Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛЬБУМИНА

Известны способы получения альбумина из плацентарной крови человека, отхода производства гамма-глобулина путем двукратного фракционирования этанолом и пастеризации.

В предлагаемом способе, в отличие от известных, к исходному продукту перед фракционированием добавляют ацетатный буфер до рН 4,6-4,8, затем понижают температуру смеси до -8-10°С, оставляют на 10-12 час и центрифугируют. Полученный осадок растворяют в дистиллированной воде, добавляют каприлат натрия, выдерживают смесь около 10 час при рН 4,6-4,8, центрифугируют, отбрасывают полученный осадок и доводят рН надосадочной жидкости до 6,8-7,0. Способ позволяет повысить качество альбумина.

Для освобождения препарата от вируса гепатита пастеризацию проводят перед стадией фракционирования этанолом.

Для получения альбумина по предлагаемому способу к центрифугату плацентарной сыворотки, содержащему 26% этанола, при температуре -5-6°С добавляют ацетатный буферный раствор до рН 4,6-4,8, охлаждают до -10°С, перемешивают и оставляют на 12-18 час. Осадок отделяют центрифугированием, а надосадочную жидкость перегоняют для регенерации этанола.

Затем осадок суспендируют в дистиллированной воде до содержании белка 1,5-1,8%, добавляют каприлат натрия до концентрации 0,18%, вновь устанавливают рН 4,6-4,8, перемешивают 3 час и оставляют на ночь при 0-4°С. Полученный осадок центрифугируют и отбрасывают.

Надосадочную жидкость фильтруют до полной прозрачности, прогревают 10 час при 60°С, предварительно установив рН до 6,8±0,2 и охлаждают до 0°С. K жидкости добавляют охлажденный до -15°С этанол до концентрации 18%, перемешивают 3 час, доводят рН до 5,7-5,8 и вновь добавляют охлажденный этанол до концентрации 40%. Смесь перемешивают 6 час и оставляют на ночь при - 4-5°С. Балластные белки отделяют центрифугированием, а надосадочную жидкость фильтруют до полной прозрачности.

В фильтрате при температуре - 4-5°С устанавливают рН 4,8-5,2 и ионную силу 0,1 и оставляют на 12-16 час при - 10°. Осадок альбумина отделяют центрифугированием и -суспендируют в дистиллированной воде, содержащей 10% этанола при рН 4,5-4,9. Раствор фильтруют через стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и лиофилизируют.

Сухой порошок альбумина вновь растворяют в дистиллированной воде до содержания белка 20%, фильтруют через стерилизующие фильтры и расфасовывают во флаконы емкостью 50 и 100 мл.

Проведение инактивации вируса гепатита перед фракционированием этанолом позволяет получать устойчивый 20%-ный раствор альбумина без использования стабилизаторов.