Результат интеллектуальной деятельности: ШТАММ БАКТЕРИЙ ACHROMOBACTER SPECIENS

Известны микроорганизмы, синтезирующие витамин В₁₂ в присутствии 5-6-диметилбензимидазола - дорогостоящего предшественника витамина B₁₂. При введении этого вещества микроорганизмы продуцируют до 20-25% других форм витамина В₁₂ (кроме кобаламина).

Предлагаемый штамм бактерий Achromobacter speciens синтезирует только истинный витамин В₁₂ кобаламин - без добавления в среду предшественника. Выделен этот штамм из почвы. Он характеризуется следующими физиологическими свойствами. Аэроб. Полный денитрификатор. Грамотрицательный. Авто-троф. Не нуждается в аминокислотах и витаминах. Хорошо растет на сахаро-минеральной среде. В качестве источников углерода используют сахарозу, мальтозу, лактозу, галактозу, глюкозу, маннит. Крахмал ферментирует. Соли лимонной кислоты угнетают рост. Источниками азотного питания являются: пептон, аминный азот, мочевина. Не использует аммонийных солей. Синтезирует витамины B₁, В₂ и В₁₂, биотин, никотиновую кислоту. Источник фосфора-ортофосфаты.

Морфологические свойства. Капсульная, бесспоровая палочка. Подвижный. Жгутики расположены по всему телу. Величина клеток колеблется от 1×0,5 мк до 1,4×0,7 мк.

Штамм на сахаро-минеральной среде образует обильную слизь. На косяке блестящий гладкий, слизистый штрих. На чашках Петри круглые, гладкие колонии с ровными краями, колонии имеют ярко выраженные концентрические круги.

На мясо-пептонном агаре (при посеве большим количеством клеток на косяке) образует слизистый, иногда складчатый штрих. На чашках Петри при посеве разведением не растет, при посеве кляксой образует круглые колонии небольшого размера с гладкими краями.

На мясо-пептонном бульоне дает легкую тонущую пленку; на картофеле - обильную слизь, блестящий, гладкий штрих. Молоко не свертывает, не пептонизирует. Желатину не разжижает. На желатиновом косяке при посеве большим количеством клеток наблюдается слабый рост через 6-7 суток. На чашках Петри при посеве разведением роста нет.

Для биосинтеза витамина В₁₂ используют следующие среды.

I. Сахаро-минеральная среда следующего состава:

При культивировании на вышеприведенной среде о условиях аэрации (на качалке при 250 об/мин) описываемый штамм образует через 72 час ферментации на 1 л среды 6-7 г биомассы и 200-250 γ-истинного витамина B₁₂.

II. Сахаро-минеральная среда того же состава с прибавлением 5%-ного дрожжевого автолизата.

При культивировании на сахаро-минеральной среде с прибавлением 5%-ного дрожжевого автолизата в условиях аэрации на качалке при 250 об/мин штамм образует через 60 час на 1 л среды 8 г биомассы и 1000-1100 γ-истинного витамина В₁₂.

III. Мелассо-минеральная среда, в которую входят следующие компоненты:

При культивировании на мелассо-минеральной среде в условиях аэрации на качалке при 250 об/мин штамм образует через 36 час на 1 л среды 6-7 г биомассы и 1700-2000 γ-кобаламина.