×
09.06.2019
219.017.79f2

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕКТИВНОЙ БЕЛОКСОДЕРЖАЩЕЙ ФРАКЦИИ БАКТЕРИЙ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к вакцинным препаратам, и касается способа получения протективных антигенов на основе секретируемых белоксодержащих фракций бактерий. Способ включает культивирование бактерий на жидких питательных средах, отделение культуральной среды от бактерий, ее очистку и концентрацию методом ультрафильтрации с порогом отсечения белка 30 кДа и колоночной хроматографии с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-75, последующей очистке на ДЕАЕ-сефарозе в градиенте NaCl до получения фракций с молекулярной массой 30-50 кДа и содержанием белка 4-5 мг/мл. Способ позволяет получать профилактические и лечебные иммунопрепараты. 1 з.п. ф-лы, 8 табл., 2 ил.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицине, а именно к вакцинным препаратам, и касается способа получения протективных антигенов на основе секретируемых белоксодержащих фракций бактерий, которые могут быть использованы для получения профилактических и лечебных иммунопрепаратов.

Проблема бактериальных инфекций на протяжении многих лет является одной из наиболее важных проблем медицинской науки и здравоохранения. Для профилактики этих заболеваний кроме анатоксинов используют большое количество вакцин, конструируемых на основе антигенов микробной клетки. Эти вакцины характеризуются различной степенью протективной активности и строгой серотиповой специфичностью.

Известен способ получения протективных профилактических препаратов (анатоксины), состоящих из белоксодержащих фракций (токсинов), секретируемых токсинобразующими бактериями; дальнейшая обработка культуральной среды, содержащей токсин производится путем обезвреживания токсина формалином, концентрации и очистки от балластных веществ.

(Анатоксины. Руководство по вакцинному и сывороточному делу под ред. П.Н.Бургасова, 1978, с.103-157.)

Недостатком этого метода является невозможность получения протективных секретируемых препаратов при использовании нетоксигенных штаммов бактерий.

Техническим результатом, на решение которого направлено данное изобретение, является создание универсального способа получения бактериальных антигенов из любых видов бактерий на основе секретируемых белоксодержащих фракций различных видов бактерий, характеризующихся высокой внутривидовой перекрестной протективной активностью.

Для достижения указанного технического результата в способе получения протективной белоксодержащей фракции бактерий, включающем культивирование бактерий на жидких питательных средах, отделение культуральной среды от бактерий, согласно изобретению культуральную среду, содержащую секретируемые белоксодержащие фракции, подвергают очистке и концентрируют методом ультрафильтрации с порогом отсечения белка 30 кДа и колоночной хроматографии с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-75 и последующей очистке на ДЕАЕ-сефарозе в градиенте NaCl до получения фракций с молекулярной массой 30-50 кДа и содержанием белка 4-5 мг/мл.

Для получения протективных антигенов на основе секретируемых белоксодержащих фракций используют нетоксигенные штаммы грамотрицательных или грамположительных микроорганизмов.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.

Пример 1. Способ получения протективных секретируемых белоксодержащих антигенов клебсиеллы К2, предусматривающий следующие стадии:

а) культивирование клебсиеллы К2 на жидкой полусинтетической питательной среде.

б) инактивация микробной массы;

в) отделение надосадочной жидкости, центрифугирование;

г) концентрирование и очистка надосадочной жидкости методом колоночной хроматографии;

д) фракционирование по молекулярной массе с помощью ультрафильтрации с порогом отсечения белка 30 кДа.

Штамм K.pneumoniae K2 (В5055) из Эталонной международной коллекции клебсиелл, находящийся в лиофилизированном состоянии в ампулах, засевают в 50 мл 0,2% сахарного бульона на 4 часа, затем на жидкую полусинтетическую среду следующего состава:

КН2РО4 - 4,50 г/л

К2НРО4 - 5,00 г/л

(NH4)2SO4-1,00 г/л

MgSO4×7Н2О - 0,30 г/л

Цитрат натрия - 0,50 г/л

Глюкоза - 10 г/л

Аминопептид -103,0 мл

Культивирование штаммов K.pneumoniae проводят в ферментере, например, фирмы "Анкум" при непрерывном перемешивании и подаче воздуха в объеме 10 л при рН 7,8 t=37°C в течение 5-6 часов. Концентрация микроорганизмов составляет (8,0±1,0)·109 микробных клеток/ мл. Микробную суспензию инактивируют азидом натрия. Полноту инактивации микробных клеток контролируют путем высева на питательный агар. Над осадочную жидкость отделяют от микробных клеток центрифугированием при 6 000 g в течение 30 минут при температуре 4°С, как и все последующие процедуры. К полученному супернатанту прибавляют сульфат аммония до 80% насыщения по методу N. Koide et al. Осадок отделяют центрифугированием при 10 000 g в течение 30 минут, растворяют в 50 мл фосфатного буфера рН 7,4, проводят ультрафильтрацию с порогом отсечения белка 30 кДа и фракционируют с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-75 (Pharmacia, Швеция). Последующую очистку белоксодержащей фракции проводят на DEAE-сефарозе в градиенте NaCl (от 0 до 50 М NaCl) до получения фракций с мол. массой 30-50 кДа и содержанием белка 4-5 мг/мл.

Принадлежность полученных фракций к белоксодержащим соединениям определяли методом иммуноблоттинга. После электрофоретического разделения исследуемой фракции по молекулярной массе к ним прибавляли гипериммунную сыворотку мышей, иммунизированных препаратом на основе указанной фракции (первичные антитела), а затем прибавляли меченые антитела к иммуноглобулинам мыши (вторичные антитела). Полосы преципитации при тестировании фракций, содержащих иммунологически активные соединения, выявляли в области 35-40 кДа (фиг.1).

Принадлежность исследуемых фракций к секретируемым белкам K.pneumoniae определяли методом проточной цитофлуориметрии. Метод основан на обработке микробных клеток 0,5% параформом в 0,9% фосфатно-солевом буфере (ФСБ) и рекомендован для фиксации бактериальных клеток или клеток млекопитающих при работе на проточном цитофлуориметре. Перед постановкой реакции микробные клетки трижды отмывали центрифугированием при 800 g в ФСБ без параформа. Отмытые клетки переносили в объеме 200 мкл в специальные пробирки (по 50·103 клеток на пробирку) и добавляли 10, 50 или 100 мкл сыворотки (первичные антитела), полученной после гипериммунизации мышей исследуемыми белковыми фракциями. В контрольные пробирки прибавляли соответствующее количество ФСБ буфера или сыворотки крови интактных мышей (отрицательный контроль). В качестве положительного контроля использовали сыворотки крови мышей, выживших после инфицирования штаммом K.pneumoniae K2. Пробы инкубировали 1 час при 37°С. После этого в каждую пробирку прибавляли по 3 мл изотонического раствора хлорида натрия и трижды отмывали от сыворотки центрифугированием при 800 g. Затем клетки ресуспендировали в 200 мкл ФСБ и вносили вторичные FITC меченые кроличьи антитела против иммуноглобулинов мыши (Caltag Labs, США). Пробирки снова инкубировали 30 мин при 37°С. Результаты учитывали на проточном цитофлуориметре FacsCalibur (фирмы Becton Dickinson, США). Измеряли уровень флуоресценции, выделенной в гейте популяции микробных клеток в канале FL-1H. Среднегеометрическую интенсивность флуоресценции клеток (Gm) рассчитывали с помощью общепринятой программы для обработки данных проточного цитофлуориметра WinMdi 2.8 и выражали в условных единицах (у.е.).

На фиг.2А показан дот-плот микробных клеток К. pneumoniae. Видно, что выделенная популяция микробных клеток представляет собой однородную клеточную популяцию, формирующую четкое "облако". Факт выделения такой однородной популяции позволяет считать, что использованный метод выделения микробных клеток не вызывает их разрушения или слипания и, следовательно, клеточная популяция пригодна для анализа. На фиг.2Б показана гистограмма свечения исходной популяции микробных клеток в канале FL-1H. Видно, что исходно популяция микробных клеток обладала низким уровнем флуоресценции в присутствии вторичных FITC-меченых антител. Прибавление гипериммунной сыворотки, содержащей антитела к секретируемым белоксодержащим фракциям с молекулярной массой 30-50 кДа в присутствии вторичных FITC-меченых антител, также не приводило к увеличению флуоресценции микробных клеток (рис.2В). Это указывает на отсутствие связывания этих антител с препаратом микробных клеток. Такие же результаты получены для белковой фракции с молекулярной массой 21 кДа. В то же время, добавление сыворотки крови переболевших животных, содержащей антитела к антигенам микробной клетки сопровождалось усилением флуоресценции в присутствии вторичных FITC-меченых антител (средний уровень флуоресценции Gm возрос с 3 до 150 у.е.) (фиг.2Г).

Содержание белка составляет 4-5 мг/мл.

Определение антигенной и иммуногенной активности полученных белоксодержащих фракций. Для иммунизации животных белоксодержащие фракции штамма К2 предварительно сорбируют на гидроокиси алюминия. Для оценки протективной активности полученных фракций иммунизацию мышей проводят 2-кратно с интервалом 2 недели. Сыворотку крови от иммунизированных животных для изучения антигенной активности, превентивных свойств и других тестов получают через 14 суток после последней иммунизации.

Для изучения протективной активности белоксодержащих фракций, сорбированных на гидроокиси алюминия, мышей иммунизировали двумя 10-кратно убывающими дозами препаратов и заражали штаммом К. pneumoniae K2 в дозе 500 микробных клеток, что соответствовало 178 LD50 (табл.1, 2). Контроль заражающей дозы проводили на интактных животных. Белоксодержащая фракция с молекулярной массой 21 кДа оказалась малоиммуногенной. Белоксодержащая фракция с молекулярной массой 34-35 кДа характеризовалась высокой протективной активностью, которая имела дозозависимый характер. Защита от заражения при иммунизации иммунизирующей дозой (10 мкл) составляла 70%.

Белоксодержащие фракции с молекулярной массой 30-50 кДа с содержанием белка 4-5 мг/мл, полученные из штамма К16 и нетипируемого 204, обладали внутривидовой перекрестной протективной активностью при заражении штаммом К2 (табл.2, группы 3,4). В свою очередь, препарат из штамма К2 защищал мышей от заражения штаммами К16 и 204 (табл.3).

Белоксодержащая фракция К. pneumoniae K2 с молекулярной массой 30-50 кДа в гомологичной системе обладала протективной активностью без адъюванта (табл.4). В качестве референс-препарата использовали поликомпонентную бактериальную вакцину Иммуновак-ВП-4, состоящую из антигенов микробных клеток Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Escherichia coli и Staphylococcus aureus, содержащую в своем составе в качестве основного компонента ЛПС, ассоциированный с белком наружной мембраны грамотрицательных микроорганизмов, пептидогликан, тейхоевые кислоты и лабильные белковые антигены S. aureus. Препараты вводили по единой схеме.

Протективная активность белоксодержащей фракции 30-50 кДа была выше, чем Иммуновак-ВП-4 (содержит с своем составе антигены микробной клетки гетерологичного штамма K.pneumoniae 204, обладающего межвидовой перекрестной протективной активностью).

Методом твердофазного ИФА установлено, что при иммунизации мышей фракцией 21 кДа не происходит увеличение уровня антител или они обладают низкой аффинностью (табл.5). При иммунизации мышей фракцией 30-50 кДа выявлено повышение уровня антител, зависящее от величины иммунизирующей дозы. Перекрестной антигенной активности между исследуемыми фракциями выявлено не было, что свидетельствует о хорошей степени очистки исследуемых препаратов.

Гипериммунная сыворотка, полученная после 4-кратной вакцинации мышей белоксодержащей фракцией 30-50 кДа в дозе 50 мкл, введенная мышам через 2 часа, 1 сутки и 2 суток после заражения, защищала их от летальной клебсиеллезной инфекции, вызванной K.pneumoniae K2. Сыворотка, полученная при иммунизации мышей фракцией 21 кДа была неэффективной (табл.6).

Пример 2. Протективная активность секретируемых белоксодержащих фракций пневмококка.

Белоксодержащие фракции получали как в примере 1.

При иммунизации мышей фракцией 10-30 кДа выявлен слабый протективный эффект (ИЭ 1,99), практически не отличающийся от контроля (табл.7). Значительный эффект был получен при иммунизации мышей фракцией >30 кДа (ИЭ 8,9).

Далее было проведено фракционирование надосадочной жидкости, полученной после культивирования S. pneumoniae типа 3 на фракцию 30-50 кДа и больше 50 кДа (табл.8). Наибольшей протективной активностью характеризовалась фракция с молекулярной массой 30-50 кДа, ИЭ=50,1. Фракция с молекулярной массой более 50 кДа была менее иммуногенной, ИЭ=7,9.

Преимущество изобретения заключается в создании универсального способа получения протективных антигенов на основе секретируемых белоксодержащих фракций грамотрицательных и грамположительных бактерий, при инфицировании которыми токсинообразование не является ведущим патогенетическим механизмом в развитии заболевания.

Таблица 1
Протективная активность препаратов из штамма Klebsiella pneumoniae K2 при заражении штаммом K.pneumoniae K2 в дозе 178 LD50
№ группыПрепаратИммунизирующая доза, мклЗаражающая доза, микр. клетокВыжилоED50, мкл
Абс.% ±m
1Белоксодержащая фракция К.pneumoniae K2 с молекулярной массой 21 кДа15001/1010,0±9,5>10,0
105000/100
2Белоксодержащая фракция К.pneumoniae K2 с молекулярной массой 34-35 кДа15004/1040,0±15,5*2,5
105007/1070,0±14,5*
3Гидроокись алюминия15000/100>10,0
105000/100
4Невакцинированные (контроль)-5000/100
Примечание:
1) достоверность разности между процентом выживших животных в опытных группах и в контроле, * р<0,01

Таблица 2
Прямая и перекрестная протективная активность препаратов из штамма Klebsiella pneumoniae K2, К16 и 204 при заражении штаммом K.pneumoniae K2 в дозе 15,8 LD50
ГруппаБелоксодержащая фракция К.pneumoniaeМолекулярная масса, кДаИммунизирующая доза, мклЗаражаюшая доза, микр. клетокВыжилоED50, мкл
Абс.%±m
1K22115000/100>100
105000/100
1005003/1030,0±14,5
2K234-3515001/1010,0±9,53,0
1050010/10100,0±6,0**
1005009/1090±9,5**
3К1634-3515003/1030,0±14,560,0
105003/1030,0±14,5
1005001/1010,0±9,5
420434-3515001/1010,0±9,525,0
105005/1050,0±15,8*
1005005/1050,0±15,8*
5Невакцинированные (контроль)-5001/1010,0±9,5
Примечание: 1) достоверность разности между процентом выживших животных в опытных группах и в контроле, * р<0,05, ** р<0,01

Таблица 3
Прямая и перекрестная протективная активность препаратов из штамма Klebsiella pneumoniae K2, К 16 и 204 при заражении штаммом K.pneumoniae К 16 в дозе 2,3 LD50
ГруппаБелоксодержащая фракция К.pneumoniaeМолекулярная масса, кДаИммунизирующая доза, мклЗаражающая доза, ×106 микр. кл/млВыжилоED50, мкл
Абс.%±m
1K234-35120,04/1040,0±15,58,0
1020,06/1060,0±15,5*
10020,06/1060,0±15,5*
2К1634-35120,03/1030,0±14,58,0
1020,06/1060,0±15,5*
10020,07/1070,0±145**
320434-35120,03/837,5±15,32,5
1020,06/875,0±13,7**
10020,08/8100,0**
4Невакцинированные (контроль)-20,01/1010,0±9,5
Примечание: 1) достоверность разности между процентом выживших животных опытных группах и в контроле, * р<0,05, ** р<0,01

Таблица 4
Протективная активность фракции секретируемого белка K.pneumoniae K2 с молекулярной массой 34-35 кДа не сорбированного на гидроокиси алюминия в дозе 2 LD50
ПрепаратКратность введения препаратовИммунизирующая дозаЗаражающая доза, микр. клетокВыжило/ всего%±mДостоверность разности между опытом и контролем, p
1Белоксодержащая фракция K.pneumoniae K2 с молекулярной массой 34-35 кДа, не сорбированная на гидроокиси алюминия240,0 мкл25,09/9100,0*<0,001
2Поликомпонентная вакцина Иммуновак-ВП-42)2200 мкг25,06/1060,0±15,50,05
Невакцинированные (контроль) - -25,02/1020±12,6
Примечание. 1) Препараты вводили 2-кратно, чередуя внутрибрюшинное и подкожное введение с интервалом 14 суток. Заражение проводили штаммом K.pneumoniae K2 в дозе 25 микробных клеток на 12 сутки.
* Достоверность разности между группами вакцинированных мышей (группы 1 и 2), р<0,05

Таблица 5
Антигенная активность секретируемых белоксодержащих антигенов K.pneumoniae K2 с молекулярной массой 34-35 кДа в ИФА
Молекулярая масса белковой фракции для сорбции на планшетах и иммунизации мышей, кДаИммунизирующая доза исследуемой белковой фракцией, мкл/мышьУровень антител в сыворотке крови мышей, иммунизированных фракциями с молекулярной массой..., кДа
ОП492Δ ОП
34-3510,320±0,0220,066
100,368±0,0290,114
1000,601±0,152***0,347
Невакцинированные0,254±0,016
Примечание.
* ОП492 - оптическая плотность при длине волны 492 нм;
**Δ ОП - разница ОП сыворотки между вакцинированными и невакцинированными мышами
* * * Достоверность разности уровня антител с сыворотках вакцинированных и невакцинированных мышей р<0,001

Таблица 6
Терапевтическая активность противоклебсиеллезной сыворотки при экспериментальной инфекции, вызванной K.pneumoniae К2
Сыворотка мышей, иммунизированных белоксодержащией фракцией с молекулярной массойКратность введения сывороткиЗаражающая доза, микробные клеткиВыжило/всего% ±m
121 кДа25000/100
234-35 кДа35007/1070,0±14,5*
3Невакцинированные-5000/100
* Достоверность разности р2 и 1,3 <0,05

Таблица 7
Протективная активность препаратов из штамма пневмококка серотипа 3 при заражении S.pneumoniae типа 3 в дозе 10,1 LD50
№ группыБелоксодержащая фракция, S.pneumoniae типа 3 иммунизирующая доза 100 мклЗаражающая доза, микр. клетокВыжило/всегоLD50, микр. клетокИЭ
110-30 кДа, 6 часов культивирования7×109/1013801,99
7×1027/10
7×1032/10
2>30 кДа, 6 часов культивирования7×1010/1061658,9
7×10210/10
7×1034/9
3Невакцинированные (контроль)7×109/10692-
7×1023/10
7×1033/10
Примечание: ИЭ - индекс эффективности - отношение LD50 в опыте к LD50 в контроле;

Таблица 8
Протективная активность препаратов из штамма пневмококка серотипа 3 при заражении S. pneumoniae типа 3 в дозе 12,6 LD50.
№ группыБелоксодержащая фракция, S.pneumoniae типа 3, иммунизирующая доза 100 мклЗаражающая доза, микр. клетокВыжило /всегоLD50, микр. клетокИЭ
130-50 кДа1038/1039810,750,1
1046/10
1057/10
2>50 кДа1034/106309,67,9
1045/10
1054/10
3Невакцинированные (контроль)1034/10794,3 -
1040/10
1050/10
Примечание: ИЭ - индекс эффективности - отношение LD50 в опыте к LD50 в контроле;

1.Способполученияпротективнойбелоксодержащейфракциибактерий,включающийкультивированиебактерийнажидкихпитательныхсредах,отделениекультуральнойсредыотбактерий,отличающийсятем,чтокультуральнуюсреду,содержащуюсекретируемыебелоксодержащиефракции,подвергаюточисткеиконцентрируютметодомультрафильтрацииспорогомотсечениябелка30кДаиколоночнойхроматографииспомощьюгель-фильтрациинасефадексеG-75ипоследующейочисткенаДЕАЕ-сефарозевградиентеNaClдополученияфракцийсмолекулярноймассой30-50кДаисодержаниембелка4-5мг/мл.12.Способпоп.1,отличающийсятем,чтодляполученияпротективныхантигеновнаосновесекретируемыхбелоксодержащихфракцийиспользуютнетоксигенныештаммыграмотрицательныхилиграмположительныхмикроорганизмов.2
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-1 из 1.
18.05.2019
№219.017.5755

Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа а/краснодар/101/59/35 (h2n2) для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины

Изобретение относится к медицинской вирусологии. Предложен холодоадаптированный штамм вируса гриппа А/Краснодар/101/59/35 (H2N2) для получения реассортантных штаммов живой гриппозной вакцины. Изобретение может быть использовано при производстве живой холодоадаптированной аттенуированной вакцины...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002354695
Дата охранного документа: 10.05.2009
Показаны записи 1-10 из 24.
10.01.2013
№216.012.18e6

Способ получения субстанции l-лизин-альфа-оксидазы

Изобретениео тносится к биотехнологии и медицине, а именно к онкологи. Предложен способ получения субстанции L-лизин-альфа-оксидазы (ЛО) с использованием штамма-продуцента Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D. Проводят ферментацию на содержащей источники азота, фосфата и пшеничные...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471866
Дата охранного документа: 10.01.2013
27.05.2013
№216.012.4398

Способ получения биоинженерной конструкции для замещения костных дефектов

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к реконструктивной хирургии, предназначено для применения в области трансплантологии, травматологии, хирургии и онкологии. Описан способ получения биоинженерной конструкции для замещения костных дефектов, основой которой является кость,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482881
Дата охранного документа: 27.05.2013
27.05.2013
№216.012.4399

Биоимплантат с многофункциональным биоактивным наноструктурированным покрытием

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, предназначено для применения в трансплантологии, травматологии, хирургии и онкологии и может быть использовано для замещения костных дефектов. Описан биоимплантат, который представляет собой донорскую кость, деиммунизированную с помощью...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482882
Дата охранного документа: 27.05.2013
27.03.2014
№216.012.ae09

Средство для лечения эстрогензависимых опухолей

Предложено лекарственное средство для лечения эстрогензависимых опухолей. Предлагаемое средство содержит (-)-секоизоларицирезинол и вспомогательные вещества: крахмал, тальк и стеарат магния. Показано: заявленное средство вызывает значительное торможение роста аденокарциномы молочной железы, при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002510268
Дата охранного документа: 27.03.2014
20.08.2014
№216.012.e9cd

Способ получения высокотитражной антимикробной сыворотки для оценки антигенной активности противостафилококковых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения высокотитражной антимикробной сыворотки. Способ включает использование штамма S.aureus №1991, характеризующийся иммуногенностью ED=(50-100)×10 микробных клеток, слабой вирулентностью LD=(0,5-2,0)×10 микробных клеток. Его...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002525661
Дата охранного документа: 20.08.2014
20.11.2014
№216.013.096e

Способ получения протективной белоксодержащей фракции бактерий

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения протективных антигенов на основе секретируемых белоксодержащих соединений Staphylococcus aureus. Способ предусматривает культивирование на жидкой питательной среде вирулентного штамма бактерий Staphylococcus aureus №6...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002533815
Дата охранного документа: 20.11.2014
13.01.2017
№217.015.7f1f

Штаммы вида streptococcus pneumoniae (варианты) и способ получения из них протективной белоксодержащей фракции, обладающей внутривидовой иммуногенной активностью

Заявленная группа изобретений относится к области иммунологии. Штаммы вида Streptococcus pneumoniae депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов III-IV групп патогенности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России под...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601158
Дата охранного документа: 27.10.2016
13.01.2017
№217.015.862c

Способ стерилизации сверхвысокомолекулярного полиэтилена, предназначенного для применения в медицине (варианты)

Областью применения заявляемого изобретения являются медицина и ветеринария, в частности реконструктивная хирургия, ортопедия и травматология, а также экспериментальная биология. Сутью заявляемого изобретения является способ стерилизации СВМПЭ, предназначенного для применения в медицине, путем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002603477
Дата охранного документа: 27.11.2016
25.08.2017
№217.015.ad24

Способ получения биоимплантата для замещения сегментарных дефектов трахеи

Изобретение относится к хирургии и может быть применимо для получения биоимплантата для замещения сегментарных дефектов трахеи. Синтетический матрикс стерилизуют перегретым паром в течение 40 мин под давлением 1 атм, покрывают фибрином крови пациента, заселяют культурой МСК пациента,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002612528
Дата охранного документа: 09.03.2017
25.08.2017
№217.015.cb33

Протез трахеи для замещения сегментарных дефектов

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к трансплантологии, травматологии, хирургии, онкологии, и касается протезов, предназначенных для замещения сегментарных дефектов трахеи человека и животных. Протез трахеи для замещения сегментарных дефектов представляет собой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002620048
Дата охранного документа: 22.05.2017
+ добавить свой РИД