Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ДИЗЕНТЕРИИ СВИНЕЙ

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к средствам и способам лечения свиней, больных дизентерией, а также профилактики данного заболевания.

Дизентерия свиней - инфекционное широко распространенное во всем мире заболевание. Первичным этиологическим фактором дизентерии свиней является сильно β-гемолитическая анаэробная кишечная спирохета Brachyspira hyodysenteriae. Гемолизин, вероятно, является ее основным фактором вирулентности (Lysons R.J. A cytotoxic haemolysin from Treponema hyodysenteriae: A probable virulence determinant in swine dysentery / R.J. Lysons, K.A. Kent, A.R. Bland, R. Sellwood, W.P. Robinson, A.J. Frost // J. Med. Microbiol. - 1991. - Vol. 34. - P. 97-102.; Hutto D.L. and Wannemuehler M.J. A comparison of the morphologic effects of Serpulina hyodysenteriae or its beta-hemolysin on the murine mucosa / D.L. Hutto and M.J. Wannemuehler // Vet. Pathol. - 1999. - Vol. 36. - P. 412-422.).

Вопросы этиологии, лечения, профилактики и особенности эпизоотического процесса дизентерии изучены в достаточной мере. Главной проблемой, приобретающей все большее значение для практической ветеринарии, становится наличие устойчивых брахиспир к ряду антимикробных средств, прежде эффективных при лечении заболевания.

Важной характеристикой дизентерии свиней является тот факт, что различные виды анаэробных бактерий, составляющие микрофауну толстого отдела кишечника свиней, действуют с Brachyspira hyodysenteriae синергически и облегчают спирохетам колонизацию кишечника, увеличивая воспаление и образование поражений (Joens L.A. Location of Bowden C.A. and synergistic anaerobic bacteria in colonic lesions on gnotobiotic pigs / L.A. Joens, R.D. Glock, S.C. Whipp, I.M. Robinson, D.L. Harris // Vet. Microbiol. - 1981. - Vol. 6. - P. 69-77).

Первичным системным действием дизентерии является нарушение водно-солевого баланса, вызываемого энтеритом. Патогенез молниеносных смертей неизвестен, однако его можно связать с образованием эндотоксина. Потеря жидкости является исключительным результатом неспособности толстого отдела кишечника повторно абсорбировать собственные эндогенные секреты, если учитывать, что в него постоянно направляется для всасывания 30-50% объема внеклеточной жидкости в форме эндогенных секретов, что и является объяснением прогрессирующего обезвоживания и летального исхода свиней от этой болезни (Swine Dysentery / D.J. Hampson, С. Fellstrom, J.R. Thomson // In Diseases of Swine / edited by B.E. Straw et al. (9-th edition). Blackwell Publishing. The Iowa State University Press, Ames Iowa, U.S.A. - 2006. - P. 785-799.).

На практике борьба с дизентерией свиней базируется, главным образом, на использовании химиотерапевтических препаратов или антибиотиков.

Для лечения дизентерии свиней (возбудитель Brachyspira hyodysenteriae) предложено много способов с использованием антибиотиков, нитрофуранов, сульфаниламидов [Скворцов В.Н. и др. Дизентерия свиней. - Методические рекомендации. - М., 2009].

Наиболее близким по достигаемому эффекту является способ лечения и профилактики дизентерии свиней, заключающийся в том, что для лечения и профилактики дизентерии свиней применяется пероральное введение лекарственного препарата, состоящего из 10%-ного водорастворимого ронидазола с высокодисперсным диоксидом кремния. При этом в 1,4 г препарата содержится 100 мг ронидазола и 400 мг диоксида кремния, а также 900 мг водорастворимого наполнителя. Для лечения используется препарат в дозе 70 мг/кг массы тела животного (5 мг/кг ронидазола и 20 мг/кг авикана), а для профилактики - в дозе 35 мг/кг (2,5 мг/кг ронидазола и 10 мг/кг высокодисперсного диоксида кремния). Перед лечением необходимая доза препарата растворяется в 100 мл питьевой воды и выпаивается больному животному индивидуально из резиновой бутылки один раз в день в течение трех суток. Профилактическая доза препарата растворяется в воде, смешивается с кормом и скармливается групповым способом один раз в день в течение трех суток [Патент РФ №2165756, опубликован 27.04.2001 г.].

Недостатки данного способа заключаются в том, что диоксид кремния при приеме внутрь может вызвать явления диспепсии, также при приеме внутрь диоксид кремния уменьшает эффективность совместно используемых внутрь лекарственных препаратов, т.е. его необходимо принимать за 1 час до применения лекарственных препаратов.

Задачей изобретения явилось расширение арсенала способов лечения и профилактики дизентерии свиней.

Поставленная задача решается предлагаемым способом лечения и профилактики дизентерии свиней, включающий пероральное введение лекарственного препарата один раз в день в течение трех суток, причем в качестве лекарственного препарата используется сочетание сорбента, обогащенного монтмориллонитом и виэвитина. Для лечения дизентерии свиней указанный препарат вводят в дозах: виэвитина по активно действующему веществу 5,6-11,1 мг/кг массы тела, сорбента, обогащенного монтмориллонитом, 400 мг/кг массы тела. Для профилактики дизентерии свиней указанный препарат вводят в дозах: виэвитина по активно действующему веществу 11,1 мг/кг массы тела, сорбента, обогащенного монтмориллонитом 400 мг/кг массы тела, причем с кормом.

Технический результат заключается в том, что комплексное применение виэвитина в сочетании с обогащенным монтмориллонит, содержащим сорбентом обеспечивает повышение эффективности лечения и профилактики дизентерии, риски передозировок при этом снижаются, быстрое выздоровление больных животных, снижение расхода виэвитина и его побочного действия на организм.

Виэвитин (Vievitinum) - антибактериальное лекарственное средство в форме порошка для орального применения, предназначенное для лечения свиней, страдающих бактериальными и микоплазменными инфекционными заболеваниями. В 1 г виэвитина в качестве действующего вещества содержится 450 мг тиамулина гидрофумарата, а в качестве вспомогательных компонентов лактозу - 350 мг и глюкозу - 200 мг. Разработчиком данного лекарственного препарата для ветеринарного применения является ГНУ "ВИЭВ" им. Я.Р. Коваленко, г. Москва. Препарат зарегистрирован Федеральной службой по ветеринарному и фитосанитарному надзору 30 декабря 2010 г. Регистрационное удостоверение лекарственного препарата для ветеринарного применения №000126. Номер регистрационного удостоверения: 77-3-3.0-0105№ ПВР-3-3.0/02656. Полученные данные по определению чувствительности Brachyspira hyodysenteriae к виэвитину показали его высокую активность в отношении возбудителя дизентерии свиней. Минимальная бактериостатическая концентрация препарата (в перерасчете на действующее вещество) колебалась в пределах 0,06-0,38 мкг/мл, а бактерицидная концентрация - в диапазоне 1,9-7,5 мкг/мл.

Сорбент является продуктом обогащения глинистого сырья месторождений Белгородской области (Патент на изобретение №2471549).

Придание сорбенту селективности путем иммобилизации на его поверхности специфических лигандов виэвитина является новым направлением сорбционной терапии. Образовавшиеся непрочно иммобилизованные лиганды виэвитина при энтеросорбции будут достаточно легко десорбироваться с поверхности сорбента. В этом случае сорбент выполняет функции носителя для доставки, дозированного выделения и пролонгации действия биоактивных лигандов, а также дополнительно выполняет функцию защиты иммобилизованных лигандов от инактивирующих факторов внешней (при длительном хранении) и внутренней (например, желудочного сока) среды. Кроме того, в таком варианте система сорбент-иммобилизованный виэвитин обладает определенной буферной емкостью, то есть работает как склад-депо, из которого организм по мере необходимости выбирает антибиотик для своих нужд в необходимых количествах, риски передозировок при этом снижаются.

Адсорбционная способность определенных видов монтмориллонит содержащих глин обусловлена их слоистой структурой. Такого рода сорбенты обычно имеют большую удельную поверхность - до нескольких сотен м²/г. Расстояние между микроскопическими слоями, составляющими структурную основу глины, составляет доли нанометра. Если увеличить это расстояние, можно существенно повысить удельную поверхность глины и тем самым ее адсорбционные свойства. Отмечено, что монтмориллонитовые глины эффективны в профилактике и лечении диарей у поросят, особенно в послеотъемный период (Буханов В.Д., Везенцев А.И., Шапошников А.А., Скворцов В.Н., Зуев Н.П., Козубова Л.А., Воловичева Н.А., Фролов Г.В. Применение фитоаскорбоминералосорбента при колибактериозе телят и дизентерии свиней // Научные ведомости БелГУ. Серия естественные науки. - №9 (80), 2010. - Выпуск 11. С. 99-103.).

Сущность изобретения характеризуется примерами апробации различных доз препарата при лечении свиней, больных дизентерией, а также данными клинического наблюдения за подопытными животными и результатами исследования мазков из ректальных проб.

Выявление терапевтической эффективности перорального применения композиционного препарата (виэвитина с сорбентом) проводили на 3-4-месячного возраста свиньях, больных дизентерией, из которых было сформировано 5 групп.

Диагноз на дизентерию устанавливали на основании эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических изменений и результатов бактериологических исследований. Больных поросят содержали в санитарных станках.

Во время проведения терапевтических и профилактических обработок свиней композиционным препаратом станки, в которых содержались больные и подозреваемые в заражении дизентерией свиньи, регулярно подвергали тщательной очистке, а места испражнений животных дезинфицировали сталосаном-Ф из расчета 50,0 г/м². Одновременно проходы, коридоры, навозосборные каналы неблагополучного помещения дезинфицировали 4%-ным горячим (70°C) раствором гидроокиси натрия.

Композиционный препарат приготавливали в лабораторной шаровой мельнице РТА-1 в следующих пропорциях:

- для первой группы животных: 5,6 г виэвитина и 400 г сорбента (в 1 г препарата содержалось 14 мг вивитина и 986 мг сорбента);

- для второй группы животных: 11,1 г виэвитина и 400 г сорбента (в 1 г препарата содержалось 27 мг вивитина и 973 мг сорбента);

- для третьей группы животных: 22,0 г виэвитина и 409 г сорбента (в 1 г препарата содержалось 52 мг вивитина и 948 мг сорбента).

Животные первой группы (n=63) получали композиционный препарат в дозе 5,6 мг/кг массы тела виэвитина (2,5 мг/кг действующего вещества) и 400 мг/кг массы тела сорбента, второй (n=65) - 11,1 мг/кг массы тела виэвитина (5 мг/кг действующего вещества) и 400 мг/кг массы тела сорбента, третьей (n=64) - 22,2 мг/кг массы тела виэвитина (10 мг/кг действующего вещества) и 400 мг/кг массы тела сорбента.

Поросята четвертой и пятой групп служили контролем. Четвертой группе (n=58) перорально вводили виэвитин в дозе 11,1 мг/кг, а пятой (n=60) - сорбент в дозе 400 мг/кг массы тела (табл. 1).

Каждую дозу препарата растворяли в 100 мл питьевой воды и выпаивали индивидуально из резиновой бутылки один раз в день в течение трех суток.

Вторые сутки лечения животных второй и третьей групп характеризовались улучшением клинического состояния, вместо кровавого поноса наблюдали жидкие или водянистые испражнения, а в мазках из фецес обнаруживали единичных брахиспир. Среди основного количества поросят первой группы отмечали клинические признаки дизентерии.

Основная масса опытных животных второй и третьей групп выздоравливала через двое-трое суток лечения (аппетит восстановился, кал был оформленным, в мазках из ректальных проб брахиспиры отсутствовали) и лишь отдельные особи - на следующие сутки после окончания курса лечения. Падёж среди поросят второй и третьей групп наблюдался в первые сутки опыта. Кроме того, во второй и третьей группах было вынужденно убито по две головы.

В первой группе отмечали излечение животных только через трое суток после начала лечения, незначительная часть свиней выздоравливала после окончания лечения, а 20,6% не выздоровели. Отход животных в этой группе был большим, поскольку пало 7 голов и 6 вынужденно убито (табл. 2).

Вылеченные животные быстро приходили в норму (поедаемость корма восстановилась, кал приобрел плотную консистенцию, а брахиспиры в ректальных пробах не обнаруживались). Рецидивов заболевания во всех трех группах за период 3-недельного наблюдения не регистрировали.

В контрольных группах, где в четвертой группе использовался виэвитин в дозе 11,1 мг/кг, а в пятой - сорбент в дозе 400 мг/кг, на вторые сутки лечения клиническая картина заболевания не исчезла, но общее состояние животных пятой группы ухудшилось (аппетит понижен или отсутствует, бока запавшие, шерстный покров тусклый и взъерошен, понос с примесями крови и слизи, голос пискляво-сиплый). Также наблюдался большой отход животных (в четвертой группе 5 голов пало и 3 вынуждено убито, а в пятой - 6 пало и 3 вынуждено убито).

На третьи сутки лечения в четвертой группе падёж свиней прекратился, но было выбраковано 4 поросенка. В пятой группе пало 3 подсвинка и 4 вынужденно убито. С целью недопущения дальнейшего падёжа, оставшиеся животные пятой группы были вылечены инъекциями тиамулина гидрофумарата. Антибиотик вводили внутримышечно один раз в день в течение трех суток в дозе 15 мг/кг массы тела.

После окончания курса лечения поросята четвертой группы полностью выздоровели.

Учитывая тот факт, что терапевтическая эффективность применения виэвитина с сорбентом в соответствующих дозах 11,1 мг/кг массы тела виэвитина (5 мг/кг действующего вещества) и 400 мг/кг массы тела сорбента составила 90,8%, то эту дозу использовали как профилактическую при даче с кормом.

Также принятое решение применения исследуемого препарата с кормом основывалось на том, что подозреваемые в заражении дизентерией поросята, как правило, не страдают отсутствием аппетита, а назначение лекарственных средств с кормом менее трудоемко и технологично, чем индивидуальная дача терапевтических препаратов с питьевой водой. Поэтому композиционный препарат смешивали с кормом и скармливали групповым способом 60 поросятам, контактировавшим с больными дизентерией свиньями, один раз в день в течение двух суток. За период 3-недельного наблюдения эти поросята были клинически здоровыми, а в мазках из фецес брахиспиры не обнаружены.

Проведенные примеры показали, что комплексное применение виэвитина с сорбентом путем индивидуальной дачи в 100 мл питьевой воды в дозах 5,6 (вторая группа) и 11,1 (третья группа) мг/кг массы тела для виэвитина и 400 мг/кг массы тела для сорбента обеспечивают высокий терапевтический эффект при лечении поросят, больных дизентерией. Выздоровление соответственно составило 90,8 и 93,8%.

Пероральная форма использования препарата, в отличие от инъекционной, не приводит к развитию анафилактических реакций, оказывает более щадящее воздействие на иммунную систему, более безопасна и удобна на практике, что расширяет область применения препарата.

Резюмируя вышеприведенные материалы, можно отметить, что подход, основанный на придании сорбенту специфических свойств путем иммобилизации на его поверхности биоактивных лиганд виэвитина, является перспективным. Он позволяет снижать или даже устранять негативное воздействие на организм животного лекарственной субстанции виэвитина.

Эти средства обычно выгоднее антибиотиков, в связи с тем что используются, как правило, экологически чистые вещества на основе отечественного сырья с повышенной эффективностью сорбции экзо- и эндотоксинов энтеропатогенных микроорганизмов за счет снижения всасывания бактериальных токсинов и продуктов распада содержимого кишечника. Время их использования, как правило, значительно короче, чем у лекарственных препаратов, ведь очень многие антибиотики рассчитаны на длительные курсы.