилпирролидон и кальций...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002484841
Дата охранного документа: 20.06.2013
10.01.2015
№216.013.1e19

Иммунокорректирующее средство для терапии атеросклеротических заболеваний

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к иммунокорректирующему средству для терапии атеросклеротических заболеваний. Иммунокорректирующее средство для терапии атеросклеротических заболеваний, содержащее цветки боярышника, траву зверобоя продырявленного, а также...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002539133
Дата охранного документа: 10.01.2015
20.01.2015
№216.013.1f00

Способ лечения атеросклероза, основанный на антицитокиновом действии

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и касается профилактики и лечения атеросклероза. Для этого пациентам назначают таблетки или капсулы, в состав активных компонентов каждой из которых входят цветки бузины черной, цветки календулы и трава фиалки в определенных количественных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002539377
Дата охранного документа: 20.01.2015
13.01.2017
№217.015.6561

Способ оценки генетического риска атеросклероза на основе определения вариантов митохондриального генома

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки индивидуального генетического риска атеросклероза. Осуществляют взятие крови, выделение ДНК и генотипирование митохондриальной ДНК. Наличие варианта A1811G свидетельствует о высоком генетическом риске. Наличие вариантов Т204С,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002592233
Дата охранного документа: 20.07.2016
13.01.2017
№217.015.6d5f

Средство с иммуномодулирующими свойствами для профилактики атеросклероза

Изобретение относится к средству с иммуномодулирующими свойствами для профилактики атеросклероза. Указанное средство содержит 21 мас.% порошка высушенного чеснока, 21 мас.% порошка высушенной левзеи сафлоровидной, 21 мас.% порошка высушенного листа зеленого чая, 24 мас.% сахара молочного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002597161
Дата охранного документа: 10.09.2016
26.08.2017
№217.015.da4f

Способ оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности

Изобретение относится к медицине и к клинической биохимии и может быть использовано для оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП). Сущность способа: используют твердофазный лектин-иммуноферментный метод, основанный на связывании цмЛПНП с 100 мкл...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002623879
Дата охранного документа: 29.06.2017
10.05.2018
№218.016.495e

Способ получения биологически активной кормовой добавки для цыплят-бройлеров

Изобретение относится к кормопроизводству и птицеводству, в частности к способу получения биологически активной кормовой добавки для цыплят-бройлеров. Способ предусматривает наращивание биомассы предкуколок мухи черной львинки Hermetia illucens при использовании в качестве питательного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002651303
Дата охранного документа: 19.04.2018
29.06.2018
№218.016.68bb

Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека

Изобретение относится к медицине и клинической биохимии и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП) с диагностическими и терапевтическими целями. Способ количественного определения содержания...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002659211
Дата охранного документа: 28.06.2018
01.03.2019
№219.016.cef4

Способ профилактики и лечения атеросклероза

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и касается профилактики и лечения атеросклероза. Для этого пациентам назначают таблетки или капсулы, в состав активных компонентов каждой из которых входят цветки бузины черной, цветки календулы и трава фиалки в определенных количественных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002455016
Дата охранного документа: 10.07.2012
09.08.2019
№219.017.bd51

Способ определения атерогенной активности пищевых продуктов

Изобретение относится к области профилактической медицины, а именно к способу определения атерогенной активности пищевых продуктов, предусматривающему использование клеточной модели моноцитов-макрофагов, выделенных из крови здорового человека, для введения в нее сыворотки крови, взятой у...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696569
Дата охранного документа: 05.08.2019
+ добавить свой РИД