ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ СРЕДСТВО ИЗ МОРСКИХ ВОДОРОСЛЕЙ

Изобретение относится к биологическим составам на основе экстрактов растительного происхождения и может быть использовано в качестве гепатопротектора, а также средства, повышающего сопротивляемость организма к воздействию химических веществ техногенного происхождения, отравлениям промышленными ядами и лекарствами.

Известно, что основным барьером, нейтрализующим токсические загрязнения в организме человека и животных, является печень. Заболевания печени и билиарной системы составляют 40% в группе нозологических форм, относящихся к патологии пищеварительной системы.

Согласно современным представлениям, значительную роль в развитии патологии при токсических поражениях печени играют свободнорадикальные реакции. Активные формы кислорода вызывают рост активности процесса перекисного окисление липидов клеточных мембран гепатоцитов, приводящее к нарушению ее функции {Weber, 2003 #1}

Ингибирование подобных процессов природными антиоксидантами оказывает лечебное действие. Такими свойствами обладают растительные полифенолы, которые как вещества с антиоксидантными свойствами, оказывают выраженный гепатозащитный эффект {Венгеровский, 1988 #2}

В настоящее время ведется активный поиск гепатопротекторных средств, повышающих устойчивость печени к патологическим воздействиям, усиливающих ее обезвреживающие функции и способствующие ее восстановлению при различных повреждениях, в том числе при отравлении промышленными ядами.

Известны препараты, обладающие гепатопротекторным действием, относящиеся к классу растительных полифенольных соединений. Это ряд лекарственных препаратов, близких по составу и действию, которые производятся в разных странах под различными названиями: "Силимарин", "Силибор", "Силибинин", "Карсил" и др., получаемые из плодов растения расторопши пятнистой. Однако при лечении этими препаратами в ряде случаев отмечается недостаточная терапевтическая эффективность и наличие различного рода побочных эффектов.

В качестве средств, обладающих гепатопротекторным эффектом, известны также экстракты из гребней калины (п.РФ №2177330 опубл.27.12.2001 г. ), лимонника китайского (п.РФ №2179031 опубл. 10.02.2002 г. ) и экстракт биомассы Maackia amurensis Rupr.et Maxim (п. РФ №2244553 опубл.20.01.2005), экстракт из гребней аралии маньчжурской (п. РФ №23299056 опубл 20.07.2008),

Наиболее близким к заявляемому средству является средство, обладающее гепатопротекторным действием, экстракт Laminaria japonica Aresch. полученный экстракцией слоевищ (таллома) морской водоросли ламинарии японской этанолом и содержащий до 30% полифенольных соединений (п.РФ №2405562 опубл. 24.07.2009).

Задачей изобретения является расширение арсенала гепатопротекторных средств.

Поставленная задача решается средством, обладающим гепатопротекторным действием,, представляющим собой содержащий до 50% полифенольных соединений продукт экстракции этанолом таллома морских водорослей саргассума бледного - Sargassum palidum (Turner) C.Agardh, семейства саргасовых - Sargassaceae.

В отличие от экстракта ламинарии заявляемый экстракт содержит отличный от прототипа комплекс флоротаннинов, что обусловлено широким разнообразием содержащихся полифенолов в различных видах бурых водорослей, отличающихся как по химическому строению, так и по своим биологическим свойствам {Singh, 2013 #2777}. Известно, что даже внутри одного рода Sargassum отмечается большой разброс как по содержанию полифенольных соединений, так и по их биологической активности {Nakai, 2006 #2795}, поэтому с очевидностью нельзя было предположить наличия у комплекса полифенолов, содержащегося в талломе Sargassum pallidum, гепатопротекторных свойств.

Технический результат заключается в проявлении выраженного гепатопротекторного эффекта нового, не применяемого ранее продукта для этих целей экстракта таллома саргассума бледного - Sargassum pallidum (Turner) C.Agardh, семейства саргасовых - Sargassaceae.

Содержание полифенольных соединений в заявляемом средстве по сравнению с прототипом выше на 60%.

В качестве сырья для получения заявляемого средства используют таллом саргассума бледного. Саргассум бледный - Sargassum palidum (Turner) C.Agardh (далее саргассум) относится к отряду бурых водорослей.

Саргассум традиционно используется как пищевой продукт высокой биологической ценности в странах Юго-восточной Азии, а так же, как сырье для получения препаратов альгиновой кислоты (полисахаридный комплекс), применяющихся в качестве энтеросорбентов, маннита и фукоидана. Однако, ввиду того, что Саргассум бледный в России не имеет широкого применения в качестве продукта пищевого назначения, в отличие от Ламинарии японской, то стоимость исходного сырья для производства заявляемого средства значительно ниже, чем прототипа, что увеличивает конечный экономический эффект.

Кроме этого, следует отметить, что промысловые запасы Саргассума бледного в целом ряде районов прибрежных морей Дальнего Востока превышают запасы ламинарии японской {Дуленин, 2012 #3513}.

Известно, что бурые водоросли содержат значимые количества полифенольных соединений, доминирующей группой которых являются флоротаннины. Флоротаннины представляют собой продукты полимеризации флороглюкинола (1,3,5-тригидроксибензола), обладающие широким спектром биологической активности. Это гидрофильные соединения с молекулярной массой в диапазоне от 162 Da до 650 KDa, количество которых в водорослях по литературным данным может достигать до 15% от сухого веса бурых водорослей (Ragan М.А., Golombitza R-W Phlorotannins, brow algal polyphenols. Progr. Phycol.Res. Vol. 4, P. 129-241, 1986). Известно, что экстракты ряда водорослей относящихся к семейству саргассовых - Sargassaceae проявляют гепатозащитное действие {Wong, 2004 #335; Yende, 2014 #153}, тогда как биологическая активность полифенольного комплекса саргассума бледного Sargassum pallidum (Turner) C.Agardh в этом отношении не изучена.

Экстракт из саргассума получают одним из приведенных ниже способов:

- экстрагируют лиофилизованый и измельченный таллом саргассума 95% этиловым спиртом Экстракцию проводят методом реперколяции. Выход экстракта составляет 1 л на 1 кг исходного сырья.

- экстрагируют суховоздушный (высушенный при 40 С) и измельченный таллом саргассума 95% этиловым спиртом Экстракцию проводят методом реперколяции. Выход экстракта составляет 1 л на 1 кг исходного сырья.

После экстракции полученное извлечение отстаивают в холодильнике при температуре 0-4°С для формирования осадка и удаления из экстракта избытка полисахаридов (альгинатов, фукоиданов) и углеводов (маннита), которые не растворимы в этиловом спирте такой концентрации при низкой температуре. После отстаивания экстракт фильтруют, упаривают под вакуумом при температуре не выше 37°С.

Такие параметры являются оптимальными, но не единственно возможными, поскольку экстракцию можно осуществлять этанолом с процентной концентрацией в конечном экстракте не менее 80% и при других соотношениях экстрагента и сырья, получая тот же качественный набор экстрактивных веществ, который и определяет гепатопротекторное действие средства. Сама же гепатопротекторная активность средства, в свою очередь, является суммарным действием полифенольных соединений и других компонентов, образующихся при экстракции заявляемого растительного сырья.

Данные параметры определяют только количество перешедших в экстракт активных компонентов сырья.

Сухой остаток полученного экстракта по данным колориметрического метода с использованием реактива Фолина-Дениса содержит до 50% полифенольных соединений (целевая группа биологически активных веществ). Кроме этого, в состав экстракта входят минеральные вещества, такие как соли калия, натрия, магния, брома, кобальта, железа, кальция, магния, цинка, марганца, соединения серы и фосфора, азотсодержащие вещества, белки, жиры и жирорастворимые пигменты, стероиды, следы полисахаридов, углеводов и ряд других органических соединений.

УФ - спектр поглощения полученного препарата, (фиг.1), имеет характерный для полифенольных соединений максимум при 267 нм. Отсутствие выраженных максимумов в районе 280-400 нм указывает на присутствие группы веществ с высокосопряженными ароматическими структурами. Известно, что эта область поглощения характерна для флоротаннинов бурых водорослей (Ragan М.А., Golombitza R-W Phlorotannins, brown algal polyphenols. Progr. Phycol.Res. Vol. 4, P. 129-241, 1986).

Готовое средство на основе продукта экстракции таллома саргассума обладает низкой токсичностью (ЛД₅₀ составляет 2000 мг/кг) и не оказывает вредного действия при длительных введениях в желудок и парэнтерально, что позволило провести экспериментальные исследования, которые выявили выраженнное гепатопротекторное действие экстракта на модели интоксикации четыреххлористым углеродом (CCl₄). В качестве референсных препаратов сравнения использовали растительный полифенольный препарат «Легалон» (MADAUS AG, Германия), содержащий в своем составе в качестве активного агента группу растительных полифенолов - флавоноидов, выделенных из плодов расторопши пятнистой и экстракт таллома ламинарии японской (п.РФ №2405562 опубл. 24.07.2009). Препарат «Легалон» (далее легалон) является эталонным гепатопротектором, который рекомендован официальными изданиями Фармакопейного комитета в качестве препарата сравнения при испытании новых средств растительной природы, обладающих гепатопротекторными свойствами (Венгеровский А.И., Маркова И.В. и др., Методические указания по изучению гепатозащитной активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Москва. 2000. С. 228-231.).

В настоящее время в экспериментальных исследованиях на животных наиболее широко в качестве гепатотоксического агента используется четыреххлористый углерод (CCL4) (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Р.У. Хабриев (ред): перераб. 2-е изд. Москва, 2005. с. 832), данная модель считается эталоном поражения печени с проявлениями дисфункции органа. Этот яд, в первую очередь, воздействует на мембраны эндоплазматического ретикулума, где, связываясь в качестве субстрата с цитохромом Р-450, метаболизируется с образованием свободных радикалов трихлорметина и хлорина. Свободные радикалы реагируют с макромолекулами внутриклеточных и цитоплазматических мембран, нарушая их проницаемость. Одновременно этот процесс сопряжен с гиперпродукцией супероксиданионов, которые индуцируют перекисное окисление липидов (ПОЛ) и формируют окислительный стресс (Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский образовательный журн. 2000. №12. С. 13-19).

Эксперимент проводили на крысах-самцах Вистар массой тела 210-220 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария и на стандартном рационе питания. Экспериментальную модель острого токсического гепатита (интоксикация четыреххлористым углеродом - CCl₄) на животных (крысах) и введение препаратов осуществляли согласно руководству для проведения доклинических испытаний (Венгеровский А.И., Маркова И.В., Саратиков А.С.Доклиническое изучение гепатозащитных средств // Ведомости фармакологического комитета. 1999. №1. С. 9-12.). Для создания острого гепатита животным вводили подкожно (в дорзальную шейную складку) 2 мл/кг CCl₄ в 50% масляном растворе (оливковое масло) ежедневно в течение 4 дней. С 5-го дня эксперимента крысы получали в течение 7-и дней внтурижелудочно 100 мг/кг легалона (в виде взвеси в 1% растворе крахмала), экстракт таллома ламинарии японской или экстракт таллома саргассума бледного в дозе 100 мг/кг в пересчете на общие полифенолы (в форме раствора в 1% растворе крахмала). Выбор дозы для препарата сравнения осуществляли на основе литературных данных. (Венгеровский А.И., Маркова И.В., Саратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств // Ведомости фармакологического комитета. 1999. №1. С. 9-12.). Животным контрольных групп вводили эквиобъемное количество 1% раствора крахмала. Через сутки после последнего введения препаратов крыс выводили из эксперимента методом дислокации шейных позвонков под легким эфирным наркозом. Терапевтическую эффективность гепатопротекторов оценивали по их влиянию на выживаемость животных, весовые характеристики печени и биохимические показатели плазмы крови. В плазме крови определяли активность аланинаминотрансферазы (АЛАТ), содержание малонового диальдегида (МДА), антирадикальную активность плазмы крови и показатели системы антиоксидантной защиты: активность супероксиддисмутазы (СОД), глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР), а также содержание восстановленного глутатиона (Г-SH).

Животные были разделены на следующие группы по восемь штук в каждой: 1-я -контрольная (интактные); 2-я - введение CCU в течение 4 дней; 3-я - введение CCl₄ с последующей отменой (депривация) в течение 7 дней; 4-я - ведение экстракта из ссаргассума в период депривации в течение 7 дней; 5-я - введение легалона в период депривации в течение 7 дней; 6-я - введение экстракта из ламинарии японской в период депривации в течение 7 дней.

В процессе эксперимента после 4-дневного введения CCl₄ масса животных снизилась на 20% (р<0,001), а удельная масса печени (г/100 г массы тела) животных увеличилась на 57% (р<0,01) (Таблица 1).

При внешнем осмотре у животных шерсть была тусклой, слипшейся в отдельные образования. Животные были слабо подвижны, плохо ели корм. В печени отмечалась сплошная зернистость жировых включений, то есть проявлялась выраженная жировая инфильтрация, характерная при интоксикации CCl₄. Это подтверждается тем фактом, что количество общих липидов в печени превышало контрольный уровень в 4 раза (р<0,001) (Таблица 2).

Увеличение активности в крови маркерного фермента печени АлАТ более чем в 3 раза (р<0,001) обусловлено развитием токсического гепатита в данной экспериментальной модели, что связано с выходом фермента из гепатоцитов в кровь в результате повышения проницаемости мембран.

Как видно из таблицы 3, после интоксикации CCl₄ активность супероксиддисмутазы (СОД), ключевого фермента антиокислительной защитной системы, была на 59% ниже (р<0,001) контрольного уровня, а антирадикальная активность (АРА) плазмы крови снижена на 37% (р<0,001). Также отмечалось снижение активности глутатионпероксидазы (ГП) на 21% (р<0,001), глутатионредуктазы (ГР) на 28% (р<0,001) и содержания восстановленного глутатиона (Г-SH) на 41% (р<0,001). Такие нарушения в показателях системы антиоксидантной защиты можно определить как ее истощение. Нарушения антиоксидантной защитной системы сопровождались увеличением количества малонового диальдегида (МДА) в 2,2 раза (р<0,001). Данный показатель характеризует высокую активность перекисного окисления жирных кислот, входящих в состав мембранных фосфолипидов, что сопровождается повышением проницаемости мембран гепатоцитов, которое и обусловливает увеличение активности АлАТ в плазме крови крыс.

Таким образом, экспериментальные данные свидетельствуют о том, что при интоксикации четыреххлористым углеродом развивается выраженный гепатотоксический эффект, который проявляется в активации перекисного окисления липидов, истощении системы антиоксидантной и антирадикальной защиты организма, повышении проницаемости мембран.

На основании выше изложенного следует отметить, что выполненная экспериментальная модель интоксикации CCl₄ действительно способствовала развитию токсического гепатита с нарушением метаболических реакций печени.

Через 7 дней после отмены CCl₄ (период депривации) в печени подопытных животных (3-я группа) большинство изученных параметров имело тенденцию к дальнейшей дерегуляции, что свидетельствовало о продолжающемся токсическом стрессе и недостаточности собственных защитных сил организма противостоять развитию токсической патологии.

Масса животных в период депривации (отмена CCl₄) (Таблица 1) осталась на уровне 2-й группы (CCl₄), оставаясь на уровне достоверно ниже контроля на 18%, (р<0,001). Удельная масса печени животных увеличилась на 8% (р<0,05) относительно 2-й группы (CCl₄), превышая контрольные показатели на 70% (р<0,001). В печени при вскрытии имелись зернистые включения липидов. Животные при внешнем осмотре были слабо подвижны, плохо ели корм, шерсть была тусклой. Количество общих липидов (Таблица 2) в печени относительно 2-й группы снизилось на 15% (р<0,001), тогда как относительно контрольного уровня их содержание было в 2,5 раза (р<0,001) выше. О сохранении токсического гепатита в данной группе животных свидетельствует достоверно высокая относительно контроля (2,5 раза, р<0,001) активность маркерного фермента печени АлАТ. Не возвратились к норме и биохимические показатели антиоксидантной защиты. Так, величина АРА стала еще меньше (на 39% относительно контроля, р<0,001). Активность СОД оставалась на уровне показателей 2-й группы (на 60% ниже контрольного уровня). Отмечали дальнейшее снижение активности ГП относительно контроля на 28% (р<0,001) и ГР на 41% (р<0,001), что обусловило и дальнейшее снижение пула восстановленного, который был ниже на 54% (р<0,001) по сравнению с таковым у интактных животных. Состояние нарушения защитной системы печени в период депривации сопровождалось дальнейшим нарастание количества МДА, превышавшего контрольные значения более чем в 2,5 раза 71% (р<0,001). Все эти факторы являются результатом дальнейшей дерегуляции антиоксидантного статуса организма в период депривации. То есть, в период депривации токсический стресс усиливается из-за присутствия продуктов метаболизма ксенобиотика, а также из-за истощения антиоксидантной защиты.

Таким образом, данные по анализу исследованных биохимических параметров печени указывают на продолжающиеся и углубляющиеся нарушения метаболических реакций даже в отсутствие токсического агента (период депривации).

Исследования по применению известного гепатопротектора легалона, экстракта ламинарии и экстракта из таллома саргассума в период отмены CCl₄ показали, что полученный биологический эффект влияния был, в общем, схож, но в ряде случаев имел разную степень выраженности (таблицы 1-3; 4-я, 5-я и 6-я группы). При действии всех трех препаратов отмечалась выраженная тенденция к нормализации исследуемых биохимических показателей. Так, отмечалось восстановление весовых характеристик животных (увеличение веса относительно 3-й группы), в среднем, на 21% (р<0,001) в 4-й группе (саргассум), на 9-11% (р<0,01) в 5-й группе (легалон) и 6-й (ламинария). Обращает на себя внимание факт выраженной тенденции к восстановлению удельной массы печени в сторону контрольных показателей. У животных шерсть стала гладкой, пушистой, они начали хорошо есть и активно двигаться. При этом, если при введении экстракта из саргассума и ламинарии количество общих липидов в печени относительно контроля было близко к норме, то при введении легалона эта величина была на 39% (р<0,001) выше контрольных значений. Однако при сравнении с группой депривации (3 группа) значения содержания общих липидов в печени крыс в 4-й, 5-й и 6-й группах были ниже более чем в 2 раза (р<0,001).

Тот факт, что активность маркерного фермента токсического гепатита АлАТ достоверно не отличалась от контрольных значений при введении экстрактов из саргассума и ламинарии, свидетельствует о их мембраностабилизирующих свойствах. В то же время при введении легалона активность АлАТ была достоверно выше контрольного уровня на 19% (р<0,05), что свидетельствует о не полном восстановлении структуры мембран гепатоцитов. При сравнении показателей перекисного окисления липидов мембран (МДА) следует отметить, что в 4-й группе (экстракт саргассума) произошло восстановление этого показателя до контрольных величин, тогда как в группах животных с введением легалона и ламинарии величина МДА была соответственно на 23% и 16% (р<0,05) выше интактного контроля. Однако относительно 3-й группы (депривация) значение МДА было снижено при введении всех препаратов на 41%, 28% и 32% (р<0,001) соответственно для 4-й, 5-й и 6-й групп.

Схожая тенденция прослеживалась и в изменениях показателей антиоксидантной защиты. При сравнении исследованных биохимических показателей в 4-й, 5-й и 6-й группах с таковыми в 3-й группе (депривация) отмечались статистически достоверные различия. Так, АРА при введении экстрактов из саргассума и ламинарии увеличились на 63% (р<0,001) и 57% (р<0,001) соответственно. При этом активность СОД в обеих группах возросла в 1,5 раза (р<0,001), ГП на 39% (р<0,001). Активность ГР в группе получавшей экстракт саргассума возросла на 57% (р<0,001), а содержание восстановленного глутатиона увеличилось более, чем в 2 раза (р<0,001). В группе получавшей экстракт ламинарии указанные величины возросли на 46% (р<0,001) и 95% (р<0,001) соответственно. Уровень МДА в 4-й и 6-й группах снизился соответственно на 41% и 32% (р<0,001) по сравнению с таковым у животных 3-й группы. При введении эталонного гепатопротектора легалона АРА увеличились на 37% (р<0,001), на фоне увеличения активности СОД более, чем в 2 раза (р<0,001) при снижении содержания МДА на 28% (р<0,001). Отмечали увеличение активности ферментов системы глутатионовго цикла ГП и ГР на 16% (р<0,001) и 29% (р<0,001) соответственно при увеличении на 87% (р<0,001) пула восстановленного глутатиона.

При сравнении биохимических показателей у животных 4-й группы (экстракт саргассума) с таковыми у получавших препараты сравнения легалон (5-я группа) и экстракт ламинарии (6-я группа) можно отметить имеющиеся достоверные отличия. Так в 5-й и 6-й группах, в отличии от 4-й группы отмечалось не полное восстановление массы тела животных и удельная масса печени, что свидетельствует о сохраняющихся процессах токсического гепатита. Достоверно более низкий уровень МДА в плазме крови животных 4-й по сравнению таковым у животных из 5-й и 6-й и величины АРА в 4-й группе по сравнению с 5-й, указывает на превышение физиологически обусловленного уровня свободно-радикальных процессов. В пользу данного предположения свидетельствует и достоверно более низкий уровень активности ГР и содержания восстановленного глутатиона у животных в группах получавших препараты сравнения. Активность СОД в 4-й группе была достоверно выше на 26% (р<0,001) таковой в 5-й. Схожая тенденция отмечалась и в значениях показателей глутатионовго цикла. Так активность ГП была выше на 20% (р<0,001), ГР на 22% (р<0,001), Г-SH на 12% (р<0,01), чем соответствующие показатели у животных 5-й группы. При сравнении с животными 6-й группы (ламинария) у животных 5-й группы отмечали достоверно более высокое значение активности ГР на 7% (р<0,05) и содержание восстановленного глутатиона на 12% (р<0,01). Это указывает как на сохранение у животных 6-й группы (ламинария) определенной напряженности в наиболее чувствительных звеньях цепи ферментов антиоксидантной защиты, так и на определенный уровень интоксикации в организме, что вызывает повышенный расход восстановленного глутатиона.

Факт восстановления уровня антирадикальной и антиоксидантной активности, пула восстановленного глутатиона, снижении перекисного окисления липидов при введении экстракта из саргассума и тенденции к восстановлению этих показателей при введении экстракта из ламинарии и легалона, свидетельствует о регуляции окислительно-восстановительного баланса в организме под действием полифенолов, которые эффективно инактивируют свободные радикалы и супероксиданионы. Поскольку полифенолы обладают и протонофорными свойствами, у исследуемого препарата возникает возможность формирования пула восстановленного глутатиона.

Полученные нами экспериментальные результаты свидетельствуют о том, что экстракт из саргассума, содержащий полифенольный комплекс флоротаннинов, проявляет выраженное антитоксическое действие при поражении четыреххлористым углеродом. Они способствуют ускоренному восстановлению каскадов метаболических реакций, обеспечивая нормализацию биохимических показателей системы антиоксидантной и антирадикальной защиты.

Механизм терапевтического действия исследуемого препарата обусловлен благоприятным влиянием полифенолов на нарушение токсикантом метаболизма и функций печени, что выражается в ингибировании свободнорадикальных реакций и уменьшении образования токсических продуктов липопероксидации, поддержании уровня восстановленного глутатиона и антирадикальной активности.

Таким образом, исследованный препарат из сарагассума превосходит эталонный гепатопротектор легалон по способности увеличивать антирадикальную и антиоксидантную активность и снижать липопероксидацию, а также превосходит принятый прототип по способности предотвращать истощение пула восстановленного глутатиона.

В качестве факторов химической природы был избран, помимо четыреххлористого углерода, тиопенталовый наркоз. Тиопентал вводили крысам внутрибрюшинно в дозе 60 мг на кг массы тела через 2 часа после внутрижелудочного введения легалона (100 мг на кг массы тела), экстракта из саргассума или ламинарии (100 мг ОПФ на кг массы). В контрольной группе погибла 1 крыса. Во 2-й, 3-й и 4-й группах гибели не было. Как видно из таблицы 4, предварительное введение препаратов сопровождается достоверным снижением времени бокового положения, что указывает на активацию монооксигеназной системы, осуществляющей биотрансформацию ксенобиотиков. Действие экстракта из ламинарии и легалона было идентичным, тогда как время бокового положения при действии экстракта саргассума было меньше, хотя и не достигало достоверного различия.

Таким образом, исходя из полученных экспериментальных данных, следует:

1. Экстракт из таллома саргассума бледного обладает выраженным гепатопротекторным действием как при поражении печени CCI₄, так и при введении тиопентала.

2. Механизм терапевтического действия экстракта из саргассума обусловлен его благоприятным влиянием на нарушения метаболизма и функции печени под действием токсиканта. Так как биохимические показатели крови являются отражением состояния функции печени, то гепатопротекторные свойства экстракта из саргассума заключаются в следующем:

- Экстракт восстанавливает активность ферментов эндогенной системы антиоксидантной защиты СОД, ГП, ГР.

- Сохраняет пул восстановленного глутатиона в системе антиоксидантной защиты печени за счет протонофорных свойств, содержащихся в нем флоротаннинов.

- Ингибирует свободнорадикальные реакции, повышает антирадикальную активность печени и уменьшает образование токсических продуктов липопероксидации.

- Стабилизирует мембраны гепатоцитов за счет встраивания флоротаннинов саргассума в пределах липидного бислоя плазматической мембраны, нормализуя их структуру и тормозит выход в плазму крови печеночных ферментов (АлАТ)

- Снимает жировую инфильтрацию печени.

Заявляемое средство в условиях интоксикации CCl₄ превосходит эталонные гепатопротекторы легалон и экстракт ламинарии по способности в большей степени восстанавливать массу животных, удельную массу печени, количество общих липидов и активность АлАТ; повышать антирадикальную и антиоксидантную активность печени, предохранять от истощения пул восстановленного глутатиона

Таким образом, заявляемое средство позволяет расширить ассортимент гепатопротекторных средств, при этом находят применение новые источники полифенольных соединений, не применяющиеся ранее для этих целей, а именно бурая водоросль саргассум бледный (Sargassum pallidum) из морей Дальнего Востока.