×
16.09.2018
218.016.887c

Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР-ПДРФ-АНАЛИЗА ДЛЯ ГЕНОТИПИРОВАНИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ГЕНУ RPS3A

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области генетики и селекции сельскохозяйственных животных. Предложен способ проведения ПЦР-ПДРФ-анализа для генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A. Изобретение обеспечивает эффективную идентификацию искомых генотипов (NN, NF) по фрагментам с длинами 185 bp, 103 bp и 82 bp. 2 табл., 1 ил.

Изобретение относиться к области генетики и селекции сельскохозяйственных животных, в частности к оценке наследственного заболевания цитруллинемия (ВС) крупного рогатого скота молекулярно-генетическим методом исследования.

Существуют различные способы проведения ПЦР-ПДРФ (полимеразная цепная реакция - полиморфизм дины рестрикционных фрагментов) для генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A.

Так в способе, предложенном R. и др. (2006) [ R., Georgescu S.E., Kevorkian Steliana, Manea Maria Adina, Rebedea Mariana, Dinischiotu Anca, Tesio C.D., Costache Marieta - "Citrullinemia diagnostication on cattle breed", Zootehnie Biotehnologii, Vol. 39(1), 2006, pp. 127-130.], используются праймеры:

F 5'-GGGCCAAAAAGGTGTTCATTGAGGACATC-3';

R 5'-CAAGTATGTGTCTCACGGCGCCGCCACAGGAA-3',

инициирующие амплификацию локуса RPS3A-гена длиной 200 bp, с последующим эндонуклеазным расщеплением рестриктазой Ava II, для генерации и интерпретации образующихся генотип-спецефических фрагментов (генотип NN=112/88 bp).

ПЦР-программа:

x1: 95°С - 5 мин

х35: 95°С - 30 сек, 57°С - 30 сек, 72°С - 1 мин

х1: 72°С - 10 мин

Цель изобретения - разработка эффективного способа генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A на основе ПЦР-ПДРФ-анализа.

Сущность способа проведения ПЦР-ПДРФ-анализа для генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A, отличающийся тем, что на этапе ПЦР используются праймеры:

Используется режим амплификации:

x1: 94°C - 5 мин

х30: 94°C - 30 сек, 55°C - 30 сек, 72°C - 30 сек

x1: 72°C - 10 мин

Условия проведения реакции

Экстракция нуклеиновой кислоты из ушных выщипов крупного рогатого скота, осуществлялась перхлоратным методом с двойной очисткой (Методические рекомендации по проведению ДНК-тестирования племенных животных субъектов племенного животноводства на устойчивость к наследственным заболеваниям, утвержденные на НТС Министерства сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь №22 от 20.02.2016 г.).

ПЦР-ПДРФ выполняли согласно протоколу, представленному в табл. №1.

Праймеры:

Режим амплификации

х1: 94°С - 5 мин

х30: 94°С - 30 сек, 55°С - 30 сек, 72°С - 30 сек

х1: 72°С - 10 мин

Хранение 4-8°С

ПЦР-продукт = 200 bp

Инкубация при 37°С в течение ночи

ПЦР-ПДРФ-фрагменты:

Генотип NN = 103/82 bp,

Генотип NF = 185/103/82 bp,

Электрофорез в 3% агарозном геле

Краткое описание графических материалов

Пояснение к фиг. 1. - Электрофореграмма технического результата предложенного способа проведения ПЦР-ПДРФ-анализа для генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A

Обозначения:

М - ДНК-маркер 50bp (ОДО «Праймтех», Беларусь)

1-5 - генотип NN,

PCR - амплификация локуса RPS3A-гена длиной 198 bp

Детекцию результатов ПЦР-ПДРФ осуществляли методом горизонтального электорофореза в 3% агарозном геле в ТВЕ буфере при УФ-свете с использованием бромистого этидия.

Размеры фрагментов ДНК оценивали по подвижности в сравнении со стандартными ДНК-маркерами (ОДО «Праймтех», Беларусь).

Заключение

По результатам практических исследований, направленных на апробацию разработанного нами способа проведения ПЦР-ПДРФ-анализа для генотипирования крупного рогатого скота по гену RPS3A, нами получен обеспечиваемый заявленным способом технический результат, выраженный в эффективной идентификации искомых генотипов (NN, NF) ввиду корректной интерпретации генерируемых генотип-спецефических фрагментов (NN=103/82 bp, NF=185/103/82 bp), где ПЦР-ПДРФ-фрагменты с длинами 185 bp, 103 bp и 82 bp являются идентификационными.

Источник информации

1. R., Georgescu S.E., Kevorkian Steliana, Manea Maria Adina, Rebedea Mariana, Dinischiotu Anca, Tesio C.D., Costache Marieta - "Citrullinemia diagnostication on cattle breed", Zootehnie Biotehnologii, Vol. 39(1), 2006, pp. 127-130.


СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР-ПДРФ-АНАЛИЗА ДЛЯ ГЕНОТИПИРОВАНИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ГЕНУ RPS3A
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 31-40 из 42.
01.08.2019
№219.017.bb12

Конструкция для проведения испытаний на адгезионную прочность дисперснонаполненных композитов на клеевой самотвердеющей основе

Изобретение относится к области испытаний покрытий, полученных различными способами, и может быть использовано для определения адгезионной прочности композиционных материалов с дисперсным наполнителем и самотвердеющей клеевой основой. Конструкция состоит из массивной обоймы, представляющей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696065
Дата охранного документа: 30.07.2019
01.08.2019
№219.017.bb16

Приспособление для определения адгезионной прочности клееполимерных дисперсных самотвердеющих композитов

Изобретение относится к испытательной технике, в частности к определению прочности сцепления клееполимерных дисперснонаполненных самотвердеющих композитов. Приспособление состоит из матрицы, которая крепится во внутренней части массивной обоймы, и штока, имеющего цилиндрическую форму, для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002696063
Дата охранного документа: 30.07.2019
04.10.2019
№219.017.d24e

Установка для приготовления и раздачи кормосмесей

Изобретение относится к области сельского хозяйства и предназначено для приготовления и раздачи кормосмесей на фермах крупного рогатого скота. Установка для приготовления и раздачи кормосмесей содержит мобильный кормосмеситель, отдельно для каждого используемого рациона кормления загрузочные...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002701966
Дата охранного документа: 02.10.2019
25.12.2019
№219.017.f23a

Система пылеудаления при выгрузке сыпучих материалов в приемный бункер

Изобретение относится к устройствам для обеспыливания при погрузочно-разгрузочных работах и может быть использовано в пищевой промышленности и производстве кормов для животных, где происходит образование пылей с различными физико-химическими свойствами. Техническим результатом изобретения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002710034
Дата охранного документа: 24.12.2019
01.02.2020
№220.017.fc0e

Тележка для сбора ягод земляники садовой индивидуального использования

Группа изобретений относится к области сельскохозяйственного машиностроения. Тележка по первому варианту содержит раму, опирающуюся на три колеса, сиденье для сборщика, площадку для наполняемой тары и кассету для порожней и наполненной тары. Рама состоит из двух соединенных разъемным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002712688
Дата охранного документа: 30.01.2020
24.04.2020
№220.018.1850

Способ уменьшения микроволнистости колец подшипников качения

Изобретение относится к устройству подшипника качения. Заявлен способ уменьшения микроволнистости колец подшипников качения. На поверхность колец нового подшипника пипеткой наносится смесь глицерина с абразивным порошком 5-10 мкм в 4-5 местах после удаления заводской смазки. На диагностическом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002719715
Дата охранного документа: 22.04.2020
21.06.2020
№220.018.2876

Способ для проведения испытаний на адгезионную прочность клееполимерных дисперсно-армированных композитов

Изобретение относится к испытательной технике, в частности к определению адгезионной прочности клееполимерных дисперсно-армированных композитов с подложкой из различных материалов. Сущность: испытания проводятся путем проворачивания цилиндрического рабочего элемента, зафиксированного в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002723965
Дата охранного документа: 18.06.2020
06.07.2020
№220.018.2f93

Наклонная камера зерноуборочного комбайна

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Наклонная камера зерноуборочного комбайна включает плавающий транспортер со скребками, решетчатое днище со сквозными продолговатыми отверстиями и устройство для отвода свободного зерна в виде щетки. Щетка смонтирована после скребка...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002725729
Дата охранного документа: 03.07.2020
12.04.2023
№223.018.479a

Подающий барабан молотильного устройства зерноуборочного комбайна

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению и может быть использовано в зерноуборочных комбайнах. На цилиндрической поверхности 1 подающего барабана по винтовым линиям 6-9 многозаходного винта размещены сориентированные радиально правосторонние 2 и левосторонние 3 захватные...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002749739
Дата охранного документа: 16.06.2021
12.04.2023
№223.018.47b1

Прицепная сцепка

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению, в частности к устройствам для соединения почвообрабатывающих орудий с трактором. Прицепная сцепка включает несущий брус, опирающийся на колеса, и сницу, представляющую собой перпендикулярную несущему брусу тягу с двумя раскосами,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002740104
Дата охранного документа: 11.01.2021
+ добавить свой РИД