Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ ЛОПУХА БОЛЬШОГО

Изобретение относится к фармации и медицинской промышленности, а именно к получению биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья, и может быть использовано для получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого.

Листья лопуха большого используются при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сахарном диабете, мочекаменной болезни, воспалениях слизистых оболочек, ожогах кожных покровов, а фармакологический эффект обусловлен водорастворимыми соединениями, основу которых составляют водорастворимые полисахариды [Л.М. Федосеева, О.А. Ковалев, М.А. Биндюк. Установление оптимальных условий экстракции листьев лопуха большого с использованием методов математического планирования // Химия растительного сырья. - 2011. - №4. - с. 273-276].

Известен способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью, по патенту РФ 2171680 [МПК А61K 35/78, А61Р 29/00, опубл. 10.08.2001], где в качестве растительного сырья используют листья лопуха войлочного (Arctium tomentosum Mill), которые экстрагируют в батарее из 5 перколяторов 40%-ным этанолом с интервалом слива в 17 ч при соотношении сырье-этанол 1:1.

Известен способ получения суммы полисахаридов, обладающих противовоспалительной активностью по патенту РФ 2177793 [МПК А61К 35/78, А61К 31/715, А61Р 29/00, С08В 37/00, опубл. 10.01.2002 г.]. В качестве сырья используют траву или шрот травы мальвы низкой. Сырье экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье : экстрагент 1:10 в течение 30 минут. Повторное извлечение и отделение сырья проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. Полисахариды осаждают четырехкратным количеством 96%-ного этанола при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом и высушивают. Причем, выход порошка суммы полисахаридов 13,6% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса.

Наиболее близким к заявленному способу является способ получения водорастворимых полисахаридов, осуществляемый путем экстрагирования растительного сырья горячей водой, упаривания экстракта, осаждения целевого продукта, его промывки и осушки [RU 2232774, МПК С08В 37/00, А61К 35/78, опубл. 20.07.2004 г.]. В качестве исходного сырья используют шрот травы фиалки душистой (Viola odorata L.) после экстракции полифенольных соединений 70%-ным этанолом. Затем шрот экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье : экстрагент 1:10 в течение 30 минут, повторное извлечение проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. После этого полисахариды осаждают трехкратным количеством 96%-ного этилового спирта при комнатной температуре. Плотный осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом, ацетоном и затем сушат при температуре 70-75°С. Причем, выход порошка суммы полисахаридов 10,5% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса и невысокий выход целевого продукта.

Технической задачей настоящего изобретения является разработка эффективного способа получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого.

Технический результат изобретения заключается в увеличении выхода целевого продукта и сокращении длительности процесса извлечения водорастворимых полисахаридов.

Технический результат достигается тем, что в способе получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающем трехкратное экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным количеством этилового спирта, фильтрование осадка, промывание и высушивание, согласно изобретению, в качестве растительного сырья используют листья лопуха большого, измельченные до линейного размера в 0,5-1 мм; экстрагирование проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15 в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 10 мин при температуре воды 80°С; растительный материал отделяют путем фильтрации; осаждение проводят 95% этанолом при температуре -18°С в течение 30 мин; фильтрование осадка проводят через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре проводят последовательно 15 мл раствора (3:1) 95% этилового спирта в очищенной воде в соотношении сырье : раствор 1:15 и 10 мл смеси (1:1) этилацетата и 95% этилового спирта в соотношении сырье: раствор 1:10; высушивание фильтра с осадком проводят при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы.

На фиг. 1 представлена таблица 1 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании степени измельчения сырья и температуры ультразвуковой бани.

На фиг. 2 представлена таблица 2 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании степени кратности экстракции и длительности экстрагирования.

На фиг. 3 представлена таблица 3 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании соотношением сырья и экстрагента.

Пример 1. Для получения водорастворимых полисахаридов аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром 0,5-1 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 15 мл воды очищенной, нагретой до температуры кипения, помещают в ультразвуковую ванну с частотой 35 КГц при температуре 80°С, экстрагируют 10 мин. Экстракцию повторяют еще 2 раза, прибавляя по 15 мл воды.

Водные извлечения объединяют и фильтруют через 3 слоя марли с подложенным тампоном ваты, вложенных в стеклянную воронку. Осаждение проводят троекратным количеством 95%-ного этилового спирта, перемешивают, охлаждают в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 мин. Затем содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы.

Пример 2. Для количественного определения содержания полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье проводят экстрагирование согласно примеру 1, все водные извлечения объединяют в колбе на 50 мл, фильтруют и доводят объем раствора до метки (раствор А).

25 мл раствора А помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавляют 75 мл 95% этилового спирта, перемешивают, охлаждают в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 мин. Затем содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95% этилового спирта в воде очищенной (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95% этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по стандартной формуле:

где m₁ - масса высушенного фильтра, г; m₂ - масса высушенного фильтра с осадком, г; m - навеска сырья, г; W - потеря в массе сырья при высушивании, %.

Предлагаемый способ позволяет интенсифицировать процесс получения водорастворимых полисахаридов и снизить время, расходуемое на него до 1,5 часов, а также увеличить выход продукта до 11,63% в пересчете на абсолютно сухое сырье.