Результат интеллектуальной деятельности: Способ лечения субклинического мастита у коров

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано при лечении субклинического мастита у коров в период сухостоя.

Лечение субклинического мастита у коров в период сухостоя имеет свои особенности, т.к. сухостойный период является важнейшей фазой цикла лактации коров, он физиологически необходим для сохранения здоровья коров, продления срока их жизни, получения жизнеспособного приплода и высокой молочной продуктивности.

Известный способ лечения мастита у коров в сухостойный период включает введение препарата антимикробного действия, в качестве которого используют апрамицин в сочетании с ксантановой смолой в соотношениях, мас. %: апрамицин - 5,0-10,0; ксантановая смола - 0,25-1,0; дистиллированная вода - остальное до 100, причем препарат вводят интрацистернально, после последней вечерней дойки перед переводом в сухостойную группу в количестве 10 мл одноразово (RU 249121 С1, 10.09.2013).

Недостатком данного способа лечения субклинического мастита у коров в период сухостоя заключается в том, что антибиотик, входящий состав препарата, вызывает гибель не только патогенной, но и симбионтной микрофлоры молочной железы, происходит селекция микрофлоры с повышенной резистентностью к антибиотикам. Что приводит к снижению неспецифической резистентности тканей молочной железы, развитию дисбактериоза [Ивашура А.И. Система мероприятий по борьбе с маститами коров: монография / А.И. Ивашура. - Москва: Росагропромиздат, 1991. - 240 с.], во-вторых интрацистернальное введение препаратов, содержащих антибиотики, не всегда эффективно, часто приводит к значительным морфологическим изменениям в тканях пораженной доли, вызывает раздражение эпителия молочных протоков и альвеол, угнетая защитные реакции организма, изменяет течение болезни, а также способствует возрастанию резистентных штаммов микроорганизмов. Большая группа антибиотиков трансплацентарно оказывает токсическое влияние на плод, вызывает аллергию у молодняка сельскохозяйственных животных, дисбактериозы и вторичные иммунодефицитные состояния [Красочко П.А. Болезни сельскохозяйственных животных: монография / П.А. Красочко, М.В. Якубовский, А.И. Ятушевич. Минск: Бизнесофсет, 2005. - 1388 с. Применение афлогилекса для лечения коров с маститом различной этиологии / А.В. Рыбакова [и др.] // Ветеринария. - 2012. - №1. - С. 35-38], в-третьих, одна лишь такая обработка не предохраняет от новых инфекций на более поздних стадиях, что объясняется ограниченным сроком действия антибиотиков.

Известен способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров путем введения в организм животного пробиотика, отличающийся тем, что в качестве пробиотика используют Ветом-3, который вводят однократно интрацистернально в дозе 0,5 г, растворенным в 5 мл теплого физиологического раствора хлорида натрия (RU 2239445 С1, 10.11.2004, прототип).

В известном способе применение пробиотика Ветом-3, действующим началом которого являлись Bacillus subtillis ВКПМВ-7048, было направлено на повышение эффективности способа лечения коров, больных субклиническим маститом, в период лактации.

Задачей изобретения является получение молозива и молока высокого санитарного качества, сохранности новорожденных телят.

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности лечения мастита у коров в период сухостоя.

Технический результат достигается тем, что в способе лечения субклинического мастита, предусматривающем диагностирование мастита и введение в организм животного пробиотика Ветом-3, последний используют на основе Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-10642 (DSM 24614), диагностируют мастит в период сухостоя путем определения плотности ρ сгустка, образованного при смешивании секрета молочной железы и 5% раствора мастидина, при ρ≤0,8-1,2 пробиотик вводят однократно интрацистернально в пораженные доли вымени, растворенный в дозе 0,3-0,35 г, при ρ≥1,3-1,9 - в дозе 0,5-0,55 г.

Ветом-3 – пробиотик, является живыми микробными клетками бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-10642 (DSM 24614), в 1 г препарата содержится 1×10⁶ КОЕ (колониеобразующих единиц), повышается уровень неспецифической резистентности организма, стимулируются клеточные и гуморальные факторы иммунитета.

Экспериментальными исследованиями установлено, что коровы, прошедшие курсовое лечение пробиотиком на основе Bacillus amyloliquefaciens ВКГМ В-10642 (DSM 24614) в дозе 0,3-0,35 г, дают молозиво (молоко) более высокого санитарного качества, чем при лечении антибиотиком (дифумастом).

Для опыта были отобраны телята черно-пестрой и красной степной пород, аналоги по живой массе и возрасту.

Животных разбили на 3 группы (по 6 голов в каждой):

- 1 (К) - контрольная группа;

- 2 (O-1) - группа телят, получавшая молоко от коров, прошедших лечение пробиотиком на основе Bacillus amyloliquefaciens;

- 3 (O-2) - группа телят, получавшая молоко от коров, прошедших лечение дифумастом.

Для изучения влияния пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens и антибиотика на состав микрофлоры желудочно-кишечного тракта были исследованы пробы кала телят контрольной и опытных групп в возрасте 12-14 дней. Пробиотический препарат и дифумаст вводились в молочную железу коровам, больным субклиническим маститом, за 2 недели до предполагаемого отела и по результатам исследований на 4 день лактации. После лечения молоко выпаивалось телятам. Оценка динамики изменений состава микрофлоры проводилась исследованием проб кала телят в возрасте 12-14, 13-15 и 18-20 дней.

Пробы фекалий отбирались на исследование до начала опыта. Телят на протяжении всего опыта выпаивали молоком, полученным от леченых коров. Далее через сутки были взяты пробы фекалий на исследование и на 5-1 день опыта.

Установлено, что в кишечнике телят контрольной группы общее микробное число (количество мезофильно-аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов) на протяжении опыта не менялось. В первой опытной группе оно увеличилось на 10%, а во второй наоборот уменьшилось на 30%. При этом наблюдалось увеличение содержания кишечной палочки в контрольной группе и первой опытной группах, а во второй - уменьшилось на 27%.

Спустя 5 суток соотношение молочнокислой микрофлоры и кишечной палочки изменилось, в 1 опытной группе (O-1) увеличилось содержание молочнокислой микрофлоры в кишечнике у телят и составило 1,4:1, во второй опытной группе количество молочнокислых микроорганизмов уменьшилось в 1,6 раза, соотношение молочнокислой микрофлоры и кишечной палочки составило 1:1,28, что указывало на дисбаланс в экосистеме кишечника телят.

В двух опытных группах наблюдалось снижение содержания условно-патогенной микрофлоры - стафилококков и стрептококков.

Таким образом, молоко, полученное из долей, подвергавшихся лечению пробиотиком на основе Bacillus amyloliquefaciens, практически не изменяло микробную экосистему в желудочно-кишечном тракте у телят. Наоборот, было отмечено изменение микробиологического состава в сторону полезной микрофлоры. Это объяснялось увеличением содержания молочнокислой микрофлоры, кишечной палочки, ингибированием роста и размножения условно-патогенной микрофлоры, а молоко, полученное из долей, подвергавшихся лечению дифумастом, снизило общее микробное число, в том числе и полезную микрофлору, т.е. остаточное количество антибиотика нарушило микробную экосистему в желудочно-кишечном тракте у телят, приведя к дисбалансу в экосистеме кишечника.

Пример 1. Для определения оптимальной лечебной дозы Ветома-3 основе бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-10642 (DSM 24614) отобрали 30 сухостойных коров, больных субклиническим маститом. Из них сформировали 3 группы по принципу пар-аналогов (п=10 голов). В группы включили коров одинакового возраста, продуктивности, периода сухостоя с одинаковым количеством пораженных долей вымени. Животным опытных групп вводили Ветом-3 через сосковый канал однократно в следующих дозах: первой группе - 0,1-0,15 г, второй - 0,3-0,35 г, третьей - 0,5-0,55 г. Перед введением препарат растворяли в 5,0 мл теплого физиологического раствора хлорида натрия.

Учет результатов лечения проводили путем постановки реакции секрета с 5% мастидиновым тестом на 10-е сутки после введения препарата. При этом образованный сгусток, в результате смешивания секрета молочной железы и диагностикума, имел различную плотность. Плотность вычисляли по формуле , где m - масса, V - его объем; V равен 2 мл (1 мл секрета + 1 мл диагностикума), m - массу измеряли на аналитических весах (поверенных).

Перед введением препарата плотность (ρ) образованного сгустка, полученного в результате смешивания секрета молочной железы и диагностикума, у всех коров была одинакова и составляла в среднем 1,197 г/см³. Содержание соматических клеток в секрете определяли по методу Прескотта-Брида. После введения препарата в различных дозах в пораженные доли вымени на 10-е сутки получили следующие результаты, которые обобщены в таблице 3.

Из материалов таблицы 3 следует, что в результате проведенного исследования объем плотности сгустка при дозе 0,3-0,35 г и 0,5-0,55 г получился одинаковый и составил 0,872-0,873 г/см³, содержание соматических клеток в секрете составило 919-920 тыс./мл, следовательно, наибольший терапевтический эффект получен после однократного интрацистернального введения Ветома-3 в дозе 0,3-0,35 г.

Уменьшение дозы вводимого препарата до 0,1-0,15 г привело к снижению на 20,0% количества выздоровевших животных и на 8,4% - количества излеченных долей. Увеличение дозы Ветома-3 до 0,5-0,55 г не привело к увеличению числа излеченных животных и пораженных долей.

Пример 2. Для выявления зависимости между плотностью образованного сгустка в результате диагностического исследования с 5% раствором мастидина и количеством соматических клеток в секрете провели исследование секрета молочной железы у коров, больных субклиническим маститом (6 голов, 12 пораженных долей). Препарат вводили в пораженные доли в зависимости от количества соматических клеток. Контролем служили симметричные здоровые доли вымени, в которые препарат не вводили. Препарат растворяли в теплом физиологическом растворе натрия хлорида и с соблюдением правил асептики вводили однократно в пораженные (1 и 2 опытная) субклиническим маститом доли вымени. Содержание соматических клеток в секрете определяли по методу Прескотта-Брида, результаты представлены в таблице 4.

В результате проведенных исследований установлено, что интрацистернальное введение испытуемого препарата в пораженные доли субклиническим маститом (1 опытная), привело к снижению количества соматических клеток в секрете в 3,5 раза, при этом плотность сгустка, образованного в результате смешивания секрета и 5% р-ра мастидина, в среднем составляла 0,71 г/см³, в пораженные субклиническим маститом (2 опытная) - в 3,2 раза, плотность сгустка составляла в среднем 1,15 г/см³. В здоровых долях вымени (контроль) количество соматических клеток уменьшилось на 7% (при плотности сгустка - 0,88 г/см³).

Применение Ветома-3 на основе бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-10642 (DSM 24614) при субклиническом мастите у сухостойных коров наряду с повышением эффективности лечебных мероприятий позволяет получить молозиво и молоко высокого санитарного качества, повысить сохранность новорожденных телят, предупредить случаи дисбактериоза и диспепсии новорожденных телят.