×
09.05.2019
219.017.4ab0

КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ А4 Т-ЛИМФОБЛАСТНОГО ЛЕЙКОЗА ЧЕЛОВЕКА, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ СКРИНИНГА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к биотехнологии и экспериментальной онкологии и может быть использовано для скрининга противоопухолевых препаратов, в частности для скрининга синтетических и природных веществ с потенциальной противоопухолевой активностью, а также для препаратов, противоопухолевый эффект которых не связан с индукцией апоптоза опухолевых клеток. Методом искусственной стимуляции апоптоза СD95-позитивных клеток действием эффекторных анти-СD95 моноклональных антител получена генетически и фенотипически стабильная клеточная линия, в полной мере сохраняющая гистогинетический фенотип Т-клеточного лимфобластного лейкоза, но не экспрессирующая рецептор CD95(Fas/APO-1). 6 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к биотехнологии и экспериментальной онкологии и может быть использовано для скрининга противоопухолевых препаратов, в частности для скрининга синтетических и природных веществ с потенциальной противоопухолевой активностью, а также для препаратов, противоопухолевый эффект которых не связан с индукцией апоптоза опухолевых клеток.

При первичном отборе синтетических и природных веществ с потенциальной противоопухолевой активностью широко используется их тестирование на линиях опухолевых клеток in vitro.

Использование панелей многообразных по генетическим и фенотипическим признакам клеточных линий дает возможность максимально эффективного скрининга синтетических соединений, природных веществ и физических воздействий на предмет поиска их биологической активности на клеточном и молекулярном уровнях. Противоопухолевая активность большинства лекарственных средств связана с их способностью индуцировать в клетках-мишенях программированную гибель клеток (апоптоз). Одним из направлений в противоопухолевой химиотерапии является разработка препаратов синтетического и природного происхождения, избирательно индуцирующих апоптоз.

Открытие трансмембранного CD95(Fas/APO-1) рецептора и его лиганда (CD95L) позволило по-новому взглянуть на молекулярные механизмы лекарственно-индуцированного апоптоза. Предполагается, что CD95 рецепторно-лигандная система является критическим компонентом лекарственно-индуцированного апоптоза [1, 2]. Взаимоотношения компонентов сигнальных путей CD95/CD95L- и лекарственно-индуцированного апоптоза может иметь не только фундаментальное, но и практическое значение в разрешении проблемы резистентности опухолевых клеток к противоопухолевым препаратам. Поэтому изучение возможной роли СD95(Fas/АРО-1)-рецепторно-лигандной системы в лекарственно-индуцированном апоптозе является актуальной и перспективной задачей в поиске новых методов и средств противоопухолевой терапии.

Известны CD95-дефицитные клеточные линии, резистентные к CD95-индуцированному апоптозу, но не резистентные к противоопухолевым препаратам [3, 4].

Известны также линии, обладающие устойчивостью к отдельным препаратам, как, например:

- цисплатин-резистентная эпидермальная линия карциномы человека - KB/DDP5 [5];

- доксорубицин-резистентная линия клеток лейкоза человека HL-60 [6];

- адриамицин-резистентный вариант клеток линии миелобластного лейкоза человека (K562/ADM) [7].

Однако известные линии не обладают фенотипом множественной лекарственной устойчивости, которым обладает линия А4, в связи с чем они не могут быть использованы для одновременного скрининга синтетических соединений и природных веществ с потенциальной противоопухолевой активностью, в том числе и тех, противоопухолевый эффект которых не связан с индукцией апоптоза опухолевых клеток.

Задачей изобретения явилось создание модельной клеточной линии, дефицитной по экспрессии рецептора сигнала клеточной смерти CD95 для расширенного поиска и скрининга веществ с потенциальной противоопухолевой активностью и веществ, противоопухолевый эффект которых не связан с индукцией апоптоза опухолевых клеток.

Заявляемая клеточная линия А4 Т-лимфобластного лейкоза человека хранится в Специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур (Института цитологии РАН) под номером РККК (П) 682Д.

Клеточную линию А4 получали следующим образом.

В качестве основы использовали линию клеток Т-лимфобластного лейкоза человека (Jurkat, клон Е6-1) [8]. Клетки родительской линии Jurkat (далее Jurkat/WT) имеют воспроизводимый иммунофенотип Т-лимфобластного лейкоза и экспрессируют трансмембранный рецептор сигнала клеточной смерти CD95(Fas/APO-1).

Суспензионную культуру линии Т-лимфобластных клеток человека Jurkat выращивали в питательной среде RPMI-1640, содержащей дополнительно 10 мМ HEPES, L-глутамин, гентамицин и 10% эмбриональной сыворотки теленка, в 24-луночном культуральном планшете (105 клеток в 1 мл) в атмосфере 5% СО2 в воздухе, при 37°С. Через 12 ч культивирования в лунки вносили моноклональные антитела (МКА) IPO-4 до их дробно понижающейся конечной концентрации: 1000, 500, 250, 125, 63, 31, 16, 8 и 4 нг/мл соответственно. Через 24 ч инкубации с МКА в лунках А1 и А2 (1000 и 500 нг/мл МКА) практически все клетки погибли или находились в состоянии развивающегося апоптоза, в лунках A3 и А4 (250 и 125 нг/мл МКА) сохранилась популяция выживших клеток (30 и 50% соответственно), в остальных лунках количество погибших и погибающих клеток снижалось пропорционально понижению концентрации МКА. Клетки из лунок A3 и А4 были переведены в свежую питательную среду без МКА для восстановления устойчивого роста. В течение 20 дней культивирования рост клеток из лунки А4 восстановился, и в дальнейшей работе использовалась именно эта культура (далее - А4). Культуру А4 вновь инкубировали 24 ч в среде с МКА IPO-4, повысив их концентрацию (250 нг/мл); далее - три недели в среде без антител. Третий и четвертый циклы селекции выполнены аналогично, но концентрация МКА в среде составляла 500 нг/мл.

Таким образом, методом искусственной стимуляции апоптоза (програмированной клеточной гибели) CD95-позитивных клеток действием эффекторных анти-СD95 моноклональных антител нами получена генетически и фенотипически стабильная клеточная линия, в полной мере сохраняющая гистогенетический фенотип Т-лимфобластного лейкоза человека, но не экспрессирующая рецептор CD95(Fas/APO-1).

Клетки полученной СD95-дефицитной линии А4 стабильно воспроизводят приобретенный иммунофенотип на протяжении 3 лет культивирования in vitro (более 1000 генераций).

Характеристика СD95-дефицитной линии А4.

Полученная СD95-дефицитная линия А4, сохраняющая в полной мере иммунологический фенотип, обладает рядом качеств, существенно отличающих ее от родительской линии Jurkat/WT.

Доля экспрессии CD95+клеток линии А4 составляет в среднем 7±3%, в противоположность родительской линии клеток Jurkat/WT, 65±14% клеток которой экспрессируют антиген CD95 (таблица 1).

Клетки линии А4 резистентны к СD95-индуцируемому апоптозу в отличие от клеток родительской линии Jurkat/WT (таблица 2).

Клетки линии А4 более резистентны к рентгеновскому облучению и жесткому УФ-свету (254 нм - диапазон УФ-С) в отличие от клеток родительской линии Jurkat/WT (таблица 3).

Клетки линии А4 устойчивы к оксидативному стрессу (к действию перекиси водорода, менадиона) (таблица 4).

Клетки линии А4 резистентны к индуцирующему апоптоз действию in vitro ряда цитотоксических противоопухолевых препаратов в терапевтических концентрациях (доксорубицин, этопозид, цисплатин, циклоплатам) (таблицы 5, 6).

Морфологические признаки. Клетки линии А4 морфологически сходны с клетками родительской линии Jurkat/WT - клетками лимфобластного типа.

Культуральные свойства. Культура суспензионного типа, со склонностью к межклеточной адгезии. Для наращивания биомассы клеток можно использовать культуральные флаконы. Во флаконы площадью 25 см2 следует засевать 5.0-9.0×105 клеток/мл. Пассирование через каждые два дня. Клетки линии А4 менее требовательны к условиям культивирования (уровень спонтанного апоптоза клеток А4 не превышает 5%, в то время как в тех же условиях 15-20% клеток «дикого типа» подвержены спонтанной гибели).

Клетки линии А4 способны длительное время (5 дней) оставаться без субкультивирования и смены среды.

Контаминация. Контаминантов не обнаружено. Тест на микоплазму отрицателен.

Кариотипическая характеристика. Модальное число хромосом - 46,

маркерная хромосома - Y.

Маркерные признаки. Экспрессия поверхностных антигенов - CD3, CD4, CD5, CD7, CD71, CD73; отсутствие экспрессии CD95, CD25. Клетки экспрессируют белки bcl-2, bcl-XL, но не экспрессируют р53.

Криоконсервация. Клетки линии А4 ресуспендируют в эмбриональной телячьей сыворотке, содержащей 7,5% диметилсульфоксида (ДМСО), в концентрации 4-5×106 клеток/мл, разливают в пластиковые ампулы, помещают в теплоизолирующий материал (пенополиуретан) и переносят в низкотемпературный холодильник при -70°С на 24 часа. Размораживание быстрое, при 37°С. Клетки разводят в 10 мл безсывороточной среде и осаждают центрифугированием, ресуспендируют в 5 мл той же среды, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, и переносят в культуральный флакон. Жизнеспособность клеток оценивают по включению трипанового синего.

Скрининг противоопухолевых препаратов проводился двумя методами:

- определение апоптотических клеток по окрашиванию пропидий йодидом (PI) клеточных ядер, заключающийся в регистрации доли клеток с гиподиплоидным содержанием ДНК, что позволяет выявить количественный критерий интенсивности процесса апоптоза.

- МТТ-тест, позволяющий оценить цитотоксическое действие противоопухолевых препаратов. МТТ-тест основан на способности дегидрогеназ живых клеток превращать бледно-желтый водорастворимый 3-(4,5-диметилтиазолин-2)-2,5 дифенилтетразолий бромид (МТТ) в голубые кристаллы формазана, не растворимые в воде. Количество образовавшегося формазана (определяемое колориметрическим методом после его растворения в органических растворителях) характеризует интенсивность окилительно-востановительных процессов в клетках культуры и является косвенной характеристикой активной биомассы.

Определение апоптотических клеток линий Jurkat/WT и А4 после инкубации с противоопухолевыми препаратами по методу Nicoletti [9].

Клетки (5·105 клеток в мл) одновременно засевают в 96-луночные плоскодонные планшеты и инкубируют с противоопухолевыми препаратами (доксорубицин, этопозид, цисплатин, циклоплатам) при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение 48 ч. Контролем служат интактные клетки, инкубированные в тех же условиях, но без препаратов.

Отмытые от среды культивирования клетки суспендируют в фосфатно-солевом буфере (ФСБ). Суспензию клеток (2,5·105) суспендируют в охлажденном 70% этаноле в течение 1 часа и осаждают центрифугированием (7 мин, 500 об/мин). Осадок мягко суспендируют в 1,0 мл гипотонического раствора флюорохрома: 5 мкг/мл PI; 0,1% натрия цитрат; 0,1% Тритон Х-100 и инкубируют в темноте в течение 15 мин.

Суспензию окрашенных пропидий йодидом клеток анализируют на проточном цитофлюориметре FACSCalibur с аргоновым лазером (длина волны - 488 нм), с использованием программного обеспечения CELLQuest. Гистограммы строят на основании подсчета не менее 10 тысяч событий для каждого образца. Анализ гистограмм проводят с учетом интенсивности флюоресценции. Длина волны устанавливается в канале FL2 (563-607 нм) для красной флюоресценции (PI). Результаты представлены в таблице 5.

Как показывают результаты, представленные в таблице 5, через 48 ч инкубации клеток с противоопухолевыми препаратами клетки линии А4 практически не вступают в процесс апоптоза в отличие от клеток линии дикого типа Jurkat/WT.

Оценка цитотоксического действия противоопухолевых препаратов на клетки линий Jurkat/WT и А4 с помощью МТТ-теста [10].

Клетки в концентрации 5·104 кл/мл засевают в 96-луночные плоскодонные планшеты и инкубируют с противоопухолевыми препаратами (доксорубицин, этопозид, цисплатин, циклоплатам) 24-48-72 ч. За 6 часов до окончания инкубации в каждую лунку вносили по 10 мкл раствора МТТ (1 мг/мл). По окончании инкубации клетки осаждают центрифугированием планшетов при 1000 об/мин в течение 2-3 мин. Супернатант осторожно отбирают, вносят в каждую лунку по 200 мкл ДМСО, клетки суспендируют и инкубируют 10 мин при 37°С, после чего немедленно определяют оптическую плотность раствора формазана в спектрофотометре при длине волны 540 нм. Результаты представлены в таблице 6.

Как следует из таблицы 6, клеточная линия Jurkat/WT более чувствительна к используемым препаратам (через 24 ч), тогда как уровень выживаемости клеток линии А4 остается на уровне интактного контроля (90-100%). Через 48 ч и 72 ч выживаемость клеток линии А4 уменьшается, но при этом значительно превышает выживаемость клеток линии Jurkat/WT.

Таким образом, полученная CD95-дефицитная линия А4 обладает рядом качеств, существенно отличающих ее от родительской линии Jurkat/WT:

- отсутствие экспрессии клетками этой линии антигена CD95 делает их полностью резистентными к индуцирующему апоптоз действию эффекторных моноклональных антител анти-СD95;

- одновременно клетки этой линии (в отличие от родительской) оказались резистентны к индуцирующему апоптоз действию in vitro ряда цитотоксических противоопухолевых препаратов;

- устойчивость к апоптоз-индуцирующим генотоксическим воздействиям коррелирует с полихимио- и радиорезистентностью клеток полученной CD95-дефицитной линии, обнаруженной по МТТ-тесту и по морфологии клеточных культур.

Технический результат.

Клеточная линия А4 Т-лимфобластного лейкоза человека, обладающая фенотипом множественной лекарственной и радиорезистентности, получена методом искусственной стимуляции апоптоза (программированной клеточной смерти) CD95-позитивных клеток действием эффекторных анти-CD95 моноклональных антител. Генетически и фенотипически стабильная клеточная линия А4 в полной мере сохраняет гистогинетический фенотип Т-клеточного лимфобластного лейкоза, но не экспрессирует рецептор CD95. Клетки полученной CD95-дефицитной линии воспроизводят приобретенный иммунофенотип на протяжении 3 лет культивирования in vitro.

Вышеуказанные свойства и результаты оценки специфического действия противоопухолевых препаратов с помощью полученной клеточной линии А4 позволяют использовать ее для одновременного расширенного скрининга и первичного отбора синтетических и природных веществ с потенциальной противоопухолевой активностью, изучать клеточные и молекулярные механизмы такой активности, а также использовать для тестирования препаратов, противоопухолевый эффект которых не связан с индукцией апоптоза опухолевых клеток.

Сравнительная характеристика иммунологического фенотипа клеточных популяций линий Jurkat/WT и А4.

Таблица 1.
АнтигенДоля антигенположительных клеток %
Jurkat/WTА4
CD379±2087±12
CD448±1053±12
CD570±1581±17
CD757±2368±22
CD84±23±2
CD252±12±1
CD9565±147±3

Сравнительная характеристика CD95-индуцированного апоптоза клеток линий Jurkat/WT и А4

Таблица 2
Время инкубации клеток с МКА анти-СD95 (100 ng/ml)Jurkat/WTА4
% апоптотических клеток
Интактный контроль 24 ч.10±22±1
24 ч30±55±1
Интактный контроль 48 ч.9±14±1
48 ч49±65±1

Сравнительная характеристика клеток линий Jurkat/WT и А4 к рентгеновскому облучению и жесткому УФ-свету.

Таблица 3.
Jurkat/WTА4
% апоптотических клеток
Интактный контроль 48 ч15±26±2
10 Гр35±410±2
20 Гр50±212±3
УФ-свет (254нм - 8 мин.)5016

Сравнительная характеристика влияния перекиси водорода и менадиона на клетки линий Jurkat/WT и А4. Долю апоптотических клеток выявляли по методу Nicoletti I.

Таблица 4.
Jurkat/WTА4
% апоптотических клеток
Интактный контроль 24 ч105
H2O2(10-4 M)317

Интактный контроль 48 ч133
Менадион (10 мкм)408

Определение апоптотических клеток линий Jurkat/WT и А4 после инкубации с противоопухолевыми препаратами по методу Nicoletti I.

Таблица 5.
Jurkat/WTА4
% апоптотических клеток
Интактный контроль 48 ч.13±14±1
Доксорубицин (10-6 М)32±16±2
Этопозид (2×10-5 M)63±211±1
Цисплатин (3×10-5 М)50±213±2
Циклоплатам (3×10-5 М)58±312±1

Оценка цитотоксического действия противоопухолевых препаратов клеток линий Jurkat/WT и А4 с помощью МТТ-теста

Таблица 6.
Jurkat/WTА4
24 ч48 ч72 ч24 ч48 ч72 ч
% выживших клеток
Доксорубицин (10-6 М)883014966860
Этопозид(2×10-5 M)53109905948
Цисплатин (3×10-5 М)5398887263
Циклоплатам (3×10-5 М)635810958270

Список литературы.

1. Friesen С., Fulda S., Debatin K-M. Deficient activation of the CD95 (APO-1/Fas) system in drug-resistant cells // Blood. - 1997. - Vol.90. - P.3118-3129.

2. Fulda S., Friesen C., Debatin K.M. Molecular determinants of apoptosis induced by cytotoxic drugs // Klin. Padiatr. - 1998b. - Vol.210. - P.148-52.

3. Wesselborg S., Engels I.H., Rossmann E. et al. Anticancer drugs induce caspase-8/FLICE activation and apoptosis in the absence of CD95 receptor/Ligand interaction // Blood. - 1999. - Vol.93. - No.9. - P.3053-3063.

4. Landowski Т.Н., Shain K.H., Oshiro M.M. et al. Myeloma cells selected for resistance to CD95-mediated apoptosis are not cross-resistant to cytotoxic drugs: evidence for independent mechanism of caspase activation // Blood. - 1999. - Vol.94. - P.265-274.

5. Chekhun V.F., Shishova Yu.., Yurchenko O.V., Vodyanik M.A., Sidorenko S.P. Drug resistance in KB/DDP5 cells associated with hypersensitivity to CD95-mediated apoptosis // Exp.Oncol. 22 (Suppl.2): 20-26, 2000.

6. Borellini F., Aquino A., Josephs S.F. and Glazer R.I. Increased expression and DNA-binding activity of transcription factor Sp1 in doxorubicin-resistant HL-60 leukemia cells // Mol. Cell. Biol. 10:5541-5547, 1990.

7. Tsuruo Т., lida-Saito H., Kawabata H., Oh-hara Т., Hamada H. and Utakoji T. Characteristics of resistance to adriamycin in human myelogenous leukemia K562 resistant to adriamycin and in isolated clones // Jpn. J. Cancer Res., July 1, 1986; 77(7): 682-92.

8. Trauth B.C., Klas C., Peters A.M., Matzku S., Moller P., Falk W., Debatin K.-M. and Krammer P.H. Monoclonal antibody-mediated tumor regression by induction of apoptosis // Science.-1989.-V.245.-P.301-305.

9. Nicoletti I., Migliorati G., Pagliacci M.C., Grignani F., Riccardi C.A. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodide staining and flow cytometry. J. Immunol Methods; 1991. 139:271-280.

10. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxity assays // J. Immunol. Methods - 1993. - V.65. - P.55-63.

КлеточнаялинияА4Т-лимфобластноголейкозачеловека,дефицитнаяпоантигенуCD95(Fas/APO-l)сфенотипоммножественнойлекарственнойирадиорезистентностидляскринингапротивоопухолевыхпрепаратовinvitro,хранитсявСпециализированнойколлекциикультурклетокпозвоночныхРоссийскойколлекцииклеточныхкультур(ИнститутацитологииРАН)подномеромРККК(П)682Д.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 15.
23.02.2019
№219.016.c72c

Клеточная линия меланомы человека mel ibr, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии и может найти применение в медицине для вакцинотерапии злокачественных новообразований. Полученная новая клеточная линия меланомы человека mel Ibr обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками, хранится в Специализированной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002287576
Дата охранного документа: 20.11.2006
23.02.2019
№219.016.c72d

Клеточная линия меланомы человека mel il, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению новых клеточных линий, и может быть использовано для создания противоопухолевых вакцин. Получена новая клеточная линия меланомы человека mel IL, которая обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002287577
Дата охранного документа: 20.11.2006
23.02.2019
№219.016.c72f

Клеточная линия меланомы человека mel p, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии и может найти применение в медицине для вакцинотерапии злокачественных новообразований. Полученная новая клеточная линия меланомы человека mel P обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками, хранится в Специализированной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002287575
Дата охранного документа: 20.11.2006
23.02.2019
№219.016.c730

Клеточная линия меланомы человека mel kor, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине для вакцинотерапии злокачественных новообразований. Полученная новая клеточная линия меланомы человека mel Kor обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками, хранится в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002287578
Дата охранного документа: 20.11.2006
08.03.2019
№219.016.d50e

Клеточная линия меланомы человека mel cher, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии. Получена клеточная линия меланомы человека mel Cher, которая хранится в Специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур под номером РККК(П) 704Д. Изобретение может быть использовано для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002364624
Дата охранного документа: 20.08.2009
08.03.2019
№219.016.d512

Клеточная линия меланомы человека mel mtp, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии. Получена клеточная линия меланомы человека mel Mtp, которая хранится в Специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур под номером РКККК(П) 705Д. Изобретение может быть использовано для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002360963
Дата охранного документа: 10.07.2009
08.03.2019
№219.016.d513

Клеточная линия меланомы человека mel si, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии, в частности к получению клеточных линий, используемых для создания противоопухолевых вакцин. Получена клеточная линия меланомы человека mel Si, которая хранится в Специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002363734
Дата охранного документа: 10.08.2009
15.03.2019
№219.016.e0b0

Противоопухолевое средство

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, и касается лекарственного средства для лечения злокачественных новообразований. Предлагаемое средство содержит DL-α-амино-β{п-ди(2-хлорэтил)аминофенокси]фенил}-пропионовой кислоты дигидрохлорид и вспомогательные вещества. В...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002335284
Дата охранного документа: 10.10.2008
29.04.2019
№219.017.426f

Способ фотодинамической терапии

Изобретение относится к медицине, онкологии и может быть использовано для фотодинамической терапии (ФДТ) опухолей. Для этого пациенту вводят фотосенсибилизатор. Затем облучают патологический участок световым излучением с длиной волны, равной длине волны спектрального максимума поглощения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002339415
Дата охранного документа: 27.11.2008
09.05.2019
№219.017.4c2c

Клеточная линия меланомы человека mel z, используемая для получения противоопухолевых вакцин

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению клеточных линий, используемых для создания противоопухолевых вакцин. Клеточная линия меланомы человека mel Z обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками, хранится в Специализированной коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002390556
Дата охранного документа: 27.05.2010
Показаны записи 1-10 из 29.
20.05.2013
№216.012.3f97

Способ лечения экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и предназначено для лечения животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования. Используют комплексный фитоадаптогенный препарат фм-40 в виде 10% раствора с питьевой водой с шестимесячного возраста мышей до их естественной гибели...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481849
Дата охранного документа: 20.05.2013
20.05.2013
№216.012.40e3

Клеточная линия d11 множественной миеломы человека, используемая для гибридомной технологии

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к получению клеточных линий, используемых для гибридомной технологии. Получена генетически и фенотипически стабильная клеточная линия D11 множественной миеломы человека, сохраняющая гистогенетический фенотип множественной миеломы человека,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002482181
Дата охранного документа: 20.05.2013
10.09.2013
№216.012.66ab

Способ подавления опухолевого роста

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для подавления опухолевого роста. Для этого применяют бинарную каталитическую систему, содержащую натриевую соль октакарбоксифталоцианина кобальта и аскорбиновую кислоту. При этом до введения бинарной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491930
Дата охранного документа: 10.09.2013
10.01.2014
№216.012.944b

N-нитрозо-n-[(2-хлорэтил)карбамоил]-l-орнитин

Изобретение относится к области биологически активных соединений, конкретно к N-нитрозо-N-[(2-хлорэтил)карбамоил]-L-орнитину формулы 1 , обладающему противоопухолевым действием. Данное соединение может найти применение для лечения онкологических заболеваний. 1 ил., 2 пр.
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002503657
Дата охранного документа: 10.01.2014
20.02.2014
№216.012.a39c

Способ профилактики развития опухолей у экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования

Изобретение относится к медицине, а именно к способам профилактики развития опухолей у экспериментальных животных с высокой частотой спонтанного опухолеобразования. Сущность заявляемого способа заключается в том, что мышам - самцам линии СВА с высокой частотой спонтанного образования...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002507599
Дата охранного документа: 20.02.2014
27.09.2014
№216.012.f9fa

Способ лечения рака толстой кишки

Изобретение относится к медицине, а именно к противоопухолевой терапии, и может быть использовано для лечения рака толстой кишки. Для чего используют противоопухолевый препарат L-лизин-альфа-оксидазу из Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D, которую вводят пятикратно ежедневно в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002529831
Дата охранного документа: 27.09.2014
20.02.2015
№216.013.2aac

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus α-продуцент моноклональных антител, специфичных к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору (gcsf) человека

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus α-продуцент моноклональных антител, специфичных к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору (GCSF) человека, депонированный в Специализированной коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542381
Дата охранного документа: 20.02.2015
20.09.2015
№216.013.7c1c

Способ ферримагнито-термохимиотерапии злокачественных опухолей комбинациями магнитоуправляемых нанопрепаратов с визуализацией онкогенеза, определением терапии, предпочтительной в режиме реального времени, и мониторингом результатов лечения в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано при ранней диагностике и лечении опухолей, индуцированных в эксперименте. Для раннего МРТ выявления опухолей, инвазий и метастазов животному вводят комбинации МРТ-негативных контрастных нанопрепаратов с позитивными...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002563369
Дата охранного документа: 20.09.2015
20.01.2016
№216.013.9fdf

Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается создания подкожных ксенографтов меланомы кожи человека для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств. Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002572569
Дата охранного документа: 20.01.2016
27.03.2016
№216.014.c686

Нанокомпозиция для люминесцентной диагностики злокачественных опухолей

Изобретение относится к медицине, в частности к нанокомпозиции для люминесцентной диагностики злокачественных опухолей. Нанокомпозиция для люминесцентной диагностики злокачественных опухолей на основе лексан-полимерной матрицы и иттербиевых комплексов диметилового эфира протопорфирина IX или...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002578976
Дата охранного документа: 27.03.2016
+ добавить свой РИД