Результат интеллектуальной деятельности: Способ прогнозирования результата дентальной имплантации

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии и клинической лабораторной диагностике, и предназначено для прогноза возможности развития воспалительных осложнений дентальной имплантации.

На сегодняшний день не существует полноценных скрининговых лабораторных методов, позволяющих оценить риск развития воспалительных осложнений дентальной имплантации и несостоятельности имплантата.

Наиболее близким аналогом заявленного способа является «Способ прогнозирования результата стоматологической имплантации на этапе ее планирования» [Патент 2538087 РФ. Опубл. 10.01.2015], который также базируется на исследовании костной крошки (стружки), полученной в ходе операции, при подготовке ложа для имплантата. Осложнения дентальной имплантации прогнозируют по результатам гистологического исследования костной крошки с места подготовки ложа для имплантата. По морфологическим изменениям костной ткани в зоне стоматологической имплантации (диаметр гаверсовых каналов, толщина костных балок губчатого вещества, линия склеивания, реакция пролиферации мезенхимальных клеток при отсутствии воспаления, наличие коллагеновых волокон, нарушение архитектоники губчатого слоя, интенсивность кровоснабжения кости, фиброз и гиалиноз сосудистой стенки, наличие или отсутствие реологических расстройств, наличие или отсутствие отложения остеоида, наличие или отсутствие воспалительных явлений) судят об интенсивности процессов остеогенеза и резорбции костной ткани и их соотношении. При этом достаточно детальное морфологическое исследование, обеспечивающее точность и эффективность диагностики, также выполняется в несколько этапов, требует длительной подготовки биологических образцов, требует высокой квалификации специалистов, проводящих исследование, что не отвечает требованиям экспресс-диагностики.

Технический результат: повышение точности прогнозирования осложнений дентальной имплантации в послеоперационном периоде, при сокращении трудоемкости и сроков выполнения исследований.

Это достигается применением объективных лабораторных методов при исследовании костной крошки для прогноза риска развития осложнений дентальной имплантации. В качестве лабораторных показателей, характеризующих риск осложнений дентальной имплантации, весьма перспективным объектом исследования являются показатели свободно радикального окисления и антиоксидантной защиты.

Предлагаемый способ позволяет на ранних сроках установить риск осложнений дентальной имплантации, принять своевременные меры по профилактике и коррекции лечебной тактики.

Сущность предлагаемого способа заключается в использовании для диагностики и прогнозирования осложнений дентальной имплантации скринингового определения содержания конечных продуктов перекисного окисления липидов в костной крошке, полученной при подготовке ложа для имплантата.

Способ осуществляют следующим образом.

В стеклянную или пластиковую пробирку собирают костную крошку, полученную в ходе подготовке ложа для имплантата. Материал стабилен в течение 24 часов при 4°С или 7 суток при температуре -20°С.

Для количественного определения содержания конечных продуктов перекисного окисления липидов может быть использован любой из доступных лабораторных методов. В ходе разработки предлагаемого способа использован экстракционно-спектрофотометрический метод (Львовская, Е.И. Спектрофотометрическое определение конечных продуктов перекисного окисления липидов / Е.И. Львовская, И.А. Волчегорский, С.Е. Шемяков, Р.И. Лифшиц // Вопр. мед. химии. - 1991. - №37:4. - С. 92-94).

Продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ), содержащие карбонильные группы, способны взаимодействовать со свободными аминогруппами различных веществ (фосфолипидов, аминолипидов, белков и др.) с образованием соединений типа шиффовых оснований. Последняя группа соединений является структурной основой липофусцинов (кероида), представляющих собой неметаболизируемые маркеры дистрофических процессов в клетке. Общеизвестным аналитическим подходом к определению конечных продуктов ПОЛ является флюоресцентная детекция этих соединений (спектрофотометрические методы не используются, поскольку шиффовы основания обладают высокой способностью к изомеризации, что существенно отражается на спектре поглощения). Вместе с тем известно, что в области 401-404 нм находится изосбестическая точка для этих соединений, которая не зависит от вида изомеров.

Ход определения. В пробирку из химически устойчивого пластика вносят 0,5 мл гомогената ткани. Добавляют 5 мл смеси гептан-изопропанол в объемном соотношении 1:1. Пробирку закрывают пробкой, резко встряхивают и помешают в лабораторный шейкер на 20 минут. Затем экстракт освобождают от белкового преципитата и других корпускулярных примесей центрифугированием.

Осветленный экстракт переносят в высокие стеклянные пробирки и разбавляют 5 мл смеси гептан-изопропанол (объемное соотношение смеси 3:7). В разбавленную липидную вытяжку вносят 2 мл раствора соляной кислоты (рН=2) и в течение 30 минут ожидают полного разделения экстракта на фазы. Верхнюю (гептановую) фазу осторожно декантируют и переносят в отдельную пробирку.

Водноспиртовую часть липидной вытяжки освобождают от воды и растворенных в ней примесей при помощи NaCl. Для этого в освобожденный от гептановой фазы экстракт добавляют не менее 1 грамма сухого NaCl. После внесения соли пробирку встряхивают и оставляют на 30 минут для отделения водной фазы. Изопропанольную фазу декантируют, избегая ее контаминации водной фазой.

Приготовление оптических контролей (растворов сравнения) осуществляют в целом так же, как это указано для опытных проб. Единственное различие касается замены биологического образца на эквиобъемное количество среды для суспендирования тканей.

Спектрофотомерию каждой фазы липидного экстракта осуществляют в кварцевых кюветах толщиной 1 см против соответствующего оптического контроля. Замеры проводят при двух длинах волн: 220 и 400 нм. Поглощение при 220 нм соответствует нисходящему плечу максимума оптической плотности изолированных двойных связей и отражает степень ненасыщенности липидов. Поглощение при 400 нм отражает уровень конечных продуктов ПОЛ.

Результат выражают в виде единиц окисления - Е400/Е220, которые отражают относительный уровень конечных продуктов ПОЛ.

Разработку способа осуществляют двойным слепым методом: сопоставление и анализ полученных в ходе лабораторного исследования данных проводят после получения клинической картины исходов операции дентальной имплантации. Интерпретацию результата исследования осуществляют следующим образом: нормальный уровень конечных продуктов перекисного окисления липидов в костной крошке составляет 0-0,01. В том случае, если уровень конечных продуктов перекисного окисления липидов в костной крошке превышает указанные значения, высока вероятность развития осложнений дентальной имплантации.

Предлагаемым способом были обследованы 80 пациентов стоматологической клиники. На этапе обследования пациентов, предшествующем имплантации, не было выявлено никаких клинических признаков (включая данные стандартных лабораторных и инструментальных методов, данные анамнеза) неблагополучия или патологии костной ткани альвеолярного отростка. Результаты лабораторного исследования сопоставлены с клиническими наблюдениями.

Полученные результаты были подвергнуты статистической обработке с использованием пакета статистических программ Statistica for Windows 6.0. О достоверности различий показателей судили с помощью непараметрических критериев Манна - Уитни.

Примеры конкретного выполнения

Клинический пример №1.

Пациент А., 56 лет, обратился по поводу частичной адентии нижней челюсти справа. Клинически конфигурация лица без особенностей. В полости рта на нижней челюсти справа вторичная адентия, 3 класс по Кеннеди. Слизистая оболочка в области отсутствующих зубов плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По КТ отмечено наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующих зубов.

Диагноз: частичное вторичное отсутствие зубов на нижней челюсти 3 класс по Кеннеди.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу, соответственно в области премоляра 4.5 и моляра 4.6, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформированы костные ложа для 2 дентальных имплантатов. Получена костная крошка для лабораторного исследования. Во всех случаях определялось плотное и безболезненное дно костного ложа. Проведена инсталляция имплантатов соответствующих размеров. Гемостаз. Установлены формирователи десны. Рана ушита нитью «Промилен».

В костной крошке определено содержание конечных продуктов свободнорадикального окисления: 0,002, что соответствует нормальным значениям.

В послеоперационном периоде больному назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, обезболивающие лекарственные препараты (кеторол) в течение 5 дней. Швы сняты на 12 день. Заживление раны первичным натяжением.

Через 4 месяца проведен осмотр пациента, выполнено контрольное рентгенологическое обследование (КТ) и определяется хорошая остеоинтеграция. Пациент направлен на ортопедическое лечение.

Клинический пример №2.

Пациент К., 48 лет, обратился в связи с отсутствием жевательных зубов на нижней челюсти слева. Конфигурация лица без особенностей. В полости рта на нижней челюсти слева - вторичная адентия, 1 класс 2 подкласс по Кеннеди.

Слизистая оболочка в области отсутствующих зубов плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По КТ отмечено наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующих зубов.

Диагноз: частичное вторичное отсутствие зубов на нижней челюсти 1 класс 2 подкласс по Кеннеди.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу, соответственно в области 3.6 3.7. зубов, а также в области 4.4. и 4.7, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформированы костные ложа для 4 дентальных имплантатов. Получена костная крошка для лабораторного исследования. Во всех случаях определяется плотное и безболезненное дно костного ложа. Проведена инсталляция имплантатов соответствующих размеров. Гемостаз. Установлены формирователи десны. Рана ушита нитью «Промилен».

В костной крошке определено содержание конечных продуктов свободнорадикального окисления: 0,000, что соответствует нормальным значениям.

В послеоперационном периоде больному назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, обезболивающие лекарственные препараты (кеторол) в течение 5 дней. Швы сняты на 12 день. Заживление раны первичным натяжением.

Через 4 месяца проведен осмотр пациента, выполнено контрольное рентгенологическое обследование (КТ) и определяется хорошая остеоинтеграция. Пациент направлен на ортопедическое лечение.

Клинический пример №3

Пациент П., 42 года, обратился в связи с отсутствием жевательного зуба на нижней челюсти слева. Конфигурация лица без особенностей. В полости рта на нижней челюсти слева - вторичная адентия, 3 класс по Кеннеди. Слизистая оболочка в области отсутствующего зубов плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По КТ отмечено наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующего зуба.

Диагноз: частичное вторичное отсутствие зубов на нижней челюсти 3 класс по Кеннеди.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:100000, проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу, соответственно в области 3.6 зуба, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформировано костное ложе для дентального имплантата. Получена костная крошка для лабораторного исследования. Определяется плотное и безболезненное дно костного ложа. Проведена инсталляция имплантата соответствующего размера. Гемостаз. Установлен формирователь десны. Рана ушита нитью «Промилен».

В костной крошке определено содержание конечных продуктов свободнорадикального окисления: 0,028, что превышает нормальный уровень.

В послеоперационном периоде больному назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, обезболивающие лекарственные препараты (кеторол) в течение 5 дней. Швы сняты на 10 день. Заживление раны первичным натяжением.

Через 3 недели появились жалобы на боли в области операции. При осмотре в области операции слизистая оболочка альвеолярного отростка гиперемирована, отечна. Определяется наличие свищевого хода в области установленного имплантата. Перкуссия имплантата болезненна, имплантат подвижен. При рентгеновском обследовании определяется участок резорбции костной ткани вокруг установленного имплантата.

Диагноз: периимплантит.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:200000 проведено удаление дентального имплантата с кюретажем костной раны. Заживление вторичным натяжением.

Клинический пример №4

Пациент О., 44 года, обратился в связи с отсутствием зубов на нижней челюсти слева. Конфигурация лица без особенностей. В полости рта на нижней челюсти слева - частичное вторичное отсутствие зубов, 1 класс по Кеннеди. Слизистая оболочка в области отсутствующих зубов плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По КТ отмечено наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующего зуба.

Диагноз: частичное вторичное отсутствие зубов на нижней челюсти, 1 класс по Кеннеди.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу, соответственно в области 3.5 3.6, 3.7 зубов, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформировано костное ложе для дентальных имплантатов. Получена костная крошка для лабораторного исследования. Определяется плотное и безболезненное дно костного ложа. Проведена инсталляция имплантатов соответствующих размеров. Гемостаз. Установлен формирователь десны. Рана ушита нитью «Промилен».

В костной крошке определено содержание конечных продуктов свободнорадикального окисления: 0,036, что превышает нормальный уровень.

В послеоперационном периоде больному назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, обезболивающие лекарственные препараты (кеторол) в течение 5 дней. Швы сняты на 14 сутки. Заживление раны первичным натяжением.

Через 1 мес. появились жалобы на боли в области операции. При осмотре в области операции слизистая оболочка альвеолярного отростка гиперемирована, отечна, выделяется гной. Определяется наличие свищевого хода в области установленных имплантатов. Перкуссия имплантата болезненна, имплантаты подвижны. При рентгеновском обследовании определяется участок резорбции костной ткани вокруг установленных имплантатов.

Диагноз: периимплантит.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Ораблок» (4% артикаин) с вазоконстриктором в концентрации 1:200000 проведено удаление дентальных имплантатов с кюретажем костной раны. Заживление вторичным натяжением.

Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет заблаговременно выявлять и прогнозировать осложнения дентальной имплантации.