×
17.07.2019
219.017.b511

Результат интеллектуальной деятельности: Тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Тест-система включает в себя буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящую из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов, специфичных для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE. Смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, содержит следующие нуклеотидные последовательности: RVF5 5'-ATTTCAGTTGATGAGACCA-3'; прямой праймер; RVR6 5'-CAATTCTAAGCGTGAGTCC-3' обратный праймер; зонд RVP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3' - BHQ1, MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3' - прямой праймер; MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3' - обратный праймер; зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных. 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики ротовирусной инфекции у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований.

Известна тест-система для обнаружения РНК вируса инфекционной болезни, путем проведения полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя инфекции олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченного зонда и контрольных образцов (патент РФ №2515916, кл. C12N 15/11, 2014).

Также известна тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовирусной инфекции с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени, включающий буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE; буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, (патент РФ №2506317, C12Q 1/68, 2014 г. - прототип).

Общим недостатком известных технических решений является отсутствие возможности диагностики ротовирусной инфекции у животных.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей и получение достоверной диагностики с помощью ОТ - ПЦР в реальном времени.

Технический результат достигается тем, что в тест-системе для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, включающей буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE, буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, согласно изобретению для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1, со следующими нуклеотидными последовательностями:

RVAF5 5'- ATTTCAGTTGATGAGACCA -3'; прямой праймер;

RVAR6 5'- CAATTCTAAGCGTGAGTCC -3' обратный праймер;

зонд RVAP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3'- BHQ1,

MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3'- прямой праймер;

MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3'- обратный праймер;

зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2.

Новизна заявляемого технического решения заключается в том, что для получения достоверной диагностики ротовирусной инфекции животных используют тест-систему с использованием специфичных для участка генома ротавируса типа А олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченного зонда и разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со с специфическими к нему праймерами и зондом.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в ветеринарной вирусологии, а именно в качестве средств диагностики ротовирус А у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Использование заявляемых олигонуклеотидных праймеров RVAF5, RVAR6 и флуоресцентно-меченного зонда RVAP обеспечивает специфическое выявление РНК ротавируса типа А у животных.

Использование разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со специфическими к нему праймерами и зондом, бактериофага MS2 обусловлено тем, что это позволяет контролировать корректное прохождение реакции в каждой пробирки, а также контролируется этап выделения РНК из образцов.

Для выбора последовательности и расчета первичной структуры олигонуклеотидных праймеров и зондов, был проведен сравнительный анализ доступных в базе данных GenBank нуклеотидных последовательности гена RVP6, кодирующего белок внутренней оболочки капсида вируса и являющегося важнейшим компонентом вириона (inner capsid protein gene) ротавирусов, входящих в семейство реовирусов. Как и другие представители этого семейства, ротавирусы обладают двунитевой фрагментированной РНК, размером порядка 18 500 пар нукдеотидов.

С помощью программы "BioEdit 7.0" выравнены нуклеотидные последовательности гена VP6 генома вирусов - представителей родов Ротавирусов (А-Н видов) и орбивирусов последовательностью гена VP6 генома ротавируса А изолята NCDV (Bovine rotavirus NCDV inner capsid protein VP6 mRNA (код доступа AF317127). В результате анализа построенного элайнмента

внутри гена капсидного белка VP6 выбран участок между 500 и 900 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности. С помощью программы "Oligo 6.0" рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд RVAP, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров RVAF5 и RVAR6. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

С помощью программы "Oligo 6.0" проанализирована нуклеотидная последовательность бактериофага MS2 (Enterobacteria phage MS2 isolate ST4, complete genome.ACCESSION EF204940). Бактериофаг MS2 содержит однонитевую позитивно ориентрованную РНК размером 3569 оснований. В результате анализа внутри гена белка `созревания` (maturation protein) выбран участок между 200 и 350 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд MS2P, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров MS2F и MS2R. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример применения тест- системы для выявления генома

возбудителя ротовируса типаА у животных

Для исследования используют следующий материал:

- фекалии весом 5 г. отбирают в стерильный пластиковый контейнер.

- из тканей кишечника вырезают кусочки размером 1 см3 и помещают в стерильный контейнер. Далее обрабатывают исследуемый материал.

Пробы тканей кишечника с содержимым (до 1 г) гомогенизируют с использованием стерильных фарфоровых ступок и пестиков, затем готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Суспензию переносят в пробирку объемом 1,5 мл и центрифугируют при 9000 об/мин в течение 1 мин. Аликвоту надосадочной жидкости (0,1 мл) используют для экстракции РНК.

Из фекалий (1-5 г) готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Взвесь фекалий декантируют в течение 5-10 минут. Отбирают 1 мл надосадочной жидкости и переносят в чистую пробирку 1,5 мл, центрифугируют при 5000 об./мин на центрифуге «MiniSpin», Eppendorf, в течение 5 мин. Экстракцию РНК из осветленного экстракта фекалий проводят по возможности, сразу. При необходимости хранения замораживают.

Анализ проводят с помощью набора реагентов (см. таблицу 1 и 2). «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР» Технические условия ТУ 21.10.60-102-51062356-2015, ранее 9398-102-51062356-2015 «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР, http://www.vetfaktor.ru/» набор реагентов для выявления РНК ротавируса типа А в клиническом материале методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Анализ состоит из трех этапов:

- экстракция НК;

- проведение ОТ-ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени;

- учет результатов анализа.

Реакция ОТ-ПЦР РВ проводится в одной пробирке.

Экстракция (выделение) НК из исследуемых проб

Отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Вносят во все пробирки с исследуемыми образцами, включая пробирку для ОКО (отрицательный контрольный образец), по 10 мкл ВКО RVA (внутренний контрольный образец).

В набор не входят реактивы для экстракции НК. Выделение РНК может проводиться, например, с помощью наборов на основе сорбционного метода, в состав которых входит силика или микроцентрифужные колонки, наборов на основе фенол-хлороформной экстракции и т.п. Рекомендуется использовать набор «ДНК/РНК-С-ФАКТОР» http://www.vetfaktor.ru/ либо аналогичный.

Подготовка образцов к проведению ПЦР

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем РНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием ПКО RV, ВКО RV и РНК буфера.

При формировании ПКО количество внесенных рекомбинантных плазмид составляет 5000 копий специфического фрагмента в 1 мкл.

Буфер для проведения ОТ-ПЦР, ПЦР буфер RV; состав: 2,5х ПЦР-буфер (хлорид калия, 100 мМ, Трис-HCl, рН 8,8 100 мМ, глицерол 1%, Tween-20 0.02%); хлорид магния, 5 мМ; деионизированная вода.

- Смесь для проведения ПЦР, ПЦР-смесь RV состав: эквимолярная смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ) в концентрации 0,25 мМ («Синтол», Россия); деионизированная вода, для ПКО: смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А (прямой и обратный праймеры RVF и RVR в концентрации 0,2 мкМ, зонд RVP-FAM в концентрации 0,1 мкМ, т.е. в соотношении 1:1:0,5), смесь праймеров и флуоресцентного зонда на (бактериофага MS2) (прямой и обратный праймеры MS2F и MS2R с концентрацией 0,2 мкМ, зонд MS2P -Су5 в концентрации 0,1 мкМ, в соотношении 1:1:0,5) («Синтол», Россия). Смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А и смесь праймеров и флуоресцентного зонда на бактериофага MS2 берется в соотношении 1:1.

Смесь ферментов, RT PCR ENZ, состав: ДНК полимераза с антителами, ингибирующими активность фермента, TAQ POLYMERASE (5 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия), обратная транскриптаза MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE (100 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия).

Буфер для разведения РНК, РНК буфер, состав: деионизованная вода.

Внутренний контрольный образец, ВКО RV; состав: суспензия бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл.

- Отрицательный контрольный образец, ОКО (ТЕ буфер); состав: ТЕ буфер (10 мМ Tris-HCl, 0,5 мМ EDTA, рН 8,0)

- Положительный контрольный образец, ПКО RV; состав: смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVa А и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

10 мкл ПЦР БУФЕР RV

5 мкл ПЦР СМЕСЬ RV

0,75 мкл RT PCR ENZ.

Перемешивают смесь на вортексе и сбрасывают капли кратковременным центрифугированием. Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации НК исследуемых и контрольных проб. Вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.

Используя наконечники с фильтром в подготовленные пробирки вносят:

а) в пробирку отрицательного контроля ПЦР (К-) 10 мкл РНК буфера;

б) в ряд пробирок для исследуемых проб - в каждую внести по 10 мкл НК соответствующей пробы;

в) в пробирку с положительным контролем ПЦР (К+) 10 мкл ПКО RV.

Проводят реакции ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией на приборах «Rotor-Gene Q», «ДТ-96» и «CFX96».

Помещают подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора и программируют прибор.

Синтез кДНК проводят при температуре 55°С в течение 15 мин, а затем терминируют реакцию 5-минутным прогреванием реакционной смеси при температуре 95°С. Далее следует стадия ПЦР.

Температурный режим для проведения ПЦР включает 40 циклов амплификации (95°С - 15 сек, 58°С - 30 сек, 72°С - 20 сек). Обе реакции проводятся в одной пробирке последовательно, без открывания пробирки и переноса материала.

Детекция продуктов амплификации осуществляется методом регистрации флуоресценции, накапливающейся в результате разрушения гибридизационного зонда, содержащего на 5'-конце флуорофор (FAM/Cy5), а на 3'-

конце - гаситель (BHQ1/BHQ2). В реакции используется два зонда одновременно, пара FAM -BHQ1 для мишени RV и пара Су5 - BHQ2 для MS2. В отсутствие мишени флуорофор и гаситель сближены и наблюдается лишь незначительная флуоресценция, так как гаситель поглощает испускаемое флуорофором излучение. В процессе ПЦР зонд гибридизуется на участок одной из нитей ампликона, при синтезе комплементарной нити ДНК Taq=полимераза приближается к флуорофору, что ведет к его разрушению за счет 5'-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы. В результате флуорофор отделяется от гасителя и его излучение может быть детектировано. Таким образом, увеличение количества синтезированного ПЦР-продукта приводит к росту сигнала флуоресценции.

В результате ПЦР получают данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала, которые анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в режиме «реального времени».

Учет результатов ОТ-ПЦР проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца.

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции НК в соответствии с таблицей 4.

Появление любого значения Ct в таблице результатов для отрицательного контроля этапа экстракции (ВК-) на канале FAM/Green и для отрицательного контроля этапа ПЦР (К-) на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа по всем пробам считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Анализ результатов амплификации для канала Cy5/Red (ВКО) по графику (рис 2) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образцы, для которых по каналу Cy5/Red значение Ct отсутствует или превышает 35 цикл (при этом по каналу FAM/ Green значение Ct также отсутствует) требуют повторного проведения исследования с этапа ПЦР. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов на канале Cy5/Red указывает на присутствие ингибиторов в пробах или на ошибки при постановке реакции ОТ-ПЦР. Требуется провести исследование, начиная с этапа экстракции НК.

Анализ результатов амплификации для канала FAM/Green (Ротавирус А) по графику (рис. 1) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образец считается положительным, РНК ротавируса А присутствует, т.к. наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (см. Табл. 4). Если для исследуемого образца по каналу FAM7 Green значение Ct определяется позднее 35 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей - он считается спорным и исследуется повторно с этапа выделения НК. Если при повторной постановке наблюдается схожий результат (наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green) - образец считается положительным.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 151-160 из 465.
16.03.2019
№219.016.e1b9

Способ регулирования стока атмосферных осадков

Изобретение относиться к водоснабжению. Способ состоит в одновременном накоплении в долине реки подземных вод в подземном водохранилище и поверхностного стока в надземном водохранилище и управлении уровнем подземных вод при его падении на участке подземного водохранилища путем регулируемого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002682055
Дата охранного документа: 14.03.2019
16.03.2019
№219.016.e1bb

Способ возделывания гибридов кукурузы на зерно в условиях выщелоченного чернозема западного предкавказья

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к растениеводству. Способ включает посев кукурузы в последней декаде апреля на глубину 6-7 см. Через 5-6 сут высевают озимый тритикале поперек рядков кукурузы на глубину 2-3 см с нормой высева 2,5-3,0 млн всхожих семян на гектар....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002682056
Дата охранного документа: 14.03.2019
20.03.2019
№219.016.e32b

Устройство для питания сварочной дуги

Изобретение относится к области электротехники, к устройствам для питания сварочной дуги. Технический результат состоит в упрощении конструкции, увеличении диапазона регулирования сварочного тока и повышении плотности смеси ферромагнитного порошка с маслом и увеличении эксплуатационной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002682244
Дата охранного документа: 18.03.2019
30.03.2019
№219.016.f970

Корпус плуга

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению, а конкретно к лемешным плугам. Корпус плуга содержит стойку с установленными на ней полевой доской (2), лемехом (3) и отвалом (4). Полевая доска (2), лемех (3) и отвал (4) соединены в одно целое и образуют лемешно-отвальную...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683494
Дата охранного документа: 28.03.2019
30.03.2019
№219.016.f9fa

Способ производства мясного крема из баранины

Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано при производстве консервированных продуктов для быстрого питания. Способ производства мясного крема включает измельчение баранины 1 сорта, подготовку смеси растительных компонентов, приготовление рецептурной композиции,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683491
Дата охранного документа: 28.03.2019
30.03.2019
№219.016.fa02

Способ инкубации яиц перепелов

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ инкубации перепелиных яиц, включающий предынкубационную обработку ультрафиолетом яиц, на которые воздействуют в ограниченном затемненном пространстве с отражающими поверхностями длинноволновым ультрафиолетовым...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683503
Дата охранного документа: 28.03.2019
30.03.2019
№219.016.fa09

Станок для предпосевной обработки семян

Изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения, в частности к оборудованию для предпосевной обработки семенного материала, и может быть использовано для подготовки к посеву мелкосемянных культур, например моркови. Станок для предпосевной обработки семян содержит...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683488
Дата охранного документа: 28.03.2019
30.03.2019
№219.016.fa0b

Устройство подсушки изоляции обмоток трехфазного асинхронного электродвигателя в технологической паузе

Изобретение относится к электротехнике, а именно к устройствам для подсушки изоляции обмоток трехфазного асинхронного электродвигателя в технологической паузе, и может быть использовано для защиты трехфазных асинхронных электродвигателей, работающих в помещениях с повышенной влажностью и вне...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683588
Дата охранного документа: 29.03.2019
30.03.2019
№219.016.fa16

Устройство для регулирования запасов пресных вод

Изобретение относится к водоснабжению и может использоваться при регулировании подземного и надземного стоков, приуроченных к долинам горных рек с периодически пересыхающими водотоками, для повышения надежности водоотбора или его увеличения. Устройство для регулирования запасов пресных вод по...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683512
Дата охранного документа: 28.03.2019
04.04.2019
№219.016.fb8b

N-(3-хлор-2,6-диэтилфенил)-2-(4,6-диметил[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-2-ил-сульфанил)ацетамид в качестве антидота 2,4-д на подсолнечнике

Изобретение относится к N-(3-хлор-2,6-диэтилфенил)-2-(4,6-диметил[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-2-ил-сульфанил)ацетамиду, который проявляет антидотную активность по отношению к 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоте на подсолнечнике. Технический результат: расширение ряда биологически активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002683792
Дата охранного документа: 02.04.2019
Показаны записи 151-160 из 219.
19.06.2019
№219.017.8ba9

Вакцина для профилактики кокцидиоза (эймериоза) кур

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии и биотехнологии и касается вакцины для профилактики кокцидиоза. Представленная вакцина в качестве антигена содержит суспензию смеси спорулированных ооцист штаммов возбудителя кокцидиоза, депонированных в коллекции ГНУ ВНИВИП...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002465313
Дата охранного документа: 27.10.2012
02.07.2019
№219.017.a358

Способ выращивания поросят

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству, в частности, к ветеринарной медицине, и может быть использовано для активизации и коррекции иммунной системы поросят, нормализации обменных процессов, устранения гормонального дисбаланса, повышения прироста живой массы. Сущностью...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002692918
Дата охранного документа: 28.06.2019
17.07.2019
№219.017.b4f7

Тест-система для обнаружения генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота при помощи мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в реальном времени. Тест–система включает буфер для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694499
Дата охранного документа: 15.07.2019
17.07.2019
№219.017.b577

Способ выявления генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ выявления генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота. Способ включает в себя выделение РНК из биологического материала в виде экстракта фекалий или фрагментов органов брюшной полости сорбционным методом,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694558
Дата охранного документа: 16.07.2019
19.07.2019
№219.017.b64f

Способ идентификации видовой принадлежности баранины и говядины в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ идентификации видовой принадлежности баранины и говядины в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах, включающий выделение ДНК из баранины (Ovis) и говядины (Bos) сорбционным методом, постановку...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694713
Дата охранного документа: 16.07.2019
19.07.2019
№219.017.b654

Тест-система для выявления рнк вируса болезни шмалленберга у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области биотехнологии. Для повышение точности диагностики тест-система для выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных включает буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения состоящую из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694719
Дата охранного документа: 16.07.2019
23.07.2019
№219.017.b79e

Вакцина ассоциированная против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам ассоциированным против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота. Вакцина содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя эшерихиоза E.coli -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002695137
Дата охранного документа: 22.07.2019
01.08.2019
№219.017.bb0b

Способ выявления генома возбудителя вируса парагриппа 3 типа у крупного рогатого скота

Изобретение относится к области биохимии. Описан способ выявления генома возбудителя вируса парагриппа 3 типа у крупного рогатого скота, включающий выделение РНК из биологического материала сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением внутреннего и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696069
Дата охранного документа: 30.07.2019
03.08.2019
№219.017.bca1

Способ выявления рнк вируса болезни шмалленберга у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выделения РНК из биологического материала по выбору: цельная кровь, сыворотка крови, фрагменты тканей и органов сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696306
Дата охранного документа: 01.08.2019
23.08.2019
№219.017.c2a3

Способ диагностики цирковируса свиней

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии и представляет собой способ диагностики цирковируса свиней, включающий посев культуры клеток РК-15, инфицирование ее биологическим материалом, фиксацию клеток РК-15, инкубирование последовательно со специфическими...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002697849
Дата охранного документа: 21.08.2019
+ добавить свой РИД