×
29.04.2019
219.017.3f86

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЛИСТЕРИЙ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
№ охранного документа
02201957
Дата охранного документа
10.04.2003
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, и наиболее эффективно может быть использовано для бактериологической диагностики листериоза. Среда в качестве основного источника азота использует питательный агар для культивирования микроорганизмов, витаминный препарат "ЭКД", характеризующийся высоким содержанием аминокислот и комплекса витаминов, тиамин-бромид, глюкозу, обеспечивающую энергетическое питание, динатрий фосфат для придания изотонических свойств среды, в качестве ингибитора сопутствующей микрофлоры - налидиксовую кислоту, акрифлавин гидрохлорид и теллурит калия. Среда полностью ингибирует рост сопутствующей микрофлоры, обладает высокой чувствительностью, повышенной селективностью. 1 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, наиболее эффективно может быть использовано для бактериологической диагностики листериоза.

Возбудитель листериоза - Listeria monocytogenes играет важную роль в перинатальной и неонатальной патологии человека, вызывает серьезные поражения у лиц с дефектами иммунной системы и представляет собой серьезную проблему для медицины и ветеринарии. Многочисленные вспышки этого заболевания в ряде стран, включая Россию, связанные с употреблением в пищу инфицированных продуктов, частота носительства возбудителя у людей и их широкое распространение во внешней среде, требуют разработки методов для выделения, идентификации и типирования листерий [2].

В этой связи разработка простых, недорогих, питательных сред для идентификации листерий из материалов различного происхождения представляется весьма актуальным, как для характеристики распространения штаммов Listeria monocytogenes, так и для разработки новых подходов к их типированию, с целью выявления значимых, вирулентных культур листерий.

В настоящее время для этих целей используют селективную среду по прописи Lucas D. et. al, (1990 г), селективную среду для выделения листерий - PAL CAM по прописи Netten P. et. al. (1989 г), питательную среду с теллуритом калия (3,4).

Кроме того, эти среды дорогостоящи и многокомпонентны, сложны в приготовлении и недоступны практическим лабораториям, занимающимся диагностикой листериоза.

Наиболее близким решением задачи по совокупности признаков является среда для обнаружения и идентификации гемолитических штаммов Listeria на плотной селективной среде, содержащей, г/л: питательный агар ДИФКО (с переваром бычьих сердец и мозгов) - 52,0, хлорид лития - 15,0, эскулин - 0,75, акрифлавина гидрохлорид - 5 мг/л, дистиллированная вода - 900 мл, в смесь добавляют 0,7% цитрат железа-аммония - 70 мл, 10 мл 2% натриевой соли цефтазидима пентагидрата (7).

К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является то, что среда для обнаружения и идентификации гемолитических штаммов Listeria - дорогостоящая, импортного производства, недоступна широкой сети практических лабораторий, занимающихся диагностикой листерий.

Задача предлагаемого изобретения - повышение селективных свойств среды.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что предлагаемая среда содержит в качестве основного источника азота - питательный агар для культивирования микроорганизмов, акрифлавин гидрохлорид и теллурит калия в качестве ингибиторов сопутствующей микрофлоры при следующем соотношении компонентов, (1,5,6) г/л дистиллированной воды:
Питательный агар для культивирования микроорганизмов - 39,0 - 41,0
Витаминный препарат "ЭКД" - 4,5 - 5,5
Тиамин-бромид - 0,0025 - 0,0035
Д(+)-глюкоза - 0,8 - 1,2
Динатрий фосфат - 2,0 - 3,0
Акрифлавин гидрохлорид - 0,0045 - 0,0055
Налидиксовая кислота - 0,035 - 0,045
Ex tempore теллурит калия - - 0,15-0,25
Среду получают следующим образом.

Пример 1. В 1 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (минимальное): питательный агар для культивирования микроорганизмов - 39,0 г, витаминный препарат "ЭКД" - 4,5 г, тиамин-бромид - 0,0025 г, Д(+) глюкоза - 0,8 г, динатрий фосфат - 2,0 г, акрифлавин гидрохлорид - 0,0045 г.

Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,035 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% раствора NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды). Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 112oС в течение 20 мин. После автоклавирования вносят 0,15 г теллурита калия (эквивалентное 9 мл 2% водно-глицеринового раствора теллурита калия). Разливают в стерильные чашки Петри, предварительно охладив среду до 45-50oС, чашки со средой подсушивают в термостате при 37±1oС в течение (35±5) мин.

Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (оптимальное): питательный агар для культивирования микроорганизмов 40,0 г, витаминный препарат "ЭКД" - 5,0 г, тиамин-бромид - 0,003 г, Д(+)глюкоза - 1,0 г, динатрий фосфат - 2,5 г, акрифлавин гидрохлорид - 0,005 г. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,04 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% раствора NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды). Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 112oС в течение 20 мин. После автоклавирования вносят 0,2 г теллурита калия (эквивалентное 10 мл 2%-ного водно-глицеринового раствора теллурита калия). Далее согласно примеру 1.

Пример 3. Отличается от примеров 1,2 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (максимальные): питательный агар для культивирования микроорганизмов - 41,0 г, витаминный препарат ЭКД - 5,5 г, тиамин-бромид - 0,0035 г, Д (+)-глюкоза - 1,2 г, динатрий фосфат - 3,0 г, акрифлавин гидрохлорид - 0,0055 г. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,045 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1%-ного раствора NaОН при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды). Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 112oС в течение 20 мин. После автоклавирования вносят 0,25 г теллурита калия (эквивалентное 11 мл 2%-ного водно-глицеринового раствора теллурита калия). Далее согласно примеру 1,2.

Результаты бактериологического контроля предлагаемой и известной среды представлены в таблице.

Из таблицы видно, что предлагаемая среда по показателям чувствительности и скорости роста не уступает известной среде. Предлагаемая среда имеет преимущество, так как она подавляет рост сопутствующей грамположительной микрофлоры Staphilococcus aureus "biotco", Staphilococcus aureus wood - 46, Streptococcus faecalis 1379, Streptococcus 5957 и грамотрицательной микрофлоры Escherichia Coli O55K59 3912/41, Escherichia Coli 168/59, Proteus vulgaris H•19 222. Обеспечивая при этом характерный рост листерий в виде круглых, черных, мелких колоний, тем самым повышается эффективность бактериологической диагностики листериоза.

Известная среда частично подавляет рост грамотрицательной микрофлоры E. Coli O55K59 3912/41, E. Coli 168/59 и не подавляет роение протея, который образует по всей поверхности чашки вуалеобразный налет, что затрудняет выделение штаммов Listeria в чистой культуре. Известная среда не подавляет рост грамположительной микрофлоры St.aureus "biotco", St. aureus "wood - 46", Str. faecalis 1379, Streptococcus 5957. При этом на известной среде невозможно идентифицировать Listeria от Streptococcus, так как они растут в виде черных колоний, что затрудняет работу бактериологов по выделению листерий.

Предлагаемая питательная среда разработана на основе гостированных ингредиентов, проста в применении, не содержит дорогостоящих, нестандартных ингредиентов, таких как мясо и сыворотка крупного рогатого скота.

Источники информации
1. Химические реактивы и высокочистые химические вещества. Каталог. М. "Химия", 1983г.

2. Лабораторная диагностика листериоза животных и людей, меры борьбы и профилактики (инструктивные документы). M., 1987.

3. Бакулов Н.А., Васильев Д.А. Листериоз как пищевая инфекция. Ульяновск, 1991 г.

4. Бакулов Н. И. , Васильев Д.А. Методические реакции по бактериологическому контролю пищевых продуктов на наличие листериоза. Ульяновск, 1992 г.

5. ФС42 -3520-98
6. ФС 42-386 ВС-91.

7. Qverlay technique for direct detection and identification of haemolytic Listeria on selective plating medium. Comparison of five media. Domingues lucas et.al. Z. Lebensm. - untersuch. und Forsh 1990. 191. 1.

Питательнаясредадляидентификациилистерий,содержащаяпитательныйагар,акрифлавингидрохлорид,теллуриткалиявкачествеингибиторасопутствующеймикрофлорыидистиллированнуюводу,отличающаясятем,чтоонадополнительносодержитвкачествестимуляторароставитаминныйпрепарат"ЭКД"итиамин-бромид,вкачествеэнергетическогопитания-Д(+)глюкозу,дляприданияизотоническихсвойствсреды-динатрийфосфат,вкачестведополнительногоингибиторасопутствующеймикрофлоры-налидиксовуюкислоту,авкачествепитательногоагара-питательныйагардлякультивированиямикроорганизмовприследующемсоотношениикомпонентов,г/лдистиллированнойводы:Питательныйагардлякультивированиямикроорганизмов-39,0-41,0Витаминныйпрепарат"ЭКД"-4,5-5,5Тиамин-бромид-0,0025-0,0035Д(+)-глюкоза-0,8-1,2Динатрийфосфат-2,0-3,0Акрифлавингидрохлорид-0,0045-0,0055Налидиксоваякислота-0,035-0,045Extemporeтеллуриткалия-0,15-0,25в
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-7 из 7.
20.02.2019
№219.016.bdb8

Способ получения пептона "каспий"

Изобретение относится к биотехнологии и к клинической микробиологии и может быть использовано для культивирования широкого спектра микроорганизмов. Белковое сырье - рыбу или рыбную муку смешивают с водой, нагревают до температуры 70-80°С, выдерживают в течение 30-40 мин, разбавляют водой,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002235770
Дата охранного документа: 10.09.2004
20.02.2019
№219.016.c4d0

Питательная среда для накопления сальмонелл

Изобретение относится к медицинской микробиологии. Может быть использовано для бактериологической диагностики брюшного тифа, паратифов, сальмонеллеза. Питательная среда содержит, г/л: панкреатический гидролизат рыбы 6,6-6,8; пептон ферментативный сухой 4,9-5,1; экстракт кормовых дрожжей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002192461
Дата охранного документа: 10.11.2002
11.03.2019
№219.016.d771

Питательная среда для выделения бактерий рода yersinia

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано для бактериологической диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Yersinia. Среда содержит сухой питательный агар, в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, содержащий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002235785
Дата охранного документа: 10.09.2004
20.03.2019
№219.016.ea2d

Тест-система для определения антибактериальных субстанций в моче

Изобретение относится к медицине. Может быть использовано при бактериологическом исследовании мочи. Тест-система содержит в качестве носителя спор крахмал, в качестве питательной среды - дрожжевой экстракт, в качестве энзиматического субстрата - глюкозу, в качестве буферной системы - натрий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 02164946
Дата охранного документа: 10.04.2001
10.04.2019
№219.017.0a29

Питательная среда для выделения патогенных энтеробактерий

Изобретение относится к клинической микробиологии. Может быть использовано при бактериологическом исследовании различных клинических материалов и объектов внешней среды. Предлагаемая среда содержит агар, лактозу, метиленовый синий, эозин, дистиллированную воду, сахарозу, в качестве источника...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 02179582
Дата охранного документа: 20.02.2002
29.04.2019
№219.017.3f87

Питательная среда для выделения bacillus cereus

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано при бактериологическом исследовании клинического материала и пищевых продуктов. Питательная среда содержит сульфадимезин или сульфадиметокси, в качестве источника азотистого питания сухой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 02201965
Дата охранного документа: 10.04.2003
29.04.2019
№219.017.4752

Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза (мбт-бульон)

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано для ускоренного выявления микобактерий туберкулеза (МБТ) в клиническом материале при диагностике туберкулеза. Среда содержит в качестве источника азотистого питания сухой триптический гидролизат...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 02193061
Дата охранного документа: 20.11.2002
+ добавить свой РИД