Результат интеллектуальной деятельности: Способ диагностики псориатической эритродермии

Изобретение относится к медицине, в частности дерматовенерологии и патологической анатомии.

Известен способ диагностики псориатической эритродермии путем изучения клинических, анамнестических и катамнестических данных, а также гистологического исследования (Marti Jill Rothe, Megan L, Bernstein BS et al. Life-threating erythroderma: diagnosing and treating the «red man». Clinics in Dermatology 2005; 23: 206-217).

Недостатком этого способа является то, что при диагностике не используются специфические биомаркеры. Клинические, анамнестические и катамнестические данные являются неспецифическими для верификации диагноза эритродермии псориатической, а в ряде случаев критерии гистологического анализа, такие как псориазиформный акантоз, гипер/паракератоз, гипогранулез, нейтрофилы в эпидермисе и дерме, не могут быть точно определены ни на какой стадии болезни.

Ближайшим к заявляемому является способ диагностики псориаза с помощью изучения экспрессии биомаркеров S100, А7, А8 и А9 (Villanova F, Di Meglio P, Nestle F.O, et al. Biomarkers in psoriasis and psoriatic arthritis. Ann Rheum Dis 2012; 72: Suppl 2: 104-10).

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что эти маркеры являются распространенными воспалительными медиаторами, которые высоко экспрессируются не только при специфических заболеваниях, таких как псориаз, но также и при других воспалительных кожных заболеваниях. Применение вышеперечисленных биомаркеров для диагностики псориатической эритродермии приводит к постановке ошибочного диагноза и назначению нерациональной терапии.

Другим недостатком способа является отсутствие единого биомаркера для диагностики псориатической эритродермии. Использование единовременно нескольких биомаркеров приводит к поздней постановке диагноза и большим денежным затратам.

Задачей настоящего изобретения является повышение точности диагностики при удешевлении способа.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе диагностики псориатической эритродермии, заключающемся в иммуногистохимическом исследовании, согласно изобретению при наличии выраженной экспрессии биомаркера IL-36γ в виде послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев эпидермиса диагностируют псориатическую эритродермию.

Патогенетической основой IL-36γ является то, что он вызывает производство типичных для псориаза цитокинов IL-12, IL-23 и TNF alfa. Это способствует воспалению кожи, действуя на кератиноциты, дендритные клетки (расположенные в эпидермисе) и косвенно на T-лимфоциты. Важным механизмом окрашивания этих слоев эпидермиса при использовании IL-36γ является то, что при псориатической эритродермии происходит хемотаксис нейтрофилов и скопление их в шиповатом и зернистых слоях.

Определение экспрессии биомаркера IL-36γ в биоптатах кожи пациентов позволяет с высокой точностью диагностировать эритродермию псориатическую в ранние сроки, оптимизировать терапию уже на ранних стадиях заболевания, что имеет существенное значение в прогнозе заболевания.

Выявление экспрессии биомаркера IL-36γ при диагностике псориатической эритродермии, которое выполняется в первые 3 суток от момента поступления больного, имеет важное значение, так как пациенты поступают в тяжелом состоянии, с признаками нарушения электролитного дисбаланса и сопутствующими патологиями. В клинической практике своевременная точная диагностика и знание основного заболевания, вызвавшего эритродермию, имеет огромное значение для назначения адекватной терапии и профилактики. При этом можно избежать назначения системных глюкокортикостероидных гормонов и осложнений терапии.

Наряду с этим, выявление случаев псориатической эритродермии посредством морфологического определения биомаркера IL-36γ в ранние сроки позволяет сократить сроки исследования внутренних органов и снизить денежные затраты.

Способ осуществляется следующим образом. При выявлении у поступивших больных эритродермии (диффузное покраснение кожи), имеющих в анамнезе хроническое заболевание кожи или без предшествующих дерматозов, выполняется биопсия кожи из наиболее инфильтрированного участка и направляется на гистологическое и иммуногистохимическое исследование (ИГХ). После стандартной проводки на парафиновых срезах выполняется иммуногистохимическое исследование по схеме, рекомендуемой фирмой производителя, используя моноклональные мышиные IgG1 античеловеческие IL-36γ антитела (ab156783, Abcam, Cambridge, MA, USA; в разведении 1:1500). Визуализация выполняется красящим компонентом Real (Дако, Гамбург, Германия) с Fast Red хромогеном. Положительным результатом ИГХ реакций является наличие специфического послойного позитивного окрашивания ядер и цитоплазматической мембраны клеток эпидермиса при экспрессии вышеуказанного маркера.

Пример 1. В дерматологическое отделение Ленинградского областного центра специализированных видов медицинской помощи 12.02.2015 г. (выписной эпикриз №15752) поступила больная К., 42 л., с жалобами на поражение кожи всего кожного покрова. Считает себя больной в течение 1 месяца, когда впервые появились пятна в области живота. При обращении к дерматологу по месту жительства выставлялись различные диагнозы: экзема, экзематид, аллергический дерматит и назначена наружная горманальная терапия. Через 4 дня от начала лечения кожный процесс начал распространяться и за 1 день охватил весь кожный покров. На момент осмотра вся кожа была красного цвета, инфильтрирована, утолщена, активно шелушилась. На ладонях и подошвах наблюдался гиперкератоз. При гистологическом исследовании выявлены: в эпидермисе ортокератоз, паракератоз, псориазиформный (колбовидный) акантоз. В дерме периваскулярный скудный инфильтрат преимущественно из лимфоцитов.

При иммуногистохимическом исследовании с использованием биомаркера IL-36γ наблюдается резко выраженное послойное специфическое окрашивание ядер и цитоплазматической мембраны клеток шиповатого и зернистого слоев.

На основании применения заявляемого способа диагностики поставлен диагноз: эритродермия псориатическая.

Пример 2. Больной З., 39 л., доставлен в университетскую клинику Бонн, Германия, 24.05.2015 г. №236/15 с клинической картиной диффузного покраснения кожи. При осмотре обнаружено универсальное покраснение всего кожного покрова, утолщение ногтевых пластинок, озноб и общая интоксикация. Выполнили биопсию кожи из наиболее инфильтрированного участка. Из анамнеза известно, что болеет вульгарным псориазом с 15 лет. Болезнь протекала с периодической ремиссией и обострением, но тотального поражения никогда не наблюдалась. При проведении гистологического исследования выявлены паракератоз, гипогранулез, неравномерный акантоз. В дерме выявляется периваскулярный лимоцитарный инфильтрат с примесью небольшого числа нейтрофилов. В связи с отсутствием специфических гистологических признаков, характеризующих псориаз, биоптат кожи направлен на ИГХ исследование.

При ИГХ исследовании с использованием биомаркера IL-36γ наблюдается резко выраженное послойное специфическое окрашивание ядер и цитоплазматической мембраны клеток всех слоев эпидермиса.

На основании применения заявляемого способа диагностики поставлен диагноз: эритродермия псориатическая.

Заявляемый способ является простым, точным, быстрым и бюджетным методом ранней диагностики псориатической эритродермии. Выполнение заявляемого способа можно осуществлять в кратчайшие сроки после поступления больного. Учитывая отсутствие в ряде случаев анамнеза, специфических гистологических признаков и тяжелое торпидное течение заболевания, фактор времени и точность диагноза являются ключевыми в принятии решения о назначении специфической терапии.

Заявляемый способ доступен врачам дерматопатологам, патологоанатомам и не требует проведения большого количества лабораторных и инструментальных исследований для постановки диагноза.

Способ позволяет в ранние сроки диагностировать псориатическую эритродермию и назначать адекватную системную терапию и профилактику обострения заболевания.