Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЦИДИВА ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ОПУХОЛЕВОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ

Изобретение относится к медицине, касается способа прогнозирования рецидива злокачественных опухолевых заболеваний после проведенного лечения.

Значительный прогресс в понимании молекулярно-генетических механизмов развития злокачественных опухолевых заболеваний у человека, достигнутый в последние десятилетия, пока не решил главную проблему - управление опухолевым процессом при лечении больного. Возможность прогнозирования рецидива опухолевой болезни позволила бы спланировать мероприятия, направленные на предотвращение дальнейшего развития заболевания и, в конечном итоге, снизить смертность онкологических больных. Для клинических целей предложен ряд различных способов прогнозирования рецидива злокачественной опухолевой болезни:

1. «Способ прогнозирования рецидивов и метастазов рака легкого» (Патент на изобретение RU 2243564 С1, 2003 г), сущность которого заключается в том, что в результате исследования уровня антител к антигенам опухоли легкого с использованием реакции пассивной гемагглютинации при показателе 1/8 и выше констатируют наличие рецидива или метастаза и проводят противоопухолевую химиотерапию, а при уровне антител 1/4 противоопухолевую химиотерапию отменяют. Основным недостатком данного способа является его селективность в отношении только рака легких.

2. «Способ прогнозирования течения онкологических заболеваний» (Патент на изобретение RU 2018835 С1, 1994 г.). Сущность изобретения: в лимфоцитах и нейтрофилах определяют содержание гистамина, рассчитывают отношение первого показателя ко второму и при значении этого отношения более 0,9 прогнозируют осложненное течение заболевания в виде появления рецидивов и метастазов. Использование способа позволяет сделать прогноз уже через 4-45 суток после проведения анализа. Изобретение относится к медицине, точнее к онкологии, основано на развитии открытия СССР, диплом №158 от 23.05.1975 г., и может быть

использовано для лечения больных опухолями почки, мочевого пузыря и легких на разных этапах лечения. Прогнозируется ухудшение состояния, связанное с развитием стойкого стресса или переходом в напряженные реакции тренировки и активации, развитие осложнений, рецидивов, метастазов. Основной недостаток способа заключается в том, что повышение уровня гистамина является неспецифической реакцией организма, которая наблюдается также при целом ряде заболеваний и приеме некоторых лекарственных препаратов. Указанный недостаток не дает возможности считать исследуемый показатель патогенетически обоснованным и применять его для прогноза развития злокачественного опухолевого процесса в широкой клинической практике. Кроме того, применение способа требует наличия специального лабораторного оборудования.

3. «Способ прогнозирования рецидива солидных опухолей» (Патент на изобретение RU 2184971 С1, 2002 г.), заключающийся в исследования субпопуляций клеток крови, при котором не реже 1 раза в месяц в крови определяют процентное содержание общих Т-лимфоцитов и при превышении верхнего предела среднестатистического значения его нормы прогнозируют начало рецидива или предрецидивного состояния. Основными недостатками данного способа является его неспецифичность по отношению к злокачественным новообразованиям, необходимость использования дорогостоящей аппаратуры для проведения цитофлюорометрических исследований и специально обученного персонала для проведения исследований.

4. «Способ прогнозирования ранних рецидивов или/и метастазов рака шейки матки» (RU 2247377 С2, 2005 г.). Способ заключается в том, что при сочетанной лучевой терапии определяют отношение абсолютного числа лимфоцитов к абсолютному числу моноцитов периферической крови, полученное соотношение делят на 4,05. При значениях полученного результата выше единицы констатируют отсутствие вероятности рецидива заболевания в течение первого года наблюдения, а при значениях ниже единицы констатируют наличие продолженного роста опухоли и возникновение рецидива рака в первый год после лечения. Способ может быть использован для диагностики до клинической манифестации рецидивов и/или метастазов для шейки матки после сочетанной лучевой терапии. Технический результат - возможность выявления развития патологического процесса до клинического его появления. Основным недостатком данного способа является его неспецифичность по отношению к злокачественным новообразованиям, в целом, и селективность относительно рака шейки матки, в частности, после сочетанной лучевой терапии.

5. Способы прогнозирования возникновения рецидивов, основанные на гистологических и иммуногистохимических методах исследования опухолевого материалахерозного рака яичников (Патент на изобретение RU 2290078 С1, 2006 г.); мелкоклеточного рака легкого (Патент на изобретение RU 2498305 С1, 2013 г.); рака тела матки (Патент на изобретение RU 2250077 С2, 2005 г.). Основными недостатками указанных способов являются их селективность в отношении конкретного злокачественного опухолевого заболевания, невозможность прогнозирования рецидива опухолевого процесса на других этапах лечения и реабилитации из-за жесткой привязки к получению опухолевого материала при хирургической операции, необходимость специального обучения и привлечения специалистов.

6. Способы прогнозирования рецидивов злокачественных опухолей, основанные на исследовании гормонов и гормоноподобных веществ:

6.1. «Способ прогнозирования возникновения рецидивов рака шейки матки» (RU 2485523 С2, 2011 г.). Изобретение относится к биохимическим исследованиям в онкологии и описывает способ прогнозирования возникновения рецидивов рака шейки матки, включающий биохимическое исследование суточной мочи больной, при котором в суточной моче определяют андростерон и этиохоланолон, вычисляют отношение между ними и при величине отношения 0,75 мг/сут и ниже прогнозируют рецидив болезни в первые 2 года, а при величине, превышающей 0,75 мг/сут, длительный безрецидивный период до 10 лет и более. Способ призван обеспечить возможность раннего, доклинического выявления рецидива заболевания, а также возможность производства индивидуального подбора лечебных воздействий для каждой больной.

6.2. «Способ прогнозирования рецидивов рака гортани» (RU 2389030 С1, 2010 г.). Сущность способа заключается в том, что у больных раком гортани после оперативного удаления опухоли в процессе диспансерного наблюдения исследуют уровень андростерона и эстрадиола в суточной моче и определяют отношение первого ко второму. При величине отношения выше 3-х - прогнозируют появление рецидива заболевания или метастаз в ближайшее время. При величине отношения показателя ниже 3 - длительный безрецидивный период. Способ призван прогнозировать появление рецидивов рака гортани и принимать меры к индивидуализации лечебных воздействий.

6.3. «Способ прогнозирования рецидива рака молочной железы» (RU 2263319 С2, 2005 г.). Сущность способа заключается в том, что в динамике наблюдения за менопаузальными женщинами после комплексного лечения констатируют развитие рецидива рака молочной железы при снижении соотношения концентрации эстриола и суммы концентраций эстрона иэстрадиола в моче с 1,68±0,23 у больных без рецидива до 0,74±0,12 у пациенток, проживших без рецидива менее одного года, до 0,65±0,13 у больных, проживших без рецидива от 2 до 6 лет, и до 0,50±0,10 у больных с безрецидивным периодом от 6 до 10 лет. Способ призван обеспечить доклиническое выявление рецидива рака молочной железы.

6.4. «Способ прогнозирования рецидива у больных меланомой кожи» (Патент на изобретение RU 2275637 С2, 2000 - 2004 г.). Сущность изобретения состоит в том, что у женщин репродуктивного возраста определяют суточную экскрецию с мочой эстрона, эстрадиола и эстриола, рассчитывают величину соотношения экскреции эстриола и суммарной величины экскреции эстрадиола и эстрона после лечения и на этапе контрольного наблюдения, и при увеличении указанного соотношения прогнозируют рецидив через 11-12 месяцев после лечения.

6.5. «Способ прогнозирования метастазов и/или рецидивов рака почки» (Патент на изобретение RU 2064179 С1, 1996 г.). Сущность изобретения: с целью доклинического выявления метастазов и рецидивов рака почки после радикального удаления основного очага опухоли определяют отношение свободных 17-оксикетостероидов (17-ОКС) к их сумме в суточной моче и при коэффициенте отношения от 0,01 до 0,07 прогнозируют наличие метастазов и рецидивов. Недостатком способа является, прежде всего, тот факт, что выявленное соотношение между свободными и общими фракциями 17-ОКС указывает на уже имеющееся распространенное опухолевое заболевание, поэтому не может использоваться для прогнозирования дальнейшего течения опухолевого процесса у больных, получивших лечение по поводу первичного рака почки.

Все указанные способы имеют ряд общих недостатков: прогностическая ценность способов снижается при наличии у пациентов гормон-независимых вариантов злокачественных опухолей или при минимальном участии исследуемых гормонов в развитии злокачественных опухолей, например, у женщин в период менопаузы; большинство способов имеют ограничения по тендерному признаку. К тому же, все способы селективны в отношении определенных злокачественных опухолей и требуют для проведения исследований наличия специального оборудования и участия подготовленных специалистов.

Зарубежные способы прогнозирования прогрессии злокачественных опухолевых заболеваний основаны на:

1. Морфологическом исследовании раковых клеток простаты (Prediction of prostate cancer progression by analysis of selected predictive parameters, US 6025128 A, 1994-2000 г.).

2. Исследовании экспрессии зоформ гистонов Macroh2A при раке молочной железы и раке легких (Diagnostic Method for Predicting the Risk of Cancer Recurrence Based on Histone Macroh2A Isoforms, US 20120171225 A1, 2009-2012 г.).

3. Исследовании экспрессии ряда генов (более 200) при раке молочной железы (Prediction of local recurrence of breast cancer, WO 2007049955 A1 (EP 1954820 A1, US 20090220956), 2005-2007 г.).

4. Сравнительном исследовании длины теломер в клетках онкобольного (Assessment of risk of local recurrence of cancer using telomere health, WO 2013049038 A1, 2011-2013 г.).

Основным недостатком перечисленных методов является селективность в отношении определенных видов злокачественных опухолевых заболеваний, а также необходимость использования дорогостоящей узкоспециализированной аппаратуры и привлечения специально обученного персонала.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является «Способ прогнозирования рецидивов и метастазов рака легкого» (Патент на изобретение №2243564, 2003 г.). Способ основан на исследовании уровня антител к антигенам опухоли легкого с использованием реакции пассивной гемагглютинации. При показателе 1/8 и выше констатируют наличие рецидива или метастаза и проводят противоопухолевую химиотерапию, а при уровне антител 1/4 противоопухолевую химиотерапию отменяют. Основным недостатком данного способа является его селективность в отношении только рака легких.

Предлагаемое нами изобретение может применяться при прогнозировании рецидива ряда злокачественных опухолей, не требует применения специального лабораторного оборудования и специально подготовленного персонала.

Обеспечиваемый технический результат изобретения: возможность получения заключения о вероятности рецидива злокачественных опухолей у онкобольных после проведенного лечения на основании оценки кожной иммунологической реакции гиперчувствительности замедленного типа в ответ на введение опухолеассоциированных антигенов (ОАА).

Указанный технический результат обеспечивается тем, что у пациента определяют степень выраженности кожной иммунологической реакции гиперчувствительности замедленного типа. Пациенту внутрикожно вводят опухолеассоциированные антигены с последующим измерением размеров зоны гиперемии кожи в миллиметрах после введения ОАА. У пациента определяют степень выраженности кожной иммунологической реакции гиперчувствительности замедленного типа. Пациенту внутрикожно вводят опухолеассоциированные антигены с последующим измерением размеров гиперемии (покраснения) кожи в миллиметрах. Измерение производят в установленное контрольное время после внутрикожного введения опухолеассоциированных антигенов. Отсутствие гиперемии кожи или размер гиперемии кожи меньше установленной контрольной величины указывает на высокий риск рецидива онкозаболевания. Размер гиперемии кожи свыше установленной контрольной величины указывает на низкий риск рецидива онкозаболевания.

Указанный технический результат обеспечивается также и тем, что способ используется в комбинации с дополнительными диагностическими методами исследования пациента (клиническими, лабораторно-инструментальными и др.), например оценкой психоэмоционального состояния, лабораторных показателей крови и др. для повышения точности прогнозирования рецидива злокачественных опухолей.

Сущность изобретения заключается в оценке состояния специфической противоопухолевой активности иммунной системы, от которой зависит рецидивирование злокачественного опухолевого заболевания.

ПРАКТИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕТОДА

Предлагаемый для клинической практики способ прогнозирования рецидива злокачественного опухолевого заболевания получил название «кожная противоопухолевая проба БС». В пробе «БС» в качестве ОАА использовались лизированные клетки опухолевой линии человеческой меланомы BRO в физиологическом растворе (25 тыс. лизированных клеток в 0,05 миллилитрах физиологического раствора), содержащие все классы опухолеассоциированных антигенов, характерных для злокачественных опухолей различных гистологических видов. Учет результатов пробы проводился через 12 часов после внутрикожного введения ОАА (пик реакции гиперемии кожи при данной концентрации антигена). Проведенное нами клиническое исследование показало, что кожная противоопухолевая проба «БС» - это специфический универсальный диагностический тест, который позволяет оценить состояние специфической противоопухолевой активности иммунной системы у больных злокачественными опухолями любого гистологического вида. Проба основана на иммунологической реакции гиперчувствительности замедленного типа в ответ на внутрикожное введение комплекса антигенов, характерных для злокачественных опухолей различного гистогенеза. Проба является безопасной, может применяться многократно и предназначена для использования врачами-онкологами на этапах диагностики, лечения, реабилитации и динамического наблюдения больных злокачественными опухолями. Применение кожной пробы не требует специальных знаний, специального оборудования и может быть осуществлено в условиях любого процедурного кабинета.

В процессе клинической апробации кожной противоопухолевой пробы «БС» выполнено 217 диагностических процедур с участием 135 онкобольных с 18 видами злокачественных опухолей (рак молочной железы, яичников, матки, шейки матки, вульвы, почек, прямой кишки, толстой кишки, желудка, легких, мочевого пузыря, щитовидной железы, гортани, меланома, плевральная мезотелиома, лимфома, лимфосаркома, острый миелобластный лейкоз). Применение кожной противоопухолевой пробы «БС» в 100% случаев позволяло получить диагностически значимую информацию о состоянии активности специфического противоопухолевого иммунитета у больных злокачественными опухолями, независимо от гистологического вида опухолей и стадии болезни.

Клинические наблюдения показали, что угнетение специфической противоопухолевой активности иммунной системы у больных злокачественными опухолями (показатели пробы «БС» менее 2 мм) с высокой степенью достоверности (р=0,00094) сопровождалось прогрессивным течением злокачественного опухолевого процесса. В то же время, высокий уровень специфической противоопухолевой активности иммунной системы у больных злокачественными опухолями (показатели пробы «БС» более 15 мм) с высокой степенью достоверности (р=0,00091) указывал на благоприятное течение (ремиссию) опухолевой болезни.

Использование в клинической практике пробы «БС» позволяет в определенной мере прогнозировать течение злокачественной опухолевой болезни, оптимизировать комплекс необходимых лечебных мероприятий, что повысит эффективность лечения злокачественных опухолей и сократит расходы на лечение онкобольных. Кроме того, предлагаемый способ (специальный универсальный диагностический гест - кожная противоопухолевая проба «БС») позволяет в определенной мере оценить эффективность проведенного онкобольному лечения (реабилитации). Если активность специфического противоопухолевого иммунитета в результате проведенных лечебных (реабилитационных) мероприятий сохраняется на высоком уровне или повышается, то данные мероприятия являются эффективными с малой вероятностью прогрессии или рецидива заболевания. И наоборот, когда уменьшение активности специфического противоопухолевого иммунитета в результате лечебных (реабилитационных) мероприятий увеличивает вероятность рецидива злокачественной опухоли, то данные лечебные (реабилитационные) мероприятия могут считаться малоэффективными.

Использование в качестве ОАА лизированных клеток других опухолевых линий человека (линии клеток рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака почки, железистого рака молочной железы, стромального рака молочной железы и ряда других) показало эффективность их применения для прогнозирования прогрессии/рецидива соответствующих онкологических заболеваний. В то же время, использование в качестве ОАА клеток опухолевой линии человеческой меланомы BRO имело универсальный характер для оценки риска опухолевой прогрессии у онкобольных при опухолях различного гистогенеза.