Результат интеллектуальной деятельности: РАНЕВОЕ ПОКРЫТИЕ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ГЕМОСТАТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

Группа изобретений относится к медицине, а именно к получению новых гемостатических средств и может быть использована для местной остановки кровотечений в хирургической практике, при ликвидации последствий массовых катастроф и террористических актов, а также в условиях боевых действий.

Одной из важнейших проблем современной медицины является остановка кровотечений, возникающих во время хирургических операций и при травматических повреждениях органов. Особое внимание уделяется местным гемостатическим средствам, которые эффективно действуют в локальных зонах и могут быть использованы в случаях диффузной кровоточивости (раневая поверхность паренхиматозного органа, губчатая ткань и др.), когда другие методы остановки кровотечений могут быть малоэффективными. На сегодняшний день существует набор гемостатических средств различного химического строения и механизма действия, а также комбинированных препаратов для местной остановки кровотечений. Особую роль играет разработка гемостатических средств для оказания помощи при критических и неотложных состояниях в условиях боевых действий и в медицине катастроф. Развитие военной науки и техники неизбежно сопровождается появлением новых видов поражений, увеличением их количества, усилением тяжести патологического процесса, в том числе геморрагических осложнений при огнестрельных ранениях, воздействиях ядерного и химического оружия. На сегодняшний день известны сведения об использовании в хирургии различных клеевых субстанций с такими гемостатическими компонентами, как фибриноген, тромбин и некоторые другие факторы свертывания крови (Перельман М.И. и др. Современные клеевые композиции в торакальной хирургии // Хирургия. - 2002. - №2. - с. 47-49). Однако фибриновые клеи, например, «Берипласт (ТМ)», состоят из 3-4 компонентов и должны быть нанесены на раневую поверхность последовательно в несколько этапов, что создает определенные неудобства при лапароскопических операциях. Непосредственное же смешивание компонентов перед применением неизбежно приводит к образованию сгустка фибрина, потере клеящих свойств и закупорке просвета лапароскопа. Современным представителем комбинированных препаратов является «ТахоКомб» фирмы Никомед (Австрия). ТахоКомб является абсорбирующим гемостатическим раневым покрытием, состоящим из коллагеновой пластины, покрытой компонентами фибринового клея (тромбин, фибриноген, апротинин). В состав пленки входит также рибофлавин, который маркирует клеящую поверхность желтым цветом. При контакте с кровоточащей раной или жидкостями организма содержащиеся в покрывающем коллагеновом слое факторы свертывания высвобождаются, и тромбин превращает фибриноген в фибрин-мономер, что приводит к осуществлению последней фазы свертывания крови и образованию фибринового сгустка. Апротинин препятствует преждевременному фибринолизу плазмином. Коллаген стимулирует агрегацию тромбоцитов, усиливая гемостатический эффект (Горский В.А. Использование фибрин - коллагеновых пластин в абдоминальной хирургии // Вестник хирургии им. Грекова. - 2001. - №2 - с. 77-81). Основным недостатком «ТахоКомба» является то, что коллаген вызывает гиперрубцевание, обладает антигенной активностью и может являться переносчиком вирусов гепатита и ВИЧ. Кроме того, коллаген животных, использующийся при изготовлении «ТахоКомба», может служить причиной иммунологических реакций.

Известна повязка с клеевой композицией для закрепления на коже двухфазной системы, состоящей из гидрофобного и гидрофильного слоев (RU 2004137811, 10.07.2005). Однако, система достаточно сложна для получения и практического использования.

Известно покрытие для лечения ран, характеризующееся тем, что содержит гидрофильную тканевую основу, гидрогелевый слой, содержащий акриловую кислоту и акриламид с сшивающим агентом, при этом гидрогелевый слой имеет pH 7,0-7,5 и обладает абсорбционной способностью 36-44 г/г, водорастворимый биодеградирующий полимер, содержащий смесь желатина с поли-N-винилпирролидоном, а также биологически активные компонент фуллерен С60, антимикробный, некролитический, антиферментный и гемостатический, при определенном содержании компонента в покрытии, в мас. %. Изобретение обеспечивает расширение ассортимента перевязочных материалов с гидрогелевым покрытием, обладающих способностью ускорять заживление ран и одновременно снижать количество осложнений при их лечении, в частности предотвращать развитие гнойно-деструктивных процессов (RU 2372944, 20.11.2009). Недостатком покрытия для лечения ран является сложность его изготовления и узкая область использования в практической медицине.

Наиболее близким техническим решением к заявленной группе изобретений является раневое покрытие с лечебным действием, содержащее биополимерный материал на основе бактериальной целлюлозы в виде пленок с комплексом биологически активных компонентов, в частности гемостатических и антимикробных средств (RU 2437681, 27.12.2011). К недостаткам описанной композиции следует отнести высокое содержание влаги в пленках, способствующее быстрому инфицированию пленок и дальнейшей их биодеградации. Кроме того, недостатком является использование в качестве продуцента Acetobacter xylilum, по сравнению с симбиотическими культурами менее пригодного к последующему масштабированию биосинтеза бактериальной целлюлозы по причине большей требовательности к питательным компонентам среды и возможного фаголиза индивидуальных штаммов. В качестве раневого покрытия используется перфорированная гидроколлоидная целлюлоза, для биосинтеза которой авторы разработали специальное устройство из металлических штырей. Для обеспечения заданной пористости бактериальной целлюлозы каждый раз необходимо изменять конструкцию, что усложняет процесс изготовления основы раневого покрытия. Присутствие кластера фуллерена в составе раневого покрытия приводит к дополнительному разрыхлению ленточной структуры матрицы бактериальной целлюлозы и носит локальный характер, что крайне нежелательно, так как может нарушить нативные физические свойства структуры бактериальной целлюлозы (Хайруллин А.Р. Диэлектрические свойства и структура бактериальной целлюлозы Gluconacetobacter xylinus и ее композитов с углеродными наночастицами и фосфатами кальция: Автореферат дисс. на соиск. учен. степ. канд. физ.-мат. Наук, Санкт-Петербург, 2013, с. 4). Гемостатическая активность данных пленок связана с включением в ее состав эпсилонаминокапроновой кислоты (ЭАКК), влияющей исключительно на торможение фибринолиза, т.е. на распад уже образовавшегося сгустка. Активацию образования первичного местного тромба данное покрытие не стимулирует. Поэтому данное раневое покрытие не может использоваться при массивных кровотечениях.

Технический результат заявленной группы изобретений заключается в расширение ассортимента раневых покрытий на основе бактериальной целлюлозы с усиленным гемостатическим действием, при кровотечениях в условиях массового поражения людей и с одновременным упрощением технологии изготовления.

Технический результат достигается тем, что создано раневое покрытие, обладающее лечебным действием, содержащее биополимерный материал на основе бактериальной целлюлозы с комплексом биологически активных компонентов, при этом в качестве биополимерного материала используют бактериальную целлюлозу, синтезированную с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12 в виде губки, а в качестве биологически активных компонентов раневое покрытие содержит до 10% гемостатических и до 3% антимикробных средств по отношению к бактериальной целлюлозе.

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве гемостатического компонента содержит фибрин-мономер.

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве гемостатического компонента содержит тромбин.

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве гемостатического компонента содержит факторы свертывания крови VIII и IX.

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве гемостатического компонента содержит железную соль полиакриловой кислоты, например, феракрил.

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве антимикробного компонента содержит диоксидин или хлоргексидин, или серебро, или раствор «доктор Чистотелофф».

В предпочтительном варианте раневое покрытие в качестве антимикробного компонента содержит антибиотики широкого спектра действия, например, цефипим или азитромицин.

Кроме того создан способ получения раневого покрытия, обладающего лечебным действием по п. 1, включающий формирование биополимерного материала посредством синтеза бактериальной целлюлозы, причем формирование биополимерного материала из бактериальной целлюлозы проводят путем синтеза с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12 в виде губки и сублимационной ее сушки до влажности от 0,1% до 30,0%.

В предпочтительной варианте в способе получения раневого покрытия используют бактериальную целлюлозу синтезируют с помощью культуры Medusomyces gisevii Sa-12 с влажностью 99% и формируют ее в виде основы размером 5 см × 5 см при массе влажного образца от 100 до 1000 грамм.

В предпочтительном варианте в способе получения раневого покрытия влажный биополимерный материал предварительно подвергают сублимационной сушке до влажности 30,0-50,0%, а после насыщения раствором компонентов биополимерный материал в виде губки высушивают до влажности 0,1-35,0%.

В предпочтительном варианте в способе получения раневого покрытия биологически активные компоненты на биополимерный материал наносят методом распыления.

Сущностью заявляемой группы изобретений является то, что предложенное раневое покрытие, обладающее лечебным действием получено путем формирования биополимерного материала из бактериальной целлюлозы с помощью синтеза симбиотической культурой Medusomyces gisevii Sa-12 в виде губки и сублимационной сушкой с влажностью от 0,1% до 35,0%. Полученное таким способом раневое покрытие обладает гемостатическим, адгезивным и атравматичным действием, что в целом способствует выраженному снижению кровопотери. Разработанный способ получения данного раневого покрытия позволяет дополнительно вводить в структуру бактериальной целлюлозы, имеющую форму губки, гемостатические, антимикробные компоненты или их композиции.

Бактериальная целлюлоза - уникальный органический материал, синтезируемый бактериями в виде нановолокон. В данной работе используют продуцент Medusomyces gisevii Sa-12, представляющий собой симбиотическую культуру, состоящую из 20-26 видов дрожжей и 8-10 видов уксуснокислых бактерий. Симбиотическая культура характеризуется высоким адаптивным потенциалом к стрессовым условиям (Юркевич Д.И., Кутышенко В.П. Медузомицет (Чайный гриб): научная история, состав, особенности физиологии и метаболизма // Биофизика, 2002, №6, С. 1116-1129), поэтому целесообразно ее использовать для решения поставленной задачи. Бактериальная целлюлоза в отличие от синтетических полимеров биологически совместима с тканями человеческого организма, обладает собственными антисептическими свойствами, безболезненно накладывается и снимается с раневой поверхности, благодаря тончайшей пористости влаго- и газопроницаемости, активно поглощает жидкую часть крови.

Активатор фибриногена - тромбин - принадлежит к семейству сериновых протеиназ и запускает каскад биохимических реакций системы свертывания крови. Кроме превращения фибриногена в фибрин, он является также мощным активатором агрегации и адгезии тромбоцитов. При действии тромбина на тромбоциты уже через 5 секунд после стимуляции происходит изменение формы клетки, централизация гранул, секреция их содержимого в систему открытых каналов и далее во внеклеточную среду. Вследствие мощного действия и опасности тромбоза, тромбин применяется только местно.

К высокомолекулярным соединениям, на основе которых возможно создание комбинированных гемостатических материалов, относится полиакриловая кислота (ПАК) и ее соли, способные образовывать с белками крови нерастворимые полимерные комплексы (Абзаева К.А. и др. Высокомолекулярные соединения, №11, 1997, с. 1883-1904), что приводит к гемостатическому эффекту.

С целью придания раневому покрытию гемостатического, адгезивного, атравматичного, антисептического и антибактериального эффектов в структуру бактериальной целлюлозы могут быть добавлены гемостатические средства, антисептики и антибиотики широкого спектра действия.

Предложенное раневое покрытие представляет собой высушенный сублимационной сушкой биополимерный материал - бактериальную целлюлозу, синтезированную с помощью Medusomyces gisevii Sa-12. Исследования данной бактериальной целлюлозы в качестве самостоятельного гемостатического средства ранее никем не проводились, что следует из существующего уровня техники. В ходе проведенных исследований было обнаружено, что бактериальная целлюлоза, синтезированная с помощью Medusomyces gisevii Sa-12, полученная предлагаемым способом, обладает самостоятельной гемостатической активностью по сравнению с контролем (марлевым тампоном) время остановки кровотечения составило 35±8,0 с против 246±22,0 с; масса (объем) кровопотери 0,527±0,162 г против 5,9±1,4 г, гемостатическая активность 85,81±11,16%. Обнаруженные свойства бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью Medusomyces gisevii Sa-12, объясняются тем, что сетчатая структура образована микрофибриллами толщиной 30-50 нм, формирующими ячейки размерами 0,5-1,5 мкм. Морфологию указанной бактериальной целлюлозы изучали методом растровой электронной микроскопии (РЭМ) на сканирующем электронном микроскопе JEOLGSM 840 (Япония) после напыления Pt толщиной слоя 1-5 нм.

Поскольку размеры тромбоцитов составляют 2-4 мкм, а волокна расположены упорядоченно плоско параллельно, то тромбоциты задерживаются между волокнами бактериальной целлюлозы, закупоривая ячейки и вызывая гемостатический эффект. Подобный эффект не может наблюдаться в прототипе, поскольку во влажной бактериальной целлюлозе градиент движения тромбоцитов от раны к раневому покрытию выражен слабо из-за присутствия в ячейках между микрофибриллами воды. Физическая природа формирования ячеек объясняется именно предлагаемым способом сублимационной сушки.

Преимущества предлагаемой группы изобретений заключаются именно в том, что биополимерный материал выращен с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, которая обеспечивает формирование микрофибрилл толщиной 30-50 нм. Приобретенные свойства за счет введения в технологический процесс стадии сублимационной сушки, резко повышают гемостатическую активность биополимерного материала, сформированного заявленным способом. Полученное раневое покрытие с остаточной влажностью от 0,1% до 30%, обладает высокой кровоостанавливающей активностью, так как быстрее адгезирует на себя жидкую часть крови, а увеличение количества пор в биополимерном материале в форме губки влечет за собой увеличение сорбирующей площади самого материала, что в совокупности сокращает время остановки кровотечения. И наоборот повышение влажности биополимерного материала влечет за собой увеличение времени смачивания образцов, уменьшение количества пор и параметров водопоглощения, что приводит к резкому снижению гемостатической активности. Необходимая влажность для получения высокой гемостатической активности раневого покрытия составляет 0,1-30,0%.

Методом распыления биологически активные компоненты наносят в том случае, если вещество, вводимое в контактный слой биополимерного материала, образовывает на раневой поверхности эластичное стойкое пленочное покрытие, которое воспроизводит форму органа и влияет на время остановки кровотечения.

Для пояснения реализации раневого покрытия, обладающего лечебным действием, и способа его получения приведены примеры конкретного их выполнения. Изучение влияния раневого покрытия на остановку кровотечений проводили в лабораторных условиях на кроликах породы «Шиншилла» обоего пола массой 3,0-4,5 кг со средним значением темпа кровотечения 1 г/мин согласно методике описанной в «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств», Часть первая, М: Гриф и К, 2012.

Эксперимент выполнялся с введения животного в состояние тиопенталового наркоза. Затем выполнялась тотальная срединная лапаротомия, в образовавшуюся рану выводилась передняя поверхность печени. При помощи пластмассового ограничителя производилась резекция лезвием выступившей части печени. В результате образовывалась равномерно кровоточащая рана. В каждом опыте размер и форма срезанного сегмента оставались неизменными. Для сравнительной оценки гемостатических свойств исследуемого раневого покрытия опытного образца и образца контроля (размером 2 см × 2 см) на доле печени одновременно производились два вышеописанных среза. В качестве контроля использовался марлевый тампон.

Пример 1

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу влажностью 99% при массе влажного образца 100 г подвергают сублимационной сушке при температуре от плюс 20°С до минус 50°С в течение 48 часов. В процессе досушивания получают пористый высушенный образец в виде губки с массой 1,01 г и влажностью 0,1%. Сухой образец биополимерного материала бактериальной целлюлозы в виде губки разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы и стерилизуют и затем используют в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность полученной пластины раневого покрытия размером 2 см × 2 см, массой 0,17 г и влажностью 0,1%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 41±5 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 270±19 секунд.

Пример 2

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу влажностью 99% при массе влажного образца 100 г подвергают сублимационной сушке при температуре от плюс 20°С до минус 50°С в течение 48 часов. В процессе досушивания получают пористый высушенный образец в виде губки с массой 1,1 г и влажностью 10,0%. Сухой образец биополимерного материала бактериальной целлюлозы в виде губки разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы и стерилизуют и затем используют в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность полученной пластины раневого покрытия размером 2 см × 2 см, массой 1,1 г и влажностью 10,0%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 52±8 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 320±19 секунд.

Пример 3

Получение раневого покрытия на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу влажностью 99% при массе влажного образца 100 г подвергают сублимационной сушке при температуре от плюс 20°С до минус 50°С в течение 48 часов. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец в виде губки с массой 1,5 г и влажностью 30,0%. Сухой образец биополимерного материала бактериальной целлюлозы в виде губки разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы и стерилизуют и затем используют в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность полученной пластины раневого покрытия размером 2 см × 2 см, массой 1,5 г и влажностью 30,0%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 54±13 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 250±17 секунд.

Пример 4

Получение раневого покрытия на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу влажностью 99% при массе влажного образца 100 г подвергают сублимационной сушке при температуре от плюс 20°С до минус 50°С в течение 48 часов. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец в виде губки с массой 1,6 г и влажностью 35,0%. Сухой образец биополимерного материала бактериальной целлюлозы в виде губки разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы и стерилизуют и затем используют в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность полученной пластины раневого покрытия размером 2 см × 2 см, массой 1,6 г и влажностью 35%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью, и полностью останавливало кровотечение за 73±8 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 250±17 секунд.

Таким образом, из примеров 1-3 видно, что раневое покрытие с полученной влажностью от 0,1% до 30,0% в процессе сублимационной сушки обладает более высокой кровоостанавливающей активностью и без обогащения ее гемостатическими средствами по сравнению с раневым покрытием, имеющим большую влажность, как показано в примере 4.

Пример 5

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца, и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,1 мг фибрин-мономера. После полного насыщения синтезированной бактериальной целлюлозы раствором фибрин-мономера, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец в виде губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца раневого покрытия размером 2 см × 2 см и массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 50±6 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 302±17 секунд. Соотношение компонентов в полученной губке: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, фибрин-мономер - 0,1 мг (0,0099% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 6

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца, затем помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 187,50 мг фибрин-мономера. После полного насыщения синтезированной бактериальной целлюлозы раствором фибрин-мономера, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в эксперименте.

Остановку капиллярно - паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 45±9 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 302±17 секунд. Соотношение компонентов в полученном заявленным способом раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 30,63 г, фибрин-мономер - 187,50 мг (0,61% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 7

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12 с влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца, затем помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,5 г фибрин-мономера. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором фибрин-мономера, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 ч и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,19 г и влажностью 10,0%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 43±5 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 312±15 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии: бактериальная целлюлоза - 81,68 г, фибрин-мономер - 0,5 г (0,61% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 8

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца, затем помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,33 мг тромбина с активностью 10 ед. NIH. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором тромбина, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в эксперименте.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см и массой 0,18 г и влажностью 10,0%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 42±6 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 331±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, тромбин - 0,33 мг (10 ед. NIH, 0,033% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 9

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 50 мг тромбина с активностью 1500 ед. NIH. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором тромбина, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в эксперименте.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 36±6 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 331±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, тромбин - 50 мг (1500 ед. NIH, 4,95% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 10

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,1 г тромбина с активностью 3000 ед. NIH. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором тромбина, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в эксперименте.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 35±8 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 331±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, тромбин - 0,1 г (3000 ед. МН, 9,90% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 11

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,02 г фактора свертывания крови VIII с активностью 60 ME. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором VIII фактора свертывания крови, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 37±6 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 331±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, VIII фактор свертывания крови - 0,02 г (60 ME, 1,98% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 12

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды и 0,010 г IX фактора свертывания крови с активностью 1000 ME. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором IX фактора свертывания крови, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в эксперименте.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 41±7 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 331±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, IX фактор свертывания крови - 0,10 г (1000 ME, 9,90% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 13

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл водного раствора и 0,09 г одной из металлических солей полиакриловой кислоты. После полного насыщения бактериальной целлюлозы заданным раствором, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 41±8 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 290±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, металлическая соль полиакриловой кислоты - 0,09 г (8,91% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 14

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл водного раствора и 0,07 г одной из металлических солей полиакриловой кислоты. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором соли полиакрилата, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 20%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 57±11 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 290±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, металлическая соль полиакриловой кислоты - 0,07 г (6,93% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 15

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 200 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды, 0,188 г фибрин-мономера и 0,00033 г тромбина с активностью 10 ед. NIH. После полного насыщения бактериальной целлюлозы комбинированным раствором гемостатических средств, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 35±3 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 302±17 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 2,02 г, фибрин-мономер - 0,188 г (0,61% по отношению к бактериальной целлюлозе), тромбин - 0,00033 г (0,02% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 16

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 80% от массы исходного образца и помещают в 20 мл 0,15% раствора антисептика «доктор Чистотелофф». После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором антисептика, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 0,1%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 0,1%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 63±11 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 270±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, 0,15% антисептик «доктор Чистотелофф» - 20 мл (2,97% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 17

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в 50 мл 0,018% раствора цефипима в дистиллированной воде. После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором антисептика, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 0,1%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 0,1%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 70±9 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 270±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, цефипим - 0,009 г (0,89% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 18

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 45 мл дистиллированной воды, 0,05 г тромбина с активностью 1500 ед. NIH и 5 мл 0,15% антисептика «доктор Чистотелофф». После полного насыщения бактериальной целлюлозы раствором тромбина и антисептика, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 0,1%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 39±6 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 300±21 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная - 1,01 г, тромбин 0,05 г (4,95% по отношению к бактериальной целлюлозе), 0,15% антисептик «доктор Чистотелофф» - 0,007 г (0,74% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 19

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 100 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и помещают в раствор, состоящий из 50 мл дистиллированной воды, 0,094 г фибрин-мономера и 0,018 г раствора цефипима. После полного насыщения бактериальной целлюлозы комбинированным раствором, ее помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 57±9 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 302±17 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 1,01 г, фибрин-мономер - 0,094 г (9,31% по отношению к бактериальной целлюлозе), цефипим - 0,018 г (1,78% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Пример 20

Получают раневое покрытие на основе бактериальной целлюлозы, синтезированной с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, влажностью 99% при массе влажного образца 200 г. Затем синтезированную бактериальную целлюлозу сублимационно высушивают до 50% от массы исходного образца и путем равномерного распыления на контактную поверхность губки наносят 0,188 г фибрин-мономера и 0,00033 г тромбина с активностью 10 ед. NIH. Затем губку помещают в камеру сублимационной сушки на 48 часов и высушивают до влажности 10%. В процессе досушивания получается пористый высушенный образец губки, который разрезают на пластины различных размеров, упаковывают в полимерные материалы, стерилизуют и используют для остановки кровотечения в медицинской практике.

Остановку капиллярно-паренхиматозного кровотечения выполняют путем нанесения на раневую поверхность образца размером 2 см × 2 см, массой 0,18 г и влажностью 10%. При этом контрольный марлевый тампон и образец раневого покрытия полностью покрывали раневую поверхность. Раневое покрытие, полученное заявленным способом, хорошо адгезировало к ране, обладало высокой гигроскопичностью и полностью останавливало кровотечение за 27±3 секунд. Тампон из марлевой салфетки, используемый в качестве контроля, также был плотно прижат к раневой поверхности, однако остановка кровотечения происходила за 322±19 секунд. Соотношение компонентов в полученном раневом покрытии следующее: бактериальная целлюлоза - 2,02 г, фибрин-мономер - 0,188 г (0,61% по отношению к бактериальной целлюлозе), тромбин - 0,00033 г (0,02% по отношению к бактериальной целлюлозе).

Как следует из примеров реализации заявленной группы изобретений, раневое покрытие из биополимерного материала в качестве которого используют бактериальную целлюлозу, синтезированную с помощью симбиотической культуры Medusomyces gisevii Sa-12, в виде губки, которую сушат до влажности от 0,1% до 30,0%, а в качестве биологически активных компонентов оно содержит до 10% гемостатических и до 3% антимикробных средств (по отношению к бактериальной целлюлозе) обеспечивает максимальный гемостатический эффект при остановке кровотечений в условиях массового поражения людей с одновременным упрощением технологии изготовления.