Способ получения комбинированного антибактериального препарата

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается получения комбинированных антибиотических препаратов.

Важной задачей современной фармакологии антибиотиков является борьба с возбудителями инфекций, устойчивость которых к противомикробным средствам обусловлена выработкой бета-лактамаз. С этой целью применяются антибиотики, потенцированные ингибиторами бета-лактамаз. Важным представителем этой группы на российском рынке стал препарат, включающий два антибиотика - амоксициллин и сульбактам.

Препарат имеет ряд клинико-фармакологических преимуществ перед своими предшественниками благодаря сочетанию хорошей фармакокинетики амоксициллина и благоприятных свойств сульбактама (высокая стабильность к бета-лактамазам, термостойкость, собственная антибактериальная активность). Проведенные исследования и имеющийся клинический опыт свидетельствуют о его высокой эффективности при лечении внебольничных инфекций дыхательных путей, мочевыводящих путей, органов малого таза, а также при профилактике в гинекологии.

В РФ препарат зарегистрированы как в виде таблетированной формы. так и в виде порошка для приготовления раствора для инъекций (http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_33710.htm).

Основной проблемой при создании препаратов антибиотиков, особенно комбинированных препаратов, является сохранение рН и стабильности при хранении. В случае порошкообразных субстанций также важным является предотвращение агрегирования и повышения содержания влаги при хранении, которые могут привести к снижению эффективности лекарственного препарата. Для решения данных задач исследователями предпринимаются разные попытки разработки новых способов получения инъекционных форм комбинированных антибиотических препаратов.

В патенте РФ 2397768 раскрывается способ приготовления композиции, который включает стадию, на которой стерильно наполняют/смешивают два активных ингредиента, причем первым активным ингредиентом является цефтриаксон натрия, а вторым активным ингредиентом является сульбактам натрия; стадию, на которой прибавляют ингибитор образования твердых частиц - двухнатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты; стадию, на которой указанное стерильное смешивание продолжают на протяжении приблизительно 1-4 ч; стадию, на которой асептично дозируют стерильную смесь, и стадию, на которой асептично закупоривают с предшествующей и послеоперационной дезинфекцией инертным газом.

Известен способ получения композиции для инъекций, которая представляет собой лиофилизированный порошок из 1-6 частей по весу амоксициллина натрия; 0,5-3 частей по массе сульбактама; 0,25-3 весовых частей ксилита; соляной кислоты - натрия гидроксида до рН 7.8-8. Способ получения заключается в том, что амоксициллин натрия, сульбактам натрия, ксилит перемешивали в воде для инъекций, до полного растворения, добавляли соляной кислоты - гидроксида натрия для рН до 7,8-8,0, добавляли остальное количество воды инъекционной воды, раствор стерилизовали фильтрацией через мембранные фильтры с размерами пор 0.45 μm и 0.22 μm, стерильный раствор разливали в бутылки и подвергали сублимационной сушке (CN 104586843).

Вышеуказанные способы требуют добавления определенных вспомогательных агентов для получения стабильных составов.

Известен патент CN 101322701, который относится к инъецируемой форме препарата амоксициллина и сульбактама, где порошок подвергают сублимационной сушке, и амоксициллин натрия для инъекций и сульбактам натрия разделяют и подвергают очистке, используя высокоскоростную противоточную хроматографию, в которой хлороформ, этилацетат, метанол, вода составляют систему растворителей. Указанный источник может быть выбран в качестве ближайшего аналога. Способ не обеспечивает значительной стерильности компонентов и содержит примеси как остаточных растворителей, так и димеров и продуктов гидролиза антибиотиков.

Задачей изобретения является получение препарата новым усовершенствованным способом, позволяющим повысить стабильность конечного продукта.

Задача решается тем, что способ производства включают смешивание предварительно очищенных стерильных лекарственных веществ амоксициллина натрия и сульбактама натрия, с последующим асептическим наполнением ампул или флаконов этой смесью. Согласно предлагаемому способу необходимо контролировать размер частиц обусловленной сегрегацией в смеси. При использовании такого контроля отсутствует проблема однородности дозировки, а весь процесс можно лучше контролировать.

Нами подобраны оптимальное сочетание способов получения стерильных субстанций для их последующего смешивания в течение определенного времени для предупреждения сегрегации субстанций при смешивании: в течение 30-40 минут в асептических условиях.

Предпочтительно процесс ведется в мешалке со скоростью 40-60 оборотов в минуту.

Полученный расфасованный препарат размещают в виде набора с приемлемым растворителем. Предпочтительное содержание амоксициллина натрия 300-1100 мг, сульбактама натрия 200-600 мг на ампулу или флакон.

Амоксициллин натрия является полусинтетическим антибиотиком, аналогом ампициллина, с широким спектром бактерицидной активности против многих грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.

Сульбактам натрия, ингибитор β-лактамаз, представляет собой полусинтетический сульфон пенициллината, содержащий β-лактамное кольцо, полученный из 6-аминопенициллановой кислоты. Хотя сульбактам обладает минимальной антибактериальной активностью при использовании в виде монотерапии, совместное использование солей сульбактама и амоксициллина дает синергетический эффект, расширяющий спектр активности.

Выбор растворителя непосредственно зависит от предполагаемого способа введения продукта. Согласно настоящему изобретению выбранным растворителем является вода для инъекций. Химически высокая диэлектрическая проницаемость воды позволяет растворить ионизированные электролиты. Кроме того, вода совместима с тканями организма.

Другим важным фактором, который следует учесть, является соответствующий объем, подлежащий включению в препарат. Было показано, что объема до 5 мл достаточно для растворения лекарственных средств и, более того, этот объем можно вводить внутримышечно.

С самого начала, продукт был определен как сухой твердый, не содержащий никаких добавок, продукт. После добавления подходящего растворителя, получаем раствор, соответствующий по всем аспектам требований, предъявляемым к растворам для инъекций.

Используемые лекарственные вещества не могут быть приготовлены в виде стабильного раствора, подлежащего хранению; поэтому выбранный процесс производства включает заполнение продуктом в виде стерильного твердого вещества и включения его в набор с подходящим растворителем. Лекарственный препарат должен быть разведен в стерильной среде, несущей лекарственное вещество, перед введением.

Изучение стабильности при хранении в виде набора подтвердило отсутствие негативных реакций взаимодействия: не было никаких заметных изменений в фармако-технических или химических параметрах.

Не было необходимости добавлять вспомогательные вещества в ампулу, содержащую активные ингредиенты.

Чтобы обеспечить стерильность продукта и продемонстрировать то, что производственный процесс и метод стерилизации статистически гарантируют стерильность всех единиц в партии, присутствует постоянный контроль экологической чистоты, порядка, материалов, оборудования и персонала в процессе производства ампул активных ингредиентов. Все материалы, которые будут использоваться, такие как текстиль, перчатки, фартуки, маски, фильтры и колпачки, стерилизуют в автоклаве при температуре 121°C в течение 30 минут. Ампулы или флаконы стерилизуют и обрабатывают в апирогенном аквадистилляторе при 250°C в течение 60 минут.

Активные ингредиенты могут быть упакованы в прозрачную стеклянную ампулу типа I из боросиликатного стекла, укупоренную бромбутиловой резиновой пробкой и запечатанную полипропиленовой алюминиевой крышкой.

Используемые лекарственные вещества в виде натриевых солей амоксициллина и сульбактама не показывают несовместимости с первичной упаковкой, как можно увидеть из изучения стабильности.

Стерильную субстанцию амоксициллина натрия получают путем растворения в изопропиловом спирте и этаноле при 0-5°C, фильтрации через активированный уголь и кристаллизации из этанола при добавлении по каплям предварительно растворенного в абсолютном этаноле и очищенного натрия изо-октоата, отделения кристаллов под вакуумом, промывания абсолютным этанолом с последующей вакуумной сушкой конечной субстанции.

Полученная субстанция имеет характеристики, представленные в таблице 1

Стерильный сульбактам натрия получают из сульбактама с использованием ацетата натрия.

Перед кристаллической реакцией в зоне класса-10000, материалы раствора фильтруются зоне с классом фильтрации 100000 с помощью стерилизующего фильтра. После сушки, измельчения и наполнения конечным продуктом обрабатывается в локальной зоне класса 100.

Сульбактам и натрия ацетат отдельно растворяют в абсолютном этаноле. Растворение ацетата натрия при температуре 35-40°C, сульбактама - 22-26°C.

Каждый из растворов пропускают через активированный уголь и подвергают мембранной стерилизующей фильтрации, затем объединяют и проводят кристаллизацию при температуре 23-26°C в течение 3-3.5 часов, полученные кристаллы отфильтровывают, сушат под вакуумом, подвергают измельчению и перемешиванию до однородности.

Как правило, стадию стерилизующей фильтрации проводят с применением мембранного фильтра в две стадии: через фильтры с размером пор 0,43-0,47 мкм и затем - 0.18-0.22 мкм, иногда используется 3-каскадная схема, включающая мембранный фильтр 0,43-0,47, 0-28-0.32 мкм и 0.18-0.22 мкм для постепенного понижения бионагрузки.

В рамках тестирования выпущенных изготовленных партий идентификация продукта подтверждается с помощью инфракрасной спектрометрии, реакцией подлинности противоионов натрия.

Примеси (стерильный сульбактам натрия) в табл. 2

Общее содержание допускаемых фармакопеей примесей, перечисленных в таблице 2, не превышает 1%.

Кроме того, следующие остаточные растворители контролируются:

Этанол: не более 4500 ч./млн.

Бутилацетат: не более 4500 ч./млн.

Восстановленный раствор - желтоватый и прозрачный без посторонних веществ. Через 6 месяцев хранения прозрачность менее 0.5, то есть практически не изменилась.

Характеристики полученной субстанции представлены в таблице 3

Изучение стабильности полученной лекарственной формы препарата.

Наблюдения проводились в течение 3-х лет по месяцам с интервалом 3 месяца.

- рН восстановленного раствора практически не меняется при хранении.

Испытания трех партий при 28-30°C показали, что при начальном среднем рН 8.9, через год рН не изменялось, через 18 месяцев также, через 2 года 9.0, через три - 9.1

Спецификация соответствует требованиям для внутривенного введения.

- Содержание воды:

Избыток влаги может повлиять на физико-химическую стабильность активных веществ, изменение растворимости, повышение химических процессов деградации, а также другие эффекты.

Установленный фармакопей предел соответствует - до 3%.

Согласно изобретению после получения содержание влаги в первый месяц хранения составило 0.1-0.32%, через 2 года - среднем 0,4%, через 3 года - в среднем 0,6%. Согласно прототипу через три года хранения увеличение до 2.5%.

- Однородность единиц дозирования:

Этот параметр включает в себя как массу лекарственной формы и содержание активных ингредиентов. Приемлемая однородность содержания лекарственного продукта обеспечивается благодаря оптимизированному процессу, что приводит к равномерному заполнению лекарственного вещества в ампулы.

Для этой лекарственной формы и процент активных ингредиентов, однородность единиц дозирования осуществляется "однородность дозирования по содержанию".

Для испытания 20 единиц дозированного лекарственного средства (то есть содержимое каждой из 20 ампул-контейнеров), полученного по заявленному способу и 20 - по способу прототипу, отбирают по статистически обоснованной схеме, взвешивают каждую в отдельности и рассчитывают среднюю массу. Затем рассчитывают отклонение массы единицы дозированного лекарственного средства от среднего значения m_w, %.

Где m - масса каждой единицы дозированного лекарственного средства, мг; m_cp - средняя масса анализируемых единиц лекарственного средства, мг.

Лекарственное средство считают выдержавшим испытание, если не более двух индивидуальных масс отклоняются от средней массы на величину, превышающую 10%. Согласно данному испытанию сделан вывод о том, что по заявленному изобретению достигается более высокий показатель однородности (по меньшей мере на 30% выше) по сравнению с прототипом.

- Идентификация:

Определение активных ингредиентов обеспечивается с помощью ВЭЖХ, в котором время удерживания основного пика на хроматограмме раствора образца (препарата для анализа) совпадает с эталонным раствором, полученным в данном анализе.

В способах высокоэффективной жидкостной хроматографии, это сравнение является принятым параметром для идентификации готовой продукции.

- Количественное определение:

Метод анализа был разработан с учетом методологии, используемой в настоящее время с этим типом лекарственных средств, а также методов, используемых в подобных продуктах, закодированных в фармакопее США.

Спецификация этого теста соответствует диапазону, установленному органами здравоохранения для содержания активного ингредиента в готовой продукции.

Срок хранения составляет не менее 3 лет.