×
17.07.2019
219.017.b511

Тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Тест-система включает в себя буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящую из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов, специфичных для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE. Смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, содержит следующие нуклеотидные последовательности: RVF5 5'-ATTTCAGTTGATGAGACCA-3'; прямой праймер; RVR6 5'-CAATTCTAAGCGTGAGTCC-3' обратный праймер; зонд RVP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3' - BHQ1, MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3' - прямой праймер; MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3' - обратный праймер; зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных. 4 табл., 1 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики ротовирусной инфекции у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований.

Известна тест-система для обнаружения РНК вируса инфекционной болезни, путем проведения полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя инфекции олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченного зонда и контрольных образцов (патент РФ №2515916, кл. C12N 15/11, 2014).

Также известна тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовирусной инфекции с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени, включающий буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE; буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, (патент РФ №2506317, C12Q 1/68, 2014 г. - прототип).

Общим недостатком известных технических решений является отсутствие возможности диагностики ротовирусной инфекции у животных.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей и получение достоверной диагностики с помощью ОТ - ПЦР в реальном времени.

Технический результат достигается тем, что в тест-системе для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, включающей буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE, буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, согласно изобретению для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1, со следующими нуклеотидными последовательностями:

RVAF5 5'- ATTTCAGTTGATGAGACCA -3'; прямой праймер;

RVAR6 5'- CAATTCTAAGCGTGAGTCC -3' обратный праймер;

зонд RVAP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3'- BHQ1,

MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3'- прямой праймер;

MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3'- обратный праймер;

зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2.

Новизна заявляемого технического решения заключается в том, что для получения достоверной диагностики ротовирусной инфекции животных используют тест-систему с использованием специфичных для участка генома ротавируса типа А олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченного зонда и разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со с специфическими к нему праймерами и зондом.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в ветеринарной вирусологии, а именно в качестве средств диагностики ротовирус А у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Использование заявляемых олигонуклеотидных праймеров RVAF5, RVAR6 и флуоресцентно-меченного зонда RVAP обеспечивает специфическое выявление РНК ротавируса типа А у животных.

Использование разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со специфическими к нему праймерами и зондом, бактериофага MS2 обусловлено тем, что это позволяет контролировать корректное прохождение реакции в каждой пробирки, а также контролируется этап выделения РНК из образцов.

Для выбора последовательности и расчета первичной структуры олигонуклеотидных праймеров и зондов, был проведен сравнительный анализ доступных в базе данных GenBank нуклеотидных последовательности гена RVP6, кодирующего белок внутренней оболочки капсида вируса и являющегося важнейшим компонентом вириона (inner capsid protein gene) ротавирусов, входящих в семейство реовирусов. Как и другие представители этого семейства, ротавирусы обладают двунитевой фрагментированной РНК, размером порядка 18 500 пар нукдеотидов.

С помощью программы "BioEdit 7.0" выравнены нуклеотидные последовательности гена VP6 генома вирусов - представителей родов Ротавирусов (А-Н видов) и орбивирусов последовательностью гена VP6 генома ротавируса А изолята NCDV (Bovine rotavirus NCDV inner capsid protein VP6 mRNA (код доступа AF317127). В результате анализа построенного элайнмента

внутри гена капсидного белка VP6 выбран участок между 500 и 900 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности. С помощью программы "Oligo 6.0" рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд RVAP, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров RVAF5 и RVAR6. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

С помощью программы "Oligo 6.0" проанализирована нуклеотидная последовательность бактериофага MS2 (Enterobacteria phage MS2 isolate ST4, complete genome.ACCESSION EF204940). Бактериофаг MS2 содержит однонитевую позитивно ориентрованную РНК размером 3569 оснований. В результате анализа внутри гена белка `созревания` (maturation protein) выбран участок между 200 и 350 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд MS2P, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров MS2F и MS2R. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример применения тест- системы для выявления генома

возбудителя ротовируса типаА у животных

Для исследования используют следующий материал:

- фекалии весом 5 г. отбирают в стерильный пластиковый контейнер.

- из тканей кишечника вырезают кусочки размером 1 см3 и помещают в стерильный контейнер. Далее обрабатывают исследуемый материал.

Пробы тканей кишечника с содержимым (до 1 г) гомогенизируют с использованием стерильных фарфоровых ступок и пестиков, затем готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Суспензию переносят в пробирку объемом 1,5 мл и центрифугируют при 9000 об/мин в течение 1 мин. Аликвоту надосадочной жидкости (0,1 мл) используют для экстракции РНК.

Из фекалий (1-5 г) готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Взвесь фекалий декантируют в течение 5-10 минут. Отбирают 1 мл надосадочной жидкости и переносят в чистую пробирку 1,5 мл, центрифугируют при 5000 об./мин на центрифуге «MiniSpin», Eppendorf, в течение 5 мин. Экстракцию РНК из осветленного экстракта фекалий проводят по возможности, сразу. При необходимости хранения замораживают.

Анализ проводят с помощью набора реагентов (см. таблицу 1 и 2). «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР» Технические условия ТУ 21.10.60-102-51062356-2015, ранее 9398-102-51062356-2015 «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР, http://www.vetfaktor.ru/» набор реагентов для выявления РНК ротавируса типа А в клиническом материале методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Анализ состоит из трех этапов:

- экстракция НК;

- проведение ОТ-ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени;

- учет результатов анализа.

Реакция ОТ-ПЦР РВ проводится в одной пробирке.

Экстракция (выделение) НК из исследуемых проб

Отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Вносят во все пробирки с исследуемыми образцами, включая пробирку для ОКО (отрицательный контрольный образец), по 10 мкл ВКО RVA (внутренний контрольный образец).

В набор не входят реактивы для экстракции НК. Выделение РНК может проводиться, например, с помощью наборов на основе сорбционного метода, в состав которых входит силика или микроцентрифужные колонки, наборов на основе фенол-хлороформной экстракции и т.п. Рекомендуется использовать набор «ДНК/РНК-С-ФАКТОР» http://www.vetfaktor.ru/ либо аналогичный.

Подготовка образцов к проведению ПЦР

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем РНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием ПКО RV, ВКО RV и РНК буфера.

При формировании ПКО количество внесенных рекомбинантных плазмид составляет 5000 копий специфического фрагмента в 1 мкл.

Буфер для проведения ОТ-ПЦР, ПЦР буфер RV; состав: 2,5х ПЦР-буфер (хлорид калия, 100 мМ, Трис-HCl, рН 8,8 100 мМ, глицерол 1%, Tween-20 0.02%); хлорид магния, 5 мМ; деионизированная вода.

- Смесь для проведения ПЦР, ПЦР-смесь RV состав: эквимолярная смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ) в концентрации 0,25 мМ («Синтол», Россия); деионизированная вода, для ПКО: смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А (прямой и обратный праймеры RVF и RVR в концентрации 0,2 мкМ, зонд RVP-FAM в концентрации 0,1 мкМ, т.е. в соотношении 1:1:0,5), смесь праймеров и флуоресцентного зонда на (бактериофага MS2) (прямой и обратный праймеры MS2F и MS2R с концентрацией 0,2 мкМ, зонд MS2P -Су5 в концентрации 0,1 мкМ, в соотношении 1:1:0,5) («Синтол», Россия). Смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А и смесь праймеров и флуоресцентного зонда на бактериофага MS2 берется в соотношении 1:1.

Смесь ферментов, RT PCR ENZ, состав: ДНК полимераза с антителами, ингибирующими активность фермента, TAQ POLYMERASE (5 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия), обратная транскриптаза MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE (100 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия).

Буфер для разведения РНК, РНК буфер, состав: деионизованная вода.

Внутренний контрольный образец, ВКО RV; состав: суспензия бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл.

- Отрицательный контрольный образец, ОКО (ТЕ буфер); состав: ТЕ буфер (10 мМ Tris-HCl, 0,5 мМ EDTA, рН 8,0)

- Положительный контрольный образец, ПКО RV; состав: смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVa А и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

10 мкл ПЦР БУФЕР RV

5 мкл ПЦР СМЕСЬ RV

0,75 мкл RT PCR ENZ.

Перемешивают смесь на вортексе и сбрасывают капли кратковременным центрифугированием. Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации НК исследуемых и контрольных проб. Вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.

Используя наконечники с фильтром в подготовленные пробирки вносят:

а) в пробирку отрицательного контроля ПЦР (К-) 10 мкл РНК буфера;

б) в ряд пробирок для исследуемых проб - в каждую внести по 10 мкл НК соответствующей пробы;

в) в пробирку с положительным контролем ПЦР (К+) 10 мкл ПКО RV.

Проводят реакции ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией на приборах «Rotor-Gene Q», «ДТ-96» и «CFX96».

Помещают подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора и программируют прибор.

Синтез кДНК проводят при температуре 55°С в течение 15 мин, а затем терминируют реакцию 5-минутным прогреванием реакционной смеси при температуре 95°С. Далее следует стадия ПЦР.

Температурный режим для проведения ПЦР включает 40 циклов амплификации (95°С - 15 сек, 58°С - 30 сек, 72°С - 20 сек). Обе реакции проводятся в одной пробирке последовательно, без открывания пробирки и переноса материала.

Детекция продуктов амплификации осуществляется методом регистрации флуоресценции, накапливающейся в результате разрушения гибридизационного зонда, содержащего на 5'-конце флуорофор (FAM/Cy5), а на 3'-

конце - гаситель (BHQ1/BHQ2). В реакции используется два зонда одновременно, пара FAM -BHQ1 для мишени RV и пара Су5 - BHQ2 для MS2. В отсутствие мишени флуорофор и гаситель сближены и наблюдается лишь незначительная флуоресценция, так как гаситель поглощает испускаемое флуорофором излучение. В процессе ПЦР зонд гибридизуется на участок одной из нитей ампликона, при синтезе комплементарной нити ДНК Taq=полимераза приближается к флуорофору, что ведет к его разрушению за счет 5'-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы. В результате флуорофор отделяется от гасителя и его излучение может быть детектировано. Таким образом, увеличение количества синтезированного ПЦР-продукта приводит к росту сигнала флуоресценции.

В результате ПЦР получают данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала, которые анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в режиме «реального времени».

Учет результатов ОТ-ПЦР проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца.

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции НК в соответствии с таблицей 4.

Появление любого значения Ct в таблице результатов для отрицательного контроля этапа экстракции (ВК-) на канале FAM/Green и для отрицательного контроля этапа ПЦР (К-) на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа по всем пробам считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Анализ результатов амплификации для канала Cy5/Red (ВКО) по графику (рис 2) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образцы, для которых по каналу Cy5/Red значение Ct отсутствует или превышает 35 цикл (при этом по каналу FAM/ Green значение Ct также отсутствует) требуют повторного проведения исследования с этапа ПЦР. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов на канале Cy5/Red указывает на присутствие ингибиторов в пробах или на ошибки при постановке реакции ОТ-ПЦР. Требуется провести исследование, начиная с этапа экстракции НК.

Анализ результатов амплификации для канала FAM/Green (Ротавирус А) по графику (рис. 1) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образец считается положительным, РНК ротавируса А присутствует, т.к. наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (см. Табл. 4). Если для исследуемого образца по каналу FAM7 Green значение Ct определяется позднее 35 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей - он считается спорным и исследуется повторно с этапа выделения НК. Если при повторной постановке наблюдается схожий результат (наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green) - образец считается положительным.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 465.
25.08.2017
№217.015.c3a9

Способ раннего прогнозирования яичной продуктивности кур

Изобретение относится к области птицеводства, а именно к селекции кур-несушек. Осуществляют отбор каждые 10 дней с возраста 90 дней и до 120 дней кур-молодок по раннему проявлению пигментации радужной оболочки глаз. Производят пересадку кур в помещение для родительского стада. Обеспечивается...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002617302
Дата охранного документа: 24.04.2017
26.08.2017
№217.015.d4e6

Комбайн для приготовления гранул из навозной массы

Комбайн для получения гранул из навозной массы смонтирован из отдельных четырех модулей с индивидуальными приводами. Первый модуль для подачи навозной массы выполнен в виде наклонного элеватора с ковшами, верхний конец которого сообщен со вторым модулем для отжима жидкой фракции и размельчения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002622258
Дата охранного документа: 13.06.2017
26.08.2017
№217.015.e16e

Способ подготовки черенков винограда к посадке

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к виноградарству, и может быть использовано при выращивании виноградного посадочного материала. Осуществляют нарезку черенков, их замачивание в водной среде и покрытие антитранспирантом. За 3-4 дня до посадки черенки длиной 35-40 см в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002625590
Дата охранного документа: 17.07.2017
26.08.2017
№217.015.e172

Способ укоренения черенков винограда

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к виноградарству и может быть использовано при выращивании виноградного посадочного материала. Осуществляют нарезку черенков, их замачивание в водной среде, содержащей электрохимически активированную воду-католит. За 3-4 дня до посадки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002625591
Дата охранного документа: 17.07.2017
26.08.2017
№217.015.e180

Способ кормления цыплят-бройлеров

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству. Способ кормления цыплят-бройлеров включает введение в полнорационный комбикорм высокоэнергетической добавки, в качестве которой используют продукт переработки маслосодержащих отходов - жирнокислотный концентрат и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002625587
Дата охранного документа: 17.07.2017
26.08.2017
№217.015.e349

Машина полевая для заготовки и сбора зернового вороха

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Машина полевая для заготовки и сбора зернового вороха содержит энергосредство с передней и задней навесками. На переднюю навеску энергосредства навешаны жатка с мотовилом, режущим аппаратом и шнеком, роторное молотильно-сепарирующее...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626161
Дата охранного документа: 21.07.2017
26.08.2017
№217.015.e53b

Стабилизатор напряжения постоянного тока

Изобретение относится к электротехнике и предназначено для стабилизации напряжения источников постоянного тока. Для повышения надежности работы стабилизатора напряжения и возможности принудительного регулирования выходного напряжения в стабилизаторе напряжения постоянного тока, содержащем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626462
Дата охранного документа: 28.07.2017
26.08.2017
№217.015.e59b

Способ получения гидратированного вымороженного подсолнечного масла

Изобретение относится к масложировой промышленности и может быть использовано в переработке растительных масел. На первом этапе проводят анализ исходного прессового подсолнечного масла. В качестве гидратирующего агента вместо технической водопроводной воды применяют деминерализованный конденсат...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626751
Дата охранного документа: 31.07.2017
26.08.2017
№217.015.e5d1

Способ изготовления гидратированного вымороженного подсолнечного масла

Изобретение относится к масложировой промышленности. На первом этапе проводят анализ исходного прессового подсолнечного масла на содержание в нем фосфолипидов. В качестве гидратирующего агента применяют конденсат водяного пара 3-5% от массы масла в виде водного раствора хлорида натрия с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626743
Дата охранного документа: 31.07.2017
26.08.2017
№217.015.e5d6

Способ производства гидратированного вымороженного подсолнечного масла

Изобретение относится к масложировой промышленности и может быть использовано в переработке растительных масел. На первом этапе проводят анализ исходного прессового подсолнечного масла на содержание в нем фосфолипидов. В качестве гидратирующего агента вместо технической водопроводной воды...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626748
Дата охранного документа: 31.07.2017
Показаны записи 1-10 из 219.
27.10.2013
№216.012.79ec

Штамм бактериофага escherichia coli ecd4, обладающий литической активностью по отношению к бактериям escherichia coli серотипа о104:н4

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается штамма бактериофага Escherichia coli ECD4. Штамм бактериофага Escherichia coli ECD4 выделен из фекалий бройлерных кур на культуре бактерий штамма Escherichia coli О104:Н4 RKI№112027 и депонирован в Государственной коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496874
Дата охранного документа: 27.10.2013
20.11.2013
№216.012.8175

Способ профилактики колибактериоза цыплят

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к птицеводству. Перорально вводят вакцинный препарат с содержанием 1,0×10-3×10 микробных клеток штамма Е. coli «Б-5» в 1 см физиологического раствора, который вводят методом выпаивания при соотношении препарата к воде 1:15-25. При этом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002498817
Дата охранного документа: 20.11.2013
10.04.2014
№216.012.b04a

Адъювант

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой адъювант для инъекционных эмульсионных вакцин. Данный адъювант может быть использован в медицине. Адъювант включает эмульгатор в виде кремнийорганического соединения и масляную основу. Для вакцины типа «вода в масле» адъювант содержит...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510845
Дата охранного документа: 10.04.2014
10.06.2014
№216.012.cd34

Композиция антибактериальная, штамм бактериофага escherichia coli, используемый для получения такой композиции.

Изобретение относится к области пищевой промышленности, биотехнологии и касается композиции антибактериальной и штамма бактериофага Escherichia coli, используемого для получения такой композиции. Охарактеризованная композиция антибактериальная включает фильтрат фаголизата Escherichia coli,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518303
Дата охранного документа: 10.06.2014
10.07.2014
№216.012.dcfe

Способ кормления коров для повышения биологической полноценности и качества молока

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству, а именно к способу кормления коров. Способ кормления заключается в том, что в рацион животного дополнительно совместно вводят селеносодержащую добавку Сел-Плекс и цинксодержащую добавку - Биоплекс Цинк. При этом добавки вводят в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522352
Дата охранного документа: 10.07.2014
27.07.2014
№216.012.e5dc

Способ стимуляции роста птицы

Изобретение относится к области птицеводства и предназначено для стимуляции роста птицы. В качестве стимуляторов роста в качестве стимуляторов роста используют амиды формулы 1 пальмитиновой (n=14), стеариновой (n=16) кислот и амид олеиновой кислоты формулы 2 которые применяют в виде солей с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002524634
Дата охранного документа: 27.07.2014
20.10.2014
№216.012.feae

Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и вирусной геморрагической болезни кроликов

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для профилактики псевдомоноза и вирусной геморрагической болезни кроликов. Вакцина в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя псевдомоноза Pseudomonas aeruginosa и вируса геморрагической болезни...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002531054
Дата охранного документа: 20.10.2014
10.12.2014
№216.013.0e89

Способ лечения кокцидиоза птицы

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения птицы при кокцидиозе. В качестве активно действующего вещества применяют амиды 1 пальмитиновой кислоты (n=14), амиды 1 стеариновой кислоты (n=16) и амиды олеиновой кислоты в виде солей с минеральными или органическими...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002535138
Дата охранного документа: 10.12.2014
10.01.2015
№216.013.1a4a

Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарной медицине и касается способа изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота. Представленный способ включает: отбор патологического материала от больного и павшего крупного рогатого скота из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538158
Дата охранного документа: 10.01.2015
27.02.2015
№216.013.2ced

Способ микробиологического анализа воздуха

Изобретение относится к области микробиологического анализа воздуха. Предложен способ микробиологического анализа воздуха. Способ включает осаждение аэрозольных частиц и посев микроорганизмов, содержащихся в воздухе, на поверхность плотной основной питательной среды, термостатирование проб и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542969
Дата охранного документа: 27.02.2015
+ добавить свой РИД