СПОСОБ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ КОЛОНИЗАЦИОННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ МИКРОБИОЦЕНОЗА БИОТОПА ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА (ВАРИАНТЫ)

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике инфекционных болезней, и может быть использовано для оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза кишечника и других биотопов организма человека.

Изучению аспектов дисбактериоза различных биотопов в последнее время посвящено достаточно большое количество работ. Существуют различные методы оценки микробной экологии и колонизационной резистентности: бактериологические, гистохимические, морфологические, молекулярно-генетические, иммунохимические методы исследования микроорганизмов, комбинированные схемы исследования биоматериала, нагрузочные пробы и др.

Известен способ определения колонизационной резистентности экологической ниши тела человека (Патент РФ №2175673, МПК C12Q 1/04, опубл. 2001.11.10).

В известном способе осуществляют взятие исследуемого материала, посев его на селективные питательные среды, выделение чистых культур микроорганизмов и определение их видового и количественного состава. Далее выделенные штаммы автохтонной микрофлоры выращивают в жидкой питательной среде, обрабатывают хлороформом, отделяют супернатант и добавляют последний к взвеси патогенных и/или аллохтонных условно-патогенных микроорганизмов. Параллельно готовят контрольные пробы из взвесей патогенных и/или аллохтонных условно-патогенных микроорганизмов и жидкой питательной среды. Опытные и контрольные пробы инкубируют, затем добавляют во все пробы жидкую питательную среду, вновь инкубируют и замеряют оптические плотности опытных и контрольных проб. О колонизационной резистентности экологической ниши судят по изменению роста патогенных и/или аллохтонных условно-патогенных микроорганизмов в опытных пробах по сравнению с контрольными.

Недостатком известного способа является достаточно высокая трудоемкость, т.к. требуется посев, как опытных материалов, так и контрольных; отсутствует интегральная оценка полученных показателей, что не позволяет использовать и сравнивать данные, полученные в различных лабораториях и от различных пациентов.

Также известный способ не может быть использован в полном объеме в широкой клинической практике.

Наиболее распространенным методом диагностики состояния микробиоценоза (дисбактериоза) кишечника является рутинное микробиологическое исследование кала с определением качественного и количественного состава микрофлоры.

Известен способ диагностики дисбактериоза кишечника, включающий исследование фекалий, по результатам которого судят о наличии дисбактериоза. Исследование осуществляют прямым электрохимическим методом с помощью рН-метра и при значении рН более 6,8 диагностируют наличие 2-й, 3-й или 4-й стадии дисбактериоза. (Патент РФ №2324191, МПК G01N 33/84, опубл. 2008.05.10)

Известен способ диагностики дисбактериоза кишечника, заключающийся в том, определяют бета-литическую активность в копрофильтратах фотонефелометрическим методом у взрослых и детей старше трех месяцев жизни и по уровню активности с 5,1 до 10,0% диагностируют первую степень, с 10,1 до 17,0% - вторую, с 17,1 до 30,0% - третью и свыше 30,0% - четвертую степень дисбактериоза кишечника, причем у детей первых трех месяцев жизни диагностируют дисбактериоз по уровню бета-литической активности: первую степень с 17,1 до 30,0%, вторую степень с 30,1 до 44,0%, третью с 44,1 по 60,0% и четвертую - свыше 60,0% (Патент РФ №2069001, МПК G01N 33/52, опубл. 1996.11.10).

Недостатками известных способов является отсутствие комплексной оценки показателей изменения микрофлоры кишечника, позволяющей сравнивать колонизационную резистентность как у одного пациента в динамике, так и у разных пациентов. Также известные способы отличает лишь ориентировочная оценка состояния колонизационной резистентности, при этом известные способы дают лишь представление о просветной микрофлоре.

Известен способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в первом триместре по патенту РФ №2255339, G01N 33/48, G01N 33/569, опубл. 2005.06.27.

Сущность известного способа прогнозирования угрозы прерывания беременности в первом триместре заключается в том, что определяют коэффициенты соотношения содержания лактобацилл к условно-патогенной флоре в соскобах, взятых после удаления слизи с поверхности заднего свода влагалища и цервикального канала, и при их уменьшении не менее чем в 2 раза по отношению к норме делают вывод о риске прерывания беременности.

Недостатком известного способа является то, что он в должной мере не позволяет описывать все клинические нюансы и особенности нарушений микроценозов, не обладает достаточно высокой чувствительностью. Например, при нормальном или высоком уровне содержания лактобацилл во влагалище и цервикальном канале и высоких уровнях содержания условно-патогенной микрофлоры соотношение параметров будет в зоне нормальных показателей, что в должной мере не отражает состояние нарушения микробиоценоза данного биотопа. Помимо этого предложенное в известном способе соотношение не применимо для других биотопов организма человека, в частности для кишечника, где требуется учитывать гораздо больше микробиологических факторов колонизационной резистентности.

В качестве прототипа выбран способ определения колонизационной резистентности экологической ниши тела человека по патенту РФ №2175673 (МПК С12Q 1/04, опубл. 2001.11.10).

Таким образом, при анализе результатов исследований не всегда представляется возможным понять: улучшается или ухудшается состояние больного, особенно при неопределенности клинических данных и незначительных изменениях в анализах.

Поэтому наиболее оптимально осуществлять мониторинг и оценку изменений в системе микрофлоры, приведя множество отдельных параметров к единому интегральному оценочному показателю - индексу.

В месте с тем до настоящего времени отсутствует какой-либо оценочный интегральный показатель, характеризующий состояние микроценоза того или иного биотопа и позволяющий комплексно сопоставлять данные из разных источников.

Технической задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является повышение надежности, унифицированности и достоверности диагностики состояния колонизационной резистентности микробиоценоза исследуемого биотопа организма человека для обеспечения комплексной оценки данных анализов.

Поставленная техническая задача решается тем, что в способе оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза биотопа организма человека, заключающемся в том, что осуществляют забор исследуемого биологического материала из биотопа организма человека, проводят бактериологическое исследование биологического материала с определением качественного и количественного состава микроорганизмов, присутствующих в исследуемом биологическом материале, согласно предложенному изобретению, для оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза биотопа человека определяют индекс колонизационной резистентности из соотношения разности показателей микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, и показателей условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, ее снижающих, к показателям микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность:

где

lg(Fpkr+1) - логарифм суммарного количественного значения микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, в КОЕ/г,

lg(УПФ+1) - логарифм суммарного количественного значения условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, снижающих колонизационную резистентность в КОЕ/г,

и по значению индекса колонизационной резистентности оценивают состояние микробиоценоза биотопа организма человека и его колонизационную резистентность.

Кроме того, для оценки состояния микробиоценоза кишечника ребенка и его колонизационной резистентности осуществляют забор исследуемого биологического материала из кишечника человека у детей, и при значении индекса колонизационной резистентности, находящемся в пределах 0,81 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза кишечника ребенка и его колонизационную резистентность как норму; при значении индекса в интервале значений больше 0 и меньше 0,81 диагностируют превышение микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и оценивают состояние как благоприятное; при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание в кишечнике человека условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза кишечника человека.

Кроме того, для оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза влагалища осуществляют забор отделяемого из влагалища, и при значениях индекса колонизационной резистентности, находящихся в пределах от 0,85 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза влагалища и его колонизационную резистентность как норму; при значении индекса в интервале значений больше 0 и меньше 0,85 диагностируют превышение микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и оценивают состояние как благоприятное; при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание во влагалище человека условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза влагалища.

Кроме того, для оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза ротовой полости осуществляют забор исследуемого биологического материала из ротовой полости человека, и при значениях индекса колонизационной резистентности, находящихся в пределах от 0,50 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза ротовой полости человека и ее колонизационную резистентность как норму; при значении индекса, находящемся в интервале значений меньше 0, 50 и больше 0, диагностируют превышение микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и прогнозируют благоприятное течения процесса; при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание в ротовой полости человека условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза ротовой полости.

Кроме того, в заявляемом способе в качестве микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность биотопа, выбраны микроорганизмы из группы бифидобактерий, лактобактерий.

Техническим результатом, достижение которого обеспечивается всей предложенной совокупностью существенных признаков способа, является повышение надежности и достоверности диагностики состояния колонизационной резистентности микробиоценоза исследуемого биотопа организма человека, что позволяет обеспечить комплексную оценку полученных данных при проведении анализов.

Изобретение поясняется чертежами, где

на фиг.1 представлена структура дисбиотических нарушений у больных ОКИ после лечения, в %;

на фиг.2 представлена диаграмма изменения показателей микрофлоры кишечника у детей, больных ОКИ, после лечения, в %;

на фиг.3 представлена динамика индекса колонизационной резистентности у детей, больных ОКИ и находящихся на разном вскармливании.

Предложенный способ осуществляется следующим образом.

При исследовании осуществляют забор исследуемого биологического материала из соответствующего биотопа организма человека.

Далее проводят бактериологическое исследование биологического материала с определением качественного и количественного состава микроорганизмов, присутствующих в исследуемом биологическом материале, т.е подсчитывают число видов микроорганизмов, их количество в lg КОЕ/г.

Для оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза биотопа организма человека из соотношения разности показателей микроорганизмов (бифидобактерий, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, и показателей условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, ее снижающих, к показателям микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, определяют индекс колонизационной резистентности (ИКР), использую формулу:

где

lg(Fpkr+1) - логарифм суммарного количественного значения микроорганизмов, повышающих колонизационную резистентность, в КОЕ/г,

lg(УПФ+1) - логарифм суммарного количественного значения условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, снижающих колонизационную резистентность, в КОЕ/г,

При нулевом значении интегральных показателей, находящихся в знаменателе, вводят в сумму ∑ логарифмов дополнительную единицу таким образом, чтобы при нулевых значениях интегральных показателей микроорганизмов, влияющих на колонизационную резистентность, в соотношении и в числителе, и в знаменателе была бы единица. Это позволяет в должной мере оценивать колонизационную резистентность в широком диапазоне значений показателей микробиоценоза кишечника.

Статистическую обработку полученных данных выполняют при помощи блока стандартных программ MS Office.

По значению индекса колонизационной резистентности интегрально оценивают состояние микорбиоценоза исследуемого биотопа человека и его колонизационную резистентность, осуществляют мониторинг изменений в системе микрофлоры и оценивают динамику основных показателей состояния микрофлоры исследуемого биотопа путем повторных микробиологических исследований и определения динамики изменения ИКР.

При проведении исследований и оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза различных биотопов организма человека учитываются показатели микроорганизмы (бифидобактерии, лактобациллы), повышающие колонизационную резистентность, и показатели условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, снижающих колонизационную резистентность, характерные для исследуемого биотопа организма человека.

В частности, при проведении исследований и оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза кишечника по предложенному способу приведенное выше соотношение (1) приобретает вид:

где

lg В - логарифм количественного значения количества бифидобактерии в КОЕ/г,

lg L - логарифм количественного значения лактобактерий в КОЕ/г,

lg Ech - логарифм количественного значения нормальных E.coli,

lg УПФ - логарифм суммарного количественного значения условно-патогенной флоры (грибы рода Candida).

При этом по значению индекса колонизационной резистентности, находящемуся в пределах от 0,81 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза кишечника организма человека и его колонизационную резистентность как норму, при значении индекса в интервале значений больше 0 и меньше 0,81 диагностируют превышение микроорганизмов (бифидобактерий, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и прогнозируют благоприятное течения процесса, при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание в кишечнике условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза кишечника человека.

При проведении исследований и оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза влагалища по предложенному способу приведенное выше соотношение (1) приобретает вид:

где

lg В - логарифм количественного значения количества бифидобактерий в КОЕ/г,

lg L - логарифм количественного значения лактобактерий в КОЕ/г,

lg Str - логарифм количественного значения нормальных стрептококков,

lg УПФ - логарифм суммарного количественного значения условно-патогенной флоры (фузобактерии, грибы рода Candida и др.).

В пределах от 0,85 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза влагалища человека и его колонизационную резистентность как норму, при значении индекса в интервале значений меньше 0, 85 и больше 0 диагностируют превышение микроорганизмов (бифидобактерий, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и прогнозируют благоприятное течения процесса, при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание во влагалище человека условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза влагалища.

При проведении исследований и оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза ротовой полости по предложенному способу приведенное выше соотношение (1) приобретает вид:

где

lg Str - логарифм количественного значения нормальных стрептококков в КОЕ/г,

lg St - логарифм количественного значения нормальных стафилококков в КОЕ/г,

lg Ech - логарифм количественного значения нормальных E.coli,

lg УПФ - логарифм суммарного количественного значения условно-патогенной флоры.

В пределах от 0,50 до 1,0, оценивают состояние микробиоценоза ротовой полости человека и ее колонизационную резистентность как норму, при значении индекса в интервале значений меньше 0, 50 и больше 0 диагностируют превышение микроорганизмов (бифидобактерий, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, ее снижающими, и прогнозируют благоприятное течения процесса, при отрицательных значениях индекса диагностируют преобладание в ротовой полости человека условно-патогенных и патогенных микроорганизмов и прогнозируют понижение колонизационной резистентности микробиоценоза ротовой полости.

Примеры конкретного выполнения способа

Пример 1

Больная Дарья М:, 6 мес. Диагноз: атопический дерматит.

Ребенок от первой беременности, первых срочных родов, находится на искусственном вскармливании с рождения. С возраста 1 месяца отмечается сухость кожных покровов лица, рук, голеней, позднее присоединилось покраснение, шелушение и зуд кожи лица. С рождения отмечается неустойчивый стул, со слизью. Находится на диспансерном наблюдении у аллерголога. При исследовании кала на дисбактериоз получены следующие результаты: бифидобактерии 10⁷ КОЕ/г, лактобациллы 10⁶ КОЕ/г, E.coli с нормальными ферментными свойствами 10³ КОЕ/г, энтерококки 10⁸ КОЕ/г.

Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило 0,5, что является ниже нормы, но т.к. этот показатель находится в зоне положительных значений, можно сказать, что микроорганизмы (бифидобактерии, лактобациллы), повышающие колонизационную резистентность, преобладают над условно-патогенными и патогенными микроорганизмами (в данном случае энтерококки), ее снижающими. Таким образом, в плане терапии был сделан акцент на повышение колонизационной резистентности кишечника за счет стимуляции роста бифидобактерии, лактобацилл с помощью пребиотиков.

После окончания курса лечения состояние ребенка улучшилось. Отмечалось улучшение характера стула, он стал регулярным, без патологических примесей. Было проведено контрольное исследование состояния микроценоза кишечника. Получены следующие результаты: бифидобактерии 10⁹ КОЕ/г, лактобациллы 10⁶ КОЕ/г, E.coli с нормальными ферментными свойствами 10⁴ КОЕ/г, энтерококки 10³ КОЕ/г. Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило 0,84, что является нормальным показателем.

Вывод. Использование интегрального показателя индекса колонизационной резистентности позволило у данного пациента оценить степень изменения состояния микрофлоры кишечника, выбрать тактику терапии и провести анализ изменения состояния колонизационной резистентности кишечника в динамике.

Пример 2

Ребенок Петр О., 1 год 2 месяца. Заболел остро с появления многократной рвоты, частого (до 7-8 раз в сутки) жидкого стула, повышения температуры до 38,8°С. Ребенок проходил лечение в стационаре с диагнозом: острый инфекционный гастроэнтерит, среднетяжелая форма. В стадии ранней реконвалесценции сохранялась дисфункция кишечника до 14 дня болезни, проявлявшаяся неустойчивым стулом. При исследовании микроценоза кала в стадии ранней реконвалесценции после перенесенной острой кишечной инфекции получены следующие результаты: бифидобактерии 10⁴ КОЕ/г, лактобациллы не выявлены, Е.coli с нормальными ферментными свойствами 10³ КОЕ/г, энтерококки 10⁸ КОЕ/г, клебсиелла 10⁵ КОЕ/г, грибы рода Candida 10⁷ КОЕ/г.

Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило отрицательное значение -0,62, что является ниже нормы. Так как этот показатель меньше нуля, можно сказать, что показатели микроорганизмов (бифидобактерии, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, значительно меньше показателей условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, а в данном случае это энтерококки, клебсиелла, грибы рода Candida, ее снижающих. Таким образом, в плане терапии был сделан акцент на коррекцию количества условно-патогенной микрофлоры с помощью бактериофагов и на повышение колонизационной резистентности кишечника за счет заместительной терапии пробиотиками (препараты бифидобактерии, лактобацилл и др. компонентов нормальной микрофлоры кишечника).

После окончания курса лечения состояние ребенка улучшилось. Отмечалось улучшение характера стула, он стал регулярным, без патологических примесей. Было проведено контрольное исследование состояния микроценоза кишечника. Получены следующие результаты: бифидобактерии 10⁸ КОЕ/г, лактобациллы 10⁷ КОЕ/г, E.coli с нормальными ферментными свойствами 10⁴ КОЕ/г, клебсиелла 10³ КОЕ/г. Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило 0,84, что является нормальным показателем.

Вывод. Использование интегрального показателя индекса колонизационной резистентности позволило у пациента, перенесшего острую кишечную инфекцию, оценить степень изменения состояния микрофлоры кишечника, выбрать тактику терапии и провести анализ изменения состояния колонизационной резистентности кишечника в динамике.

Пример 3

Использование индекса колонизационной резистентности в клинических исследованиях

С целью изучения эффективности использования индекса колонизационной резистентности в клинических условиях было проведено исследование у детей первого года жизни, находящихся на искусственном вскармливании и больных с «инвазивными» ОКИ, средне-тяжелой формы, поступивших в стационар в ранние сроки от начала заболевания. В первой группе (20 человек) дети получали адаптированную молочную смесь с пробиотиком, во второй группе (15 детей) - молочную адаптированную смесь, не содержащую пробиотик.

Группы были сопоставимы по возрасту и полу больных, по отягощенности преморбидного фона, этиологической структуре острых кишечных инфекций. У всех детей проводилось изучение состояния микрофлоры желудочно-кишечного тракта в остром периоде ОКИ и в периоде реконвалесценции.

Анализ полученных данных показал, что в группе детей, больных ОКИ и получавших молочную смесь с пробиотиком, наблюдались наиболее благоприятные показатели микрофлоры желудочно-кишечного тракта в периоде реконвалесценции.

На фиг.1 представлена структура дисбиотических изменений у больных, находящихся на разном вскармливании.

Как видно из диаграммы на фиг.1, в группе детей, получавших смесь с пробиотиком, более половины детей в стадии реконвалесценции имели нормальные показатели микрофлоры. Изменения микрофлоры I, II, III степени больше наблюдались у детей, получавших смесь, не содержащую пробиотик. Данная диаграмма отражает только распределение детей по степеням нарушения микроценоза кишечника и только косвенно отражает состояние колонизационной резистетности.

Изменение показателей микрофлоры кишечника у детей, больных ОКИ после лечения, представлены на фиг.2.

Как видно из диаграммы на фиг.2, в группе детей, получавших смесь с пробиотиком, по основным показателям нормальной микрофлоры (Bifidobacterium, Lactobacillis) желудочно-кишечного тракта в периоде реконвалесценции изменений выявлено не было, а в группе сравнения отмечались изменения у 20% и 10% детей соответственно. Доля детей с изменениями в качественном и количественном составе E.coli в исследуемых группах составила 15% и между группами не отличалась. Достоверные отличия между группами были получены в проценте детей, в анализах кала которых присутствовали грибы рода Candida: у детей, в питании которых присутствовал пробиотик, грибы отсутствовали, в группе сравнения - у 40% детей эти микроорганизмы выявлялись в титрах более 10⁵ КОЕ/мг.

Однако полученные данные не позволяют достоверно оценить колонизационную резистетность кишечника у наблюдаемых пациентов. Поэтому был проведен расчет индекса колонизационной резистентности, который позволил провести интегральную оценку изменений микрофлоры желудочно-кишечного тракта в сравниваемых группах (фиг.3).

Как видно из диаграммы на фиг.3, было получено достоверное повышение индекса колонизационной резистентности в группе детей, получавших смесь с пробиотиком (p<0,001), после лечения по сравнению с начальным уровнем. В группе сравнения достоверных отличий между показателями индекса колонизационной резистентности до и после лечения получено не было. А при сравнении этого показателя между исследуемыми группами в стадии реконвалесценции были получены достоверные отличия - р<0,05.

Таким образом, предложенный способ оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза различных биотопов организма человека позволяет комплексно оценивать состояние микроценоза и поможет врачам унифицировать прочтение результатов анализов на дисбактериоз.

Применение предложенного способа оценки состояния колонизационной резистентности микробиоценоза возможно и в диагностике дисбактериозов других биотопов организма человека, в частности половых органов, что является актуальной проблемой гинекологии.

Пример 4

Больная П., возраст 22 года. Обратилась с жалобами на выделения из половых путей. При осмотре: слизистая влагалища гиперемирована, выделения обильные, белые без запаха. При обследовании исключены инфекции, передаваемые половым путем.

Для оценки состояния микробиоценоза влагалища у пациентки произведен забор отделяемого из влагалища и проведен анализ полученного материала на питательные среды с определением количества лактобацилл, условно-патогенной факультативно-анаэробной и облигатно-анаэробной микрофлоры (приказ Минздрава СССР от 22.04.85 №535 об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений).

Были получены следующие результаты: отсутствие в отделяемом лактобацилл, бифидобактерии 10³ КОЕ/г, 10⁶ КОЕ/г фузобактерии (норма менее 10³ КОЕ/г), 10⁵ КОЕ/г стафилококки (норма менее 10⁴ КОЕ/г).

Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило отрицательное значение -2,67, что является ниже нормы. Так как этот показатель меньше нуля, можно сказать, что показатели микроорганизмов (бифидобактерий, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, значительно меньше показателей условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, ее снижающих, а в данном случае это фузобактерии и стафилококки.

Таким образом, в плане терапии было необходимо провести коррекцию количества условно-патогенной микрофлоры, а повышение колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища возможно за счет заместительной терапии пробиотиками (препараты бифидобактерий, лактобацилл).

Пациентке был выставлен диагноз: бактериальный вагинит.

После проведенного курса лечения клинические признаки заболевания разрешились.

Произведена повторная оценка состояния микробиоценоза влагалища у пациентки: в отделяемом высевались лактобациллы в количестве 10⁸ КОЕ/г; бифидобактерий 10⁶ КОЕ/г, 10² КОЕ/г фузобактерии (норма менее 10³ КОЕ/г), стафилококки выявлены не были.

Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило отрицательное значение 0,86, что является нормальным показателем.

Таким образом, использование предложенного способа оценки колонизационной резистентности различных биотопов организма человека применимо к клинической практике в диагностике и лечении дисбактериозов половых органов у женщин.

Пример 5

Больная М.Е., 67 лет. Диагноз: хронический панкреатит, синдром раздраженного кишечника.

Пациентка обратилась с жалобами на периодические боли в животе, локализующиеся в верхней части живота и левой подвздошной области, тошноту, отмечается неустойчивый жирный стул, со слизью. Жалобы появляются в основном после нарушения диеты. Находится на диспансерном наблюдении у гастроэнтеролога с диагнозом: хронический панкреатит. При исследовании кала на дисбактериоз получены следующие результаты: бифидобактерии 10³ КОЕ/г, лактобациллы 10⁴ KOE/г, энтерококки 10⁸ KOE/г, грибы рода Candida 10⁵ КОЕ/г. Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило -0,86, что является ниже нормы. Таким образом, в плане терапии был сделан акцент на повышение колонизационной резистентности кишечника за счет стимуляции роста бифидобактерий, лактобацилл с помощью пробиотический препаратов. Лечение проводилось на фоне стандартной базисной терапии хронического панкреатита и диетической коррекции.

Через 2 месяца после начала курса лечения состояние пациента улучшилось. Отмечалось улучшение характера стула, патологических примесей не отмечалось. Было проведено контрольное исследование состояния микроценоза кишечника. Получены следующие результаты: бифидобактерии 10⁶ КОЕ/г, лактобациллы 10⁷ КОЕ/г, энтерококки 10⁶ КОЕ/г.

Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило 0,54, что является показателем ниже нормальных значений, но так как этот показатель находится в зоне положительных значений, можно сказать, что показатели микроорганизмов (бифидобактерии, лактобацилл), повышающих колонизационную резистентность, преобладают над показателями условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, а в данном случае это энтерококки, ее снижающих. По сравнению с показателем состояния колонизационной резистентности до начала терапии отмечается выраженная положительная динамика.

Вывод. Использование интегрального показателя индекса колонизационной резистентности позволяет у пациентов с хронической гастроэнтерологической патологией оценить степень изменения состояния микрофлоры кишечника, выбрать тактику терапии и контролировать состояние колонизационной резистентности кишечника в динамике.

Пример 6

Девочка Настя М., возраст 2 года 3 месяца. Было обращение с жалобами на покраснение в области промежности. Из анамнеза: ребенок в течение 10 дней находилась на стационарном лечении с диагнозом: ротавирусная инфекция, среднетяжелая форма. При осмотре: слизистая влагалища гиперемирована, выделения водянистые, не обильные, без запаха. На коже промежности отмечаются выраженные опрелости.

Для оценки состояния микробиоценоза влагалища у девочки произведен забор отделяемого из преддверия влагалища и проведен анализ полученного материала на питательные среды с определением количества лактобацилл, условно-патогенной факультативно-анаэробной и облигатно-анаэробной микрофлоры (приказ Минздрава СССР от 22.04.85 №535 об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений).

Были получены следующие результаты: бифидобактерии 10³ КОЕ/г - 10⁴ КОЕ/г, фузобактерии (норма менее 10³ КОЕ/г) 10³ КОЕ/г, грибы рода Candida 10⁵ КОЕ/г. Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило отрицательное значение -1,67, что является ниже нормы. Таким образом, в плане терапии был необходимо провести коррекцию количества условно-патогенной микрофлоры (грибы рода Candida), а повышение колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища возможно за счет заместительной терапии пробиотиками (препараты бифидобактерии, лактобацилл).

Девочке поставлен клинический диагноз: вульвовагинит. Проведен курс базисной терапии в сочетании с пробиотиками.

При повторном осмотре после окончания курса терапии - жалоб нет, гиперемии и выделений из вульвы нет.

Произведена повторная оценка состояния микробиоценоза влагалища у пациентки: в отделяемом высевались лактобациллы в количестве 10⁷ КОЕ/г; бифидобактерии 10⁶ КОЕ/г, 10² КОЕ/г фузобактерии (норма менее 10³ КОЕ/г), грибы рода Candida не были обнаружены. Был проведен расчет индекса колонизационной резистентности. Значение показателя составило отрицательное значение 0,85, что является нормальным показателем.

Таким образом, использование предложенного способа оценки колонизационной резистентности различных биотопов организма человека применимо для ранней диагностики и лечения дисбактериозов (в частности, после перенесенных инфекционных заболеваний) наружных половых органов у детей.