Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ПЛАЦЕНТАРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ВО ВТОРОЙ ПОЛОВИНЕ БЕРЕМЕННОСТИ

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности.

Плацентарная недостаточность является важнейшей проблемой акушерства и перинатологии. Различные факторы, воздействующие на материнский организм с ранних сроков беременности и приводящие к нарушению имплантации, формирования фетоплацентарного комплекса, внутриутробному неблагополучию эмбриона, способствуют развитию гестационных осложнений (Течение и ведение беременности по триместрам / И.С.Сидорова, И.О. Макаров. - М.: МИА, 2009. - 304 с.). Отсутствие единого подхода к клинической классификации, диагностике, лечению ведет к нерациональной акушерской тактике и неблагоприятным перинатальным исходам (Комплексная оценка степени тяжести хронической плацентарной недостаточности / А.Н. Стрижаков, И.С. Липатов, Ю.В. Тезиков // Акуш. и гин. - 2012. - №3. - С.20-25). Учитывая большое количество спорных практических вопросов, касающихся плацентарной недостаточности, возникает необходимость прогнозирования данного осложнения гестации с целью своевременной профилактики неблагоприятных исходов беременности.

Существует способ раннего прогнозирования плацентарной недостаточности путем определения уровня микроальбуминурии (Пат. №2410030. Российская Федерация. Способ раннего прогнозирования плацентарной недостаточности / Макаров О.В., Волкова Е.В., Пониманская М.А., Кушхов Р.Х. // Изобретения. Полезные модели. - 2011. - №3). В первом триместре беременности определяют уровень микроальбуминурии и при его значении, равном и более 45 мг/л, прогнозируют плацентарную недостаточность. Данный способ трудно рекомендовать для скринингового обследования, поскольку микроальбуминурия не является специфическим маркером плацентарной недостаточности. В норме экскреция альбумина с мочой у взрослых составляет 10 мг в сутки, также протеинурия имеет физиологический характер (употребление белковой пищи, стресс, физические нагрузки). Повышенная экскреция альбумина является чувствительным маркером повреждения почек при сахарном диабете, артериальной гипертензии, инфекционных заболеваниях почек, кроме того, протеинурия наблюдается при неправильном сборе мочи.

Существует способ доклинического прогнозирования плацентарной недостаточности (Пат. №2148256. Российская Федерация. Способ доклинического прогнозирования плацентарной недостаточности / Смиренина И.В., Пестрикова Т.Ю. // Изобретения. Полезные модели. - 2000. - №12). Данный способ заключается в том, что путем исследования крови определяют содержание молекул средней массы и при показателях более 0,220, 0,230 и 0,240 условных единиц соответственно в первом, во втором и в третьем триместрах беременности прогнозируют развитие плацентарной недостаточности. Молекулы средней плотности также не являются специфическими маркерами плацентарной недостаточности, так как они свидетельствуют о наличии синдрома эндогенной интоксикации, наблюдающемся при остром воспалительном процессе различной локализации, поэтому данный способ трудно рекомендовать для скрининговых обследований беременных.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности с ранних сроков (до 12 недель) беременности (Пат. №2521367. Российская Федерация. Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности / Газиева И.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И., Тарасова М.Н., Паначева Н.М. // Изобретения. Полезные модели. - 2014. - №18). Способ включает определение в сыворотке крови в ранние сроки беременности содержания интерлейкина 6 (IL-6), интерлейкина 8 (IL-8), растворимой сосудистой молекулы межклеточной адгезии (sVCAM), васкуло-эндотелиального фактора роста (VEGF) и big-эндотелина. Затем определяют прогностический индекс (PI) по формуле: PI=0,63697X₁-0,02367X₂+0,00235X₃-0,03931X₄-15,99295X₅-2,11547, где X₁ - концентрация IL-6, пг/мл; Х₂ - концентрация IL-8, пг/мл; Х₃ - концентрация sVCAM, нг/мл; Х₄ - концентрация VEGF, пг/мл; Х₅ - концентрация big-эндотелина, фмоль/мл. При PI>0 прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности, а при PI<0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния с точностью 81,5%. Данный способ является трудоемким, затратным, поскольку исследование проводится по пяти показателям, метод невозможно использовать в повседневной практике врачей женских консультаций и родильных домов.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в сроке 5-12 недель гестации в сыворотке крови беременных определяют концентрацию DcR3 и при ее значении более 0,87 пг/мл прогнозируют плацентарную недостаточность во второй половине беременности.

Технический результат направлен на расширение арсенала прогностических средств, упрощение методики, повышение точности, чувствительности и специфичности прогнозирования плацентарной недостаточности. Предлагаемый метод исследования позволяет с точностью 91,6% прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности у женщин с ранних сроков гестации, что дает возможность провести своевременную профилактику и лечение данной патологии, снизить уровень перинатальной заболеваемости и смертности.

Способ осуществляется следующим образом.

1. Для исследования сывороточного содержания DcR3 кровь из кубитальной вены в количестве 3 мл забирают в сухую центрифужную пробирку до полного свертывания в течение 10-15 минут.

2. Сгусток крови обводят по стенке пробирки длинной иглой и центрифугируют со скоростью 1500 оборотов в минуту в течение 10 минут. Отделившуюся от сгустка сыворотку разливают в пробирки типа Эппендорф и хранят до проведения исследования в холодильнике при температуре -20°С.

3. Содержание DcR3 в сыворотке крови определяют методом иммуноферментного анализа на микропланшетном ридере Multiscan EX Labsystems (Finland) с использованием коммерческой тест-системы (R&D, USA). Анализ проводят в соответствии с протоколом фирмы-производителя. Результат исследования выражают в пг/мл.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине гестации по определению содержания DcR3 в сыворотке крови у беременных.

DcR3 - рецептор-ловушка, который является лигандом к факторам апоптоза (LIGHT, FasL и TL1A), ингибируя различные иммунорегуляторные функции, в частности блокируя апоптоз, вызванный Fas, предоставляет возможность синцитиотрофобласту избегать агрессии со стороны клеток иммунной системы матери (Ascites from epithelial ovarian cancer contain high levels of functional decoy receptor 3 (DcR3) and is associated with platinum resistance / J.P. Connor, M. Felder // Gynecol. Oncol. - 2008. - Vol. 111(2). - P. 330-5). DcR3 хорошо изучен при развитии опухолей молочной железы, колоректального рака, рака яичника, почки, печени, поджелудочной железы, различных аутоиммунных и воспалительных процессах (Aberrant expression of decoy receptor 3 in human breast cancer: relevance to lymphangiogenesis / Q. Wu, Y. Zheng, D. Chenetal. // J. Surg. Res. - 2014. - Vol.188(2). - P. 459-65; The tumor necrosis factor-like cytokine 1A / death receptor 3 cytokine system in intestinal inflammation / G. Bamias, L.G. Jia, F. Cominelli // Curr. Opin. Gastroenterol. - 2013. - Vol. 29(6). - P. 597-602; Decoy receptor 3 expression in AsPC-1 human pancreatic adenocarcinoma cells via the phosphatidylinositol 3-kinase-, Akt- and NF-kappa B-dependent pathway / P.H. Chen, C.R. Yang // J. Immunol. - 2008. - Vol. 181(12). - P. 8441-9).

Установлено, что DcR3 способен индуцировать ангиогенез и обеспечивать достаточное кровообращение маточно-плацентарного комплекса (Decoy receptor 3 expression in AsPC-1 human pancreatic adenocarcinoma cells via the phosphatidylinositol 3-kinase-, Akt- and NF-kappa B-dependent pathway / P.H. Chen, C.R. Yang // J. Immunol. - 2008. - Vol. 181(12). - P. 8441-9). Ранее определение DcR3 в сыворотке крови с целью прогнозирования развития плацентарной недостаточности у беременных не использовалось. Вероятно, увеличение концентрации DcR3 с ранних сроков может являться одним из факторов, приводящих к нарушению механизмов апоптоза при беременности, что может обусловливать развитие плацентарной недостаточности.

Использование предлагаемого способа позволяет с высокой степенью точности (91,6%) с ранних сроков гестации прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности.

Отличительными признаками заявленного способа являются: определение концентрации DcR3, при ее значении более 0,87 пг/мл прогнозируют развитие плацентарной недостаточности.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Пациентка А., 32 года, беременность четвертая, желанная, наступила самостоятельно, во втором браке. В анамнезе два самопроизвольных выкидыша, одна погибшая беременность ранних сроков, преимущественно инфекционного генеза. В сроке 5 недель беременности госпитализирована в гинекологическое отделение ИвНИИ М и Д с жалобами на тянущие боли внизу живота. При влагалищном исследовании наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длиной до 5 см, наружный зев сомкнут, тело матки чуть больше нормы, округлой формы, плотное, подвижное, безболезненное, выделения слизистые.

Диагноз: Беременность 5 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

До назначения сохраняющей терапии было проведено обследование по заявляемому способу: концентрация DcR3 составила 1,655 пг/мл.

Заключение: прогноз - развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности.

Проводилась сохраняющая терапия с положительным эффектом.

В сроке 28 недель гестации по результатам ультразвукового и допплерометрического исследования выявлена задержка роста плода I степени, нарушение маточно-плацентарного кровообращения I А степени.

Диагноз: Беременность 28 недель. Фетоплацентарная недостаточность. Синдром задержки развития плода I степени. Привычное невынашивание беременности.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. Пациентка Е., 24 года, беременность первая, желанная, наступила самостоятельно, в первом браке. При очередной явке в женскую консультацию в сроке 12 недель беременности при влагалищном исследовании наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длиной до 4 см, наружный зев сомкнут, тело матки увеличено до 12 недель беременности, округлой формы, мягкое, подвижное, безболезненное, выделения слизистые.

Биохимический и ультразвуковой скрининг - без патологии.

Диагноз: Беременность 12 недель.

Проведено обследование по заявляемому способу: концентрация DcR3 составила 0 пг/мл.

Заключение: прогноз - отсутствие плацентарной недостаточности во второй половине беременности.

Биохимический и ультразвуковой скрининг в установленные сроки - без патологии.

В сроке 39 недель произошли первые своевременные роды через естественные родовые пути плодом женского пола длиной 54 см, массой 3830 г. Оценка по шкале Апгар составила 8/9 баллов.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Пациентка М., 25 лет, беременность первая, желанная, наступила самостоятельно, в первом браке. При очередной явке в женскую консультацию в сроке 10 недель беременности при влагалищном исследовании наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длиной до 4 см, наружный зев сомкнут, тело матки увеличено до 10 недель беременности, округлой формы, мягкое, подвижное, безболезненное, выделения слизистые.

Диагноз: Беременность 10 недель.

Проведено обследование по заявляемому способу: концентрация DcR3 составила 0,87 пг/мл.

Заключение: прогноз - отсутствие плацентарной недостаточности во второй половине беременности.

Биохимический и ультразвуковой скрининг в установленные сроки - без патологии.

В сроке 39 недель произошли первые своевременные роды через естественные родовые пути плодом женского пола длиной 50 см, массой 3160 г. Оценка по шкале Апгар составила 7/8 баллов.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 60 женщин, результаты исследований приведены в таблице 1.

Преимущества заявляемого способа:

1. Высокая точность - 91,6%, чувствительность - 80,0% и специфичность - 95,6%.

2. Хорошая воспроизводимость метода.

3. Простота и доступность выполнения методики.

4. Простота в интерпретации результатов обследования.

5. Способ позволяет с наиболее ранних сроков гестации прогнозировать развитие плацентарной недостаточности у женщин во второй половине беременности, что дает возможность профилактировать данную патологию и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности.

6. Использование данного изобретения будет способствовать более объективному прогнозированию плацентарной недостаточности и позволит снизить затраты на лечебно-профилактические мероприятия у женщин из группы низкого риска.