ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ КОМБИНАЦИЮ МЕМАНТИНА И МЕЛАТОНИНА

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности, а именно к комбинированному препарату мелатонина и мемантина.

Мемантин (или 3,5-диметиладамантан-1-амин) представляет собой производное адамантана следующего строения:

Являясь неконкурентным антагонистом М-метил-D-аспартат (NMDA)-рецепторов, оказывает модулирующее действие на глутаматергическую систему. Регулирует ионный транспорт, блокирует кальциевые каналы, нормализует мембранный потенциал, улучшает процесс передачи нервного импульса. Обладает ноотропным, церебровазодилатирующим, противогипоксическим и психостимулирующим действием, улучшает когнитивные процессы, повышает повседневную активность, уменьшает утомляемость и симптомы депрессии, уменьшает спастичность, вызванную заболеваниями и повреждениями мозга [Регистр лекарственных средств: http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_2206.htm].

Мелатонин (или N-ацетил-5-метокситриптамин) представляет собой синтетический аналог гормона, вырабатываемого эпифизом, следующего строения:

В физиологических условиях секреция мелатонина повышается вскоре после наступления темного времени суток, достигает максимальных значений в 2-4 часа ночи и снижается в течение второй половины ночи. Содержание эндогенного мелатонина снижается с возрастом. Мелатонин контролирует циркадные ритмы и восприятие цикла день-ночь, обладает снотворным эффектом и улучшает засыпание, адаптирует организм к быстрой смене часовых поясов, снижает стрессовые реакции, проявляет иммуностимулирующие и выраженные антиоксидантные свойства, тормозит секрецию гонадотропинов и, в меньшей степени, других гормонов аденогипофиза - кортикотропина, тиреотропина и соматотропина [Регистр лекарственных средств: http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_2278.htm].

Из уровня техники [патент RU 2536270 С1, опубл. 20.12.2014] известно применение комбинации мемантина и мелатонина, эффективной в отношении устранения нарушений у больных с патологиями мозга, для профилактики, коррекции и терапии проявлений амилоидной интоксикации. В указанном документе показано, что комбинация мемантина с мелатонином обладает синергетическим действием в отношении улучшения когнитивной дисфункции и снижения концентрации агрегатов бета-амилоида - протеина, скопления которого образуют амилоидные бляшки в мозге пациентов, страдающих болезнью Альцгеймера. Фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию мемантина и мелатонина, может быть представлена в виде таблетки, капсулы, инъекционной формы и т.д., и может дополнительно включать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.

Однако в указанном документе не раскрываются конкретные варианты фармацевтических композиций, содержащих комбинацию мемантина и мелатонина, при этом фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества представлены в общем виде и не указываются предпочтительные из них. Кроме того, в документе синергетический эффект демонстрируется при применении только комбинации мемантина и мелатонина, а не конкретной лекарственной формы, включающей указанную комбинацию совместно с какими-либо вспомогательными веществами.

Ближайшим аналогом (прототипом) настоящего изобретения является фармацевтическая композиция в виде твердой лекарственной формы [патент RU 2488388 С1, опубл. 27.07.2013; заявка на патент WO 2015060746 А1, опубл. 30.04.2015], содержащая комбинацию мемантина и мелатонина и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества при следующем соотношении компонентов, мас. %:

Разбавитель выбирается из лактозы, крахмала, производного крахмала, микрокристаллической целлюлозы, сукрозы, инвертированого сахара, декстрозы и декстрата; дезинтегрирующегий агент выбирается из натрий карбокиметилцеллюлозы, кроскармелозы, желатинированного крахмала; связующее выбирается из поливинилпирролидона, желатина, производных целлюлозы, природных камедей, полиэтиленгликолей, альгината натрия; антифрикционный агент выбирается из стеариновой кислоты и/или ее солей, коллоидного диоксида кремния, талька, бензоата натрия, ацетата натрия и олеата натрия.

В качестве недостатков можно отметить отсутствие в указанном источнике данных по изучению стабильности и скорости растворения представленной фармацевтической композиции в виде твердой лекарственной формы.

Задача настоящего изобретения состоит в расширении арсенала фармацевтических композиций, содержащих комбинацию мемантина и мелатонина.

Технический результат настоящего изобретения заключается в повышении безопасности, стабильности при хранении и скорости растворения фармацевтической композиции, содержащей комбинацию мемантина и мелатонина.

Задача настоящего изобретения решается, а указанный технический результат достигается новой фармацевтической композицией в виде твердой формы для профилактики и лечения психических, поведенческих, когнитивных расстройств, содержащей:

- от 2,0 до 15,0% мас. мемантина;

- от 1,0 до 10,0% мас. мелатонина;

- от 75,0 до 97,0% мас. вспомогательные вещества.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения фармацевтическая композиция включает:

- от 2,0 до 15,0% мас. мемантина;

- от 1,0 до 10,0% мас. мелатонина и/или

- от 65,0 до 80,0% мас. наполнителя и/или

- от 4,0 до 15,0% мас. дезинтегранта и/или

- от 1,0 до 2,0% мас. связывающего вещества и/или

- от 1,0 до 2,5% мас. подсластителя и/или

- от 0,5 до 1,0% мас. скользящего вещества и/или

- от 1,5 до 3,0% мас. ароматизатора.

При этом наполнитель выбирается из маннитола или смеси маннитола с коповидоном, дезинтегрант выбирается из кросповидона, натрийкарбокиметилцеллюлозы, кроскармелозы, желатинированного крахмала, связывающее вещество выбирается из сорбитола, поливинилпирролидона, желатина, производных целлюлозы, природных камедей, полиэтиленгликолей, альгината натрия, подсластитель выбирается из мальтитола, сахарината натрия или их смеси, сукралозу, ацесульфам калия, скользящее вещество выбирается из коллоидного диоксида кремния, стеариновой кислоты и/или ее солей, талька или их смесей, стеариновой кислоты и/или ее солей, коллоидного диоксида кремния, талька, бензоата натрия, ацетата натрия и олеата натрия.

В качестве ароматизатора могут использоваться любые, которые обычно используются при изготовлении фармацевтических композиций в форме таблеток. Предпочтительно ароматизатор выбирается из мятного, ментолового, клубничного, апельсинового или лимонного. Данный выбор веществ является предпочтительным, но не ограничивается только приведенными вариантами.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения таблетка является диспергируемой в полости рта.

Еще в одном варианте осуществления изобретения количество мемантина составляет 2,5-10,0% мас., предпочтительно 2,5% мас., а количество мелатонина составляет 1,5-6,0% мас., предпочтительно 1,5% мас.

Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению применяются для профилактики и лечения психических, поведенческих, когнитивных расстройств и нарушений, в том числе при деменции различной степени выраженности. Средство может быть показано при следующих медицинских состояниях, которые сопровождаются клиническими проявлениями органического психосиндрома (и его наиболее существенного компонента - деменции): болезнь Альцгеймера, сосудистая (мультиинфарктная) деменция, алкоголизм, внутричерепные объемные процессы - опухоли, субдуральные гематомы и мозговые абсцессы, аноксия, черепно-мозговая травма, нормотензивная гидроцефалия, болезнь Паркинсона, хорея Гентингтона, прогрессирующий супрануклеарный паралич, болезнь Пика, боковой амиотрофический склероз, спиноцеребеллярные дегенерации, офтальмоплегия в сочетании с метахроматической лейкодистрофией (взрослая форма), болезнь Геллервордена - Шпатца, гашишный психоз, поздние стадии, инфекции, болезнь Крейтцфельдта - Якоба, вирусные энцефалиты, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия, нейросифилис, болезнь Бехчета, хронические бактериальные и грибковые менингиты; Дефицитные состояния, синдром Гайе - Вернике - Корсакова - недостаточность тиамина, недостаточность витамина В12, недостаточность фолиевой кислоты, недостаточность витамина В3, пеллагра; Метаболические нарушения, диализная деменция, гипо- и гиперфункция щитовидной железы, тяжелая почечная недостаточность, синдром Кушинга, печеночная недостаточность, болезни паращитовидных желез, системная красная волчанка и другие коллагеновые болезни, сопровождающиеся церебральными васкулитами, рассеянный склероз, болезнь Уиппла.

Способ получения указанной фармацевтической композиции в форме таблетки включает взвешивание и просеивание исходных веществ, их смешивание и таблетирование. Предпочтительно таблетирование осуществляют методом прямого прессования. Готовые таблетки могут быть упакованы в блистеры, а блистеры в картонные пачки.

Хотя изобретение представлено в данном документе с учетом различных типичных практических способов применения, необходимо учитывать, что эти варианты практического применения представляют собой лишь описание принципов существующего изобретения и его применения. Специалисты, являющиеся экспертами в данной области знаний, могут видеть, что возможно существование множества модификаций типичных вариантов практического применения изобретения, не выходящих за область изобретения.

Кроме того, необходимо учитывать, что различные особенности и/или характеристики разных способов практического применения изобретения могут быть объединены. Следовательно, нужно понимать, что могут существовать многочисленные модификации в дополнения к описанным вариантам практического применения, и могут быть разработаны другие способы использования, не выходящие за область изобретения.

Кроме того, специалисты в конкретной области специальных знаний могут увидеть другие варианты практического применения изобретения после ознакомления с представленным описанием к изобретению, а также после практического использования изобретения, представленного в данном документе. Предполагается, что разделы описания и примеры будут восприняты только как иллюстрация типичного применения, в соответствии с данной областью знания и указаниями данной заявки на изобретение.

Варианты композиций

Варианты 1-3

Варианты 4-6

Варианты 7-9

Варианты 10-12

Варианты 13-15

Пример 1

Для подтверждения синергии эффектов были проведены несколько опытов на животных моделях.

Для этого брали активные вещества Мелатонини 3 мг/Мемантин 10 мг; Мелатонини 5 мг/Мемантин 20 мг; Мелатонини 10 мг/Мемантин 20 мг, и переводили дозировки, рекомендуемые для человека, адаптированные для мыши, по формуле «(активное вещество/70(ср. масса человека))×7». Для этого указанные композиции растворяли в 5 мл раствора и в соответствии с приведенной формулой, вводили животным внутрибрюшинно, один раз в день в течение 5-ти дней.

Действие композиций на факторы обучения и памяти исследовали на белых нелинейных мышах-самцах, массой 20+/-4 гр., используя условную реакцию пассивного избегания (УРПИ) электросудорожного шока (ЭСШ) (Я. Буреш и соавт., 1991; К.М. Дюмаев и соавт., 1995).

В качестве амнезирующего воздействия применили электросудорожный шок (ЭСШ), параметры электрического тока: 50 Гц, 50 мА, 0,3 с, который наносили мышам с помощью электродов в виде клипс, фиксируемых на ушных раковинах, транспиннеально, сразу после обучения УРПИ («Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», 2000). У животных контрольной группы вызывали псевдоэлектросудорожный шок: накладывали пиннеальные электроды для нанесения ЭСШ без подачи электрического тока. Тестирование мышей на сохранение УРПИ производили через определенные промежутки времени после ЭСШ.

Тест УРПИ является основной моделью для оценки влияния веществ на формирование и воспроизведение кратковременной памяти в норме и в условиях его нарушения, искусственная амнезия. И УРПИ наиболее информативный из применяемых сегодня методов оценки эффективности веществ с влиянием на ЦНС млекопитающих («Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», 2000). Выработку УРПИ (условный рефлекс пассивного избегания в темной, светлой камере) у мышей производили на основе электрокожного подкрепления по методу Cumin et al. (1982) с учетом рекомендаций Mondadori et al. (1990). Установка для мышей Lafayette Instrument Co., США представляла собой камеру черного цвета с электродным полом и белой пластиковой платформой, которую располагали на полу в центре камеры. Мышей, по одному помещали на пластиковую платформу. Животные спускаются/спрыгивают с платформы на электродный пол, где они получают удар электрическим током, т.н. наказание. Электрический ток подавали, поле того как животное опиралось всеми четырьмя лапами. Естественной реакцией животного является возвращение на бестоковую или же безопасную платформу. После нескольких минут обучения, в среднем около 5 мин, у мышей вырабатывалась УРПИ и они оставались на безопасной платформе. Тесты на запоминание УРПИ проводили через последовательные промежутки времени после амнезирующего воздействия. В случае, когда животное спускалось/спрыгивало на платформу в течение 1 мин, у него отмечали ретроградную амнезию навыка пассивного избегания. Изучение композиций проводились в сравнении с Мелатонином 5 мг (моноприменение) и Мемантином 10 мг (моноприменение), в соответствии с вышеприведенной формулой адаптирования к животным моделям.

Влияние исследуемых композиции на амнезию у мышей, вызванную электросудорожным шоком (ЭСШ)

Таким образом, что ЭСШ вызывал у большинства мышей ретроградную амнезию навыка пассивного избегания, у 80% животных (р<0,001) через 24 ч наблюдалась амнезия усвоенных навыков. Мелатонин и Мемантин изменяли амнестическое действие. Композиции, содержащая Мемантин и Мелатонин, значимо (р<0,05) ослабляла амнестический эффект. При этом по выраженности действия исследуемых композиций превосходили и Мелатонин, и Мемантин по отдельности.

Пример 2. Определение стабильности при хранении таблеток, полученных в соответствии с вариантами 1-15.

Стабильность при хранении таблеток, полученных по вариантам 1-15, оценивали по содержанию мемантина и мелатонина, а также наличию примесей, и сравнивали ее со стабильностью таблеток, полученных в соответствии с прототипом [патент RU 2488388 С1, опубл. 27.07.2013]. Таблетки, полученные в соответствии с вариантами 1-15 и в соответствии с прототипом, были упакованы в блистеры из алюминиевой фольги ('Alu-Alu') и помещены в климатическую камеру на 6 месяцев в условия ускоренных и долгосрочных («в реальном времени») испытаний. Содержание мемантина, мелатонина и каких-либо примесей определялось методом ВЭЖХ с использованием стандартов.

Установлено, что после 2-х и 3-х лет хранения таблетки, полученные по вариантам 1-15, обладали практически равноценными показателями стабильности и оставались химически чистыми (содержание мемантина и мелатонина уменьшалось не более чем на 0,1%, примесей не присутствовало). Таблетки, полученные в соответствии с прототипом, оставались химически чистыми в течение 1,5 лет, далее содержание мемантина и мелатонина уменьшалось более чем на 0,1%. То есть таблетки, соответствующие вариантам 1-15, настоящего изобретения являются более стабильными по сравнению с прототипом.

Пример 3. Сравнение профилей растворения таблеток в соответствии с вариантами 1-15 и полученных в прототипе.

Представленные результаты показывают, что таблетки, полученные по вариантам 1-15 настоящего изобретения, имеют намного лучший профиль растворения, чем таблетка, полученная в соответствии с прототипом, что иллюстрирует важность конкретных вспомогательных веществ и соотношений для составов, содержащих комбинацию мемантина и мелатонина.

Настоящее изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами.

В примерах представлены предлагаемые согласно настоящему изобретению фармацевтические композиции в форме таблетки, включающие комбинацию мемантина и мелатонина, которые носят иллюстрирующий характер и никоим образом не ограничивают объем притязаний.

Пример 4

Способ получения фармацевтической композиции в соответствии с примером включает взвешивание и просеивание исходных веществ (как активных, так и вспомогательных), их смешивание и таблетирование. Таблетирование осуществляли методом прямого прессования. Были изготовлены плоскоцилиндрические таблетки белого цвета с фаской со слабым характерным запахом.

Пример 5. Изучение острой токсичности препарата

Характеристика исследуемых групп

При исследовании острой токсичности были сформированы группы из 5 самок и 5 самцов мышей, а также из 5 самок и 5 самцов крыс для каждой дозы и каждого пути введения.

Внутрижелудочное введение мышам комбинации субстанций мемантина и мелатонина в соотношении, соответствующем их соотношению в препарате «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» (5:3)

Внутрибрюшинное введение мышам комбинации субстанций мемантина и мелатонина в соотношении, соответствующем их соотношению в препарате «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» (5:3)

Внутрижелудочное введение крысам комбинации субстанций мемантина и мелатонина в соотношении, соответствующем их соотношению в препарате «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» (5:3)

Внутрибрюшинное введение крысам комбинации субстанций мемантина и мелатонина в соотношении, соответствующем их соотношению в препарате «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» (5:3)

Внутрижелудочное введение крысам препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания»

Внутрижелудочное введение крысам препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания»

Дозы, необходимые для расчета LD₅₀, установлены экспериментальным путем.

Расчет LD₅₀ производили с использованием пробит-анализа по методу Прозоровского.

Результаты изучения острой токсичности препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» и комбинации субстанций мемантина и мелатонина

Определение летальных доз

При исследовании острой токсичности дозы были подобраны экспериментально, расчет доз осуществляли по мемантину как более токсичному компоненту.

Результаты изучения острой токсичности препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» и комбинации субстанций мемантина и мелатонина в соотношении, соответствующем их соотношению в препарате «Мемантин + Мелагонин, таблетки для рассасывания» (5:3)

Выводы по результатам изучения острой токсичности

Анализ результатов изучения острой токсичности комбинации субстанций в соотношении, соответствующем имеющемуся в препарате «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» (5:3), показал, что комбинация субстанций при внутрижелудочном введении проявляет токсические свойства в дозах, позволяющей отнести ее по классификации Hodge и Sterner к веществам со степенью токсичности III - умеренно токсичным. По классификации К,К. Сидорова при введении в брюшную полость комбинация субстанций относится к классу IV - малотоксичные вещества.

Для препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания», при внутрижелудочном введении, с учетом содержания действующих веществ в исследуемых таблетках для рассасывания, результаты токсикометрии, данные наблюдений за экспериментальными животными на протяжении 14 дней после острого введения, а также данные некропсии позволяют отнести препарат «Мемантин + Мелатонин.» (по готовой лекарственной форме) к V классу практически нетоксичных лекарственных веществ (II Hodge et ah Clinical Toxicology of Commercial Products. Acute Poisoning. Ed. IV, Baltimore, 1975, 427p.; K.K. Сидоров, 1977).

Пример 6. Токсичность при многократном введении

Токсичность при многократном введении

Изучение хронической (180-дневной) токсичности было проведено на аутбредных крысах Wistar (90 самцов и 90 самок, всего 180 крыс). При исследовании хронической токсичности животных делили на 9 групп по 20 животных в каждой группе (10 самок и 10 самцов). Препараты вводили внутрижелудочно.

Анализ данных изучения хронической токсичности показал, что в группах сравнения наблюдалась единичная смертность, которая, вероятно, была связана с развитием сердечно-легочной недостаточности. Значения массы тела животных, потребление корма и воды находились в пределах физиологической нормы.

Исследуемый препарат, препараты сравнения и комбинация препаратов сравнения не оказывали негативного влияния на поведение животных.

Частота нарушений биоэлектрической активности сердца при введении исследуемого препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» соответствует частоте аналогичных нарушений, возникающих при введении препарата мемантина, что свидетельствует об отсутствии эффекта потенциирования компонентов комбинированного препарата.

Введение препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания» практически не оказывает негативного влияния на гемопоэз. Зафиксированные статистически достоверные относительно контроля отклонения (лейкоциты, моноциты, эритроциты, гемоглобин, гематокрит, MCV, МСН, тромбоциты) находились в пределах физиологической нормы. Явления потенциирования токсического эффекта фармацевтических субстанций в исследуемом препарате отсутствуют.

Показатели гемостаза находились в пределах физиологической нормы.

При изучении результатов биохимического исследования крови четкой закономерности полученных результатов относительно других показателей не наблюдалось, что свидетельствовало о функциональном характере обнаруженных отклонений, не вызывавших при данном режиме и длительности введения препаратов выраженных цитолитических явлений, что было подтверждено гистологическими исследованиями. Явления потенциирования компонентов (мемантин+мелатонин) отсутствовали.

Результаты анализа мочи свидетельствуют о том, введение в течение 180 дней исследуемого препарата, препаратов сравнения и комбинации препаратов сравнения приводили к появлению в моче белка и клеток крови. Изменения носили стойкий характер. Полученные результаты подтверждают ранее выявленные при клинических осмотрах, и описанные случаи изменения цвета мочи и появления выделений из мочеиспускательного канала. Гистологическое исследование патологических процессов в почках не выявило. Таким образом, данные эксперимента показывают, что повреждение не касалось структуры почек и их функционального состояния. Изменения состава и свойств мочи в равной мере были выражены у исследуемого препарата, препаратов сравнения и комбинации препаратов сравнения. Эффект потенциирования отсутствует.

Изучение гистоморфологической структуры внутренних органов не выявило признаков патологических изменений после введения исследуемого препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания», препаратов сравнения и комбинации препаратов сравнения мемантин + мелатонин. Местнораздражающее действие отсутствовало.

Данные проведенных исследований общетоксических свойств препарата позволяют сделать вывод об отсутствии потенциирования токсических эффектов компонентов комбинированного лекарственного препарата «Мемантин + Мелатонин, таблетки для рассасывания».

Пример 7. Исследование фармакологической активности

Нейропротективную активность композиций, полученных в примерах 1-3 и содержащих комбинацию мемантина и мелатонина, исследовали на модели нейротоксичности, вызванной L-глутаматом на примарной культуре нейронов головного мозга и сравнивали ее с нейропротективной активностью отдельно мемантина и мелатонина.

Опыты проводились на примарной культуре гранулярных нейронов мозжечка крысы. Гранулярные нейроны мозжечка представляют собой практически однородную популяцию интернейронов. Митотическая активность этих клеток заканчивается в первые 4-6 дней постнатального периода, что позволяет выделять эти клетки для получения нейрональной культуры у крысят в возрасте 6-8 дней. В определенных условиях in vitro эти клетки диффренцируются на 80-90% в гранулярные нейроны, что позволяет проводить исследования на достаточно гомогенной популяции нервных клеток. По химическому фенотипу гранулярные нейроны в основном глутаматергические. На наружных мембранах этих нейронов экспрессируются все подтипы глутаматных рецепторов и поэтому гранулярные нейроны характеризуются высокой чувствительностью к токсическому действию глутамата и других возбуждающих аминокислот: каиновой кислоте и N-метил-D-аспартата. В связи с этим, примарная культура гранулярных нейронов широко используется для оценки нейропротективного действия фармакологических веществ.

Для приготовления одной культуры использовалось 6-8 крысят в возрасте 7-8 дней.

Все процедуры проводились под ламинарным шкафом в стерильных условиях. Для приготовления растворов использовались химикаты аналитической степени чистоты. Готовые стерильные растворы использовались только с маркировкой «для клеточной культуры». Растворы химических веществ стерилизовались автоклавированием или фильтрацией через бактериальные фильтры.

Животных декапитировали под легкой галотановой анестезией, выделяли мозжечок и из него приготавливали срезы толщиной 0.4 мм с помощью специального резака системы «Мак Иллвейн».

Для растворения мелатонина использовался 98% этанол, который затем разводился до необходимой концентрации раствором Локка. Конечная концентрация этанола в чашке с культурой составляла 10 нМ. В такой концентрации этанол не оказывает влияния на жизнеспособность клеток.

Выводы: В опытах на модели нейротоксичности, вызванной глутаматом (50 мкМ), на примарной культуре гранулярных нейронов комбинация мемантин + мелатонин (в соответствии с примерами 1-3) оказывала выраженное концентрация-зависимое нейропротективное действие, что выражалось в снижении процента гибели нейронов. Это действие проявлялось в диапазоне концентраций мемантин + мелатонин: 1+0,6 мкМ, 10+6 мкМ и 100+60 мкМ. Мемантин также оказывал нейропротективное действие в концентрациях 1, 10 и 100 мкМ. Нейропротективное действие мелатонина было менее выраженно и проявлялось только в концентрации 60 мкМ. Сравнение силы нейропротективного действия комбинации мемантин+мелатонин по сравнению с отдельно мемантином и мелатонином выявил статистически достоверную более высокую эффективность комбинации. Полученные данные позволяют предположить нейропротективную эфективность комбинации мемантин+мелатонин при патологических состояниях, при которых повышенное высвобождение глутамата вызывает гибель нейронов (постишемическая реперфузия мозга, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, ВИЧ-зависимая энцефалопатия, болезнь Хантингтона, гибель нейронов, вызванная старением мозга).

Изучение эффективности фармацевтических композиций, содержащих комбинацию мемантина и мелатонина (в соответствии с примерами 1-3), на модели острой ишемии головного мозга, вызванной билатеральной окклюзией общих сонных артерий, было проведено на базе Института экспериментальной фармакологии (Санкт-Петербург).

Проведенное исследование показало:

1. Фармакологическая эффективность комбинации мемантин + мелатонин выше фармакологической эффективности препаратов в отдельности.

2. В условиях данной патологии выявлено наличие тенденции уменьшения смертности животных при применении комбинации мемантин + мелатонин.

3. Применение комбинации мемантин + мелатонин характеризовалось положительным эффектом в динамике устранения неврологических симптомов.

4. Применение комбинации мемантин + мелатонин в дозе 20+12 мг/кг соответственно приводило к увеличению локомоторной и поисковой активности животных данной группы относительно группы контроля.

5. Применение комбинации мемантин мелатонин в дозе 20+12 мг/кг соответственно приводило к восстановлению когнитивных функций у 40% животных данной группы.

6. При применении комбинации мемантин + мелатонин в дозе 20+12 мг/кг соответственно выявлена тенденция к устранению дефицита двигательной координации с течением времени.

7. При применении комбинации мемантин + мелатонин в дозе 20+12 мг/кг соответственно выявлено уменьшение перекисного окисления липидов по сравнению с контрольной группой и группами с применением препаратов мемантин и мелатонин в аналогичных дозах.

Проведенные исследования общетоксических свойств комбинации мемантин + мелатонин (в соответствии с примерами) позволяют сделать вывод об отсутствии потенциирования токсических эффектов компонентов комбинированного лекарственного препарата.

8. При применении комбинации мемантин+мелатонин с пониженным содержанием мелатонина происходит повышение эффективности препарата при этом токсичность препарата уменьшается.