Результат интеллектуальной деятельности: Способ профилактики технологического стресса у овец при стрижке

Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано для профилактики технологического стресса у овец при стрижке.

Известны способы профилактики технологических стрессов у молодняка крупного рогатого скота (Авт. О.А. Ляпин и др. Патенты РФ №2069950, 1996 г., №2147799, 2000 г.), которые заключаются в скармливании животном в течение 5 суток до и после стресса в период выращивания и откорма и в течение 5 суток до реализации животных на мясоперерабатывающие предприятия антиоксиданта ионола в дозе 10-50 мг/кг живой массы в сутки.

Известен способ профилактики технологических стрессов у молодняка крупного рогатого скота (Авт. О.А. Ляпин и др. Патент РФ №2073513, 1997 г.), сущность которого заключается в том, что для профилактики технологических стрессов у молодняка крупного рогатого скота животном скармливают дилудин в течение 5-7 суток при взвешивании, ветробработках, смене кормления, перегоне, транспортировке в дозах 12-18 мг/кг живой массы.

Существует также способ профилактики технологического стресса у поросят (Авт. Ф.Г. Гизатуллина и др. Патент РФ №2442579), которой предусматривает введение комплекса витаминов в виде тривитамина в дозе 0,9-1,1 мл/гол. внутримышечно и аскорбиновой кислоты в дозе 45-55 мг/гол. внутрь с кормом за 5-7 дней до действия стресс-фактора (отъема или другой технологической операции), а также на 2-3 и 11-13 дни после действия стрессора.

Недостатком применения указанных способов является сложность схем их применения и низкая эффективность, так как используемые при их выполнении биологически активные вещества оказывают лишь косвенное действие на антистрессорные механизмы организма животных.

Известны также способы профилактики технологических стрессов у животных с использованием транквилизаторов, в частности аминазина, который с целью снижения стрессового состояния инъецируют животным в дозе 0,5-2,0 мг/кг живой массы или скармливают в дозе 2,5-5,0 мг/кг (Ветеринарно-санитарные правила перевозки животных №432-5).

Существенным недостатком применения аминазина и других транквилизаторов является их способность накапливаться в организме животных, в частности в мясе и молоке, что влияет на здоровье потребителей этих продуктов.

Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ профилактики технологического стресса у коз оренбургской породы при выческе пуха (Д.Ф. Давлетбердин и др. Транскраниальная электростимуляция как стресс-протектор. - Известия Оренбургского аграрного университета. - Вып. №13/1 - Т. 1, 2007. - С. 47-48), который предусматривает использование непосредственно перед выческой пуха транскраниальной электростимуляции (ТЭС) с использованием прибора ГИ-1. При этом применяется режим, включающий импульсный ток 10 мА, длительностью импульсов 0,1 мс, частотой 300 Гц, в течение пяти минут при наложении электродов «ухо-ухо».

Недостатками способа-прототипа является низкая эффективность, так как используемый при этом режим ТЭС не обеспечивает полной активизации антиноцицептивных структур мозга, участвующих в адаптационных (антистрессовых) процессах. В частности, в исследованиях, проведенных В.П. Лебедевым (Лебедев В.П. Транскраниальная электростимуляция: новый подход / В.П. Лебедев // Транскраниальная электростимуляция: экспериментально-клинические исследования. - Сб. науч. работ. - СПб. - 2005. - С. 22-38), экспериментально было подтверждено, что максимальной уровень эндогенного опиоидного пептида бета-эндорфина, играющего решающую роль в адаптационных эффектах ТЭС, в крови животных достигает только при частоте импульсов 77 Гц. Также было экспериментально доказано (Лебедев В.П. Разработка и обоснование лечебного применения транскраниальной электростимуляции защитных механизмов мозга с использованием принципов доказательной медицины / В.П. Лебедев, В.И. Сергиенко // Транскраниальная электростимуляция: экспериментально-клинические исследования. - Сб. науч. работ. - СПб. - 2003. - С. 11-69), что только при сагиттальном наложении электродов («катод» в области лобной кости, «анод» - в области затылочной кости) полностью охватываются опиоидергические структуры мозга, обеспечивающие поступление в ликвор и кровь эндогенных опиоидных пептидов.

Технической задачей изобретения является повышение эффективности ТЭС при профилактике технологического стресса, возникающего у овец во время стрижки.

Для достижения поставленной задачи за 30-35 мин до стрижки овцам внутримышечно вводят препарат даларгин в дозе 3,0-4,0 мл/гол., который является синтетическим аналогом эндогенного опиоидного пептида лейэнкефалина. После этого проводят однократно сеанс ТЭС в режиме, который предусматривает подачу на электроды, закрепленные на лобной (катод) и затыльной (анод) областях черепа, постоянного тока, медленно нарастающего в течение 2,0-2,5 мин от 0 до 3,0-4,0 мА. Затем на электроды подаются прямоугольные импульсы с частотой 75-80 Гц и длительностью 3,5-4,0 мс, с амплитудой 4-5 мА. При этом продолжительность электросеанса составляет 30-40 мин.

Оптимальную дозировку даларгина выбирали опытным путем. При дозе препарата менее 3,0 мг/мл его анальгетические эффекты значительно снижались, а при увеличении дозы более 4,0 мг/гол. они не изменялись.

Оптимальные параметры режима ТЭС, применяемого в разработанном способе, подбирались экспериментально с учетом анатомических особенностей костей черепа у овец. При подаче на электроды постоянного тока в более коротком режиме (менее 1 мин) у животных во время электростимуляции возникает беспокойство в виде повышенной двигательной активности, а также судороги отдельных групп мышц. Увеличение времени подачи постоянного тока на электроды (более 2,5 мин) не оказывает существенного влияния на эффекты ТЭС.

При частоте прямоугольных импульсов менее 75 Гц и более 80 Гц эффективность ТЭС значительно снижается, так как уменьшается выработка в опиоидергических структурах мозга эндогенных опиоидных пептидов (Лебедев В.П. Разработка и обоснование лечебного применения транскраниальной электростимуляции защитных механизмов мозга с использованием принципов доказательной медицины / В.П. Лебедев, В.И. Сергиенко // Транскраниальная электростимуляция: экспериментально-клинические исследования. - Сб. науч. работ. - СПб. - 2003. - С. 11-69).

При уменьшении длительности прямоугольных импульсов менее 3,5 мс и их амплитуды менее 4,0 мА эффективность способа снижается, а увеличение этих параметров более 4,0 мс и 5,0 мА не оказывает существенного влияния на эффективность ТЭС.

Использование даларгина в разработанном способе значительно повышает антистрессовый эффект ТЭС, так как в применяемой дозировке он оказывает анальгетический эффект (Коренюк И.И. и др. Влияние даларгина на болевую чувствительность у крыс // Ученые записки Таврического национального университета им. В.И. Вернадского. Т. 27 (66). - 2014. №4. - С. 43-51). При этом даларгин обеспечивает защиту головного мозга от гипоксии, улучшает микроциркуляцию, метаболизм в нервных клетках (Казанцев В.В. и др. Патент РФ 2099077, 1997; Чурляев Ю.А. и др. Патент РФ 2146530). Являясь опиоидным пептидом, даларгин после введения разрушается эндопептидазами в течение 60-80 мин и не накапливается в организме, что делает продукцию (мясо) безопасной для потребителя.

Пример. Для сравнительной оценки эффективности разработанного способа и способа-прототипа в условиях ветеринарной клиники Курской государственной сельскохозяйственной академии имени И.И. Иванова был проведен эксперимент на овцах романовской породы. С этой целью было сформировано три группы овец по 10 голов в каждой.

Овцам 1-й опытной группы за 35 мин перед стрижкой вводили внутримышечно даларгин 3,0 мг/гол. После этого проводили ТЭС с использованием аппарата «Трансаир-2» (производство «Центр ТЭС», НИИ физиологии им. И.П. Павлова). Для этого на электроды подавали постоянный ток в режиме медленного нарастания от 0 до 4,0 мА. Затем подавали импульсный ток (прямоугольные импульсы) с частотой 77 Гц, длительностью 3,5 мс и амплитудой 4,0 мА. ТЭС проводили однократно в течение 30-40 мин.

При стрижке овец 2-й опытной группы ТЭС проводили с использованием аппарата ГИ-1 в режиме способа-прототипа. Для этого за 60 мин до стрижки овцам на электроды-зажимы, закрепленные на ушных раковинах («ухо-ухо»), подавали импульсный ток 10 мА, длительностью импульсов 0,1 мс, частотой 300 Гц. Продолжительность электросеанса составляла 5 мин.

Овцы 3-й группы являлись контролем, им накладывали электроды-зажимы на ушные раковины, но электростимуляцию не проводили.

За животными всех групп в период эксперимента проводили наблюдение, учитывали поведенческие реакции, определяли общие клинические показатели (температуру тела, частоту пульса и дыхательных движений) и массу тела. До стрижки, а также через 30 и 60 мин после ее окончания у овец всех групп брали кровь, в которой определяли общие гематологические показатели (СОЭ, гематокрит, эритроциты, лейкоциты, гемоглобин) с использованием общепринятых методов (Клиническая лаборатория: диагностика в ветеринарии. - М., 1985). Содержание эозинофилов подсчитывали методом И.С. Пиралишвили (1962). Уровень кортизола устанавливали с применением иммуноферментного анализа, адреналин определяли флюрометрическим методом.

Сравнительные наблюдения за животными показали, что овцы 1-й опытной группы в период стрижки были спокойными. После окончания стрижки они быстро адаптировались к окружающей обстановке, через 10-15 мин их поведение не отличалось от такового у животных, которые стрижке не подвергались. При даче корма овцы активно его поедали.

Большинство овец 2-й опытной и 3-й контрольной групп в период эксперимента вели себя беспокойно, во время стрижки они пытались освободиться от фиксации, издавали звуковые сигналы. После окончания стрижки у одних животных отмечалась пониженная двигательная активность, находясь в загоне, они уединялись и продолжительное время стояли с опущенной головой. Другие животные, наоборот, были активными, постоянно перемещались по загону и беспокоили других животных своей повышенной активностью. У овец 2-й (опытной) и 3-й (контрольной) групп аппетит был понижен, что оказывало отрицательное влияние на среднесуточные привесы. Так, если на 3-и сутки у овец 1-й группы они увеличились в среднем на 200-300 г, то у овец 2-й опытной группы привесы оставались на уровне до начала стрижки, а у овец 3-й контрольной группы были меньше в среднем на 150-200 г.

Общие гематологические показатели у овец всех групп в период эксперимента находились в пределах физиологических границ (табл. 1). При этом у животных 1-й опытной группы отмечалось более высокое содержание эритроцитов, гемоглобина (р>0,05) и эозинофилов (р<0,05) по сравнению с животными 2-й опытной и 3-й контрольной групп.

Содержание адреналина и кортизола в крови овец всех групп после стрижки увеличилось. Однако если у овец 1-й опытной группы увеличение данных компонентов крови по сравнению с фоновыми показателями было недостоверным (р>0,05), то у овец 2-й опытной и 3-й контрольной групп оно имело достоверный характер (р<0,05).

Таким образом, клинические и гематологические исследования свидетельствуют о том, что использование разработанного способа профилактировало технологический стресс у овец, подвергавшихся стрижке. У этих животных была менее выраженной стресс-реакция на стрижку по сравнению с применением способа-прототипа. Это связано с тем, что при разработанном способе у животных «включаются» все опиоидергические структуры мозга, участвующие в адаптационных процессах. На это указывают и результаты иммуноферментного исследования бета-эндорфина, содержание которого в крови овец, подвергавшихся ТЭС с применением разработанного способа, было достоверно больше как по сравнению с фоновыми показателями, так и с животными 2-й опытной группы и 3-й контрольной группы.