Аннотация:
Изобретение относится к способам праймер-зависимого размножения нуклеиновых кислот в иммобилизованных средах, в частности, к способам обнаружения продуктов такого размножения. В изобретении предложен усовершенствованный способ идентификации, обнаружения изменений в нуклеотидной последовательности и определения числа молекул нуклеиновых кислот как отдельных молекул, так и содержащихся в клетках или во фрагментах ткани. Изобретение позволяет обнаруживать молекулярные колонии нуклеиновых кислот с помощью флуоресценции по мере роста колоний в иммобилизованной среде (в реальном времени) без осуществления дополнительной стадии гибридизации и без разгерметизации камеры, в которую заключена среда. Если колония образована более чем одной молекулой мишени, изобретение позволяет определить количество молекул мишени, давших начало данной колонии. Это, в свою очередь, позволяет определить пространственную локализацию и локальную концентрацию молекул РНК или ДНК данного вида в клетках или во фрагментах ткани, заключенных в гель на стадии полимеризации. Изобретение может найти широкое применение в качестве метода диагностики и инструмента научных исследований. 4 н. и 51 з.п. ф-лы, 11 ил.