КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ КОЖНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И РАН У ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к химико-фармацевтической и косметической промышленности и касается получения фармацевтических и косметических препаратов и изделий для лечения и профилактики грибковых, воспалительных, аллергических кожных заболеваний и ран, а также лечения ожогов, обморожений и пролежней на основе комплекса биологически активных веществ из голотурий.

Для лечения кожных заболеваний и ран смешанной этиологии получили распространение химически синтезированные препараты, обладающие фунгицидным и/или бактерицидным действием. К ним можно отнести такие, как мазь "Цинкундан" (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Часть 2, М.: Медицина, 1993, изд-ие 12-ое; "Средство для лечения грибковых заболеваний (варианты)" (з. РФ 96123879, опубл. 10.02.99), активным ингредиентом которого является нистатин; "Применение солей полигексаметиленгуанидиния в качестве препаратов, обладающих антимикробной активностью по отношению к анаэробной и смешанной инфекции" (з. РФ 97101062, опубл. 10.02.99); "Противовоспалительное и ранозаживляющее лекарственное средство" (з. РФ 95116621, опубл. 10.10.97), в основе противомикробного действия которого - использование нитазола. Однако ограниченная терапевтическая направленность препаратов и возможность побочного действия снижают эффективность их применения.

От указанных недостатков в большой мере свободны препараты на основе комплексов биологически активных веществ растительного и животного происхождения, обладающие более широким спектром биологического действия и не имеющие побочных токсичных эффектов. Из известных препаратов сюда можно отнести "Противоожоговое и ранозаживляющее средство" (з. РФ 96113672, опубл. 20.09.98) на основе веществ, полученных из подвергнутых тепловой обработке гидробионтов, и препараты на основе растительного сырья, используемые в "Способе лечения дерматологических заболеваний" (з. РФ 96117176, опубл. 10.02.99) и в "Косметическом креме для профилактики грибковых поражений кожи "Рада-плюс", (з. РФ 96123467, опубл. 27.08.98), а также "Средство для лечения заболеваний кожи и слизистых и способы его получения" (патент RU 214078, опубл. 10.11.99) на основе бета-каротина и витаминов с добавкой гентамицина, которые в той или иной степени обладают бактерицидными, противоаллергическими, ранозаживляющими свойствами. Однако отсутствие или недостаточная выраженность фунгицидных свойств в определенной мере ограничивают применение указанных препаратов или вынуждают дополнительно вводить в их состав химически синтезированные фунгицидные агенты, как это сделано в случае упомянутого выше крема "Рада-плюс" (з. РФ 96123467, опубл. 27.08.98), в который для усиления фунгицидных свойств дополнительно введена салициловая кислота, или при производстве "Геля для кожи с дезодорирующим, бактерицидным и фунгицидным действием" (з. РФ 96124443, опубл. 27.07.98), в котором бактерицидными свойствами обладают растительные экстракты и эфирные масла, а фунгицидными - 1-гидрокси-4-метил-6(2,4,4-триметилпентил)-2-(1Н)-пиридин-2- аминоэтанол. Известны, напротив, вещества природного происхождения, отличающиеся высокой фунгицидной, но низкой бактерицидной активностями, что также ограничивает применение препаратов на их основе для лечения кожных заболеваний. Это тритерпеновые гликозиды, встречающиеся преимущественно у ряда растений, и получаемые обычно многоступенчатой очисткой, включающей стадию экстракции полярными растворителями. У животных их наличие является характерной особенностью типа Echinodermata (Анисимов М.М., Чирва В.Я. О биологической роли тритерпеновых гликозидов /Успехи современной биологии. - 1980, - вып. 3, 6. - С. 351-364). В частности, показана высокая фунгицидная активность тритерпеновых гликозидов вида Apostichopus japonicus, относящегося к классу Holothurioidea, тип Echinodermata, извлекаемых из указанных гидробионтов двукратной экстракцией горячим метанолом, сопровождаемой центрифугированием, перерастворением в бензене и потом в воде, а также перекристаллизацией из этанола (Shimada S. Antifungal steroid glycosid from sea cucumber// Science. - 1969 - V/ 163, N 3874. - P.1462). Фунгицидная активность гликозидов из этой голотурии (минимальная концентрация, обладающая фунгицидным эффектом, - 1,56-16,7 мкг/мл) в большинстве случаев превышает таковую для растительных гликозидов (30-300 мкг/мл) (Анисимов М.М., Чирва В.Я. О биологической роли тритерпеновых гликозидов // Успехи современной биологии. - 1980. - вып. 3, 6. - С.351-364). Вместе с тем, ткани голотурий содержат каротиноиды и мощные жирорастворимые антиоксиданты (Савватеева Л.Ю., Маслова М.Г., Володарский В. Л. Дальневосточные голотурии и асцидии как ценное пищевое сырье//Владивосток. Изд-во Дальневост. ун-та. - 1983. - 184 С.), которые являются важными факторами оздоровления кожи млекопитающих, но теряются при получении чистых препаратов тритерпеновых гликозидов. Наличие каротиноидов и жирорастворимых витаминов - антиоксидантов в тканях голотурий дает основание предположить, что действие содержащих их экстрактов будет во многом аналогично действию активного начала композиции, представленной в патенте RU 2140781, при этом эффективность композиции, по-видимому, должна значительно повыситься, если экстракт дополнительно будет содержать тритерпеновые гликозиды, имеющие фунгицидное действие. Таким образом, прототипы заявленного изобретения описаны в патенте RU 2140781 и статье Shimada S. Antifungal steroid glycosid from sea cucumber// Science. - 1969. - V. 163, N 3874. - Р. 1462.

Цель изобретения: усиление лечебно-профилактических свойств и расширение ассортимента фармацевтической и косметической продукции, предназначенной для профилактики и терапии заболеваний кожи и слизистых оболочек бактериальной, грибковой и смешанной этиологии, а также вызванных трофическими нарушениями.

Указанная цель достигается тем, что в качестве активного начала в фармацевтических и косметических препаратах и изделиях используют комплекс биологически активных веществ, извлекаемых из дальневосточных голотурий (одного или нескольких видов из следующего ряда: Apostichopus japonicus, Cucumaria japonica, Eupentacta fraudatrix.

Cucumaria longicaudata, Cucumaria obunca, Cucumaria sachalinica, Psolus regalis, Cucumaria miniata) с помощью малополярных органических растворителей. В качестве таковых используют растворители из ряда: диэтиловый эфир, ацетон, трет-бутанол, метилацетат, этилацетат. Экстракцию проводят при температуре от 20 до 40^oС в течение от 72 до 168 час. При этом экстрагируются как суммарная липидная фракция, содержащая, в частности, каротиноиды, жирорастворимые витамины, стероиды и терпеноиды, которая проявляет бактерицидные и ранозаживляющие свойства, так и тритерпеновые гликозиды, обладающие выраженным фунгицидным действием. Полученные экстракты фильтруют, растворитель выпаривают. Добавление сухого экстракта к фармацевтически приемлемой основе в количественном соотношении 0,001-0,7 мас.% позволяет получить препараты или изделия, сочетающие выраженные фунгицидные и бактерицидные свойства, и при этом не оказывающие какие-либо неблагоприятные побочные эффекты.

Пример 1.

915,2 г исходного сырья (свежие тушки Apostichopus japonicus) промывают в воде, подсушивают фильтровальной бумагой, заливают 3,6 л диэтилового эфира и экстрагируют в течение 168 час при температуре 37^oС. Фильтруют через бумажный фильтр. Растворитель выпаривают под вакуумом. Получают 30,5 г осадка фиолетового цвета, что составляет 3,3% от массы исходного сырья.

Пример 2.

Полученный по примеру 1 осадок растворяли в 8% растворе диметилсульфоксида в концентрации 5 мг/мл, по 0,1 мл в течение трех дней наносили на высеянные в чашках Петри колонии грибов: Candida albicans, Trichophyton interdigitale, Microsporon, Epidermophtyton ruhrum. Рост культур замедлялся уже через сутки в 2-3 раза.

Пример 3.

521 г исходного сырья (свежезамороженные тушки Cucumaria japonica) измельчают, заливают 2,08 л трет-бутанола и проводят экстракцию при 40^oС в течение 144 час. Фильтруют через бумажный фильтр. Сушат под вакуумом. Получают 23,76 г сухого остатка желтого цвета, что составляет 4,56% от массы исходного сырья.

Пример 4.

Результаты испытаний бактерицидных свойств препаратов, полученных по примеру 1 или 3, приведены в таблице и подтверждают их высокую противомикробную активность.

Пример 5.

Мазь на основе экстракта голотурий, полученных по примерам 1 или 3, содержит следующие компоненты, мас.%:
Вазелин - 21,5
Ланолин безводный - 78
Сухой экстракт голотурии - 0,5
Мазь приготовляют следующим образом.

Сухой экстракт голотурии растирают в шаровой мельнице в порошок, не содержащий отдельных крупинок, и загружают его по примеру 5 в эмалированный реактор с паровой рубашкой и мешалкой, в который уже загружены предварительно расплавленные вазелин и ланолин. Перемешивают, нагревают до 40^oС. Перемешивание проводят в течение 15 мин. Снижают температуру до 20^oС и расфасовывают.

Пример 6.

Мазь, полученную по примеру 5, использовали у 25 больных микробной экземой и 27 больных паховым рубромикозом. Исследуемые пациенты были в возрасте 26-50 лет, обоего пола. Мазь наносили тонким слоем на пораженные участки тела 2 раза в день.

У больных микробной экземой на 2 день после начала применения мази уменьшались зуд, инфильтрация в очаге поражения. К 5 дню разрешались признаки вторичного инфицирования.

У больных рубромикозом к 5 дню использования препарата побледнели очаги, в центре началось разрешение, значительно уплотнились папулезные высыпания по периферии очага. К концу второй недели высыпания разрешились полностью. Микроскопическое исследование на грибы с очага поражения дало отрицательный результат.

Все больные действие препарата переносили хорошо, побочных эффектов в виде обострения процесса, усиления зуда, появления новых высыпаний не наблюдалось.

Пример 7.

В терапии поверхностной ожоговой раны значительную роль играет обеспечение антисептики. Выполнение этого условия обеспечивает излечение поверхностного ожога. Предупреждение инфицирования способствует также излечению ожогов второй степени, предотвращая некроз и создавая условия для эпителизации. Многочисленные противоожоговые препараты, имеющие распространение в клинике в настоящее время, имеют ряд недостатков. Так, появление резистентных к гентамицину, левомицетину и другим антибиотикам госпитальных штаммов микроорганизмов сузило спектр применения антибиотиков. Препараты на основе сульфаниламидов практически не применяются из-за высокой токсичности. Препараты йода - бетадин, йодовидон, йодинол обладают широким спектром антимикробного действия, но связывание в открытых ранах белков с йодом часто приводит к снижению их антибактериального действия. Некоторые препараты, как, например, содержащие диоксидин, обладают канцерогенным действием. Поэтому представляло особый интерес исследование противоожоговых свойств заявленного препарата из голотурий, обладающего широким спектром бактерицидного и фунгицидного действия.

Исследования проводили на 10 добровольцах: 6 мужчинах и 4 женщинах (22-48 лет). В 5 случаях ожог был получен от действия пламени, в 2 случаях - из-за кипящей воды, у 3 людей - из-за кипящего масла. Ожоги были 1-2 степени с повреждением 0,1-2% поверхности кожи. С момента ожога до аппликации мази на основе экстракта голотурии по примерам 1 или 3 прошло от нескольких минут до трех часов. Продолжительность времени, в течение которого продолжалась терапия, варьировала от 1 до 14 дней. Использовались марлевые салфетки в один слой, пропитанные мазью. Перевязки производились через день или ежедневно. В одном случае, при ожоге кипятком пяточной области, при применении мази через несколько минут после ожога отмечено исчезновение болевого синдрома уже через две минуты от начала применения мази и ограничение развития патологического процесса гиперемией кожи, без образования пузырей. В остальных случаях отмечено полное заживление ожоговых ран, без дополнительных вмешательств, со сроком начала эпителизации 2-7 дней. Каких-либо аллергических, местнораздражающих и других побочных реакций при использовании мази не отмечено.

Пример 8.

Крем, полученный на основе экстракта голотурий по примерам 1 или 3, содержит следующие компоненты, мас.%:
Экстракт голотурии - 0,4
Масло подсолнечное - 26
Воск эмульсионный - 4
Масло парфюмерное - 19
Отдушка - 0,001
Ланолин - 50,6
В емкость с мешалкой загружают по примеру 7 предварительно расплавленные и профильтрованные ланолин, воск эмульсионный, масла подсолнечное и парфюмерное, сухой экстракт голотурии, перемешивают при нагревании до 44^oС. Эмульгируют 30 мин. Охлаждают крем до 35^oС. Добавляют отдушку. Продолжают охлаждение до 25^oС и расфасовывают.

Пример 9.

Исследование влияния препарата, полученного по примеру 8, на юношескую угревую сыпь проводили на 15 добровольцах обоего пола 18-23 лет. Крем наносили на лицо 2-4 раза в день в зависимости от распространенности сыпи. Препарат не вызывал аллергических реакций. В большинстве случаев первые признаки улучшения появлялись через 3 дня, через 2-3 недели наблюдалось значительное, а в ряде случаев и полное, очищение кожи.

Пример 10.

Крем для ухода за кожей после бритья имеет следующий состав, мас.%:
Экстракт голотурии по примерам 1, 3 - 0,02
Эмульгатор - 15 - 20
Масло оливковое - 4
Ментол - 0,03
Отдушка - 0,02
Ланолин - 60
Вода - Остальное
В реактор при перемешивании загружают по примеру 10 эмульгатор, масло оливковое, предварительно расплавленный ланолин, экстракт голотурии. Перемешивают при температуре 44^oС в течение 10 мин. Добавляют нагретую до 44^oС воду, перемешивают 10 мин. Охлаждают до 40^oС и добавляют раствор ментола в отдушке. Охлаждение и перемешивание ведут до 25^oС. Оставляют на 24 часа. После этого отправляют готовый продукт на фасовку.

Использование в качестве биологически активного вещества экстракта голотурии придает крему выраженную бактерицидную активность и высокую ранозаживляющую способность
Пример 11.

Лосьон для кожи головы содержит следующие компоненты, мас.%:
Экстракт из голотурии по примерам 1, 3 - 0,02 - 0,05
Этанол - 30 - 40
Глицерин - 2
Кислота лимонная - 0,15
Отдушка - 0,2
Вода - Остальное
Экстракт из голотурии, этанол, глицерин, часть воды по примеру 9 загружают в реактор, нагревают до 44^oС, перемешивают. Добавляют раствор лимонной кислоты, приготовленной в отдельной емкости растворением лимонной кислоты в оставшейся воде при температуре 60^oС. Массу перемешивают в течение 10 мин и охлаждают до 30^oС. Загружают в реактор отдушку. Массу охлаждают до 25^oС и подают на линию расфасовки.

Применение лосьона для волос давало положительный дерматологический эффект: устраняло воспаление и зуд кожи в первые же дни от начала использования.