Результат интеллектуальной деятельности: Средство для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом и способ его получения

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для получения средства для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом.

Средства для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом в доступных авторам источниках информации не обнаружены.

Технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается в получении средства для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом.

Указанный технический результат достигается тем, что средство для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом содержит лиозольную составляющую диспергированной плаценты (например, плаценты денатурированной эмульгированной) человека или животного.

Указанный технический результат достигается также тем, что средство для стимуляции получают путем замораживания смеси диспергированной плаценты с растворителем (водным раствором соли, изотоничным плазме крови), ее последующего размораживания и выделения из размороженной смеси лиозольной составляющей.

Средство получают следующим образом.

К диспергированной плаценте, например, денатурированной эмульгированной (ПДЭ) добавляют растворитель - водный раствор соли, например, физиологический раствор (стерильный 0,9% раствор хлористого натрия), в результате чего снижается концентрация дисперсной фазы смеси, что приводит к уменьшению коагуляционных контактов между частицами и прекращению гелеобразования. Затем смесь замораживают, что приводит к формированию золь-гель перехода. Затем смесь размораживают, в результате чего она преобразуется в смесь твердой и лиозольной составляющих, из которой фильтрованием выделяют лиозольную составляющую.

Полученная лиозольная составляющая (ПДЭ-М) содержит основные белки плаценты (трофобластный бета1-гликопротеин и хорионический гонадотропин) в более высоких концентрациях, чем исходный препарат (таблицы 1 и 2). В результате получается растворимая в воде субстанция с высокой концентрацией активных компонентов плаценты, которая может быть стерилизована путем последующего мембранного фильтрования. Это позволяет использовать ПДЭ-М в инъекционных лекарственных препаратах. Сохранение в ПДЭ-М активных компонентов ПДЭ доказывается способностью ПДЭ-М стимулировать продукцию соматотропного гормона (таблица 3).

Ниже приведен конкретный пример получения средства для стимуляции выработки соматотропного гормона гипофизом.

Смешали 100 мл ПДЭ (ТУ 9358-001-48552915-07) со 150 мл 0,9% физиологического раствора в пластиковом флаконе. Флакон разместили на магнитной мешалке и перемешивали его содержимое со скоростью 100 об/мин в течение 5 мин. Полученную смесь поместили в холодильник и выдерживали в нем при температуре -20°С в течение 24 часов. Затем оттаяли смесь при комнатной температуре и отфильтровали с помощью лавсановой фильтровальной ткани (ФЛ-4, ГОСТ 26095-84). Хранение полученного средства при температуре -20°С обеспечивает его пригодность для использования в течение 1 года.

Сравнение ПДЭ и ПДЭ-М по содержанию трофобластического бета1-гликопротеина (ТБГ).

Трофобластический бета1-гликопротеин (ТБГ) - специфический белок беременности. В зарубежной научной литературе ТБГ чаще обозначается как SP-1 (Schwangerschaft Protein 1) или PSG (pregnancy specific glycoprotein). Трофобластический β-1-гликопротеин (ТБГ) представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 75 кДа. ТБГ является специфическим маркером беременности. ТБГ продуцируется клетками синцитиотрофобласта, начиная с их дифференциации из клеток ворсинчатого цитотрофобласта. ТБГ включает в себя группу протеинов, синтезируемых преимущественно в плаценте.

Определение концентрации ТБГ производят с помощью набора реагентов «ТБГ-ИФА-БЕСТ», предназначенного для иммуноферментного исследования ТБГ в сыворотке крови человека, согласно инструкции производителя. Минимальная концентрация ТБГ, достоверно определяемая набором составляет 1,5 нг/мл.

Результаты исследования 5 серий ПДЭ до модификации и после модификации (ПДЭ-М) представлены в таблице 1. ПДЭ-М содержит в пересчете на 1 мл в 1,5 раза больше ТБГ (разница достоверна, р<0,05).

Сравнение ПДЭ и ПДЭ-М по содержанию хорионического гонадотропина человека (ХГЧ).

Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 36700 Да, состоящей из альфа и бета-субъединиц. ХГЧ является одним из важнейших маркеров беременности, а также опухолевым маркером.

Определение концентрации ХГЧ проводят с помощью набора реагентов «ХГЧ-ИФА-БЕСТ», предназначенного для иммуноферментного определения ХГЧ в сыворотке крови человека. Минимальная концентрация ХГЧ, достоверно определяемая набором составляет 2 МЕ/л.

Результаты исследования 5 серий ПДЭ до модификации и после модификации (ПДЭ-М) представлены в таблице 2. ПДЭ-М содержит в пересчете на 1 мл в 2,2 раза больше ХГЧ (разница достоверна, р<0,05).

Использование ПДЭ-М в препарате Гамавит для повышения продукции соматотропного гормона и увеличения живой массы у поросят.

В опыте используют препарат Гамавит, в состав которого входят: нуклеинат натрия - 0,002%, ПДЭ-М - 0,05%, среда 199 (10-ти кратная) - 10%, вода для инъекций - до 100%.

Гамавит вводят поросятам породы Ландрас в возрасте от 0 до 7 дней. Аспирацию крови выполняют через 3 часа после введения препарата, на 2, 3, 4, 6 сутки эксперимента.

Исследования были проведены по следующей схеме.

15 поросятам 1 группы (опытной) вводят Гамавит в дозе 0,5 мл/кг ж.м., внутримышечно, на 1, 2, 3, 5 сутки эксперимента.

15 поросятам 2 группы (контрольная) вводят физиологический раствор NaCl в дозе 0,5 мл/кг ж.м., внутримышечно, на 1, 2, 3, 5 сутки эксперимента.

Для определения соматотропного гормона в сыворотке крови (плазме) использовали набор реагентов для иммуноферментного анализа «ГР-ИФА», (ООО «Сhemа»).

Результаты представлены на рис. 1. Концентрация СТГ в крови опытных поросят на всех сроках исследования выше, чем у контрольных животных. Следствием этого были более высокие показатели привесов в опытной группе (таблица 3).